Сефадексы в хроматографии характеристики

Гель-хроматография, как представляется на первый взгляд, должна быть идеальным методом отделения полимеров и определения их характеристик. Однако большинство известных сорбентов, применяемых в гель-хроматографии, для решения зтой задачи не подходят. На поверхности гелей сефадекса имеются вицинальные гидроксильные группы, которые в нейтральной среде легко образуют комплексы с ионами большинства металлов (типичным соединением этого типа является глицерат железа Британской фармакопеи). Поэтому при применении в больших концентрациях эти ионы дают хвосты , а при малых концентрациях полностью адсорбируются. На поверхности пористых стекол и пористого силикагеля (и их производных) обычно располагается значительное число силанольных групп, которые также энергично взаимодействуют с мономерными и полимерными ионами металлов. Тем не менее методом гель-хроматографии удается разделить гидролизуемые полимерные соединения некоторых металлов, например рутения [12], родия (III) i[13], и растворимые ферроцианиды [14—16]. Характер перемещения небольших мономерных ио ов внутри сорбента, применяемого для гель-хроматографии, в значительной степени определяется ионным обменом с остаточными карбоксильными группами (благодаря которым происходит вытеснение ионов) и гидрофобной адсорбцией, особенно сильной на сефадексе LH-20, при использовании которого, кроме того, может наблюдаться эффект высаливания [17]. [c.328]

Показано, что сефадекс G-10 удобно применять для разделения сложных смесей азокрасителей, используемых в качестве хелатных агентов при флуорометрическом анализе. Эти соединения получают из о, о -диоксиазобензола путем введения одной и двух метилениминодиацетатных групп [19]. Сефадекс G-25 применяли для хроматографирования некоторых пищевых красителей [20], причем использовали как колоночную, так и тонкослойную хроматографию (в последнем случае на предметных стеклах). Эти результаты приведены в табл. 47.1. Величины Rp для тартразина, индиго-кармина и оранжевого G в 0,1%-ном растворе сульфата натрия соответствуют относительным расстояниям, пройденным красителями на колонках с сефадексом смесь этих красителей разделяли на колонке длиной б см в 0,1%-ном растворе сульфата натрия. Выход чистых красителей превышал 98%. Исследовали влияние молекулярной массы красителя на его извлечение из сефадекса водным раствором ацетона [21]. Была изучена корреляция между характеристиками набухания и параметрами элюирования для нескольких лищевых красителей в процессе гель-фильтрования [22—24]. [c.263]

Развитие ТСХ шло несколькими путями. Во-первых, всемерно расширялась область ее применения, от эфирных масел и алкалоидов — первых объектов ТСХ, исследователи перешли к анализу полярных соединений (аминокислоты и их производные, феполрл и др.) и, наконец, к высокомолекулярным соединениям — синтетическим полимерам и полимерам природного происхождения — белкам и нуклеиновым кислотам. Неорганические соединения стали также исследоваться методами ТСХ. Во-вторых, расширялся диапазон используемых адсорбентов. Вслед за окисью алюминия и силикагелем нашли применение окись магния, силикат магния, ионообменные кристаллы, целлюлоза и ее ионообменные производные, сефадексы, пористые стекла. Очень интересное направление в развитии ТСХ связано с работами Ванга [5—7], предложившего для хроматографии пористую полиамидную пленку, которая наряду с хорошими гидродинамическими характеристиками обладала необходимой устойчивостью, позволяющей ее использовать многократно. В-третьих, исследовались теоретические аспекты ТСХ, связанные с динамическими характеристиками этого процесса [8—11], особенностями поведения многокомпонентного элюента на хроматографической пластинке, который разделяется на аь -тивном адсорбенте, образуя отдельные зоны разного состава (так называемая нолизональная хроматография) [12, 13] и, наконец, с вопросами [c.134]

Успехи в использовании равновесия между растворами и твердыми фазами при разделении биологических полимеров связаны с тем, что здесь используются преимущественно водные растворы, в которых эти вещества обладают наибольшей устойчивостью, а также кристаллические и сорбированные состояния, при переходе в которые молекулы биополимеров весьма часто изменяют свои характеристики полностью обратимо. Известно, что сильные воздействия на макромолекулы могут привести к де-натурационным изменениям. В связи с этим в качестве сорбентов применяют мягко действующие на биополимеры карбоксильные смолы, некоторые типы анионитов, ионообменники — производные жесткоцепного полимера целлюлозы и сефадексы — сшитые производные декстрана. В отличие от этого хроматография низкомолекулярных, сравнительно стабильных веществ (аминокислот) [c.7]

Применение колоночной жидкостной хроматографии (КЖХ) для анализа состава почв носило до недавнего времени ограниченный характер. При анализе гумуса почвы основное внимание уделяли разделению экстрактов на компоненты фракциониробанием по молекулярной массе с помощью гель-хроматографии на сефадексе. Соотношения количеств компонентов, присутствующих во фракциях с различными молекулярными массами, используют для качественной характеристику гумусовых кислот (фульвокислот и гуминовых кислот) из разных типов почв. [c.272]

Нейтрализованные гумусовые кислоты растворяли в 2М растворе хлористого натрия и пробы, содержащие 3,33 мг/мл каждого образца, разделяли на колонке с сефадексом дистиллированной водой. Разделение проводили на колонках длиной 32 см (сефадекс G-25), 42 см (сефадекс G-50) и 52 см (сефадекс G-100), диаметр колонки во всех случаях равнялся 4,1 см [30]. Во всех случаях достигали разделения на две основные фракции а и б, окрашенные в коричневый цвет. На сефадексе G-25 выделяли третью фракцию, меньшую по размерам, желтовато-коричневого цвета. Фракции а и б после повторного разделения исходной пробы упаривали до 20—30 мл при температуре ниже 45 °С. Фракции подкисляли 0,2— 0,3 мл 5 н. раствора НС1, после чего проводили центрифугирование. Осадки отмывали дваз сды порциями по 10 мл 0,1 н. НС1. Гумусовые кислоты высушивали под вакуумом и хранили при, комнатной температуре. Пробы высушенных и измельченных гумусовых фракций растворяли в NaOH, растворы доводили до рН=7,0 и записывали спектры поглощения. Коэффициенты экстинкции рассчитывали для растворов с концентрацией 1,0 мг/мл и по ним получали информацию о молекулярной массе. Аналогичные исследования, в ходе которых в качестве элюента использовали растворы солей, проведены также в работах [35—38]. Хотя гель-проника-ющая хроматография на сефадексах и других типах гелей широко используется для фракционирования и характеристики сложных природных полимеров, необходима разработка более эффективных систем фракционирования гумусовых кислот, чтобы достаточно глубоко изучить свойства гумусовых кислот и фульвоколлоидов в почве. [c.279]

Колонки с сефадексом использовали для фракционирования органических соединений, присутствующих в природной воде. Помимо цвета были изучены также и другие характеристики каждой фракции. Джессинг и Ли [59] нащли взаимосвязь между распределением углерода, цветом и содержанием азота во фракциях, элюированных из колонки с сефадексом. В заключение- следует сделать несколько замечаний относительно данных, полученных на сефадексе. Многие возможные эффекты не были изучены достаточно подробно, в том числе взаимодействие с гелем окрашенных кислот и других веществ. При сильном взаимодействии разделяемых веществ с материалом насадки найденное молекулярно-массовое распределение может существенно изменяться. Даже в отсутствие взаимодействия с гелем влияние концентрации компонентов в пробе на поведение органических веществ до сих пор не выяснено. Некоторые исследователи сообщали об уменьшении интенсивности окраски при концентрировании пробы. Весь-ма"возможно, что молекулярно-массовое распределение в исходной пробе совершенно отличается от распределения на колонке. В тех случаях, когда данные, полученные методом гель-хроматографии, подтверждаются другими методами, их следует считать полезными и важными, но не исчерпывающими. [c.422]

Вода может быть использована в качестве элюента для СЭХ углеводов только в том случае, если условия хроматографирования обеспечивают минимальные взаимодействия (обусловленные электростатическими или вандерваальсовыми силами) молекул растворенного вещества с сорбентом или друг с другом. Роль адсорбции при хроматографии олигосахаридов на жестких сшитых гелях, например на биогеле Р-2 и сефадексе 0-15, была детально изучена Брауном с сотр. [151 —155] и Дельвигом и др. [156]. Эти авторы показали, что главным фактором, особенно-при анализе декстрановых гелей, является взаимодействие растворенного вещества с гелем, интенсивность которого повышается с увеличением длины цепи в гомологичных сериях (например, в ряду мальто-, целло-, ксило- и маннодекстринов). Сила такого рода взаимодействия падает с повышением температуры, что приводит также к уменьшению коэффициента распределения Кй для каждого олигомера, причем заметнее всего изменения температуры сказываются на хроматографических характеристиках олигомеров с высокой молекулярной массой, которые имеют самые низкие значения Ка. Таким образом, с повышением температуры увеличиваются различия в значениях Ка для членов гомологичных серий олигосахаридов, что приводит, следовательно, к повышению эффективности разделения. [c.31]

Подбор сорбента с соответствующими характеристиками является в аффинной хроматографии вопросом первостепенной важности. Аффинный сорбент состоит из трех частей носителя, пространственной группы и лиганда. Присутстд [е всех трех элементов иногда необязательно например, для аффинной хроматографии лектинов носитель (сефадекс 0-75, содержащий остат- [c.181]