Белки иодирование

При обзоре литературных данных по методам иодирования различных белков наиболее перспективными представляются следующие условия [c.515]

Замещение в ароматическом кольце тирозина может быть легко достигнуто при реакции белков с галогенами, азотной кислотой или диазосоединениями. Иодированные белки получаются при прибавлении к растворам белков раствора иода в иодистом калии при слабо щелочной реакции [49]. Иод замещает водород в положениях 3 и 5 фенольного кольца тирозина [50]. Продолжительное воздействие иода на белки ведет [c.128]

Определение тирозина. Растворимость тирозина (XX) в воде настолько мала, что он осаждается при нейтрализации белкового гидролизата. В связи с этим его можно определить методом изотопного разведения [61]. Различные цветные реакции тирозина также широко используются для его количественного определения. Наиболее часто применяются для этой цели 1) диазореакция — красное окрашивание, образуюшееся при реакции тирозина с диазобензолсульфокислотой [115, 116] 2) реакция Миллона — красное окрашивание, появляющееся в присутствии тирозина при прибавлении раствора ртути в азотной кислоте [117] 3) синее окрашивание, появляющееся в результате восстанавливающего действия тирозина на смесь фосфорновольфрамовой и фосфорно-мшибденовой кислот [118]. При обработке иодом в слабощелочном растворе тирозин иодируется. В результате иодирования получаются дииодтирозин и тироксин [119, 120]. Подобная же реакция наблюдается при обработке иодом белков [80]. [c.41]

Спиртовый раствор иода применяется также для иодирования белков 2 . [c.425]

Другой проблемой, относящейся к мечению белков радиоактивным иодом, является степень гомогенности распределения метки в белке. В идеале желательно иметь материал, который постоянно содержит только 1 или 2 атома иода на молекулу белка, так как это соответствует наименьшим возможным изменениям протеина. Для создания такой степени иодирования необходимо сохранить низкий уровень иодирования (1/10), применяя при этом специальные мягкие окисляющие агенты для предотвращения потерь иодирующего агента на окисление 5Н-групп. [c.514]

К сложным белкам относят также соединения белков с липидами (липопротеиды), некоторыми углеводами, иодированными аминокислотами (тиреоглобулин) и нуклеиновыми кислотами (нуклеопротеиды). Значение нуклеопротеидов исключительно велико, так как они выполняют ответственные функции в процессах синтеза белка. [c.64]

Очевидно, реактивные группы пепсина обладают способностью связывать как отрицательно заряженную боковую цепь аминодикарбоновой кислоты, так и фенольный остаток тирозина, входящие в состав этого дипептида. В пользу этого свидетельствует то, что белки с иодированными фенольными группами не расщепляются пепсином, тогда как после отщепления иода они расщепляются этим ферментом с большой легкостью [71]. [c.292]

Тиреоглобулин содержит 0,6% иода [10]. Молекулярный вес тиреоглобулина 700 000 [И]. Каждая молекула тиреоглобулина содержит, следовательно, 32 атома иода, входящие в состав 2—3 группировок тироксина и 8—12 групп дииодтирозина [11]. Тиреоглобулин устойчив только при определенных значениях pH, и вне этой зоны молекулы тиреоглобулина расщепляются на более мелкие субъединицы [12]. Тиреоглобулин не реагирует с антителами, образующимися при введении в организм иодированных белков [13]. Это указывает на то, что остатки тироксина находятся внутри большой молекулы тиреоглобулина, а не на ее поверхности и потому недоступны для специфических антиподных групп молекулы антитела. [c.314]

Иммунологическая специфичность белков является весьма характерным их свойством, которое в нормальных условиях сохраняется без изменения. Однако присоединяя к белкам чужеродные соединения или создавая комплексы из двух и более белков, можно изменить их антигенные свойства. Так, например, если сывороточный глобулин осторожно нагревать в присутствии сывороточного альбумина, то образуется комплекс, обладающий новыми серологическими свойствами [23]. Подобным же образом при иодировании белков происходит изменение их серологической специфичности [24, 25]. Специфичность иодированных [c.333]

Выше было уже упомянуто о получении белков, иодированных радиоактивным изотопом иода. В связи с работами по метаболизму был осуществлен биосинтез тироглобулинов, в состав которых входит J131 (189). В ряде лабораторий [67] изучалось иммуно-химическое поведение иодсодержащих белков, полученных либо прямым иодированием, либо внедрением иодированных радикалов. Белки, иодированные радиоактивным изотопом, оказались полезными при исследовании образования антител в зависимости от устойчивости соответствующих антигенов в тканях [4,7,31, 1316]. [c.319]

Метод лактопероксидазного иодирования технически несложен при этом выявлять радиоактивный иод (с помощью Y-счетчика или радиоавтографии) гораздо проще, чем тритиевую метку. Кроме того, определенные типы клеток (например, эритроциты и спермин) в процессе биосинтеза могут включать лишь очень небольшое количество метки в этих случаях для маркирования мембранных белков иодирование становится методом выбора. [c.182]

Одновременно было описано использование метил-п-окси-бензимидата в качестве промежуточного реагента, который можно иодировать, а затем присоединить к белку. Иодирование осуществляется также с помощью Хлорамина Т, а присоединение к белку происходит по аминогруппам за счет отщепления метилового эфира реагента. Примечательно, что при этом сохраняется положительный заряд белка. [c.241]

Последние четыре белка, приведенные в табл. 42, — гормоны, но и здесь нет заметного. различия в содержании разных аминокислот, кроме тиреогло 5улина, в состав которого входят иодированные аминокислоты. В инсулине много цистеина и цистина, но их много и в кератине. Известно также, что аминокислотный состав высокоспецифичных белков зависит от источника выделения, что было показано, например, на инсулине (Хкрфенист, 1953). [c.656]

Для модификации остатков Т. в молекулах белков используют нитрование тетранитрометаном и иодирование ароматич. кольца, ацетилирование гидроксигруппы, р-ции с бромсукцинимидом, цианурфторидом и диазониевыми соединениями. В пептидном синтезе фенольный гидроксил остатка Т. защищают бензильной, 2,6-дихлорбензильной или /ире/и-бутильной группой. [c.589]

Присоединение хлора сопровождается кратковременным образованием переходного соединения железа, спектрально неотличимого от соединения I. Для него была предложена структура Ре—0С1 [29]. Белок имеет молекулярный вес 42 ООО он был выделен в низкоспиновом ферри-состоянии. Восстановленный феррофермент является высокоспиновой формой спектроскопически он почти идентичен цитохрому Р-450 (разд. Ж,2, е) [29, ЗОХ Лактопероксидаза молока в присутствии 1 и НгОг катализирует совершенно аналогичную реакцию иодирования в белках [c.378]

В сложных многоклеточных организмах роль сигнальных, регуляторных веществ играют гормоны. В организмах животных имеются две большие группы гормонов — белки, полипептиды и их производные и стероиды. К первой группе относится тирео-глобулин — белок щитовидной железы, содержащий иодированный тироксин, инсулин, регулирующий уровень сахара в крови, окситоцин, вызывающий сокращение матки, вазопрессин, регулирующий кровяное давление, и т. д. Гормоны синтезируются в железах внутренней секреции и осуществляют регуляцию на уровне организма. Стероиды — соединения, содержащие углеродный скелет циклопентанофенантрена [c.50]

Рис, 3.8. Лактопероксидазный метод иодирования остатков тирозина в белках. Ферментативное иодирование затрагивает только поверхностные белки п поэтому может использоваться для локализации белков в клеточной мембране, [c.78]

Тот факт, что ароматические соединения задерживаются гелями декстрана (см. стр. 129), может быть использован для их выделения и идентификации. Фенольная группировка в нейтральной среде обладает особенно сильным сродством к сефадексу. На этом основано важное клинико-химическое приложение гель-хроматографии определение в сыворотке свободного Тироксийа, радиоактивного иода и связанного с белком гормона при анализе функции щитовидной келезы. В гл. V приводится большой список работ на эту тему, в основу которых положен тот факт, что меченый тироксин (вместе с трииодтиронином) сильно удерживается сефадексом Q-25, но может быть затем количественно элюирован. Два иодированных тирозина можно затем разделить, например с помощью хроматографии на бумаге. [c.191]

Сыворотку инкубируют в стандартных условиях с меченым гормоном, а затем хроматографируют. При этом получают три пика радиоактивности пик связанного с белком гормона, пик свободного гормона, а между ними пик свободного 12 , образовавшегося при фотохимическом разложении гормона. Результаты количественного определения отлично совпадают с данными, полученными другими методами эти результаты были подтверждены на многих сотнях случаев [113, 114]. Многократно было описано также разделение иодированных аминокислот, продуктов их ассоциации с белками и неорганического иода (см. литературу к гл. IV, приложение II). Этот прием использовался для количественного определения 1 -тиро-нина и I -тироксина [115—117]. Для определения немеченого тироксина сыворотку вначале депротеини-зируют, а затем прибавляют определенное количество тироксинсвязывающей фракции глобулинов. Потом инкубируют с определенным количеством меченого тироксина и определяют распределение активности на сефадексе G-25. Таким путем можно оценить количество первоначально присутствовавшего в среде тироксина, поскольку он конкурирует с радиоактивным гормоном за связывание с глобулином [118]. В настоящее время разработан метод разделения и определения гормонов щитовидной железы, позволяющий обнаруживать количества порядка одного нанограмма [119]. С другой стороны, высказано критическое мнение, что следует очень тщательно учитывать спонтанную деградацию тироксина, влияние размеров колонки и необратимую адсорбцию тироксина [120]. [c.227]

При иодировании тирозина последовательно образуются моно- и дииодтирозин (соответственно МИТ и ДИТ). Введение второго атома иода протекает с более высокой скоростью, по этому ДИТ является основным продуктом реакции. Степень замещения и распределение иодтирозина в пептидах, полученных после гидролиза белка, определяют по включению радиоактивной метки, а также методом дифференциальной спектрофото-метрии. [c.353]

Гемокупреин, церуло-плазмин, 3-глобулин-медь, купроиротеин молока, гепатокуиреин, тканевые белки, соединения нуклеопротеидов с железом, и медью, медь-порфирин Тиреоглобулины, иодированные аминокислоты [c.188]

В 1876 г. Боэм впервые сообщил о том, что иод соединяется с белками (цит. по [101]). Окончательное заключение, что тирозильный остаток является тем участком протеиновой молекулы, где присоединяется иод, было дано Освальдом в 1911 г. [101]. Однако расход иода в реакции с белком больше, чем это соответствует содержанию тирозина. Согласно современным представлениям о химизме иодирования [102], тирозильный остаток—основной акцептор иода, однако гипоидная кислота (Н2Ю+, ее катионная форма), являясь иодирующим белки агентом, довольно активно вступает во взаимодействие с некоторыми восстанавливающими группами белка, например с сульфгидрилом, поэтому первая порция иода в любом методе иодирования расходуется на окисление 5Н-групп и должна расматриваться как потерянная для метки [103]. [c.514]

В основу получения гамма-глобулина-иод-131 была взята методика Гельмкампа [105]. Разработанный в Радиевом институте способ иодирования белковых препаратов (гамма-глобулин) заключается в струйном смешении раствора белка в боратном буфере с раствором иодистого калия-иод-131 и иодмонохлорида (носителя иода). [c.515]

Очистку иодированного белка от ионного иода проводили на анионообменной смоле дауэкс 1X16. Выход по иоду-131 составлял 60—70%, по белку — 70—80% [c.515]

Применение смолы с высоким процентом дивинилбензола — дауэкс 1X16 (16%), обладающей меньшей сорбционной способностью по отношению к белкам, особенно к низкомолекулярным, и большей специфической сорбцией иодид-нона, дало возможность уменьшить потери иодированного белка и увеличить чистоту меченого препарата. [c.515]

Тиреоглобулин содержит, кроме того, иодированные производные тирозина и углеводы (галактозу, маннозу, а также клюкозамин), т. е. является глюкопротеидом. Молекулярная масса этого белка очень высока — 600 ООО молекула его состоит из десяти пептидных цепей и включает около 600 аминокислот. Молекулы тирео-глобулина склонны образовывать крупные скопления — агрегаты, молекулярная масса которых доходит до 17 000 000. [c.151]

Нерастворимая в кислотах фракция гидролизата иодированного белка о-Метиловый эфир тироксина 3,5-дииодтиронин 1 тироксин. Идентификация 1) Бумажная 3) Бумага-1-2 и. раствор аммиака 4) Бутил, спирт амил, спирт 1 1 202 [c.273]

Прилипание иодированного белка к рибосомам весьма специфично н целиком определяется присутствием в нем гаптенноп дпнитрофенильной группы. Прилипший радиоактивный белок не отмывается ни буфером, ни солевым раствором, по е-динитро-фениллизипом [c.506]

Тироксин легко образуется in vitro при воздействии на белки иодом в слегка щелочном растворе [14]. Так, например, при обработке 100 г казеина иодом было получено 0,4 г кристаллического тироксина [15, 16]. Тироксин можно также получить, окисляя дииодтирозин перекисью водорода в щелочной среде [17]. Все приведенные данные свидетельствуют о том, что первым этапом образования тироксина является иодирование тирозина [c.314]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология