Кролик, антисыворотка

Если раствор овальбумина добавить к соответствующей антисыворотке (от кролика, которому вводили овальбумин), то образуется осадок. Если [c.469]

Антисыворотка, полученная у кроликов, иммунизированных глицеральдегид-З-фосфатдегидрогеназой из дрожжей. [c.304]

Антисыворотка кролика к IgG мыши. [c.308]

Например, если немеченая антисыворотка была получена путем иммунизации кроликов, то на втором этапе используют меченую антивидовую кроличью сыворотку, полученную путем иммунизации кроличьими гамма-глобулинами ослов или каких-либо других животных. При этом антиглобулиновые меченые АТ покрывают вторым слоем исследуемый АГ (первый слой — за счет немеченых АТ, которые, в свою очередь, служат АГ для анти-глобулиновой сыворотки). В результате этого АГ становится видимым в люминесцентном микроскопе (как и в прямом варианте РИФ). [c.75]

Активность очищенных групповых веществ крови можно измерить как по торможению гемагглютинации, так и по специфической преципитации с соответствующей антисывороткой [29]. Групповые вещества А человека и животных, кроме специфической А-активности, обладают еще одной особенностью, так называемой активностью Форемана, т. е. способностью тормозить гемолиз бараньих эритроцитов под действием иммунной анти-А-сыворотки кролика в присутствии комплемента [88]. Все попытки разделить эти активности были неудачны, и в настоящее время активность Форемана рассматривается как неотъемлемая часть активной молекулы вещества А. Вещества В, Н и Ье этой активностью не обладают. [c.176]

Использование антисыворотки может обогатить минорную фракцию в популяции, состоящей из двух видов микроорганизмов. При исследовании смешанной культуры, в которой присутствуют два вида морской спириллы —крупные и мелкие, Линн и Криг [45] обнаружили, что мелких спирилл значительно больше. Это делало невозможным получение отдельных колоний крупных спирилл методом посева в чашки. Более того, для этих целей не подходил ни один из многочисленных методов селекции. Для получения накопительных культур крупной спириллы авторы выделили мелкую спириллу и использовали ее для иммунизации кролика. Когда полученную антисыворотку добавили к смешанной культуре, мелкие спириллы агглютинировали и осели на дно пробирки. Для получения отдельных колоний методом посева в чашки использовали надосадочную жидкость, содержащую теперь много крупных спирилл. [c.295]

Выделение антисыворотки из крови кролика [c.165]

Инкубируют в течение ночи в антисыворотке кролика к ДНФ-группам, разбавленной (1 200) реагентом В. [c.312]

Антисыворотка кролика к NPT-II в разведении 1 500. [c.361]

Сыворотку животного, содержащую специфические к данному антигену антитела, называют антисывороткой. При этом обычно указывают, против какого антигена она выработана. Например, когда говорят об антисыворотке кролика против эритроцитов человека, подразумевают, что в ответ на введение в кровь кролика эритроцитов человека образуются специфические к ним антитела. [c.11]

Метод является усложненным вариантом обычного двухцентрового или сэндвич -анализа, в котором образование комплекса детектируется не непосредственно введением в него меченного ферментом антитела, а с помощью содержащих ферментативную метку антивидовых антител. В качестве антивидовых (или вторичных) используют антитела, специфичные к глобулинам тех видов животных или птиц, которых иммунизировали антигеном для получения антисыворотки. Примером наиболее распространенных антивидовых конъюгатов являются меченные ферментом антитела кролика против иммуноглобулинов человека, меченые антитела козы (осла, барана и т. д.) против иммуноглобулинов кролика и т. д. [c.89]

Для получения поликлональных антисывороток, используемых в повседневных иммунологических методах исследования, особенно в реакциях преципитации, применяют более крупных животных, в частности лабораторных кроликов. Кроликов можно содержать в клетках, они хорошо размножаются в неволе, выносливы и долго живут. Уход, иммунизация и взятие Крови у этих животных не представляют труда. Полученные от кроликов антисыворотки обладают хорошими преципитиру-ющими свойствами и стабильны при хранении, иммуноглобулиновая фракция легко поддается очистке. Кроме того, такие антисыворотки, обладая высокой авидностью/аффинностью пригодны для использования в чувствительных иммунологических тестах. В течение нескольких месяцев в период максимального ответа можно получить не менее 100 мл антисыворотки и еще 150 мл при аутопсии. Аутбредные кролики отвечают на иммуноген по-разному, поэтому следует использовать для иммунизации несколько животных, протитровать их сыворотки по отдельности, затем смешать отобранные пробы, если требуется максимальное разнообразие антител. Кролики достаточно хорошо отвечают на широкий спектр ммуногенов в сочетании с адъювантом Фрейнда образованием IgG. [c.41]

Основной принцип ELISA — специфическое связывание первого антитела с мишенью. Если молекула-мишень представляет собой белок, то его очищенный препарат обычно используют для получения антител, при помощи которых затем и выявляют данную мишень. Антитела, которые образуются в сыворотке (антисыворотке) крови иммунизированного животного (обычно кролика), связываются с разными антигенными детерминантами (эпитопами) моле-кулы-мишени. Такую смесь антител называют поликлональным препаратом. Использование поликлональных антител имеет два недостатка, существенных для некоторых методов диагностики 1) содержание отдельных антител в поликлональном препарате может варьировать от одной партии к другой 2) поликлональные антитела нельзя применять, если необходимо различить две сходные мишени, т. е. когда патогенная (мишень) и непатогенная (не-мишень) формы различаются единственной детерминантой. Однако эти проблемы вполне разрешимы, поскольку сейчас научились получать препараты антител, выработанных к одной антигенной детерминанте, т. е. препараты моноклональных антител. [c.184]

Независимо от схемы иммунизации одним и тем же антигеном следует одновременно иммунизировать группу животных, так как обычно наблюдаются весьма большие индивидуальные различия в иммунном ответе. Чем больше группа иммунизируемых животных, тем выше вероятность получения антисыворотки достаточно высокого титра в наиболее короткий срок. Это особенно важно при получении антисыворотки к смеси белков, например при иммунизации кроликов белками сыворотки крови для получения антисыворотки, используемой в] иммунселектрофорезе. Именно в этом случае можно ожидать образования антител к ряду компонентов смеси. Для получения антисыворотки к белковым антигенам вполне достаточно иммунизировать 1%-ными белковыми растворами. Белок обычно растворяют в 0,15 М растворе ЫаС1 этим же раствором разбавляют сыворотку крови для иммунизации. [c.116]

В нашей лаборатории гидроокись алюминия используется при иммунизации кроликов для получения антисыворотки к сывороточным белкам человека (например, для иммуноэлектрофоретических исследований). Ниже описывается способ получения антисыворотки. [c.118]

Образование антител можно исследовать количественно с помощью реакции преципитации. Животное, которое служит реципиентом-обычно это кролик,-иммунизируют каким-либо специфическим чужеродным белком, например яичным альбумином из куриньк яиц. Затем сыворотку крови иммунизированного животного антисыворотку), содержащую антитела, смешивают с небольшим количеством антигена, т.е. яичньш альбумином. При этом происходит помутнение, так как образуется осадок (преципитат), содержащий комплекс антиген-антитело. Если же с антигеном смешивается сыворотка неиммунизирован-ного животного, никакого осадка не образуется. [c.157]

Так называемый р-1гасе -белок (называемый здесь р-белок) был обнаружен вместе с у-1гасе -белком в 1961 году в концентрате спинномозговой жидкости человека с помощью антисыворотки кролика. На иммунофореграм-ме эти белки располагались соответственно в р- и у-областях, откуда они и получили свои названия. — Прим. перед. [c.266]

Помимо жирового тела, где находятся основные очаги инфекции, вирус проникает в гиподермис, в мышечные ткани (у непарного шелкопряда), в основания крыльев. У куколок белянки вирус проникал также в шелкоотделительные железы и в трахейные матрицы. Вирусные тельца, развивающиеся во всех названных выше хозяевах, морфологически одинаковы и дают также идентичные или очень сходные иммунные реакции связывания комплемента и агаровой диффузии. Инъекция очищенного вируса кроликам вызывает образование антисыворотки с идентичными свойствами независимо от происхождения вируса. Электронномикроскопические исследования выявили определенные различия в структуре вирусных телец и в их окрашивании фосфомолибде-новой кислотой. [c.164]

Специфичность антифенолатических сывороток обнаруживается ка при окислении гваякола, так и ири окислении пирогаллола. Иммунизация кроликов препаратами фенолазы, инактивироваппыми посредством кипячения, дала отрицательные результаты. При дальнейшей иммунизации активными препаратами те же ншвотные дали специфические антисыворотки. [c.571]

Растворимость осадков, полученных с антителами лошади, сильно зависит от температуры [54], поэтому осаждение или ингибирование с лопищиными антисыворотками проводят в бане со льдом и поддерживают низкую температуру в течение всего процесса. Указанные выше стадии, предусматривающие инкубацию нри 37°, применяют только для сывороток человека или кролика в случае антисывороток лошади их проводят в бане со льдом при 0°. [c.439]

Была получена специфическая антисыворотка цыпленка [70] и кролика [39] против (-кислого гликопротеипа. Эту антисыворотку использовали для определения содержания (-кислого гликопротеипа в сыворотке и моче человека. [c.76]

При использовании антигенов, полученных с помощью хроматографических методов и поэтому, по крайней мере частично, растворимых, смешайте 0,2—2,0 мг интактного гибридного белка, растворенного в 1 мл физиологического раствора или PBS с 1,25 мл полного адъюванта Фрейнда и получите гомогенную эмульсию, как описано выше. Сделайте зафиксированному кролику подкожные инъекции в несколько мест. Повторите инъекции 0,2—1,0 мг антигена в неполном адъюванте Фрейнда на 14-й и 21-й день и с 28-го дня начинайте брать кровь. Для определения титра антител берите кровь еженедельно и повторите введение 0,2—1,0 мг антигена, когда титр антител начнет уменьшаться. После получения достаточного количества антисыворотки, пока титр антител остается достаточно высоким, возьмите под анестезией кровь из сердца кролика. [c.163]

Каждую реакцию иммунопреципитацни проводите с таким объемом надосадочной фракции, который эквивалентен примерно ЗХЮ клеток. Инкубируйте клеточный экстракт с 100 мкл надосадочной фракции антител нли с 10 мкл мышиной антисыворотки в течение ночи при 4 °С. Клеточные экстракты, инкубировавшиеся с моноклональными антителами, далее инкубируйте с 5 мкг антимышиных иммуноглобулинов (DAKO) и 5 мкл нормальной сыворотки кролика в течение 2 ч при комнатной температуре. [c.189]

Инъекция животных клеток или клеточных экстрактов вызывает образование антител. Более подробно этот метод рассматривается в монографии Клаузена ( lausen, 1969), принадлежащей к той же серии, что и настоящее издание. К животным, используемым обычно для получения антисывороток, относятся кролики, мыши, хомячки и т. д. Антисыворотку к вирусным ан- [c.208]

Непрямой метод предусматривает использование одной универсальной флюоресцирующей сыворотки—антиглобулиновой, содержащей антитела только против кроличьих глобулинов. В связи с тем что диагностические антисыворотки содержат кроличьи глобулины (так как их получают путем иммунизации кроликов), они реагируют с флюоресцирующей анзгиглобулиновой сывороткой в качестве антигена и вместе с тем соединяются с гомологичным исследуемым антигеном (микроорганизмом) как антитела. При этом на образовавшемся комплексе (специфические антитела+исследуе-мый антиген) фиксируются флюоресцирующие антиглобули-новые антитела, вызывая его свечение при люминесцентной микроскопии. [c.115]

Поликлональные антитела против GGT почек быка или GGT почек крысы (легкие формы) могут быть получены иммунизацией кроликов (самки, возраст 6—8 нед) путем инъекций в подушечки задних лап эмульсии, состоящей из 50 мкг фермента в 0,5 мл Na l-натрийфосфатного буфера с 0,5 мл полного стимулятора Фрейнда на животное. Через 2 нед вводят то же количество антигена (50 мкг GGT в 0,5 мл того же буфера), хорошо эмульгированного неполным стимулятором Фрейнда, подкожно в несколько мест шеи. Целесообразно повторить последнее введение еще через 2 нед. Через 10—15 сут берут пробы крови кролика инкубируют взятые пробы при 37 Х в течение 2 ч, затем оставляют на ночь при 4 °С и отделяют антисыворотку центрифугированием при 3000 g в течение 30 мин. В анализах методом двойной иммунодиффузии антисыворотка при разбавлении 1 128 (Na l-фосфатным буфером) все еще дает дуги преципи тации с разбавленной GGT (0,025 мг/мл). [c.153]

Отбор крови и получение антисыворотки. Иммунизированное животное используется в качестве донора иммунной сыворотки в течение 5—7 мес, за это время удается провести 5—6 циклов иммунизации. Животных, прошедших несколько циклов иммунизации, называют гипериммуиными. Кровь у животных отбирают из вены уха (кролик) или непосредственно из сердца путем кардиальной пункции (кролик, морская свинка) в объеме 50—70 мл у кролика и 5—10 мл у морской свинки в стерильные пробирки, промытые стерильным буферным раствором. [c.153]

Антисыворотку кролика против иммуноглобулинов быка получают гипер-шунизацней по стандартной методике. IgG-фракцию аитисыворотки выделя-т как описано в п. 2. [c.274]

Линия опухолевых клеток легкого человека 2563 (полученная из опухоли МАС-21) была использована Акесоном [37] непосредственно в качестве антигена для кроликов. При анализе полученной антисыворотки с помощью реакции связывания комплемента, иммунофлуоресцентного теста и метода насыщающего связывания в ней обнаружили антитела, специфические для антигенов нормальной ткаии почек. Эти антитела могли быть избирательно адсорбированы препаратами легочной ткани следовательно, существует антиген, общий для этих двух нормальных органов. [c.152]

Сериани с сотрудниками предоставили данные, показывающие наличие специфических антигенов молочной железы в нормальных и опухолевых клетках молочной железы. Эти исследователи иммунизировали кроликов обезжиренным препаратом верхней фракции отстоенного молока человека. Видоспецифические антитела удалялись из этой сыворотки путем адсорбции на эритроциты человека. Результаты непрямого иммунофлуоресцентного анализа показали, что антитела, содержащиеся в такой антисыворотке, специфически связываются с линиями клеток нормальной молочной железы и карциномы молочной железы человека. Был предложен чувствительный метод радиоиммуноанализа, позволивший получить количественное подтверждение этих результатов. Семь линий карциномы молочной железы и первичные культуры эпителия молочной железы связывали по крайней мере в 10—30 раз больше антител, чем фибробласты молочной железы и эпителиальные клетки из других источников. Трипсинизация клеток МСР-7 и МДА-МВ-157 приводила к снижению реактивности клеток на 80—84%, что указывало на поверхностную локализацию антигенов, специфических для молочной железы [38]. [c.152]

При антигенном анализе продуктов протеолиза белков желательно использовать антисыворотки от нескольких животных, полученные в различные сроки после иммунизации. Так, в случае изучения антигенной структуры белка вируса табачной мозаики было установлено, что индивидуальные антисыворотки кроликов реагируют, как правило, с С-концевым декапептидом, но часть антисывороток соде ржит антитела против N-концевого декапептида. Антитела к С-концевому декапептиду от некоторых кроликов взаимодействуют с пептидом, от которого отщеплен С-концевой аргинин, в то время как антитела от других кроликов распознают детерминанту только [c.28]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология