Плазма фракционирование

Рис. 1.2. Диаграмма фракционирования белков плазмы крови человека этанолом (но методу Кона).

В качестве примера высокоэффективного метода фракционирования при помощи органического растворителя можно привести метод фракционирования белков плазмы крови человека. Разделение основано на применении последовательно различных концентраций этанола, различных буферов, обеспечивающих на каждом отдельном этапе необходимую (различную) ионную силу и ионный состав. В составе буферов использовались ацетат натрия, глицин, цитрат натрия, ацетаты цинка, бария, уксусная, лимонная кислоты, компоненты фосфатного буфера. Осаждение вели при температурах —5°, —6—7°С, в различных зонах pH, примерно от 5,5 до 6,7. Точное выполнение условий pH, ионной силы и температуры имеет в этом сложном методе решающее значение. [c.146]

Новейшая техника фракционирования и консервирования плазмы крови при низких температурах, разработанная Коном с сотрудниками, включает стадию быстрого высушивания конечных продуктов лиофильной сушкой. Сконструировано оборудование, позволяющее упаривать этим способом тысячи литров воды в день. [c.319]

Недавно для фракционирования белков плазмы крови начали применять также соли тяжелых металлов, в частности соли цинка [35]. Осаждение белков большими количествами солей тяжелых металлов приводит к необратимой их денатурации, прибавление же небольших количеств солей вызывает обратимое связывание катионов белками (по всей вероятности, сульфгидрильными группами белка) с образованием осадков, из которых можно выделить нативный белок [35]. [c.177]

При решении задач качественного анализа нельзя забывать, что при испарении веществ в угольной дуге, как правило, наблюдается фракционированное поступление элементов в плазму дуги. Последовательность испарения элементов описывается так называемыми рядами летучести [c.111]

Фракционирование белков кровяной плазмы с помощью ионообменных смол. Обзор методов [500]. [c.269]

Чувствительность определения мышьяка можно значительно повысить, испаряя большое количество пробы из камерного электрода или фотографируя на одном месте спектры нескольких навесок. При этом используют фракционирование. Высокой чувствительности определения мышьяка можно ожидать, выполняя анализ в атмосфере аргона, обеспечивающего низкую температуру электрода и высокую температуру плазмы дуги. При анализе кремния с применением полого катода в атмосфере гелия или аргона достигнута чувствительность определения мышьяка 0,0005% [455]. [c.245]

В ультрафиолетовой области спектра расположены две линии Ма 3302,32 и 3302,99 А (0,05%), которые при регистрации на среднем спектрографе почти сливаются. Первая линия несколько чувствительнее. Этим линиям мешают линии Хп 3302,59 и 3302,94 А (0,03%), а также Сг 3302,19 и 3302,87 А (10%). Особую опасность представляют линии цинка, так как очень часто в нефтепродуктах (особенно в смазочных маслах) содержится его заметное количество. Использовать фракционирование для ослабления линий цинка в данном случае невозможно, так как цинк и натрий близки по летучести. Для подавления линий цинка можно использовать их высокий потенциал возбуждения (7,78 эв) по сравнению с линиями натрия (3,75 эв) и существенно снизить температуру плазмы, вводя в пробу большое количество щелочного металла. [c.250]

Рис. 17. Двумерное фракционирование белков плазмы человека.

Примерами использования ионного обмена для обработки биологических продуктов служит также удаление кальция из крови, чтобы устранить коагуляцию, и удаление ионов цинка из плазмы после фракционирования протеинов плазмы цинковыми солями. [c.582]

С другой стороны, мы должны признать, что усовершенствование методов фракционирования белков позволило установить присутствие в плазме большого числа новых белковых фракций. Прежние представления о том, что в плазме крови содержится только один альбумин и один глобулин, пришлось оставить и признать, что в ней имеются а-, и у-глобулины, причем каждая из этих фракций, в свою очередь, может быть разделена на две под-фракции и более. Путем дальнейшего усовершенствования методов можно, очевидно, получить из плазмы еще большее количество белковых фракций. Возможно, что в плазме крови вообще нет совершенно чистых однородных белков. Иммунологические исследования показали, что при инъекции антигена в крови появляется ряд специфических глобулинов (антител), обладающих различной способностью реагировать с полярными группами антигена [37]. Возможно, что так же обстоит дело и с нормальными сывороточными глобулинами, т. е. что в нормальной плазме содержатся различные типы глобулинов, между которыми существуют промежуточные формы. Если это так, то безнадежны все попытки выделить совершенно однородные глобулины из плазмы крови. [c.178]

Замена иона натрия на ион цинка при фракционировании плазмы [c.579]

Временные ТУ на иониты и контейнеры для собирания крови. Подкомитет ТУ на иониты Комиссии по фракционированию плазмы и родственным му процессам, Гарвардский Университет. [c.602]

Методы фракционирования. При таком ценном биологическом сырье, как кровь человека, можно достигнуть экономии только путем разделения ее на полезные компоненты, каждый из которых имеет специфическое применение в терапии иначе они были бы потеряны при переливании всей крови или плазмы. В этом, вообще говоря, состоит цель любой попытки фракционирования крови или плазмы. [c.606]

Весьма многообещающе применение ультрафнльтрации для фрак-цпоииропання кровяной плазмы, содержащей альбумни (М — 69 000), глобулины (М 110000—150000) н макроглобулины (М 1000000). Ме.мбраны, задерживающие альбумин, позволяют отделять протеины плазмы от низкомолекулярпых веществ, тогда как мембраны с более крупными порами могут быть использованы для отделения альбумина от глобулинов. Набор таких мембран в соответствующем порядке позволяет создать компактную установку. Такой метод фракционирования может быть с успехом применен для разделения протеинов различного строения. [c.286]

Особое значение имеют глобулины плазмы крови. Первоначально Тизелиус разделил их электрофоретически на три фракции 3- и /-глобулины, которые, однако, ие являются однородными, а представляют собой смеси белков одинаковой подвижности. Позднее Кон и Эдсалл нашли, что фракционированное осаждение спиртом ири низкой температуре более удобно для разделения глобулнновых фракций. Этим способом теперь в больших масштабах получают т-глобулин, В нем содержатся многочисленные антитела, обусловливающие иммунитет по отношению к патогенным микробам, и поэтому -(-глобулин используют для пассивной иммунизации против различных инфекционных заболеваний. [c.399]

В другом варианте обратнофазовой гидрофобной хроматографии плазмы крови на колонке Li hrosorb RP-8 элюцию вели в среде, подкисленной до рП 3 монохлоруксусной кислотой, используя выпуклый градиент концентрации ацетонитрила (0—45%) в смеси с 0,05 М раствором ДДС-Na (1,4%о). Последний, по-видимому, блокирует заряды аминогрупп и обеспечивает гидрофобность аминокислот, т. е. играет роль ион-парного агента, как подробнее описано ниже для случая фракционирования пептидов. [c.194]

При остывании и эволюции выброшенной из звезд плазмы формируются холодные твердые тела, начиная от космич пыли и кончая родительскими телами метеоритов, астероидами, планетами Осн процессы формирования твердых тел Солнечной системы, как показывают радио-изотопные данные, прошли 4,55 млрд лет назад Образование твердых тел сопровождалось глубоким фракционированием космич в-ва твердая компонента Солнечной системы представляет собой трудиолетучую его фракцию, резко обедненную водородом, инертными газами, азотом, а также С, 5, С1 и др Лишь удаленные от Солнца планеты-гиганты, их спутники и кометы сохранили в виде льдов и массивных атмосфер значит часть солнечных газов [c.485]

ТИМС (термоионизационная масс-спектрометрия) является одним из лучших методов по точности (воспроизводимости). Это делает данный метод пригодным для измерения изотопного отношения, особенно при использовании электрометра Фарадея и секторного масс-спектрометра. Воспроизводимость может быть на уровне 0,1%, например для Са/ °Са, Mg/ Mg. В зависимости от приложения может быть необходима поправка на фракционирование изотопов, зависящее от массы. Метод ТИМС относительно нечувствителен к многоатомным помехам, особенно к тем, которые связаны с наличием Аг, таким, как в ИСП-МС (масс-спектрометрия с индуктивно-связанной плазмой) или ТРМС (масс-спектрометрия с тлеюцщм разрядом). Производительность составляет примерно 20 проб в день, что лучше, чем в ИИМС (масс-спектрометрия с искровым источником), но не так хорошо, как в ИСП-МС. [c.142]

Табулированы и обсуждены имеющиеся данные по физическим и химическим свойствам полимеров изобутилена. Рассмотрены химические свойства и превращения олиго- и полиизобутиленов, которые подразделены на превращения концевых групп двойных связей (реакция присоединения и расщепления) звеньев основной цепи, боковых метильных групп (заместител ьные реакции) и распад основной цепи (деградация, деполимеризация, сшивка). В ряду различных воздействий на полимер проанализированы химические, физические и высокоэнергетические методы воздействия (реагенты и окислители, механохимия, ультразвук, плазма тлеющего разряда, ионизирующие излучения и др.). Особенно выделены направленные превращения полимеров изобутилена, открывающие пути технического применения полимеров изобутилена (каталитическое ионное гидрирование, алкилироваьше фенолов и аминофенолов, каталитическая деполимеризация и некоторые другие). Суммированы аналитические характеристики полиизобутилена спектроскопические (ИК, ЯМР) данные, касающиеся основной цепи и дефектов структуры вязкостные, реологические и молекулярно-массовые параметры их взаимосвязь и методы определения (фракционирование, озонолиз, гель-проникающая хроматография и др.). Совокупное сочетание различных методов обеспечивает высокую степень надежности полученной информации, касающейся аналитических характеристик полиизобутилена. [c.379]

Особую трудность представляет определение хрома в металлах подгрупп титана и ванадия из-за близости летучести их хлоридов [419]. С целью увеличения разницы в летучестях микропримесей и матрицы исследуемые металлы предварительно прокаливают на воздухе для перевода их в труднолетучие окислы. 1Три анализе карбонатов и сульфатов марганца соли прокаливают до МП3О4 [61]. Благодаря близости летучестей окислов марганца и хрома и их смесей с угольным порошком [491] селективное фракционирование этих элементов в процессе испарения отсутствует. Предел обнаружения хрома равен 8-10 %. Однако и в этом случае для хрома не достигается полное отделение от основы. Так, выход хрома в плазму при анализе УаОз и УаОд достигает только 50% [419]. [c.81]

При остывании и эволюции выброшенной из звезд плазмы формируются холодные тв. тела, начиная от космич. пыли и кончая метеоритами, астероидами, планетами. Основные процессы формирования тв. тел Солнечной сист., как показывают изотопные данные, прошли 4,55 млрд. лет назад, через 200—300 млн. лег после последнего этапа нуклеосинтеза. Образование тв. тел сопровождалось глубоким фракционированием космич. в-ва тв. компонента Солнечной сист. представляет собой труднолетучую его фракцию, резко обедненную Hj, инертными газами, N2, а также С, S, С1 а др. Лишь удаленные от Солнца планеты-гиганты, их спутники и кометы сохранили в виде льдов и массивных атмосфер значит, часть солнечных газов легкие газы (Hj, СН , МНз и др.) и продукты их конденсации (жидкие р-ры и льды) составляют осн. массу этих тел. В-во космич. тел претерпело, как показывают исследования метеоритов, многократное преобразование в процессах испарения,конденсации, соударения облучение их пов-сти галактич. и солнечными лучами изменяет изотопный состав злементов и приводит к накоплению космогенных, как правило, короткоживущих, радиоактивных изотопов. Но в целом эти процессы слабо нарушают относит, распространенности большинства труднолетучих злементов, к-рые остаются близкими к солнечным, свидетельствуя о единстве в-ва Солнечной сист. [c.279]

Кадмий — сравнительно трудновозбудимый элемент (энергия ионизации 8,99 эв), а энергия возбуждения наиболее интенсивной линии 5,41 эв). Поэтому для его определения целесообразно применять высокотемпературный источник света. Но кадмий и большинство его соединений легколетучи. В ряду летучести А. К. Русанова [8] они занимают одно из первых мест. Следовательно, для спокойнога испарения кадмия желательна низкая температура электрода. Сочетание низкой температуры электрода и высокой температуры плазмы обеспечивает работа в атмосфере аргона. Из-за высокой летучести кадмия при озолении пробы возможны существенные потери. Поэтому желательно применять кислотное озоление. Чувствительность его определения можно повысить фракционированием пробы, например при испарении большой навески из камерного электрода. [c.219]

Необходимая стадия прн выделении большинства Б.— механич, разрушение клеток и экстракция требуемого Б. Иногда экстракции предшествует фракционирование содержимого клетки но субклеточным фракциям с помощью препаративного ультрацентрифугиро-вания. Известны также методики выделения, согласно к-рым механич. разрушения клеток не происходит. Такие методики применяют обычно для выделения внеклеточных Б. (напр., протеолитич. ферментов, гормонов, белков, гликопротеидов и липопротеидов плазмы крови, гликопротеидов соединительной ткани). Именно этот класс Б. наиболее доступен. [c.129]

Для того чтобы облегчить абсорбцию растворов, до нанесения анализируемого раствора электроды обыскривают или обжигают в дуге. Эта предварительная обработка особенно необходима в случае графитовых электродов, так как она улучшает прилипание высушиваемых растворов к поверхности. Раствор, нанесенный на электрод с помощью микропипетки, упаривают досуха на подставке в сушильном шкафу или под инфракрасной лампой. Нанесение толстого слоя соли нежелательно, поскольку это приводит к сбрасыванию его с электрода во время разряда, в результате чего он не попадает в плазму. В случае углей с высокой абсорбционной способностью появляется опасность фракционирования компонентов раствора во время процесса абсорбции. Этот селективный эффект можно устранить соответствующей предварительной обработкой угольных электродов. Так, например, разбавленные растворы, нанесенные и подсушенные на электродах, предварительно покрытых коллодием, анализировали в высоковольтной [c.151]

П. получают по методу Пиллемера из сыворотки крови путем адсорбции его зимозаном. Другой снособ получения П. из плазмы крови разработан Ротштейном и Пеннелом (1957) П. выделяют из 1 фракции белков плазмы путем ее фракционирования. При этом получают высокоочищенный препарат с активностью до 2000 единиц на мг белка. [c.177]

Широко распространенным методом этого типа является фракционирование белков плазмы крови по Кону. Высокая эффективность, воспроизводимость и практичность этого метода позволяют использовать его не только в условиях лаборатории, но и для промышленного получения высокоочищенных препаратов белков плазмы крови. Однако схема очистки по этому методу сложна, и описание ее выходит за рамки настоящего руководства. Примером более простого метода, в котором используются органические растворители, является фракционирование основных белков ядер — гистонов — из ткани тимуса по Джонсу. Гомогенат ткани экстрагируют смесью 4 объемов этанола и 1 объема 1,25 н. соляной кислоты. Из экстракта диализом против абсолютного этанола осаждают фращию ги- [c.19]

Растворимость белков возрастает также при добавлении глицина или других дипольных молекул, увеличивающих диэлектрическую постоянную воды органические же растворители, пони-жаюпще диэлектрическую постоянную воды (например, такие, как спирт), уменьшают растворимость белков в воде [38]. Это действие глицина и органических растворителей используется при фракционировании белков плазмы (см. гл. VI11). При повышении диэлектрической постоянной усиливается ионизация белков, чем и объясняется повышение их растворимости. [c.113]

В настоящее время трудно еще интерпретировать результаты, получаемые при фракционированном осаждении белков плазмы. Мы не можем еще с достаточной уверенностью сказать, существуют ли все эти фракции как таковые в самой плазме крови, а также решить вопрос о возможности их дальнейшего разделения. Всего вероятнее, что белки плазмы находятся в плазме в виде соединений с липидами, у1 леводами, а также друг с другом . Так, например, можно думать, что -глобулины, изоэлектрическая точка которых лежи г около pH 7,0, дают солеобразного тина соединения с альбуминами, изоэлектрическая точка которых находится вблизи pH 4,7. Возможно также, что белковые компоненты липопротеинов и глюкопротеидов плазмы идентичны [c.177]

При фракционировании сыворотки крови человека этиловым спиртом (см. гл. У1П) получаются главным образом два липо-протеина -липопротеин из фракции П1—О и йрлипопротеин из фракции IV—1 их количество составляет соответственно 5 и 3% общего количества белков плазмы [10—12]. В состав [Рглипо-протеина входит около 70% всех липидов плазмы. Он содержит 25% белка, 30% фосфолипидов и 45% холестерина и эфиров холестерина. Молекулярный вес его 1 300000. ЛрЛипопротеин содержит 65% белка и 35% липидов [10—12]. Молекулярный вес его 200 ООО. [c.228]

При скорости протекамия 2 мл/см мин ионная сила сыворотки снижалась до 0,001 и осадок глобулина быстро пропускался через колонну осадок отделялся от этих протеинов при ионной силе 0,001 центрифугированием. Несомненно, что подбором объема ионита, скорости протекания или устройство.м специальных колонн можно добиться разделения глобулинов ионитами. 95—98%-ный выход протеина был получен при промывании ко-лонлы объемом жидкости, равным 10% объема сыворотки для извлечения 10% протеинов, адсорбированных ионитом. Работа с колоннами, видимо, будет иметь ряд преимуществ, заключающихся в легкости получения альбумина из сыворотки и минимальном количестве как ионообменных операций, так и центрифугирований. Электрофоретическим и серологическим испытанием, а также определением растворимости протеинов, выделенных фракционированием на ионитах, не обнаружено потери биологической активности. Фракционирование плазмы ионитами будет особенно применимо в лабораториях госпиталей, так как [c.617]

Соединения белков с металлами были выделены также из плазмы крови. Если плазму крови подвергнуть фракционированному осаждению этиловым спиртом, то во фракции IV [62] (см. стр. 175) можно обнаружить pi-глобулины, содержащие металлы. Эти металлопротеиды представляют собой смесь протеидов, содержащих медь, и протеидов, в состав которых входит железо (сидерофилины). Содержащие железо сидерофилины имеют такую же розовую окраску, как и соединения железа с гидрокса-мовыми кислотами. Весьма вероятно, что в сидерофилине железо соединено с группировкой —N(OH) O—, входящей в состав белка [93]. Молекулярный вес сидерофилина 90 ООО. Каждая молекула белка в сидерофилине способна присоединять два атома железа. [c.240]

Кроме особо специализированных олеращий, ионообмен нашел широкое применение для обычных процессов фармацевтической технологии. Удаление избытка кислоты или электролитов, обмен катионов или анионов органических солей являются обычными операциями. В области биологии ионообмен еще не достиг такой степени развития, но интерес к нему увеличивается. Многие возможные области применения находятся в разных стадиях разработки наибольший интерес, видимо, представляет применение ионитов для разделения компонентов крови и фракционирования протеинов плазмы. В этих и в некоторых других биологических процессах не только оказались полезными обычные операции, деионизации, обмена ионов, нейтрализации и адсорбции, но разработана новая специальная техника, основанная на биологических реакциях, позволяющая осуществить специфические разделения. Собирание крови с применением анти-коагуляции ее ионитами развилось до промышленного масштаба будущее возможных применений ионитов в технологии кро- [c.577]

В дальнейшем методы фракционирования протеинов с ионитами будут описаны очень кратко, в основном фаза процесса, где применялись иониты. Сюда включены исследования Ислайке-ра [41] по приготовлению и использованию сшитых ионитов для очистки антител из сыворотки и плазмы хотя они не имеют [c.606]

Ионообменное фракционирование протеинов. Фракционирование протеинов плазмы крови с использованием ионитов было разработано Рейдо.м и Джонсом В7, 68, 69]. Метод основан на принципе осаждения протеинов обессоливанием, при котором уменьшается ионная сила раствора он дает результат, аналогичный диализу или разбавлению с изоэлектрическим корректированием pH и не имеет недостаттков, свойственных таким методам, особенно в большом масштабе [70]. При периодическом добавлении катионита и анионита (в смеси или отдельно) к сыворотке протоплазмы или при пропускании раствора протеина через колонну с обоими ионитами в пределах pH = 6—8 происходит осаждение некоторых протеинов, так как ионная сила раствора непрерывно понижается. Разделение осадков, образовавшихся при определенной заданное ионной силе, позволяет выделить из плазмы или сыворотки фракции глобулярных протеинов, богатых каким-либо одним компонентом в жидкой фазе основным компонентом является альбумин. [c.616]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология