Ферменты термостабильность

Ферменты термолабильны, т. е. при нагревании теряют свою активность. Большинство ферментов не выдерживает температуру выше 50—60°. Коферменты термостабильны, они выдерживают температуру кипения воды. Добавляя прокипяченный кофермент к ферменту, который потерял свою активность-вследствие отделения кофермента, можно опять восстановить активность фермента. [c.521]

Так как большинство белков, выделенных пз термофилов, относится к ферментам, термостабильность обычно изучают, измеряя сохранность их каталитической активности. Как правило, раствор фермента нагревают при разных температурах в течение определенного времени (5—10 мин), а при более длительной инкубации из раствора отбирают аликвотные пробы, в которых определяют активность при температуре, обеспечиваюшей стабильность фермента. Данные такого рода ясно показали, что белки термофилов более стабильны, чем их аналоги из мезофилов, однако этот вывод основан на изучении необратимого изменения белков и по существу ничего ие говорит о причине их инактивации [c.260]

Митохондриальный фермент выделен в виде димера, гексамера и октамера. Изоферменты креатинкиназы различаются по электрофоретической подвижности, по кинетическим свойствам, по термостабильности, по аминокислотному составу, по количеству и реактивности 5Н-групп, аргининовых остатков и другим свойствам. Мышечный изофермент (ММ) более стабилен, чем мозговой (ВВ) и митохондриальный при изменении pH и температуры. Они устойчивы в диапазоне pH 6,0—9,5, но при этом к раствору мозгового и митохондриального изоферментов необходимо добавлять 5Н-восстанавливающие реагенты (2-меркаптоэтанол и др.). Оптимальные значения pH активности для изоферментов практически одинаковы и равны 9 — для прямой реакции (синтеза креатинфосфата) и 7 — для обратной реакции (расщепления креатинфосфата). [c.292]

Замена одного из них на остаток треонина или изолейцина приводила к повышению термостабильности фермента, на аспарагиновую [c.170]

Термостабильность фермента оценивают как время полужизни (скорость инактивации фермента) при 100 °С. Чем оно больше, тем более стабилен фермент. [c.170]

Молекулы большинства ферментов состоят из двух составных частей, по отдельности лишенных активности а) термолабильная белковая часть, называемая носителем или апоферментом и б) небелковая, термостабильная часть, называемая коферментом, играющим очень важную роль в действии фермента. Обе эти части составляют полный фермент (голофермеит). [c.257]

Кроме этого значительного в количественном отношении белка, в альбуминовой фракции белков рапса обнаруживается мирозина-за. Речь идет о ферменте, который посредством гидролиза глюкозинолатов семени вызывает образование антипитательных компонентов (тиоцианаты). Мирозиназа представляет собой глико-протеин с молекулярной массой около 133 ООО Да, образованный двумя полипептидными цепями. Вероятно, существует несколько изоферментов, которые различаются по термостабильности. Оптимальный pH для их активности находится в диапазоне от 4,5 до 8 [79]. [c.168]

Под биомассой здесь понимается вся совокупность веществ и материалов, побочных продуктов пищевой и перерабатывающей промышленности, которая может служить сырьем для получения ценных продуктов. Производство этанола или фруктозы из молотого зерна происходит в несколько ферментативных стадий. Участвующие в этих процессах ферменты часто используются однократно. Чтобы повысить эффективность ферментативных реакций и снизить стоимость процессов, исследователи занимаются клонированием и исследованием свойств бактериальных генов, кодирующих термостабильные, обладающие высокой каталитической активностью и устойчивые к действию спирта ферменты. [c.302]

Создание детальной кинетической модели ферментативного гидролиза целлюлозы и его оптимизация представляет собой крайне сложную задачу. Во-первых, целлюлазные комплексы, осуществляющие гидролитическое расщепление целлюлозы, состоят из нескольких различающихся по специфичности ферментов (которые в свою очередь могут иметь множественные формы) и в зависимости от источника могут значительно варьировать по компонентному составу, способности расщеплять природные формы целлюлозы, кинетическим и другим важным свойствам (термостабильности, адсорбционной способности и т.д.). Во-вторых, целлюлозосодержащие материалы, используемые в качестве сырья, представляют собой нерастворимые субстраты с различной реакционной способностью в зависимости от структуры целлюлозы, наличия в их составе нецеллюлозных компонентов (гемицеллюлозы, лигнина и др.), а также от способа их предобработки. [c.157]

Анализ получения этанола из целлюлозосодержащих субстратов, крахмала и сахарных сиропов показывает, что использование терхмофильных бактерий в процессе получения этанола имеет следующие преимущества термофильные культуры меньше подвержены вытеснению, их ферменты термостабильны. Не требуется жесткая стерилизация среды и оборудования, кроме того, снижаются затраты на о.хлаждение. При 50—60 °С осуществляется самопроизвольная дистилляция этанола, следовательно, снимается проблема ингибирования процесса его образования. Применение термофильных бактериальных культур при промышленном получении этанола из сахаров и целлюлозосодержащих субстратов позволит снизить себестоимость этанола примерно на 25% по сравнению с существующей (Payton, [c.201]

Отдельные ферменты амилазного комплекса солода обладают неодинаковой термоустойчивостью. а-Амнлаза более термостабиль-на, чем р-амилаза. Повышение концентрации углеводов в сусле защищает амилазы, повышая их термостабильность. Оптимальная температура для действия а-амилазы ячменного солода в сусле около 70°С, р-амилазы 60°С. В условиях производства температуру поддерживают в пределах 57—58°С. Меньшая температура, напри- [c.181]

Химический смысл превращения рибонуклеотидов в дезоксирибо-нуклеотиды сводится к элементарному акту-восстановлению рибозы в 2-дезоксирибозу, требующему наличия двух атомов водорода. Непосредственным источником последних оказался восстановленный термостабильный белок тиоредоксин, содержащий две свободные SH-группы на 108 аминокислотных остатков. Тиоредоксин легко окисляется, превращаясь в дисульфидную S-S-форму. Для его восстановления в системе имеется специфический ФАД-содержащий фермент тиоредоксинредуктаза (мол. масса 68000), требующая наличия восстановленного НАДФН. Обозначив [c.475]

Изучают термостабильность лактатдегидрогеназы из разных источников, нагревая фермент (растворимая клеточная фракция) при 60°С в течение 10, 20, 30 мин. Оценивают защитный эффект 0,5 мМ НАДН от термоинактивации. С целью учета стабилизирующего влияния на лактатдегидрогеназу других белков цитозоля в качестве объекта исследования используют растворимую клеточную фракцию в разведении 1 7 и 1 200. [c.339]

В кислоторастворимых и поддающихся биохимическому разложению системах в качестве закупоривающего материала обычно используют измельченный карбонат кальция. Он полностью растворяется в кислоте и поставляется в виде широкой гаммы порошков различного гранулометрического состава (от нескольких миллиметров до десятых долей миллиметра). Его можно использовать при любой температуре в нефтяных скважинах. Таттл и Баркмэн установили, что при правильном подборе гранулометрического состава с помощью суспензий одного карбоната кальция можно проводить краткосрочный ремонт скважин, в которых для установления сообщаемости с пластом осуществлялась пулевая перфорация. Однако в большинстве случаев в эти суспензии необходимо добавлять полимеры для регулирования фильтрации и несущей способности. К широко используемым полимерам относятся КМЦ и полиакрилонитрил, которые нерастворимы в кислоте ксантановая смола (растворима в кислоте на 50%) и гуаровая смола, которые, как уже отмечалось, можно разложить с помощью ферментов производные крахмала и ГЭЦ, которые почти полностью растворяются в кислоте. Следует обратить внимание на то, что для обеспечения высокой термостабильности к ГЭЦ необходимо добавлять оксид магния. При необходимости, в качестве дополнительных материалов для регулирования фильтрации используются лигносульфонаты кальция. Как гуаровая смола, так и ГЭЦ имеют низкие значения отношения предельного динамического напряжения сдвига к пластической вязкости, к тому же они нетиксо-тропны, что является их преимуществом, так как существует возможность эффективно удалять из раствора газ и посторонние твердые примеси. В тех случаях, когда требуются высокая несущая способность и взвешивающие свойства, по-видимому, целесообразнее использовать ксантановую смолу. [c.433]

ПО изменению кругового дихроизма раствора белка. Исходная (нативная) форма лизоцима Т4 содержит два свободных остатка цистеина, не участвующих в образовании дисульфидных связей, У фермента так называемого псевдодикого типа они заменены на остатки Thr и Ala, при этом активность и термостабильность фермента остались прежними. Последовательность псевдодикого типа служила стандартом при сравнении вариантов с потенциально термостабилизирующими дисульфидными связями и также предотвращала образование случайных дисульфидных связей между вновь введенными остатками цистеина и остатками, присутствующими в нативном белке. [c.169]

Другая цинксодержащая протеиназа термолизин, продуцируемый Ba illus thermoproteolyti us,— фермент, обладающий заметной термостабильностью. Он содержит также четыре связанных иона кальция [47, 48]. [c.116]

С денатурацией хорошо коррелирует протеолиз, т. е. гидролитическое расщепление белка с помощью протеолитических ферментов (Лин церштрем-Ланг). Чем выше термостабильность белка, тем труднее он расщепляется. Это важно, в частности, для лягушек — протеолиз коллагена коллагеназой происходит при утрате головастиком его хвоста. [c.121]

Результаты этого эксперимента показали, что термостабильность фермента повыщается при образовании новых дисульфидных связей, при этом наиболее термостабильным является белок с максимальным числом таких связей. Однако некоторые варианты (С, Е и F), будучи более термостабильными, чем нативный фермент или фермент псевдодикого типа , не обладают ферментативной активностью. Возможно, это обусловливается искажением конформации белковой молекулы при образовании дисуль-фидной связи между остатками 21 и 142. Хотя создание новых белков с помощью методов генной инженерии часто представляет собой эмпирический процесс (т. е. далеко не всегда бывает ясно, замены каких именно аминокислот позволяют получить наилучший вариант), описанный эксперимент показывает, что получение термостабильных белков с дополнительными дисульфидными связями вполне реально. [c.169]

Чтобы определить, в какие участки полипептидной цепи могут быть введены одна, две или три дисульфидных связи для стабилизации фермента без нарушения его каталитической активности, использовали компьютерное моделирование пространственной структуры ксиланазы. Были получены восемь производных ксиланазы В. ir ulans. Все они обладали более высокой термостабильностью, чем нативный фермент, и при этом три были столь же активны при 60 °С, как и нативный белок, а один, содержащий ди-сульфидную связь между N- и С-концами, был даже в два раза более активным и сохранял свыше 85% своей активности после 2-часовой инкубации при 60 °С, в то время как нативный фермент полностью утрачивал активность в этих условиях уже через 30 мин. Успех этих экспериментов показывает, что данную стратегию можно использовать для повышения термостабиль- [c.169]

Оценка чувствительности рекомбинантных белков к протеолитическому расщеплению показала, что существует положительная корреляция между термостабильностью белка и его устойчивостью к протеолитическому расщеплению. Полученные данные говорят о возможности создания термостабильньгх форм других ферментов путем замены несущественных остатков аспарагина. [c.170]

Выбор аминокислоты, подлежащей замене, как правило, производится с учетом ее роли в функционировании белка. Данные об этом получают в ходе генетических исследований или методом рентгеноструктурного анализа трехмерной структуры белка. Изменяя специфические сайты или целые участки белковой молекулы, можно повысить термостабильность белка, изменить его чувствительность к pH, специфичность, аллостерическую регуляцию, потребность в кофакторе и другие свойства. Так, термостабильность триозо-фосфатиозомеразы удалось повысить, заменив аминокислоты в двух позициях. Этот подход можно использовать как для придания новых свойств уже существующим белкам, так и для создания уникальных ферментов. [c.175]

Коммерческую ценность 2,5-DKG-peдyктaзы можно повысить, если произвести аминокислотные замены, повышающие каталитическую активность фермента и его термостабильность. В то время, когда бьш идентифицирован ген 2,5-DKG-редуктазы, аминокислотные остатки, участвующие в образовании активного центра этого фермента, еще не были установлены. Однако, исходя из данных об аминокислотной последовательности фермента, была воссоздана его вторичная структура, состоящая из восьми тесно расположенных параллельных (З-слоев, перемежающихся восемью а-спиралями, которые соединялись с р-слоями петлями разной длины (рис. 12.5). Такой характер укладки полипептидной цепи был установлен для 17 других ферментов с уже известной кристаллической структурой, и по аналогии с ними были идентифицированы три петли, возможно участвующие в связывании субстрата. С помо- [c.251]

Название фермент получает от названия полисахарида и типа связей, которые он гидролизует. Место и номер в КФ фермент занимает исходя из специфики расщепления нм определенных связей, зависящей от продуцирующего фермент микроорганизма, условий его культивирования, используемого субстрата. Обозначенные одним номером ферменты могут различаться индивидуальными свойствами, т. е. молекулярной массой, оптимумом pH, температурой действия, составом аминокислот и т. д. Например, ксиланазы, полученные иутем твердофазной ферментации, отличаются от ксиланаз, образующихся в процессе глубинного культивирования Aspergillus niger. Обе ксиланазы используют тот же субстрат. Но ксиланазы, полученные путем твердофазной фермен-тадии, от ксиланаз, полученных путем глубинного культивирования, отличаются большей термостабильностью и имеют максимальную активность при 50 С против 45 °С во втором случае, имеют оазные оптимальные значения pH — соответственно 4,5 и [c.225]

Мехвнизм действия ренина, представляющего собой термостабильную пептидазу, связан с расщеплением сывороточного а -гло-булина, или ангиотензииогена, с образованием декапептида ангио< тензина I последний при участии ангиотензин-конвертирующего фермента отщепляет С-концевой дипептид и превращается в ангиотензин 11, обладающий ярковыраженным прессорным действием [c.272]

Смотреть страницы где упоминается термин Ферменты термостабильность: [c.291] [c.96] [c.19] [c.216] [c.7] [c.86] [c.138] [c.236] [c.488] [c.43] [c.85] [c.277] [c.513] [c.26] [c.168] [c.169] [c.170] [c.252] [c.292] [c.100] [c.60] [c.100] [c.106] [c.117] [c.436] [c.240] [c.52]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология