Вирус методы выявления

Лабораторная диагностика арбовирусной инфекции у человека основана на применении экспресс-методов, выделении вируса и выявлении нарастания титра антител при исследовании парных сывороток (см. прил. табл. 4.4). [c.291]

Подобно пептидному картированию продуктов гена, олигонуклеотидное картирование вирусных генов является удобным методом выявления сходства и различий (мутаций) между вирусами, осо- [c.19]

Методы выявления (индикации) вирусов в культуре клеток и в курином эмбрионе. [c.56]

Методы выявления посторонних вирусов [c.106]

Окраска по Морозову методом серебрения. Метод применяется для выявления путем импрегнации серебром спирохет, вирусов и микроструктур бактерий (жгутиков, включений). Готовят следующие растворы. [c.20]

Выявление по внутриклеточным включениям. Внутриклеточные включения образуются при репродукции некоторых вирусов в цитоплазме и ядре клеток (оспы, бешенства, гриппа, герпеса и др.). Они представляют собой участки локализации вирусов и их компонентов в клетках. Включения обнаруживают при микроскопии после окраски монослоя по Романовскому—Гимзе или другими сложными методами, а также при люминесцентной микроскопии после обработки акридиновым оранжевым (1 20 000). [c.266]

Электронно-микроскопическое выявление ЭМВ). Это исследование дает возможность в зависимости от вида вируса выявить в клетках отдельные вирионы и их кристаллоподобные скопления в ядре или цитоплазме. ЭМВ, как правило, используется для обнаружения возбудителей вирусных инфекций с типичной морфологией (оспенные вирусы), особенно в тех случаях, когда их не удается культивировать обычными методами (вирусы гепатитов А и В, ротавирусы). Вирусы, содержащиеся в исследуемом материале, очищают и концентрируют ультрацентрифугированием, колоночной хроматографией, адсорбцией с помощью специальных сорбентов или антител. Последний способ лежит в основе метода иммунной электронной микроскопии (ИЭМ). [c.267]

В последнее время для экспресс-диагностики вирусных инфекций используют также ряд методов, направленных на выявление вирусов или их компонентов в различных видах клинического материал. По сути их можно отнести к методам вирусологической или серологической диагностике их отличает высокая специфичность и чувствительность. [c.276]

Для выявления специфического гриппозного антигена можно также использовать РОНГА и ИФА. Перспективным методом экспресс-диагностики является ИФА для индикации М-белка вируса гриппа. Разработана также ПЦР. [c.280]

Важным аспектом в проведении иммунологических исследований является подбор источников антигенов для выявления противовирусных антител. В доступных коммерческих тест-системах для обнаружения антител IgM vi IgG к вирусу 5-19 используются рекомбинантные антигены — аналоги белков вируса VPX и VP2. Следует отметить, что использование синтетических пептидов снижает чувствительность метода. [c.309]

Для того чтобы узнать, заражен ли человек ВИЧ, необходимо сделать анализ крови. Известно, что иммунная система реагирует на внедрение патогенов выработкой антител. Образец проверяемой крови смешивают с производимыми сейчас в коммерческих масштабах белками ВИЧ. Если в крови присутствуют антитела против этого вируса, реакция оказывается положительной, а пациента, прошедшего тестирование, называют ВИЧ-положительным. Однако даже при отрицательном результате инфекция не исключена, поскольку достаточное для выявления стандартным методом количество антител иногда накапливается в крови только через три месяца после заражения, а то и позже. [c.216]

Последние достижения в развитии новейших технологических приемов значительно расширили наши возможности в определении генетического строения и молекулярной структуры вирусов, а также выявлении сходства штаммов и идентификации различий между вариантами вирусов. Наиболее важные из этих методов — клонирование и определение последовательности нуклеиновых кислот, картирование РНК и пептидов, а также антигенный анализ белков с помощью моноклональных антител. Задача последней обзорной главы данной книги — обсуждение эпидемиологии вируса гриппа в свете применения этих новых методов. Особое внимание уделено оценке последних достижений и изучению вопросов эпидемиологии, которые могут быть успешно решены при использовании молекулярных методов. [c.313]

После второй мировой войны благодаря появлению биохимических и цитологических методов произошло быстрое возрождение генетики человека. Генетика человека, которой в основном занимались ученые, использующие статистические методы, влилась в основной поток медицинских исследований. Полинг показал, что серповидноклеточная анемия-молекулярная болезнь [1260], и его открытие послужило толчком к развитию подобных исследований. Наличие аномальных гемоглобинов предоставило возможность для детального изучения последствий мутаций. Генетический код был выявлен у столь далеко отстоящих друг от друга организмов, как вирусы и человек. Было обнаружено, что мутации могут приводить к аминокислотным заменам, сдвигать рамку считывания или вызывать обрыв аминокислотной цепи в результате делеции. При помощи методов биохимии и молекулярной генетики удалось определить нуклеотидную последовательность глобинового гена. Было показано, что причины многих врожденных нарушений метаболизма-различные дефекты ферментов, возникающие вследствие мутаций, изменяющих их структуру. Мет-гемоглобинемия, возникающая вследствие недостатка диафоразы, и болезни накопления гликогена относятся к числу первых обнаруженных болезней, вызываемых дефектами ферментов (разд. 4.1). [c.31]

Рнс. 56. Иммунофлюоресцентный метод Кунса. Выявление вируса кори в клетках инфицированной им тканевой культуры. [c.114]

Заражение культуры клеток микоплазмой создает значительно более сложные проблемы, чем заражение бактериями и грибами. Присутствие некоторых видов микоплазмы в культуре может быть обнаружено по вызываемым ими дегенеративным эффектам. Однако другие виды микоплазмы могут активно метаболизировать и пролиферировать в культуре, не вызывая каких-либо заметных морфологических изменений в линии клеток, которую они загрязняют. При этом, если в задачу исследователя входит изучение метаболизма клеток, свойств поверхностных рецепторов, взаимодействия вирусов с хозяином и тому подобное, присутствие микоплазмы в культуре может приводить к неточной или вовсе неправильной интерпретации результатов. В настоящее время существует 9 основных методов выявления микоплазмы [5, 6], из которых в АТСС постоянно применяются прямые культуральные испытания и непрямые исследования с использованием бисбензимидазольного флуорохрома (Хехст 33258) для окраски ДНК- Контролю на микоплазму подвергаются все приходящие в коллекцию линии клеток, а также все клетки, предназначенные для распределения [16]. [c.128]

Следует подчеркнуть, что предложенный скрининг может не выявить латентные вирусы и вирусы, не вызывающие общий ЦПЭ и не индуцирующие гемадсорбцию. В работах [17, 18] более подробно изложены методы выявления вирусного заражения, а также приведены дополнительные специализированные тесты для обнаружения вирусов, заражающих клетки. [c.137]

Рис, 4. Сравнение результатов иммуиоферментного и радиоиммунного методов выявления антител к антигенам вируса гепатита В в культуральной жидкости клеток гибридом. Надосадочные жидкости исследовали, кал описана в тексте (пример Б). Один квадрат таблицы содержит результаты анализа одной иадосадочиой жидкости. Цифра — радиоактивность (имп/мин) отражает количество связанных 1-антител кролика к иммуноглобулинам мыши. Плюсы и минусы — оценка реакции в ИФМ (—отрицательная реакция +, + +, -i -i -l- разные степени цветной положительной реакции). Первая колонка— контрольный опыт (без белкового антигена), вторая — негативный контроль (с одной лишь средой) в остальных квадратах — результаты испытания отдельных клонов иа синтез антител к антигенам вируса гепатита В. [c.336]

Иммунофлуоресцентное окрашивание применяется также для быстрой диагностики вирусных инфекций. Это направление недавно рассмотрено в исчерпывающих обзорах [12, 13], а конкретные методы обнаружения РСВ в клиническом материале описаны в работе Гарднера и др. [14]. Икмунофлуоресценция — более точный метод выявления РСВ в организме больного, чем непосредственное выделение вируса, поскольку в период рекон-валесценции после вызванного РСВ заболевания зараженные клетки бывают покрыты противовирусными антителами. [c.139]

Многие авторы пытались проследить нарастание содержания вируса во времени после заражения. При любой вирусной инфекции появлениго новообразованного вируса предшествует определенный латентный период, или эклипс, как это можно проиллюстрировать на примере вируса некроза табака (фиг. 28). Продолжительность латентного периода сильно варьирует у разных вирусов и зависит также от условий эксперимента, в особенности от концеитрации инокулума, от температуры, при которой выран 1 и-ваются растения, и от метода выявления вируса. Если для заражения используется полный вирус, то иногда выявляется инфекционность, обусловленная наличием остатков инокулума. Она снижается в первые несколь- [c.160]

Для идентификации многих вирусов можно использовать метод механической инокуляции индикаторных растений. Используется и серологический анализ, а также различные цитологические (см., например, [1429]), электронно-микроскопические и химические тесты [1072], Однако наиболее ттадожпыи методом выявления здоровых растений остается все же постановка тестов на ипфок1дионпость. [c.449]

Препараты для ЭМВ готовят методом негативного контрастирования. Для этого смешивают равные объемы вирусной суспензии и 1%-го раствора фосфорно-вольфрамовой кислоты ( негативная краска ) на формваруглеродной подложке. Краска окружает вирусную частицу и контрастирует наружную оболочку вириона, а иногда проникает внутрь капсида, в результате чего получают профильное изображение наружной оболочки. Для выявления вирусов в биологическом материале применяют также метод ультратонких срезов. [c.267]

Применение. В микробиологии и вирусология для быстрого выявления кислотоустойчивых бактерий (в мазках на туберкулез, проказу и др.), а также для (Обнаружения риккетсий и некоторых вирусов. В бактериологии для обна--ружения туберкулезных бактерий методом флуоресцентной микроскопии, по Ха-геманну [1] или Дегомье [2]. [c.46]

Данные табл. 29 дают убедительное подтверждение палочкообразной конформации вируса табачной мозаики, уже описанной на основе результатов электронной микроскопии (см. рис. 36), и пoли-Y-бeнзил-L-глyтaмaтa (в некоторых растворителях, таких, как ж-крезол), выявленной по зависимости радиуса инерции и характеристической вязкости от молекулярного веса (табл. 15, рис. 118). Молекулярные длины, которые мы получаем с помощью коэффициента вращательной диффузии и других методов, не находятся в абсолютном согласии друг с другом, по крайней мере в случае вируса табачной мозаики. Однако хорошего согласия трудно было ожидать ввиду упрощений, которые были сделаны в теории, таких, как предположение, что длинная палочка может рассматриваться эквивалентной вытянутому эллипсоиду той же самой длины (см. раздел 20г). [c.504]

Однако вскоре возникла еще одна неожиданность ослабление гибели кроликов, не имевшее отношения к иммунитету. Подтвердившееся предположение, что жесткий отбор под влиянием вируса постепенно привел к развитию устойчивости кроликов к миксоматозу, объясняло снижение эффективности метода лишь частично. Не меньшее значение имело поэтому выявление-слабовирулентных вирусов миксоматоза. Очевидно, наиболее вирулентные штаммы погибли вместе с хозяином вскоре после начала эксперимента, в то время как выживаемость ослабленных штаммов возросла. Наименее вирулентные штаммы действуют подобно живым вакцинам, и огромное число животных подвергается естественной активной иммунизации на всю жизнь. Именно поэтому численность кроликов в Австралии можно в течение длительного времени удерживать на низком уровне только при условии дальнейшего искусственного их инфицирования штаммами вируса миксоматоза, отбираемыми на высокую вирулентность. [c.207]

Но в книге X. Френкель-Конрата нас привлекла прежде всего ясность, оригинальность и свежесть изложения тех вопросов, которым уделено сравнительно мало места в большинстве других, близких по теме монографий. Это вопросы выявления, выделения и очистки вирусов, химического состава и структуры целых вирионов и их компонентов, взаимного расположения этих компонентов (гл. II—VIII), а также сборки и искусственного воссоздания вирусов (гл. X). Эти главы, которые составляют большую часть книги и материал которых наиболее близок личным научным интересам автора, являются, несмотря на компактность изложения, прекрасным и почти исчерпывающим введением в общую и структурную химию вирусов. Они дают полное представление не только о составе вирусных частиц, но и о современных методах их химического, биохимического и физико-химического исследования. Многочисленные указания на возможные методические ошибки и практику проведения экспериментов делают книгу особенно ценной для начинающих научных работников. [c.6]

Существуют два механизма превращения протоонкогена в онкоген при включении его в ретровирус изменение носледовательности или фрагментация гена, в результате чего на нем синтезируется белок с аномальной активностью, или попадание его (протоонкогена) под контроль мощных вирусных промоторов и энхансеров. что приводш к избыточному накоплению продукта или созданию неподходящих условий для его функционирования часто происходит и то, и другое. Сходный онкогенный эффект ретровирусы могут оказывать и другим способом, без захвата клеточных генов и переноса их из клетки в клетку ДПК-конии вирусной РПК могут просто встраиваться в геном клетки рядом с протоонкогенами или даже внутри их. Этот феномен называется вставочным (инсерционным) мутагенезом, а измененный таким образом геном наследуется всеми потомками данной клетки. Вообще, случайное встраивание ДПК-коний вирусной РПК в геном клетки - часть нормального жизненного цикла ретровируса, и если оно происходит в пределах 10 тыс. пар оснований от протоонкогена, то может вызвать аномальную активацию нарушенного встраиванием гена Вставочный мутагенез дает возможность идентифицировать нротоонкогены за счет их близости к встроенному ретровирусу. Выявленные таким способом нротоонкогены оказывались теми же, которые обнаруживали и другими методами, но были среди них и новые (табл. 21-5), например, ген int-l, активируемый у мышей, зараженных вирусом опухоли молочных желез [c.469]

С учетом сегментированности вирусных геномов избирательная пересортировка генов обеспечивает тонкий метод идентификации генов, определяющих такое сложное явление, как вирусная вирулентность, т. е. способность вируса нанести вред хозяину каким-либо образом. Как уже указывалось, самые первые маркеры, использованные для изучения генетики вируса гриппа, включали вирулентность и были в основном полигенными. Неудивительно поэтому, что вирулентность остается каким-то быстро исчезающим явлением, определение которого затруднено даже при использовании доступных сейчас более точных методов идентификации вирусных генов. Проблема генетического выявления вирулентности с помощью перераспределительной генетики — методом разрезания и склеивания — включает 1) возможность появления мутации в пересортированных генах в процессе перераспределения генов или при выделении вируса-реассортанта [21, 27] 2) приобретение вирусом новых фенотипических признаков вследствие пересортировки генов в другом ключе, т. е. генные констелляции [73, 98] 3) необходимость точного определения и оценки свидетельств вирулентности, особенно у сложных (интактных) хозяев. Тем не менее были получены существенные результаты, даже несмотря на ограпиченпые возможности аналитических методов (см. главу 9). [c.20]

При анализе белков различных штаммов вируса гриппа методом ПААГЭ обнаруживаются заметные различия в скоростях миграции соответствуюпщх белков. Эти вариации происходят вследствие различий в молекулярной массе, заряде или (для гликопротеидов) числе и типе олигосахаридных боковых цепей. Выявленные различия в скоростях миграции соответствующих белков позволяют установить происхождение белков в рекомбинантных вирусах. Эта информация в сочетании с анализом РНК рекомбинантов была использована для построения генетической карты вирусов гриппа (для обзора см. [89]). Подробный анализ результатов сравнения различных белков подтипов вируса гриппа типа А птиц был опубликован F. Bos h и соавт. [16]. [c.114]

Монография посвящена анализу современных данных об этиологии вирусных гепатитов, свойствах вирусов. Рассмотрены методы диагностики — выявление антигенов и антител в различной стадии болезни и рекон-валесценции, а также особенности эпидемиологии. Освещены проблемы профилактики и в первую очередь вакцинопрофилактики, клиника и лечение. [c.335]

В прямом методе антитела, полученные к вирусным антигенам, сочетаются с флуорохромом и используются для окраски зараженных клеток. Положительная реакция (желто-зеленый цвет в люминесцентном микроскопе) указывает на присутствие в клетках вирусных антигенов. Этот метод, следовательно, может быть использован для выявления клеточной трансформации, когда антитела вырабатываются, например, против ранних антигенов вируса SV40, или для выявления образования зрелых вирусов, когда получаются антитела против капсидных белков. [c.208]

Для лабораторной диагностики гепатита применяют серологические методы исследования сьшороток крови больных,. контактировавших с ними лиц, переболевших, доноров с целью выявления специфических антигенов и антител вируса гепатита В. [c.247]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология