Глобулины выделение из плазмы

Плазма крови. Общее количество крови у взрослого человека в норме составляет примерно 5 л. Из них на долю плазмы приходится 2,75 л, а на долю эритроцитов —2,22 л. Лейкоциты занимают объем 0 мл, тромбоциты — около 20 мл. Основным компонентом плазмы являются белки. В плазме всего идентифицировано более 70 различных белков. В основе классификации белков лежат их растворимость и методы выделения. Например, если к плазме добавить равный объем насыщенного раствора сульфата аммония, выпадают глобулины. Если затем удалить глобулины и добавить твердый сульфат аммония, выпадают альбумины. Хотя этот метод классификации кажется произвольным, белки, находящиеся в этих фракциях, близки не только по растворимости, но и по функции. [c.438]

Время от времени в литературе появляются сообщения о превращениях альбумина в глобулин при воздействии различных реагентов, например смеси этилового спирта с диэтиловым эфиром, гепарина и некоторых других соединений. Само собой разумеется, что речь идет не о подлинном превращении такое превращение было бы невозможно, так как альбумины по своему аминокислотному составу отличаются от глобулинов (см. табл. 1). Речь может идти только о том, что при определенных экспериментальных условиях растворимость альбумина изменяется, в результате чего он по своим физико-химическим свойствам становится похожим на глобулин. Поэтому вполне возможно, что в нативной плазме крови имеется лишь небольшое количество белков и что многие из выделенных белковых фракций образованы путем соединения этих основных белков с липидами, углеводами, друг с другом, а также с некоторыми ионами. [c.178]

Получение гамма-глобулина. Большинство антител против инфекционных болезней найдено в гамма-глобулине плазмы человека [22, 13]. Основные стадии процесса его выделения показаны на рис. 3. Дифференциальной экстракцией гамма-глобулина ацетатом цинка при pH = 5,6 и последующим изо-электрическим осаждением при pH = 7,2 легко отделить его от других протеинов плазмы. [c.614]

Для удаления ионов из белковых растворов стали применять ионообменные смолы. Были опубликованы сообщения об удалении таким путем кальция из плазмы с целью замедления ее свертывания [12], а также об удалении из плазмы ионов для выделения глобулинов [179]. [c.38]

Выделение брадикинина из плазмы крови быка или человека достигается путем ферментативного расщепления з-глобулина нри помощи трипсина или змеиного яда [c.176]

Сходное строение с орозомукоидом имеет а-глобулин, выделенный из плазмы крови теленка, — фетуин. Его молекулярная масса 45 ООО— 49 700. Некоторые детали строения фетуина выяснены в результате ферментативного и частичного кислотного гидролиза. Под действием мейраминидазы или 0,25 н. серной кислоты (80 °С 1 ч) отщепляются сиаловые кислоты. При более жестком кислотном гидролизе гликопеп-тида, полученного деструкцией фетуина протеолитическими ферментами, выделен дисахарид [c.92]

Наиболее распространенным способом выделения п разделения Л. плазмы крови является метод ультрацентрифугирования в средах с определенной (однородной или градиентной) плотностью. При этом получаются фракции Л., характеризующиеся различной плотностью и значительно отличающиеся дру от друга как по составу своих липидных компонентов, так и по характеру белковой части. Л. с высокой пилотностью (1,149) обладают электрофоретич. подвижностью ai-глобу.линов, содержат 21% фосфолипидов, 57% белка, 5% триглицеридов, 17% холестерина. Л. с низкой плотностью (1,035) обладают электрофоретич. подвижностью р -глобулинов, содержат 22% фосфолипидов, 21% белка, 10% триглицеридов и 46% холестерина. В основном выделенная из шшзмы крови ультрацентрифугированием фракция Л. с высокой плотностью соответствует по своим свойствам а -Л., с низкой плотностью — i-Л. [c.488]

Некоторое представление о сложности состава протеина плазмы и его терапевтической ценности можно получить на основании большого количества протеинов или биологически активных веществ, выделенных из плазмы человека [131 с помощью ионов цинка, свинца и ртути. Из них только альбумин сыворотки, гамма-глобулин и фибриноген имеются в продаже другие, например стабильный раствор протеина плазмы (5РР5), протромбин, церулоплаз-мин, могут найти применение в терапии [431. [c.606]

При скорости протекамия 2 мл/см мин ионная сила сыворотки снижалась до 0,001 и осадок глобулина быстро пропускался через колонну осадок отделялся от этих протеинов при ионной силе 0,001 центрифугированием. Несомненно, что подбором объема ионита, скорости протекания или устройство.м специальных колонн можно добиться разделения глобулинов ионитами. 95—98%-ный выход протеина был получен при промывании ко-лонлы объемом жидкости, равным 10% объема сыворотки для извлечения 10% протеинов, адсорбированных ионитом. Работа с колоннами, видимо, будет иметь ряд преимуществ, заключающихся в легкости получения альбумина из сыворотки и минимальном количестве как ионообменных операций, так и центрифугирований. Электрофоретическим и серологическим испытанием, а также определением растворимости протеинов, выделенных фракционированием на ионитах, не обнаружено потери биологической активности. Фракционирование плазмы ионитами будет особенно применимо в лабораториях госпиталей, так как [c.617]

В плазме большая часть эстрогена связана с протеином (р-глобули-ном), образуя соединение, легко расщепляющееся при диализе. Эстроген, содержащийся в наиболее активной фракции, выделенной из плазмы человека, повидимому, представляет собой, главным образом, эстриол. Комплекс может функционировать как средство переноса . При, нейтральном pH эстрадиол в 22 раза лучше растворим вЗ /о ном растворе альбумина, чем в изотоническом растворе соли f-глобулин является менее эффективным диспергирующим агентом . Тестостерон и прогестерон тоже несколько лучше растворимы в растворе протеинов, но. разница не так явно выражена, как у эстрадиола. [c.462]

Молекулярная масса гиалуроновой кислоты, полученной из различных источииков, составляет (2,0—2,8) 10 . Данные светорассеяния показали, что молекула гиалуроновой кислоты образует спираль с радиусом 150—400 нм. Ее комплексы с протеинами, выделенные ультрацентрифугированием или электродиализом, имеют молекулярную массу порядка (8—10)-10 . Эти комплексы сильно гидратированы. Содержание протеина в комплексе достигает 20—30%. Он может быть отделен от полисахарида на ДЭАЭ-сефадексе или разрушением полисахарида гиалуронидазой. По иммунологическому и электрофоретическому поведению протеиновый компонент комплекса близок к а-глобулинам и содержит, по-в идимому, примеси р- и у-глобулинов, однако он отличается от глобулинов плазмы крови. О комплексах гиалуроновой кислоты с альбуминами см. [70]. [c.88]

Общего правила, выражающего влияние температуры на растворимость белка, нет. Растворимость многих белков растет с повышением температуры. В случае одних белков растворимость увеличивается в разбавленном, а в случае других — в концентрированном растворе соли, а также в водно-спиртовых смесях. К числу белков, очищенных или выделенных в кристаллическом состоянии путем использования различия в растворимости, относятся глобулины семян [32], фосфорилаза мышц [23] и пепсин [14]. В то же время растворимость белка часто резко убывает с повышением температуры, что изображено на рис. 6. Альдолаза мышц [96] и карбокоигемоглобин человека [29] были выделены в кристаллическом состоянии из концентрированных растворов (NH4)2SO4 или фосфатов калия путем повышения температуры насыщенного раствора от 0 до 20°. Указанное явление, невидимому, чаще наблюдается в условиях, при которых происходит высаливание, однако оно не ограничивается этими случаями. Согласно опубликованным данным [9г], сульфат альбумина плазмы и сульфат инсулина обнаруживают отрицательный температурный коэффициент растворимости в воде. [c.49]

Металлопротеиды. Из плазмы крови выделен кристаллический глобулин, способный связывать железо, медь и цинк. Содержание этого белка составляет около 3% от общего содернсания белков плазмы крови. Он пе связан с липидами и включает углеводы (1,8%). Молекулярный вес его около 90 ООО. Каждая молекула способна связать два атома железа. Связь с железом непрочна и при рН-7 железо отделяется от белка. Физиологическая роль металлопротеида заключается в транспорте железа. [c.511]

Скиталось, что многие фракции, выделенные из сыворотки, являлись результатом изменения сыворотки в процессе их выделе-ВИЯ. Хотя работы с ультрацентрифугой и дали много ценных сведений (см. т. II, гл. XX) относительно природы сыворотки и ее белков в нормальных и патологических условиях, лишь Тизелиусу удалось найти простой и точный метод разделения и отбора фракций сыворотки. Тизелиус обнаружил, что необработанная человеческая сыворотка без добавления осаждающих солей начинает разделяться в электрическом поле на четыре компонента. Было найдено, что наиболее быстрый из этих компонентов является альбумином, а три более медленных компонента соответственно а-, р- и 7- глобулинами. Фибриноген появляется в плазме между 8- и 7- глобулинами. Было обнаружено, что сыворотки ряда животных дают похожие, хотя и специфические, электрофоретические изображения [39, 40]. После электрофоретического выделения отдельные компоненты сыворотки при повторном измерении проявляют те же электрические подвижности, которые были обнаружены и в. цельной сыворотке. Это является важным доказательством того, что в сыворотке находятся индивидуальные компоненты и что сыворотка не является равновесной смесью компонентов. Невозможно, однако, переоценить значение состава буферного растворителя для получаемых электрофоретических изображений, так как число, относительная величина и подвижность компонентов, а также контуры и симметричность изображений возрастающих и убывающих границ являются функцией применяемого электролита. На рис. 168 представлены результаты электрофоретического анализа фракций, полученных из патологической и нормальной сывороток. Фильтрат после добавления 13,5% сульфата натрия представляет собой фракцию, полученную после удаления эуглобина, 17,4%-ный фильтрат—фракцию лосле удаления псевдоглобулина I, 21,5%-ный фильтрат—фракцию после удаления всех белков за исключением альбумина. Значительные количества а-и р-глобулина остаются с альбумином. Подобг яые же результаты были получены Коном и другими исследователями [42] при применении различных солей. Мур и Линн [43] определили соотношения альбумина и глобулина А С для 25 [c.375]

Методом электрофореза с подвижной границей при использовании, как правило, буферных растворов с pH 8,4—8,6 белки плазмы можно разделить на 5 или 6 фракций альбумин и несколько групп глобулинов, обозначаемых какаг,а2-, Р и -гло-булины. С помощью данного метода на ранних этапах его развития были установлены многие важные свойства белков плазмы. Результаты этих исследований были суммированы в ряде обзоров [560, 1149, 1462]. Электрофорез с подвижной границей применялся также для проверки чистоты белков, получаемых в препаративных количествах для клинических целей. И до сих пор этот метод используется для тестирования выделенных из плазмы белковых фракций (следует сказать, что для контроля качества необходимы также и другие методы, такие, как ультрацентрифугирование или иммунохимический анализ). Так, например, согласно существующим стандартам (Комитет экспертов по биологической стандартизации при Всемирной организации здравоохранения, 1967), препараты иммуноглобулинов человека должны содержать не менее 90% глобулинов с электрофоретической подвижностью, не превышающей —2,8-10 см /В [c.328]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология