Хроматографирование горизонтальное

Рис. 1У.8. Схема прибора для хроматографирования горизонтальным проточным методом на закрепленном слое

Для хроматографирования горизонтальным проточным методом [88] на закрепленном слое служит прибор, изображенный на рис. 15. Ниже приведены характеристики отдельных частей прибора 1) резервуар из нержавеющей стали А для растворителя объемом 15+5. ил с отшлифованным верхом. Через отверстия в боковых стенках вставлены два полиэтиленовых шланга Б длиной [c.39]

Хроматографирование в тонком слое может быть осуществлено в нескольких вариантах. Во-первых, слой сорбента может быть н е-закрепленным на пластинке и закрепленным. В первом случае сорбент наносят на пластинку в виде порошка, покрывающего ее равномерным тонким слоем. Пластинку для хроматографирования устанавливают в специальную камеру горизонтально или под углом к горизонтальной плоскости не более 15—20°. Во втором случае сорбент предварительно смешивают с каким-либо связующим материалом и наносят на пластинку в виде пасты, распределяемой по поверхности пластинки тонким ровным слоем. В качестве связующих материалов обычно применяют медицинский гипс, очищенный крахмал и др. Пластинка с закрепленным слоем может устанавливаться в камере в любом положении вплоть до вертикального. [c.125]

Рис. 35. Простейшая камера для горизонтального хроматографирования (метод горизонтальных закрытых камер)

Восходящая Нисходящая Радиальная Двухмерная Вертикальное в сосуде То же Горизонтальное Вертикальное в сосуде Снизу вверх Сверху вниз От центра к периферии Сначала в одном направлении после высушивания повторное хроматографирование в направлении, перпендикулярном первоначальному [c.112]

Движение растворителя может происходить горизонтально, снизу вверх (восходящая), сверху вниз (нисходящая) или от центра к периферии (круговая или радиальная хроматография) [46]. Восходящая, нисходящая и круговая хроматография по технике выполнения может быть одномерной и двумерной. В последнем случае хроматографирование проводят дважды во взаимно перпендикулярных направлениях после проявления хроматограммы одним элюентом ее поворачивают на 90 и вторично проявляют другим элюентом. [c.100]

ЛЯТЬ нисходящую хроматографию по аналогии с хроматографией на бумаге. При этом избыточный растворитель скапывает с ниж-него конца слоя на дно камеры. При использовании стеклянных пластинок хроматографирование с перетеканием растворителя можно осуществить в нисходящем, восходящем или горизонтальном вариантах с помощью сравнительно простых приспособлений. [c.93]

УСТРОЙСТВА ДЛЯ ГОРИЗОНТАЛЬНОГО ХРОМАТОГРАФИРОВАНИЯ [c.29]

Р п с. 22. Простейшая камера для горизонтального хроматографирования. [c.30]

Рис. 65. Разделение проявителя при горизонтальном тонкослойном хроматографировании (покрытые пластинки [64]) смеси 2,4-динитрофенола и некоторых 2,4-динитрофенильных производных ДНФ-соединений в хлороформе — метаноле — уксусной кислоте (95 -Ь 5 -I- 1) [70].

Кроме улучшения качества идентификации компонентов, комбинированная система ГХ — ТСХ позволяет получать информацию и об эффективности каждого из составляющих ее методов. Ниже мы приведем несколько примеров получения такой информации и проиллюстрируем их с помош ью хроматограмм ГХ и хроматограмм ТСХ. Горизонтальная ось пластинки соответствует направлению движения пластинки, а вертикальная — движению отдельных компонентов во время хроматографирования. [c.335]

Пластинку с нанесенными пятнами помещают в камеру для хроматографирования, в которую налита смесь четыреххлористого углерода и диэтилового эфира в отношении 1 1. Смесь может быть использована только однократно. Край пластинки должен быть погружен в растворитель не более чем на 0,5 см. После того как фронт растворителя поднимется приблизительно на 10 см, пластинку вынимают из камеры, отмечают линию фронта и оставляют на несколько минут на воздухе для испарения растворителя. Затем пластинку помещают в сушильный шкаф, нагретый до 160— 170° С, и выдерживают при этой температуре в течение 1 ч. После этого пластинку помещают горизонтально в камеру для опрыскивания и опрыскивают проявляющим раствором № 1 и сразу же раствором № 2. В присутствии пропанида на пластинке появляются пятна оранжево-красного цвета. [c.48]

На практике применяют различные виды элюирования восходящее, нисходящее, горизонтальное, круговое (центрифужное). При нисходящем хроматографировании следует тщательно уложить край бумаги в лоток и прижать ее тяжелой стеклянной палочкой или узкой пластинкой, чтобы бумага не могла соскользнуть в процессе элюирования. Во время работы не следует касаться бумаги пальцами, особенно если хроматографируются аминокислоты. Закрепленную в лотке полоску или лист бумаги помещают на подставку внутри камеры, закрывают камеру крышкой и выдерживают в атмосфере паров неподвижной фазы в течение определенного времени — от 5 мин до 16 ч, т. е. до следующего дня. При работе с сильно летучими растворителями типа растворителей Буша (см. разд. 3.5.6 Стероиды и терпеноиды ) бумагу следует выдерживать над неподвижной фазой не менее 3 ч, а лучше до следующего дня, если неподвижная фаза не наносилась на бумагу посредством одного из указанных выше методов. По окончании выдержки наливают в лоток подвижную фазу и дают ей передвигаться в бумаге под действием капиллярных сил почти до самого края. После этого осторожно вынимают хроматограмму из камеры, сразу же отмечают положение фронта растворителя и дают листку высохнуть. При работе с большими листами удобно пользоваться специальными широкими щипцами. [c.92]

При горизонтальном (или нисходящем) хроматографировании в зависимости от способа подачи подвижной фазы следует особо отметить круговой и поточный методы. Последний метод, при котором [c.17]

Методы нисходящего, горизонтального, кругового и проточного хроматографирования отличаются способами подачи подвижной фазы, которые определяются соответствующими особенностями в конструкции разделительных камер, о чем будет сказано ниже. [c.24]

При горизонтальном хроматографировании подвижный растворитель перемещается по горизонтально расположенной пластинке в горизонтальном направлении. Такой способ применяют в случае круговой радиальной хроматографии, которую проводят на приборе, показанном на рис. 10 [1, стр. 42]. Для этого пластинку с закрепленным слоем сорбента и нанесенной по кругу вокруг центра разделяемой смесью веществ помещают на стеклянный кристаллизатор слоем внутрь. Растворитель подают из чашки при помощи [c.39]

Проточный метод (БН-камера) и метод горизонтальных закрытых камер, в которых хроматографирование проводится в горизонтальном направлении, редко применяется в ТСХ неорганических веществ. Устройства для проведения таких процессов описаны в [90, стр. 30-32]. [c.39]

Края бумаги загибали в сторону, противоположную стеклянной подложке. Далее, проводя горизонтальное хроматографирование в другом направлении и направляя с по.мощью бумажного мостика растворитель на оставшуюся часть адсорбента, пятна выводили на края бумаги. После чего довольно просто проэкстрагировать соединение из бумаги. Возможен п другой метод. Адсорбент помещают над пятном в точке, где продукты [c.330]

На практике часто реализуются одновременно неск. механизмов разделения. БХ осуществляется в стеклянных хроматографич. камерах или др закрытых сосудах. Для улучшения воспроизводимости их часто кондиционируют, покрывая внутр. стенки фильтровальной бумагой, смоченной соответствующим р-рителем. В камеру помещают лоток с элюентом, в к-рый опускают край хроматографич. бумаги после нанесения на нее пробы разделяемых в-в (обычно объемом 1-10 мкл) Элюент движется под действием капиллярных и гравитац сил. По расположению бумаги и направлению тока элюента различают восходящую, нисходящую и горизонтальную БХ Хроматографирование можно проводить также в центробежном поле или в условиях градиента т-ры, что увеличивает эффективность и скорость разделения В т. наз. двумерной БХ пробу наносят в один из углов квадратного листа и после завершения хроматографирования в одном элюенте бумагу высушивают и, повернув на 90 погружают в др элюент. На дву- [c.325]

Для вымывания с такой колонки полос с небольшими значениями R требуется много времени и большой объем растворителя. Поэтому в таких случаях колонку приготавливают несколько иным способом. Стеклянную трубку разрезают продольно на две половины. Обе половины складывают вместе и по всей длине обматывают полоской мокрого целлофана. Весь процесс хроматографирования проводят в такой колонке до тех пор, пока компонент смесн с наибольшим значением величины R не начнет выходить нз колонки. Затем проявление. заканчивают, разматывают целлофан и одну половину трубки в горизонтальном положении осторожно снимают с поверхности столбнка целлюлозы. На такой открытой поверхности определяют при помощи подходящего метода обнаружения размещение полос компонентов столбец разрезают и отдельные компоненты экстрагируют водой. [c.466]

Нанесение образцов исследуемых веществ осуществляется в принципе так же, как и при хроматографировании на бумаге. Чаще всего для этой цели применяют калиброванные микропипетки. При проведении качественного анализа образцы можно наносить на хроматограмму с помощью обычного капилляра, который легко вытягивается в пламени стеклодувной горелки из тонкостенной капиллярной трубки (если взять трубку из легкоплавкого стекла, то капилляр можно вытянуть на обычной лабораторной горелке). После использования капилляр выбрасывают. Образцы можно наносить также с помощью щпателя или скальпеля. На кончик шпателя помещают очень небольшое, опытным путем подобранное количество вещества. На шпатель, находящийся в горизонтальном положении, рядом с образцом наносят каплю подходящего растворителя и, наклоняя шпатель острием вниз, дают капле стечь к образцу. Вещество растворяется и образует концентрированный раствор, который затем осторожно наносят на старт хроматограммы. Этим же способом наносят и образцы размельченных таблеток. [c.63]

При выборе направления движения фронта растворителя (восходящий или нисходящий метод) руководствовались главным образом эффективностью разделения аминокислот и воспроизводимостью величии Кг, Восходящая хроматография наряду с некоторыми положительными качествами (простота оборудования) обладает рядом существенных недостатков. Растворитель иногда поднимается не строго горизонтальным фронтом. Это изменяет величины Кг и затрудняет идентификацию. В наших опытах растворитель не поднимался более чем на 30 см. что для компонентов с близкими Кг недостаточно. Необходимо многократное пропускание растворителя. К лучшим результатам приводит нисходящее хроматографирование, использованнное в дальнейшем в работе, в смеси н. бутанол — уксусная кислота —вода (4 1 1). [c.214]

Комплект КТХ-01 включает оборудование для нриго-товления хроматографических пластин для нанесения пробы для хроматографирования восходящим, нисхо-р, дящим, горизонтальным, проточным и градиентным ме- тодами для проявления хроматограмм химическим спо-Q собом для просмотра хроматограмм в ультрафиолето-вом свете и их фоторегистрации. [c.17]

Отмечалось [52], что для получения воспроизводимых результатов при хроматографии в тонких слоях при описании экспериментов желательно указывать вид и тип хроматографических камер, материал, из которого эти камеры сделаны, способ приготовления адсорбционных слоев, тип и качество адсорбента, вид и размер подложки (стекло, пластик и т. п.), толщину слоя сорбента, способ его активации, условия сушки сорбционного слоя, количество хроматографируемых пластинок в камере, способ и метод нанесения на пластинку с сорбентом анализируемого вещества (пятно, полоса), количество испытуемого вещества и положение стартовой линии, способ хроматографирования (восходящая, нисходящая или горизонтальная хроматография), состав применяемых растворителей, степень насыщения камеры растворителем, температуру и влажность, при которых проводится разделение, способ идентификации анализируемых веществ на пластинке (погружение, опрыскивание или др.), использованные для этой цели реагенты, цвет и усто1 чивость окрашенных пятен, чистоту и квалификацию химических реактивов, а также другие детали эксперимента. [c.38]

Проявление тонкослойных или бумажных хроматограмм может осуществляться путем восходящего, нисходящего, горизонтального или радиального движения растворителя. При восходящей хроматографии ослол непия, связанные с образованием каналов при движении растворителя, сводятся к минимуму. При непрерывном проявлении растворитель продвигается до конца бумаги или тонкого слоя в одном опыте. При многократном проявлении после того, как фронт растворителя достигает края листа, растворителю дают испариться и повторяют проявление при том же направлении движения растворителя. Ступенчатое проявление включает проявление на пластинке в неполярном растворителе, испарение растворителя и второе проявление в более полярном растворителе. При двухмерном проявлении также последовательно применяют два растворителя сначала проводят хроматографирование в одном направлении, затем высушивают пластинку для испарения первого растворителя, поворачивают пластинку на 90° и проводят проявление вторым растворителем. При градиентном элюировании состав растворителя меняется в ходе проявления [94]. Эта методика, однако, сложна, в ней теряется простота тонкослойной или бумажной хроматографии. [c.553]

Хроматографирование. На середину хроматографической пластинки на расстоянии 1,5 см от края при помощи пипетки наносят исследуемую пробу в одну точку так, чтобы размер пятна не превышал 10—12 мм. Колбу с пробой трижды тщательно смывают небольшими порциямй эфира (по 0,5 мл), которые наносят на пластинку в центр того же пятна. Справа и слева от пробы на расстоянии 2 см наносят с помощью шприца стандартные растворы прометрина, так чтобы одно пятно содержало 5—10, а второе 10—20 мкг препарата. Пластинку с нанесенными пятнами помещают в камеру для хроматографирования, в которую налита смесь четыреххлористого углерода и эфира для почвы и растений, гексана и ацетона для воды в соотношении 4 1. Смесь может быть использована однократно. Края пластинки погружают в растворитель не более чем на 0,5 см. После того как фронт растворителя поднимается на 10 см, пластинку вынимают из камеры, отмечают линию фронта и оставляют на несколько минут для испарения растворителя. Затем пластинку помещают горизонтально в камеру для опрыскивания и опрыскивают проявляющим реактивом № 1 и помещают в сушильный шкаф на 20 мин. при температуре 50°. После охлаждения пластинку опрыскивают проявляющим раствором № 2. В случае наличия прометрина в пробе на пластинке появляется синее пятно, расположенное на одинаковом уровне и аналогичное пятнам стандартных растворов. Для закрепления пластинку опрыскивают реактивом № 3. [c.171]

Хроматографирование. Ацетоновый раствор выпаривают до объе ма 0,1 мл, который наносят на хроматографическую пластинку. Бюкс смывают еще дважды ацетоном по 0,1 мл и также наносят на пластинку. Нанесение пробы производят на расстоянии 1,5 см от нижнего горизонтального края и 3,5 см от вертикального края. Размер нанесенного пятна не должен превышать 0,5 см. [c.78]

Для разделения препарата используют двухмерную хроматографию. Сначала пластинку помещают горизонтально в камеру для хроматографирования, в-которую налита смесь ацетона и гексана (1 5). Когда фронт растворителя поднимется на всю высоту пластинки, ее вынимают из камеры и сушат на воздухе. После испарения растворителя с.тева от пятна пробы на расстоянии 0,5 см наносят стандартные растворы препарата. Пластинку помещают в круглую хроматографическую камеру со смесью растворителей гексана и этилацетата (3 1). После того как фронт растворителя поднимется на высоту 13 см, пластинку вынимают и сушат. Когда растворитель испарится, пластинку опрыскивают проявляющим реактивом и помещают на 5 мин в сушильный шкаф при температуре 30°С. Затем пластинку опрыскивают 5%-ньш раствором уксусной кислоты. Абат проявляется в виде синих пятен на светло-желтом фоне. Величина при использовании стеклянных пластинок с силикагелем КСК — 0,54, а при использовании пластинок Силуфол /1/254 —0,31. [c.78]

На рис. 9.6 доказана выпускаемая фирмой Phaгma ia камера для нисходящего хроматографирования [2], предназначенная для тонкослойной гель-хроматографии. Для горизонтального элюирования ири различных, но точно устанавливаемых условиях предварительного насыщения слоя сорбента можно использовать К5-жамеры (рис. 9.7). Оптимальные условия разделения в этих камерах можно быстро установить. Другие типы камер, используемые для специальных методов, например проточного (непрерывного) элюирования, градиентного элюирования или круговой хроматографии, описаны в монографиях по ТСХ ([2Э, [c.95]

Ввиду того что на таких длинных листах процесс разделения продолжается иногда много часов (в зависимости от растворителя и марки бумаги) и поэтому метод БХ не может конкурировать со скоростной ТСХ (в тех случаях, когда оба метода можно было бы использовать с одинаковым успехом), Буш и Кроушоу [19] предложили методику скоростной БХ. Эта методика предусматривает применение более узких камер (рис. 3.7), горизонтального хроматографирования (возможного благодаря наличию специальной металлической рамки), тщательного насыщения атмосферы камеры парами растворяющей системы (применяются липофильные, маловязкие, летучие и быстро впитываемые растворители), а главное — предварительной пропитки бумаги водной неподвижной фазой. Поскольку разделение этим методом ведется на более коротких полосках бумаги, то требуется меньшее количество хроматографируемого вещества, которое наносят на меньшую площадь у стартовой линии (т. е. в виде пятен меньшего размера). Методика работы описана ниже в разд. 3.2.3. [c.64]

Высшие жирные кислоты можно хроматографировать в исходном состоянии, поскольку они нелетучи, используя обращен-но-фазные системы. Хроматограмму погружают в раствор ун-декана или керосина в бензоле с добавкой уксусной кислоты (соотнощение компонентов 14 18 1) избыток раствора удаляют, промокая хроматограмму с обеих сторон фильтровальной бумагой и затем подсущивая ее 5—10 мин на воздухе. Элюирование проводят 90—95%-ной уксусной кислотой. Результаты хроматографирования можно улучшить, применяя более плотную бумагу и нанося пробы в виде тонкой горизонтальной линии или полосы. Чтобы отделить насыщенные кислоты от ненасыщенных, Клячко-Гурвич и др. [66], добавляли к подвижной фазе нитрат серебра. [c.112]

Определение состава смеси триглицеридов возможно также хроматографированием в горизонтальном тонком слое. Для этого 100 мг смеси триглицеридов растворяют примерно в 1 мл петролейного эфира или ССЦ и хроматографируют в тонком слое (1 мм) силикагеля, импрегни- [c.87]

Когда еще не было приборов для двухмерного электрофореза (по Гроссу), удовлетворительные результаты получали сочетанием электрофореза с хроматографией. Диксон и др. [15] проводили электрофорез при pH 3,6 с последующим хроматографированием на бумаге в другом направлении с растворителем н-пропанол—пирофосфатный буфер. Лист бумаги ватман № 3 Т-образной формы с размерами, указанными на фиг. 23, свертывают до горизонтальной части т. Последнюю увлажняют с обоих концов буфером пиридин — уксусная кислота, pH 3,6, и проводят электрофорез при 1500 в в течение 20 мин. Диксон и др. применяли прибор Михля с жидким теплоносителем, но столь же успешно может быть использован прибор для электрофореза между горизонтальными пластинами. В последнем случае, прежде чем приступать к разделению, концы горизонтальной части Т, находившиеся в контакте с бумажными фитилями, следует отрезать. При pH 3,6 кислые аминокислоты (глутаминовая, аспарагиновая и цистеиновая) разделяются основные дают одно общее пятно, а нейтральные — другое. Если использовать для хроматографии систему П — Э — ФФ Хейнса и др. (см. [c.52]

Рэттер предложил следующий прием от края до центра кружка фильтровальной бумаги диаметром 11 см вырезают узкую полоску эту полоску сгибают перпендикулярно к плоскости кружка и обрезают, оставляя отрезок длиной 1,5 см. Каплю раствора, подлежащего анализу, помещают в центр кружка, положенного горизонтально на чашку Петри так, чтобы загнутая полоска оказалась погруженной в проявляющий раствор, помещенный в маленькую чашечку. Для предотвращения испарения фильтровальную бумагу накрывают стеклянной пластинкой, на которую можно нанести шкалу для наблюдения за ходом проявления. Рэттер предложил обрабатывать бумагу 0,03%-ным водным раствором бромистого цетилтриметиламмония и затем высушивать. После такой обработки бумага приобретает при соприкосновении с водой положительный заряд и становится более пригодной для хроматографирования некоторых кислот ых красителей. [c.1511]

Предложен ряд методов для уменьшения количества примесей, попадающих в конечный элюат из адсорбента. Малдер и Венстра [29] наносили пробы в виде полос и проводили непрерывное горизонтальное хроматографирование с тем, чтобы разделить соединения и переместить полосы к верхнему краю пластинки для концентрирования путем упаривания. В гл. V указан ряд методов, применяемых для такого хроматографирования. После этого пластинки поворачивают боком и, используя узкие полоски бумаги, с помощью которых растворитель направляют на необходимую часть хроматограммы, концентрируют полосы в виде пятен. Де Дейн и Феттерс [30] пользовались другой методикой. После достижения необходимой степени разделения пятен они поворачивали пластинки на 90° и удаляли адсорбент над пятном. Небольшие кусочки беззольной фильтровальной бумаги, которым придавали форму пятен, помещали рядом с пятнами и прижимали стеклянной пластинкой. [c.330]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология