Определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам

Определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам (МИК, мкг/мл) методом серийных разведений в бульоне [c.43]

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ МИКРООРГАНИЗМОВ К АНТИБИОТИКАМ [c.165]

Активность образца антибиотика выражают как отношение дозы, которая угнетает рост соответствующего чувствительного микроорганизма, к дозе Международного биологического стандарта. Международного биологического эталонного препарата или Международного химического стандартного образца этого антибиотика, которая дает такую же степень угнетения. В количественном определении можно также использовать вторичные стандартные образцы, активность которых удостоверена соответствующим методом. Количест-ьенное определение основано на сравнении угнетения роста микроорганизмов, вызванного известными концентрациями стандартного образца, с угнетением, вызванным определенными разведениями испытуемого вещества. Этот эффект может быть измерен при помощи метода диффузии, ак описано ниже, или турбидиметрическим методом. [c.165]

Определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам [c.42]

Важными условиями корректного определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам являются [c.46]

Для определения чувствительности в стерильные предварительно подсушенные чашки Петри разливают по 20 мл МПА. На поверхность среды высевают суспензию суточной агаровой культуры микроорганизма (1 млрд микробных клеток на 1 мл по оптическому стандарту). Градуированной пипеткой берут 0,02 мл этой суспензии (одна капля) и стерильным шпателем растирают досуха на питательной среде в чашке Петри у пламени горелки. Затем стерильным пинцетом раскладывают диски фильтровальной бумаги, пропитанные разными антибиотиками, -всего шесть дисков. [c.165]

Таким образом, антибиотические свойства стрептомицина в большей степени определяются кислотностью среды и ее составом. Поэтому определение чувствительности микроорганизмов к действию названного антибиотика или его количественное определение биологическими методами необходимо проводить при строго определенных условиях среды, способствующих наивысшему проявлению антибиотических свойств стрептомицина. [c.246]

В приготовленные разведения антибиотика вносят бульонные культуры микроорганизмов в логарифмической или ранней стационарной фазе роста. Для большинства патогенных микроорганизмов этот период соответствует 16—18 ч для некоторых видов, рост которых замедлен, — 48 ч культивирования. В соответствии с действующим приказом № 250 от 13 марта 1975 г. Об унификации методов определения чувствительности микроорганизмов к химиотерапевтическим препаратам вместо бульонных культур допускается использование агаровых культур, которые разводят бульоном и стандартизируют до содержания 10 —10 микробных тел в 1 мл. Бульонную культуру или взвесь агаровой культуры исследуемых бактерий в бульоне добавляют в объеме 1 мл к каждому разведению антибиотика. При этом концентрация антибиотика в пробирке становится в 2 раза ниже. Все ряды пробирок включают по одной контрольной пробирке, содержащей 1 мл бульона без антибиотика и 1 мл культуры каждого испытываемого штамма. [c.71]

Методы обнаружения антибиотиков на протяжении ряда лет практически не претерпели никаких изменений. Обычно они включают бноавтографию с помощью чувствительных к данному антибиотику хмикроорганизмов, посеянных на агаре, или проявление хроматограмм путем их опрыскивания растворами соответствующих реагентов с последующим просмотром при УФ-освещении. Для обнаружения антибиотиков наиболее пригоден метод биоавтографии, суть которого заключается в следующем. Высушенную бумажную хроматограмму, тонкослойную пластинку или электрофореграмму прижимают к поверхности агара, содержащего культуру подходящего микроорганизма, и выдерживают в течение определенного времени. За время инкубации число бактерий увеличивается лишь в тех участках агара, которые не соприкасались с антибиотиком. По положению зон, в которых подавляется рост бактерий, определяют значения Rf соединений, проявляющих свойства антибиотика. Мейерс и Чанг [33] предложили способ увеличения чувствительности обнару- [c.145]

Выбор противомикробного препарата (или их комбинации) осуществляют в соответствии с видом возбудителя, выделенного из патологического материала, и его чувствительностью к противомикробным препаратам. Если клиническая картина заболевания характерна для определённого возбудителя и для него нетипично развитие резистентности, терапию можно проводить без определения чувствительности микроорганизма к антибиотикам. Например, возбудителями рожистого воспаления, скарлатины всегда бывают стрептококки, крупозной пневмонии — пневмококки, эпидемического менингита — менингококки. [c.367]

Практическое использование антибиотиков. Широкое применение разнообразных по химической природе и спектру антимикробного действия антибиотиков в медицинской практике, сельском хозяйстве и пищевой промышленности сопровождается нарушением микробного экологического равновесия в различных природных очагах и, что особенно существенно, в организме человека. Это может сказаться на нарушении микробного равновесия в полости рта, в кишечнике, микрофлора которого играет огромную роль в обмене веществ. Такие нарушения могут быть связаны с тем, что, во-первых, антибиотические вещества подавляют развитие лишь определенных, чувствительных к ним форм микроорганизмов во-вторых, массовое практическое использование антибиотиков стимулирует возникновение и распространение в природе атипичных штаммов известных групп микроорганизмов, в той или иной степени резистентных к этим биологически активным соединениям. Для борьбы с возникающими резистентными к антибиотикам формами микроорганизмов в практику вводят все новые антибиотические препараты, а это, в свою очередь, ведет к появлению новых устойчивых форм микроорганизмов. Возникает своеобразный порочный круг . [c.507]

Характеристика физиолого-биохимических особенностей микроорганизмов включает описание их способности расти на разных питательных средах и вызывать определенные превращения веществ, входящих в состав этих сред. Учитывают использование различных соединений углерода, азота и серы, отношение к молекулярному кислороду, способность образовывать антибиотические вещества и проявлять ферментативную активность в отношении определенных субстратов. Проверяют чувствительность микроорганизмов к разным антибиотикам. [c.155]

Под термином штамм понимают чистую культуру микроорганизма, выделенную из определенного места обитания (воды, почвы, организма животного и т. д.). Разные штаммы одного вида микроорганизмов могут различаться по некоторым признакам, например, чувствительности к антибиотикам, способности синтезировать некоторые продукты метаболизма и т. д., но эти различия меньше чем видовые . Виды микроорганизмов объединяют в так- [c.189]

Через определенные промежутки времени следует проводить контрольные испытания, чтобы показать, что остаточная антибиотическая активность снижена с помощью описанной выше методики промывания ниже уровня, при котором происходит рост посевного материала, содержащего 50—100 микроорганизмов, чувствительных к испытуемому антибиотику. [c.175]

Антибиотик, образуемый неизвестным организмом, может быть определен путем испытания его биологического действия на ряд микроорганизмов, чувствительных и устойчивых к известным антибиотикам. Таким путем можно выяснить сходство или различие биологического действия изучаемого вещества и известных антибиотиков и тем самым решить вопрос о химическом сходстве или различии этих веществ. [c.137]

Необходимо отметить, что при действии большинства антибиотиков (в том числе и типично бактерицидных) на чувствительные микробные клетки у микроорганизмов наблюдается определенный период, в течение которого при освобождении клеток от действия препарата восстанавливается их жизнеспособность. [c.421]

Диско-диффузионный метод. При определении чувствительности методом диффузии в агар чистую культуру возбудителя засевают газоном на питательный агар в чашке, например, тампоном, смоченном в стандартизованной (10 КОЕ/мл) суспензии микроорганизма. Затем на поверхность агара укладывают стандартные бумажные диски, пропитанные антибиотиками, которые диффундируют в агар, создавая градиент концентрации. На чашку диаметром 90 мм равномерно укладывают не более шести дисков с определенным количеством антибиотика. После инкубирования в термостате измеряют диаметры зон задержки роста вокруг дисков и по специальным таблицам определяют степень чувствительности к тому или иному антибиотику (см. цв. вклейку, рис. 13). Поскольку опыт диффузии ставят в стандартных условиях (состав V) количество среды, количество засеваемых микробов, температура и сроки инкубирования, стандартные диски и др.), каждому значению диаметра зоны вокруг диска с ан1Ибиотиком соответствует определенное значение МИК. Исходя из этих значений, для каждого антибиотика рассчитаны величины терапевтического индекса, что позволяет по диаметру зоны определить степень чувствительности к тому или иному антибиотику чувствительные (S), умеренно устойчивые (/) и устойчивые (/ ). К категории S (от англ. sensitive, чувствительный) относят те, для которых использование средних терапевтических доз будет достаточным для трехкратного превышения МИК. В категорию / (от англ. intermediate, промежугочный) относят те микробы, для подавления которых потребуются максимальные терапевтические дозы. Категорию R [c.44]

Второй метод выяснения стерильности антибиотиков определяется тем, что для больщинства этих соединений не имеется биологических инактиваторов их биологической активности.Поэтому у контролируемых препаратов выявляют наличие устрой-чивых к ним форм микроорганизмов, а также определяют возможное присутствие чувствительной микрофлоры. Для определения возможного присутствия в препаратах чувствительных к ним бактерий раствор антибиотиков пропускают через мембранные фильтры (диаметр пор не более 0,75 мк). [c.274]

Определение чувствительности микроорганизмов к антибиоти-ческим веществам. Чувствительность микроорганизмов к антибиотикам удобно определять с помощью выпускаемых промышленностью бумажных дисков, пропитанных определенными антибиотиками. Концентрация антибиотиков в дисках подобрана с таким расчетом, чтобы диаметры задержки роста стандартных тест-организмов были 28—32 мм. [c.170]

Другие исследования Выделение культуры микроорганизмов (особенно Pseudomonas) из мокроты и определение чувствительности к антибиотикам У новорождённых — повышенная концентрация иммунореактивного трипсина в крови Генетические исследования на основе на основе ПЦР для выявления мутаций гена F. [c.393]

Значение сульфонамидов резко уменьшилось в наши дни, в эпоху антибиотиков — веществ, которые производятся микроорганизмами и препятствуют росту других микроорганизмов. Тем не менее сульфонамиды остаются ценными лекарствами в тех случаях, когда антибиотики нельзя применять (болезненная чувствительность пациента к определенному антибио- [c.317]

Несмотря на большое число работ, посвяпденных выяснению механизма антибиотического действия те-тра.ци,клинов (см. обзоры ,. многие стороны этого сложного.явления изучены еще очень мало. Почтл не исследован вопрос о количестве антибиотика, присоединяющегося к бактериальной клетке, а также о месте, и характере этого присоединения. Происходящие под влиянием тетрациклинов изменения проницае-.М ости микробной клетки, окислительно-восстановительного потенциала и адсорбции катионов оболочкой бактерий косвенно указывают, что эти антибиотики присоединяются к по.верхности бактерий, но прямых определений (в частности, с помощью радиоактивных тетрациклинов) в литературе не описано. Мало данных опубликовано относительно тех. морфологических изменений, которые происходят при действии тетрациклинов на чувствительные к ним микроорганизмы. Рядом авторов отмечено, что тетрациклины сильнее действуют на активно размножающиеся, чем на покоящиеся микроорганизмы. [c.251]

Для исследования этого явления изучаемый организм высевают на поверхность питательного агара в виде штриха или в виде отдельной макроколонии в центре чашки Петри. Вырабатываемое организмом антибиотическое вещество диффундирует в окружающий агар и создает определенную зону. Пересекая эту зону чувствительными и устойчивыми к определенному антибиотику микроорганизмами, выясняют сходство биологического действия изучаемого препарата с известным антибиотиком. [c.137]

Итак, под действием антибиотиков в микробной клетке происходит ингибирование вполне определенных звеньев (мишеней) метаболизма чувствительных к ним организмов. Блокирование той или иной мишени зависит как от химической структуры молекулы антибиотика, так и от особенностей строения клетки микроорганизма и происходящих в ней метаболитических процессов, контролируемых соответствующими генами. [c.459]

До недавнего времени цельные микроорганизмы использовали лишь в биосенсорах косвенного действия, в которых их биокаталитические свойства сочетались с простыми и хорошо известными чувствительными элементами, такими как рН-электрод (в случае индуцируемого субстратом образования кислых или щелочных продуктов) или обычный кислородный электрод (при субстрат-зависимом дыхании). Общее представление о применении этих приборов дают написанная Карубе глава 2 настоящей книги и обзоры [2, 23, 36]. Особое внимание, в частности, уделяется возможностям их использования в клиническом анализе биологических жидкостей, для контроля за ферментационными системами, в токсикологических исследованиях и для определения антибиотиков [17, 21, 32, 47]. [c.238]

Хернстен и другие [13] с помощью чувствительного к водороду РёМОППТ изучали влияние ампициллина на энтеробактерии. Для этого большое число проб энтеробактерий, взятых у пациентов с заболеваниями мочевых путей, культивировали в запаянных ампулах количество образовавшегося водорода определяли, вводя 2 мл изучаемого газа в ячейку сенсора типа РёМОППТ. Молекулярный водород является конечным продуктом смешанного кислотного брожения энтеробактерий и, следовательно, степень ингибирования образования водорода является мерой чувствительности бактерий к ампициллину. Почти во всех пробах в течение 5 ч удалось выяснить, остались ли бактерии жизнеспособными в присутствии ампициллина. Полученные результаты хорошо согласуются с выводами, достигнутыми с помощью обычного метода диффузии в агаровом диске. Эти результаты свидетельствуют о том, что определение продуцируемого водорода может стать полезным, простым и быстрым методом оценки устойчивости микроорганизмов к антибиотикам. [c.432]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология