Методы Михаэлиса определение

При помощи универсального индикатора (см. определение pH методом Михаэлиса) устанавливают примерное значение pH исследуемой жидкости, затем по табл. 18 (стр. 63) подбирают индикатор, в зоне перехода окраски которого находится найденное примерное значение pH анализируемого раствора. Так, например, если приблизительное значение pH 5,5, то следует использо- [c.217]

При буферном методе, так же как и при методе Михаэлиса, предварительно следует подобрать соответствующий индикатор, к зоне перехода которого может быть отнесено значение pH исследуемого раствора, а также соответствующую для этого буферную систему. Предварительное определение pH обычно производится также при помощи универсального индикатора. [c.67]

Кинетическое описание ферментативных реакций в нестационарном режиме связано с определенными математическими трудностями. Например, для анализа реакции, протекающей по схеме Михаэлиса — Ментен (схема 5.1), необходимо решить систему дифференциальных и алгебраических уравнений (5.2)—(5.5). Формально-кинетический анализ ферментативных реакций развивается как по пути использования численных методов интегрирования систем дифференциальных уравнений, так и по пути использования аналитических методов. Аналитическое решение имеет определенные преимущества. Поэтому важно указать, что аналитическое решение системы дифференциальных и алгебраических уравнений может быть существенно упрощено, если при использовании определенных условий систему можно трансформировать в линейную систему уравнений. Развитие методов нестационарной кинетики ферментативных реакций идет именно по этому пути. [c.175]

Опишите определение pH методом Михаэлиса. [c.182]

ОПРЕДЕЛЕНИЕ pH ПО МЕТОДУ МИХАЭЛИСА [c.94]

Если константа диссоциации индикатора известна, то измерение глубины окраски, отвечающей отношению а/(1—а), позволяет определить pH раствора. Этот метод часто называют методом Михаэлиса. Чтобы уменьшить солевую ошибку, следует пользоваться формальной константой диссоциации индикаторной кислоты, соответствующей ионной силе исследуемого раствора. При определении значений формальных констант диссоциации индикаторов полезно применять буферные растворы, pH которых измерено электрометрическим методом (стр. 134). [c.144]

Наиболее распространенным является метод Михаэлиса, основанный на изменении окраски различных индикаторов в зависимости от pH раствора. Сравнивая цвет испытуемой жидкости с индикатором и стандартных растворов колориметрической шкалы, производят определение pH в пределах 2,8 до 8.4. [c.376]

Работа № 2. Определение pH по методу Михаэлиса с цилиндрами [c.91]

Существуют два основных колориметрических метода определения концентрации ионов водорода буферный и безбуферный. Точность этих методов не превышает 0,1 pH. Наиболее распространенным методом безбуферного определения pH является метод Михаэлиса, основанный на применении стандартных рядов, полученных с одноцветными индикаторами групп нитрофенола в растворах с различным значением pH (см. табл. 20). По методу Михаэлиса может быть определено pH растворов в широком диапазоне от 2,8 до 8,4. Для выяснения, с каким же из указанных индикаторов следует производить определение pH, предварительно при помощи универсального индикатора узнают примерное значение pH исследуемого раствора, а затем производят окончательное определение pH с одним из индикаторов. [c.88]

Для выяснения, с каким же из указанных индикаторов следует производить определение pH, предварительно с помощью универсального индикатора узнают примерное значение pH исследуемого раствора, а затем производят окончательное определение pH с одним из индикаторов (см. Описание рекомендуемых практических работ , метод Михаэлиса). [c.93]

Колориметрическое определение pH исследуемой жидкости методом Михаэлиса [c.274]

Примером колориметрического определения pH является метод Михаэлиса. Определение производится методом стандартного ряда. pH раствора определяют одноцветными индикаторами. Окраску исследуемого раствора сравнивают с окраской серии стандартных растворов, имеющихся в готовом виде. Если окраска исследуемого раствора совпадает по интенсивности с окраской одного из стандартных растворов, следовательно, концентрация ионов в исследуемом растворе такая же, как и в стандартном. [c.180]

Кинетические параметры У т — максимальная скорость и Кт(кят)— кажущаяся константа Михаэлиса ферментативной реакции— функции констант скоростей индивидуальных стадий (см. соотношения 5.10, 7.2, 7.3). Для раздельного определения этих параметров в общем случае нельзя использовать интегральные методы обычной неферментативной кинетики вследствие смешанного порядка ферментативных процессов. Например, метод Гуггенгейма (см. гл. 2) пригоден для обработки кинетики ферментативных реакций только в случае. т(каж)> [8]о или [Е]о>[8]о, т. е. только при наличии кинетики первого порядка по субстрату или продукту. [c.166]

Предложить аналитический метод определения константы Михаэлиса, исходя из уравнения касательной к кинетической кривой в начальный момент времени и интегральной формы уравнения кинетической кривой ферментативной реакции. [c.175]

Безбуферный метод (по Михаэлису). Так как pH испытуемого раствора уже грубо определен с помощью универсального индикатора, то по табл. 7 выбирают подходящий в данном случае одноцветный индикатор. [c.168]

Бсзбуферное определение pH (так называемый метод Михаэлиса) заключается в использовании стандартных рядов, полученных с одноцветными индикаторами группы нитрофенола в 0,001 н. растворах NaOH 1) р-дннитрофенол с диапазоном pH от 2,8 до 4,5 2) у-динитрофенол с диапазоном pH от 4,0 до 5,5 3) п-нитрофенол — от 5,2 до 7,0 pH и 4) л -нитрофенол — от 6,7 до 8,4 pH. [c.222]

Таким образом, по методу Михаэлиса pH растворов определяется в довольно широком диапазоне —от 2,8 до 8,4. Предварительно надо определить ирибли-зительнис значен-ие pH с помошью универсального индикатора. Затем производят выбор индикатора и уже с этим индикатором производят более точное определение pH. [c.222]

На этой зависимости между pH раствора и степенью диссоциации индикатора основан другой метод колориметрического определения pH без буферов — метод Михаэлиса с одноцветными индикаторами. [c.87]

Метод безбуферного определения pH (по Михаэлису), В этом методе используют чаще одноцветные индикаторы, нитро- и дини-грофенолы, у которых кислотная форма бесцветна, а щелочная окрашена. В этом методе в отличие от буферного шкала готовится на растворах щелочи, в которых весь прибавленный в пробирку и1Дикатор полностью диссоциирован п интенсивность окраски можно считать пропорциональной количеству прибавленного индикатора. [c.58]

Определение концентрации водородных ионов безбуферным ме-тодо.м Михаэлиса йашло весьма широкое применение в лабораториях и в услов/иях полевых исследований. Метод Михаэлиса основан на применении одноцветных индикаторов — различных нятрофенс- [c.170]

Определение pH безбуферным методом можно осуществить или с двухцветными индикаторами (метод Джиллеспи), или с одноцветными (метод Михаэлиса). [c.86]

Рис. 2.3. Определение параметров V и методом Михаэлиса и Ментен. Для достаточно большого интервала вваченнй скорости зависимость о от (5//См) является почти линейной, что позволяет без труда вайти максимальный наклон.

Существует несколько других способон спрямления зависимости т от 5 для вычисления параметров уравнения Михаэлиса. Однако анализ погрешностей показывает, что при заданной точности определения т и а приводимый метод дает наиболее надежные значения и [c.258]

Трудности в определении активности протона привели к тому, что было предложено много других методов оценки кислотности в неводных растворах. Первой была попытка Михаэлиса и Митцутани, которые предложили оценивать кислотность в неводных растворах, измеряя э. д. с. цепи, включающей диффузионный и фазовый потенциал [c.411]

Одноцветные индикаторы (фенолфталеин, п- и л1-нитрофенолы, а- и у-динитрофенолы) широко применяются при определении pH колориметрическим методом при помощи набора индикаторов Михаэлиса. [c.61]

Фермент катализирует р-ции, в к-рых участвуют, как правило, один или два субстрата. В односубстратной р-ции концентрация субстрата [З],, пропорциональна скорости процесса Уц только при условии [8]оСЛГ1 . где К -константа Михаэлиса. Следовательно, верхняя фаница определяемых содержаний лимитируется, как правило, величиной Предел обнаружения и ниж. фаница анализируемых содержаний субстрата определяются обычно той величиной Vo, к-рая м. б. зафиксирована выбранным инструментальным методом. Чем меньще величина Уц и чем выще каталитич. константа скорости и концентрация [Е]о фермента, тем ниже предел обнаружения и нижняя фаница определяемых содержаний субстрата. Для двусубстратных р-ций при определении субстрата 8, субстрат 82 берется в насыщенных концентрациях и двусубстратная р-ция сводится к односубстратной. [c.78]

Лля определения активности и изучения кинетики действия ферментов по отношению к НФГ реакцию останавливают защела-чиваш1ем и регистрируют количество НФ в видимой области (при 405 нм) [56]. Однако, более удобным является фотометрический метод непрывной регистрации кинетики образования НФ в кислой области при 346 нм — в изобестической точке п-нитрофенолят иона [3, 57]. Следует иметь ввиду, что целлобиазы и / -глюкозидазы значительно различаются константами Михаэлиса по отношению к НФГ. Методика определения / -глюкозидазной активности изложена в разделе 5.6. [c.141]

В некоторых случаях для определения константы Михаэлиса и максимальной скорости реакции более перспективным является метод Эди—Хофсти. При использовании этого метода на оси ординат откладывают и, на оси абсцисс — и/[8]. Полученная прямая линия отсекает на оси ординат отрезок, равный а с осью абсцисс образует угол а, тангенс которого равен (рис. 6.7). [c.75]

Зёренсен придерживался, в основном, той техники определения, которая ранее предложена Бьеррумом [14]. Была сделана попытка элиминировать диффузион- g ный потенциал на жидкостных границах методом экстраполяции Бьер-рума [15]. Для этой цели проводили два измерения э. д. с. элемента (И. 8) для каждого раствора х с солевым мостом из 3,5 и 1,75 н. растворов КС1, помещенным между двумя полуэлементами. Наблюдаемую разность потенциалов добавляли к а. д. с. цепи с более концентрированным солевым мостом или вычитали из нее (рис. П. 1) для того, чтобы получить гипотетический потенциал, соответствующий солевому мосту с бесконечно большой концентрацией (1/с = 0), при которой диффузионный потенциал становится равным нулю. Очевидно, такая процедура действительно приведет диффузионный потенциал к пренебрежимо малой величине только в том случае, когда наблюдаемая разность э.д.с. мала [16, 17]. Михаэлис [18] считает, что экстраполяцию Бьеррума следует применять тогда, когда концентрация ионов водорода или гидроксила в исследуемом растворе превышает 0,001 г-ион/л. [c.29]