Нингидрин, реактив

После термического разложения нингидрин (реактив № 108) [c.326]

Нингидрин—нитрат меди для аминокислот (полихроматический реактив). [c.487]

Проявление нингидрином. Раствор нингидрина наливают в ванночку и равномерно пропитывают им хроматограмму. Хроматограмму высушивают под тягой и выдерживают в темноте при комнатной температуре около 12 ч. В этих условиях с нингидрином реагируют все а-аминокислоты (другие аминокислоты дают реакцию при более высокой температуре — около 100°С). Проявление хроматограмм при качественной хроматографии можно ускорить, помещая последние на 5—10 мин в термостат при 60° С. Окраска, получаемая при проявлении аминокислот нингидрином, неустойчива. Ее можно закрепить, опрыскивая проявленную хроматограмму из пульверизатора раствором ацетона, содержащим азотнокислую медь. Стойкую окраску можно получить при внесении в нингидриновый реактив кадмия (с. 135) или стронция. Окраска сохраняется в течение нескольких недель при проявлении аминокислот смесью 1%-ного раствора нингид-рнна в ацетоне и 1%-ного раствора хлористого стронция в 20%-ном растворе СН3СООН (1 6). [c.129]

Для обнаружения аминов используют нингидрин (реактив № 108), прочную голубую соль (реактив № 61), нитропруссид натрия (реактив № 112), азотную кислоту (реактив № 132) и ванилин (реактив № 147). 3,5-Динитро-бензамиды можно сделать видимыми, используя раствор иода в хлороформе (реактив № 73) или а-нафтиламин (реактив № 98). Они появляются также в виде фиолетовых пятен после 15-минутного облучения ртутной лампой без фильтра. [c.304]

Диметиламинобензальдегид Нингидрин Реактив Фолина Соли диазония [c.332]

За опрыскиванием нингидрином может следовать опрыскивание а-нитрозо-р-нафтолом или реагентом Эрлиха. За ним могут также следовать реагенты, дающие пониженную чувствительность обработки (реагент Паули или Сакагучи). Изатину может предшествовать нингидрин или за изатином может следовать реактив Эрлиха или а-нитрозо-Р-нафтол (чувствительность последнего теста при этом снижается). За реактивом Эрлиха может следовать обработка по Сакагучи, даже если предшествующими операциями были опрыскивание нингидрином или изатином. УФ-облучение и обработка иодом не метают проведению любых последующих тестов. [c.394]

Для обнаружения витамина В0 и пантотеновой кислоты нижнюю часть второй, до этого времени защищенной хроматограммы опрыскивают дихлор-хинонхлоримидом (реактив № 41 0,1%) и обрабатывают парами аммиака, в результате витамин Ве окрашивается в голубой цвет. Затем 0,5 час нагревают при 160°, опрыскивают верхнюю часть полосы нингидрином (реактив № 108 0,5% в этаноле). После повторного кратковременного нагревания до 160° появляется пантотеновая кислота в виде фиолетового пятна. [c.237]

К раствору пептида объемом 0,1 —1,0 мл добавляют 1 мл раствора нингидрина (гл. 32) пробирку закрывают колпачком, встряхивают и нагревают на прикрытой кипящей водяной бане в течение 15 мин. После развития окраски разбавляют до нужного объема 50%-ным этанолом, охлаждают до 30 °С и измеряют экстинкцию при 570 нм. Нингидриновый реактив готовят на достаточно концентрированном буферном растворе (гл. 32), который обеспечивает сохранение оптимального значения pH 5,5. Степень разведения (50%-ным этанолом) зависит от концентрации пептида. Иногда в раствор для разведения добавляют немного бензола, но в таких случаях для предотвращения опалесценции увеличивают концентрацию этанола до 60%. Интенсивность окраски пересчитывают на лейциновый эквивалент , т. е. указывают содержание лейцина (в ммолях), дающего в аналогичных условиях равную интенсивность окраски. По полученным результатам строят профиль элюирования, где на оси абсцисс откладывают объем в миллилитрах, а на оси ординат— соответствующий лейциновый эквивалент, или оптическую плотность при 570 нм. [c.392]

Реактив для проявления 0,1 г нингидрина растворяют в 20 мл этанола, прибавляют 1 мл ледяной уксусной кислоты и 3 мл 0,2%-ного водного раствора сульфата меди. [c.404]

Затем пробку слегка приподнимают и медленно добавляют 80,0 г нингидрина через насыпную воронку. Продолжают перемешивание до тех пор, пока реактив не растворится. Для ускорения растворения нингидрина рекомендуется медленно поводить бутыль по окружности магнитной мешалки так, чтобы лучше размешивался нингидрин у стенок на дне бутыли. [c.54]

Проявляющий реактив раствор 0,3 г нингидрина в 3 мл ледяной уксусной кислоты и 100 мл я-бутанола Камера для хроматографирования Прибор для отгонки воды в вакууме Водоструйный насос Стеклянный пульверизатор Микропипетки [c.127]

После пропускания растворителя хроматограмму сушат в течение ночи в вытяжном шкафу и затем разрезают на полоски. Одну полоску, содержащую стандарт или неизвестное вещество, опрыскивают нингидрином, а другую (с тем же неизвестным веществом или стандартом) — реактивом Драгендорфа. Серин и этаноламин после обработки нингидрином проявляются в виде синих пятен с значениями Rf около 0,27 и 0,51 соответственно. Холин и М,М-диметилэтаноламин не реагируют с нингидрином. Реактив Драгендорфа окрашивает холин в оранжевый цвет, а диметилэтаноламин — в бледно-оранжевый. Значения Rf для холина и N,N-димeтил-этаноламина составляют - 0,93 и 0,86 соответственно. [c.319]

Хроматография. к-Бутанол — ледя-Старт ная уксусная кислота—вода (80-f 20-f 20), восходяш ий метод, 2,5 час, обнаружение нингидрин (реактив № 108). [c.432]

Для тонкослойной хроматографии применяют подвижный растворитель хлороформ-метанол-вода (65 25 4) или хлороформ-метанол-уксусная кислота-вода (25 15 4 2) проявляют раствором родамина или йодом. Для идентификации аминофосфатидов (кефалина) хроматограмму опрыскивают раствором нингидрина для холинсодержащих фосфолипидов (лецитина) применяют реактив Драгендорфа [15]. Идентифицированы следующие фосфолипиды [9J лецитин (R — 0,6) и кефалин (Rf —0,32). В качестве метчиков применяли синтетический лецитин и фосфолипиды желтка яйца. [c.374]

Нингидрин, реактив на аминокислоты ( R, 60, 39), получается с выходом 35% при окислении нндандиона-1,3 двуокисью селена [c.193]

Удобной цветной реакцией на аминокислоты является взаимодействие с нингидрином (рис. 12.5) продукт реакции с15льно сопряжен и поэтому интенсивно окрашен. Нингидриковый реактив используют для обнаружения аминокислотных пятен при хроматографии на пластинках или на бумаге, а также для колориметрического количественного определения аминокислот. [c.265]

Проба с нингидрином. Реактив представляет собой 0,2%-пый раствор нингидрина (трикетогидринденгидрат) в 90%-ном спирте. К 1 мг (или менее) исследуемого вещества в пробирке добавляют 1 мл реактива. Смесь нагревают до кипения. Возникновение голубой или пурпурной окраски указывает на положительную реакцию. Пробу можно проводить с 5 V или менее вещества, используя методику, описанную в гл. XIV, раздел V. Исследуемое вещество растворяют в капельке воды, которую наносят на фильтровальную бумагу, после высушгшания пятно опрыскивают раствором нингидрина и затем нагревают нри 100 в течение 10 мин. Появление голубой ИJШ пурпурной окраски указывает на положительную реакцию. [c.395]

Окси-Ь-пролин найден только в гидролизатах эластина и коллагена, где на его долю приходится до 13% всех аминокислотных остатков. При обработке нингидрином оксипролин дает на хроматограммах желтую окраску, при обработке изатином он может быть обнаружен в виде синего пятна. Взаимодействие оксипролина с перекисью водорода с последующим подкисле-нием раствора приводит к образованию пиррол-2-карбоновой кислоты (стр. 352), которая дает с л-диметиламинобензальде-гидом (реактив Эрлиха) интенсивное красно-фиолетовое окрашивание. [c.19]

Электрофорез осуществляют в следующих условиях пи-ридннацетатный буфер, pH 6,5, 40 е/сж, 10°, 2 часа, 1%-ный раствор нингидрина в бутиловом спирте, реактив Сакагущи. Чистый солянокислый аргинин спекается при 218°, затвердевает снова при 225° и разлагается при 235°. [c.299]

Нингидриновый реактив. Приготовление нингидринового реактива 40 мг ЗпСЬ 2НгО растворяют в 25 мл цитратного буферного раствора и добавляют 4,0 мг нингидрина, предварительно растворенного в 12,5 мт метилцеллозольва. Реактив готовят непосредственно перед опытом. [c.70]

Пантотеновая кислота и пантенол расщепляются на пластинках при нагревании в течение 30 мин при 160°. После опрыскивания 0,5%-ным раствором нингидрина в этаноле (реактив № 108) и повторного кратковременного нагревания до 160 [15] образующийся -аланин приобретает фиолетовую окраску, а аминопропанол — винно-красную. Количественное расщепление достигается также при обработке 10%-ным раствором трихлоруксусной кислоты и сушкой в течение 10 мин при 110° (минимально определяемое количество 2 цг). [c.244]

Оксипролин Изатин 4- реактив Эрлиха Модификация нингидрина Перйодат ацетилацетон -j-ацетат аммония Нингидрин" Джепсон, Смит [76] Кларксон [96] Шварц [97] [c.407]

Для обнаружения пептидов целесообразно использовать методы, проверенные в области хроматографии на бумаге. Часто применяемый реактив нингидрина не всегда достаточно чувствителен, особенно для высших пептидов в особенности он непригоден в случае циклических пептидов, поскольку они содержат в боковой цепи свободные амино-группы. Гораздо более широко применимым и более чувствительным (минимально определяемое-количество 0,1 цг) является N-галогенирование по методу Райнделя и Гоппе [73] со следуюш,ими изменениями прописи [149, 8] [c.412]

Для количественного определения аминокислот используют пингидриновый реактив [6]. При нагревании до 100° в буферном растворе pH 5 нингидрин (I) реагирует со всеми а-аминокисло-тами за исключением цистеина [13]. [c.136]

М. Использование подобных элюентов с восстановительными свойствами позволяет собственно нингидрированный реактив не предохранять от попадания воздуха, что упрощает конструкцию прибора, избавляя от необходимости иметь в нингидриновой системе промежуточные емкости с маслом и азотную магистраль. Кроме того, для предотвращения кристаллизации нингидрина в реакторе был изменен состав буфера нингидринового реактива (ацетатный буфер заменен на пронионатный). Таким образом, нингидриновый реактив Розена имеет следующий состав 201,8 г пропионата натрия, 93,0 мл пропионовой кислоты, 500 мл метилцеллосольва, 20,0 г нингидрина и воды до 1 л. Этот реактив не дает окраски при взаимодействии с буферными растворами и не изменяет своих свойств при хранении в течение 6 недель на холоду. Буферная емкость нингидринового реактива достаточна для получения pH, необходимого для максимального развития окраски (pH 4,5—5,5). Элюат с буфером pH 2,9 доводится до pH 4,75 и с 0,8 М цитратом натрия до pH 5,45. Это обеспечивает строгую воспроизводимость окраски и по сравнению с оригинальной методикой Пье и Морриса снижает подъем базовой линии. [c.165]

Нингидриновый реактив. Растворяют 75 мг d lj в 6 мл воды, добавляют 0,3 мл ледяной уксусной кислоты, 2 г нингидрина и 100 мл ацетона [4]. [c.106]

Для проявления хроматограмм мы применяли нингидрин-ный реактив — смесь 95 мл 0,5%-ного раствора перекристаллизованного нингидрина в ацетоне, 4 мл дистиллированной воды и 1 мл уксусной кислоты. Для получения колориметрируемого раствора использовали раствор СиЗО .бНаО в 75%-ном этиловом спирте. [c.151]

Для определения пролина готовят нингидриновый реактив, содержащий 40 мл 6 М Н3РО4, 60 мл ледяной уксусной кислоты и 2,5 г нингидрина на каждые 100 мл смеси. Для растворения нингидрина эту смесь нагревают до 70° на водяной бане. Хроматограммы обрабатывают 0,02%-ным раствором нингидрина в ацетоне, окрашен- [c.43]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология