Хромосом нестабильность

Использование таких приемов отбора позволило получить гибриды не только путем слияния линий клеток одного вида, о и межродовые гибриды клеток человека с клетками мыши м крысы. Эти линии клеток грызунов/человека нестабильны, тричем легче они теряют хромосомы человека, так что после тридцати делений в процессе выращивания у них остается всего семь из 24 хромосом человека, изначально присутствовавших в гибридной клетке. Этот процесс элиминации хромосом был Применен при картировании генома человека, поскольку таким путем удается быстро локализовать определенные гены на хромосомах. [c.313]

В настоящее время появилась возможность выделять индивидуальные хромосомы и, следовательно, использовать их для направленной трансформации животных клеток. Получаемые данным методом трансформанты, как правило, нестабильны. Однако в их популяции можно найти стабильные трансформанты, у которых часть хромосомы донорной клетки интегрировалась в какую-либо хромосому реципиента. Такие клетки позволяют картировать сцепленные гены. [c.148]

ДИЦЕНТРИЧЕСКАЯ ХРОМОСОМА. Образуется в результате объединения двух хромосомных фрагментов, каждый из которых содержит центромеру. Такая хромосома нестабильна и может быть разорвана в процессе митоза. [c.521]

Отходя от чисто описательных аспектов повреждения хромосом, необходимо в первую очередь рассмотреть зависимость выхода аберраций от дозы. Опыты с животными и данные по облученным больным показали, что выход аберраций (/) после облучения клеток излучением с низкой ЛПЭ лучше всего описывается простым математическим уравнением у = сЮ +, где О - доза, а а и 0 - константы. Это уравнение хорошо согласуется с гипотезой о том, что некоторые аберрации являются результатом прохождения через хромосому лишь одной ионизирующей частицы (одно попадание), поэтому их выход пропорционален дозе (оО), в то время как другие аберрации вызываются прохождением двух отдельных частиц, и их выход пропорционален квадрату дозы (/ Я). На рис. 7.7 показаны примеры одно- и двухударных хромосомных и хроматидных аберраций. Одноударные аберрации линейно зависят от дозы, для более сложных аберраций зависимость нелинейная (рис. 7.8). Выход одноударных аберраций, по-видимому, не зависит от мощности дозы. Если события ионизации происходят с частотой 1 раз в 1 с или 1 раз в 1 мин и каждое такое событие вызывает разрыв, то соответственно через 1 мин или через 1 ч в обоих случаях будет получена одна и та же поглощенная доза и возникает одно и то же число (около 60) потенциальных разрывов хромосом. Два повреждения одной хромосомы, необходимые для образования более сложных аберраций, могут порождаться одним или двумя треками ионизирующих частиц, и истинная форма кривой доза — эффект для двухударных аберраций типа, например, нестабильных дицентриков будет зависеть от мощности дозы и ЛПЭ излучения. Мощность дозы здесь важна, поскольку число наблюдаемых двухударных аберраций зависит от вероятности того, что первый и второй разрывы произойдут рядом друг с другом в пространстве и времени. Необходимо, чтобы два разрыва находились в достаточной близости друг к другу в ядре для того, чтобы они могли взаимодействовать и дать двухударную аберрацию они должны также произойти в максимально коротком временном интервале, чтобы первый разрыв не успел воссоединиться до того, как возникает второй. [c.94]

Хромосомы человека в клетках, полученных слиянием лимфоцитов человека с клетками миеломы мыши, нестабильны, поэтому трудно получить клетки, способные вырабатывать моноклональные антитела человека. [c.214]

Подобным же образом было показано, что действие 5-фторурацила на бактерии, приводящее к образованию химически измененных ферментов, протекает чрезвычайно быстро в течение десятков секунд. Наконец, при инфицировании клеток бактериофагом Tj немедленно ингибируется синтез рибосомной РНК. Через несколько минут начинается бурный синтез ряда (около 20) новых белков фага вместо примерно 1000 белков нормальной клетки, для чего необходимо образование в рибосомах соответствующих матриц. Если считать, что для синтеза нового белка нужны матрицы из РНК, то время синтеза матриц измеряется десятками секунд. Указанные факты также подтверждают гипотезу о существовании особого вида РНК, переносящего информацию от хромосомы к рибосомам, в которых синтезируются белки, РНК, крайне нестабильной, с малым временем оборота, постоянно синтезируемой и распадающейся. [c.466]

Поскольку при добавлении целого генома к генотипу пшеницы наблюдаются понижение плодовитости и нестабильность числа хромосом, ряд исследователей решили добавлять не весь геном, а отдельные чужеродные хромосомы, получая линии пшеницы с добавленными хромосомами другого рода или линии, в которых пара хромосом пшеницы замещена парой хромосом другого рода. Методика получения линий с добавленными хромосомами наиболее подробно описана О Мара (О Мага, 1940) на примере получения линий пшеницы с добавленными хромосомами ржи. Эта методика заключается в следующем. [c.143]

Недавно методами генной инженерии были получены плазмиды, которые реплицируются подобно хромосомам (см. гл. 31). Однако из-за неравномерного распределения они нестабильны в митозе и мейозе и исчезают из большинства клеток. Выделены фрагменты хромосомной [c.352]

Эксперименты с трансфекцией были начаты с добавления препаратов метафазных хромосом к суспензиям клеток. Хромосомы включались клетками довольно неэффективно, и с низкой частотой возникали нестабильные варианты. Интактные хромосомы редко сохранялись во время процедуры реципиентные клетки обычно приобретали фрагмент донорной хромосомы (который отличался нестабильностью из-за отсутствия центромеры). В редких случаях возникали стабильные линии в результате интеграции материала донора с хромосомой хозяина. [c.500]

Если такой клеточный клон содержит хромосому со структурной аномалией, мы должны иногда обнаруживать в определенной части клеток пациентов, страдающих одним из трех синдромов с хромосомной нестабильностью, специфические хромосомные аберрации. Такие клеточные клоны действительно были найдены. На рис. 5.30 приведена фотография необычной хромосомы 1р-, маркирующей клон клеток пациента с анемией Фанкони, наблюдавшего- [c.200]

Эффект положения может быть стабильным и нестабильным, или мозаичным. Если, например, перенести посредством транслокации нормальную аллель vv+ с Х-хромосомы на какую-либо Другую, в участок, богатый гетерохроматином, то у гетерозигот w /w в части фасеток аллель не проявляется и глаза становятся мозаичными. Если аллель vv+ удалить о т гетерохроматина — поменять местами и w посредством кроссинговера (рис. 13.13), тр доминантная аллель вновь работает нормально и глаза Гетерозиготы vv+/w оказываются полностью красными. Этот эксперимент доказывает, что здесь имеет место эффект положения гена, а не его мутация, не изменение самого гена. При стабильном эффекте положения исчезает и аномальное проявление [c.335]

В тех хромосомах нестабильных клеточных линий, которые несут ген dhfr, изменений не обнаружено. Однако в этом случае установлено появление большого числа элементов, названных двойными микрохромосомами. Такие хромосомы видны на рис. 38.11. В типичной клеточной линии каждая двойная микрохромосома несет 2-4 гена dhfr. Двойные микрохромосомы, по-видимому, представляют собой самореплицирующиеся структуры, утратившие центромеры. В результате они не способны прикрепляться к митотическому веретену, сегрегируют нерегулярно и поэтому часто утрачиваются дочерними клетками. Несмотря на данное им название, в действительности двойные микрохромосомы представляют собой внехромосомные элементы. [c.497]

По этой причине гетерозигота здесь не применима, потому что на гомологичной нетрансгенной хромосоме отсутствует соответствующий трансгену аллель. Что касается мозаиков, то они появляются, как правило, только в Fo-генерации. Животные Fi-генерации и последующих поколений (если они позитивные) содержат генную конструкцию во всех соматических и эмбриональных клетках. Однако в нескольких случаях отмечено нестабильное наследование трансгена через поколение. [c.229]

Продолжительная селекция на устойчивость к метотрексату позволила выделить как стабильные, так и нестабильные по этому признаку линии клеток. Какова пе.р-воначальная ступень в амплификации гена На первых ступенях отбора большинство или все резистентные клетки проявляют нестабильность. Образование внехромосомных копий явно представляет собой более частое событие, чем амплификация внутри хромосомы. Мы не знаем, происходит ли внутрихромосомная амплификация менее часто как процесс, происходящий de novo, или она связана с внехромосомной амплификацией, являющейся промежуточной ступенью процесса. Из-за неправильной сегрегации двойных микрохромосом увеличение числа копий может происходить относительно быстро в тех случаях, когда при каждом делении отбираются клетки, содержащие больше, чем положено, копий генов dhfr. Такие клетки возникают и отбираются в ответ на возросшие уровни метотрексата. Поведение двойных микрохромосом объясняет ступенчатую эволюцию признака mtx и нерегулярные колебания в уровне генов в нестабильных линиях. [c.498]

В опытах по трансфекции массу добавленной к реципиентным клеткам ДНК обычно увеличивают за счет избытка ДНК-носителя, препарата какой-то другой ДНК (например, ДНК спермы лосося). Доказано, что трансфицируемые клетки получают ДНК-носитель в виде последовательностей, фланкирующих селектируемые с каждой стороны. Следовательно, трансфекция осуществляется структурой ДНК, состоящей из ряда сцепленных последовательностей всех типов, присутствующих в препарате донора. Поскольку ревертанты по селектируемому маркеру утрачивают весь этот материал, кажется вероятным, что трансфицируемые клетки приобретают только одну такую структуру ДНК. Данная структурная единица может образовываться благодаря конкатемерному сцеплению донорных последовательностей в ходе реакции, которая проходит очень быстро по сравнению с другими событиями, вовлекаемыми в процесс трансфекции. Такая трансфицируемая единица может иметь протяженность около 1-10 п.н. Мы не можем установить с помощью метода гибридизации, сцеплена ли донорная единица с хромосомной ДНК реципиента (интересующие нас концевые фрагменты представлены в слишком незначительных количествах). Вероятно, что первая стадия процесса заключается в образования нестабильных внехромосомных единиц, которые впоследствии стабилизируются в результате интеграции. В некоторых клеточных линиях методом гибридизации in situ было показано, что трансфицированные клетки содержат донорный материал, интегрированный в хромосомы хозяина. Любая определенная клеточная линия имеет только один сайт интеграции однако сайты в каждой линии различны. Вероятно, выбор сайта для интеграции - случайное событие иногда оно связано с большими хромосомными перестройками. [c.500]

Для рекомбинационного картирования требуется клетка реципиента с кольцевой ДНК хромосомы и ДНК донорной клетки. ДНК клетки-донора может вводиться в клетку реципиента различными способами с помощью Hfr-хромосомы (при коньюгации), вместе с фагом-вектором (трансдукция), или путем прямой передачи ДНК из клетки донора в клетку-реципиент, как это описано в гл. 4 в отношении пневмококков (трансформация). Образующаяся при этом частично диплоидная клетка называется мерозиготой. Мерозиготы нестабильны, поскольку донорная ДНК представляет собой фрагмент целого репликона. Генетические [c.246]

Присущая микротрубочкам нестабильность позволяет объяснить, как может регулироваться их рост в определенных нужных направлениях в ползущей клетке, например, к переднему краю, а в делящейся к конденсированным хромосомам (разд. 13.5.4). Микротрубочка, у которой оба конца открыты , в цитоплазме быстро исчезает Однако центр организации все время порождает новые трубочки. Они направлены случайным образом, а их минус-концы защищены от денолимеризации. [c.308]

При всех трех заболеваниях-анемии Фанкони, синдроме Блума и атаксии-телеангиэктазии - увеличение хромосомной нестабильности не артефакт, наблюдаемый in vitro, а феномен, имеющий место in vivo. Резонно предполагать, что клиническая симптоматология этих болезней непосредственно связана с хромосомной нестабильностью. Кроме того, хромосомы больных, страдающих любой из этих трех патологий, проявляют повышенную чувствительность к агентам, разрывающим хромосомы (кластогенным агентам). [c.200]

Факт совместимости клеток разного происхождения оказался поразительным. РТзвестио, что половые клетки совмещаются только при гибридизации близких по происхождению видов и то с большим трудом. Межвидовые гибриды соматических клеток используют в настоящее время для решения ряда важнейших генетических и биологических проблем. Так, с их помощью оказалось возможным проводить генетический анализ и картирование хромосом у человека. Размножаясь делением, как обычные клетки, соматические гибриды, в силу их митотической нестабильности, в каледом поколении постепенно теряют хромосомы одного из родителей , происходит так называемая сегрегация хромосом. Например, гибриды клеток человекХмышь через сто последовательных клеточных делений, т. е. примерно в течение трех месяцев, полностью утрачивают хромосомы человека. Если с ут- [c.169]

При общей трансдукции в реципиентную клетку поступает фрагмент двунитевой ДНК донора. Он может сразу же включиться в хромосому реципиента, вследствие чего формируются стабильные клоны рекомбинатного генотипа. При специфической трансдукции фрагмент хромосомы донора может остаться соединенным с генетическим материалом фага и бактерия становится лизогенной по данному профагу. Возникает диплоидное в отношении трансдуцированных генов (мерозиготное) состояние. Оно сохраняется при клеточных делениях неопределенно долго. Клоны, несущие такой профаг, обнаруживают нестабильность. [c.99]

Если при митотических делениях диплоидных ядер теряется одна хромосома (2/г — 1), то возникающее анэуплоидное ядро становится нестабильным и последовательно теряет все хромосомы одного набора, пока не установится стабильное гаплоидное число. При этом хромосомы разных пар ведут себя независимо, а гены одной хромосомы обнаруживают абсолютное сцепление. Поэтому для локализации неизвестного гена в уже маркированной группе сцепления необходимо установить, с какими из маркеров постоянно ассоциирован исследуемый ген при гаплоидизации. [c.189]

Использование YA для получения клонотек нуклеотидных последовательностей. При создании искусственных хромосом дрожжей in vitro в среднем удается клонировать фрагменты ДНК длиной 300 т.п.о. Однако с помощью гомологичной рекомбинации, проводимой непосредственно в клетках дрожжей, можно получать вышеупомянутые вставки в несколько млн п.о. Для реализации полной емкости вектора используют предварительно полученные YA -конструкции, в которых клонированы частично перекрывающиеся последовательности. Для обнаружения перекрывающихся клонов используют рестрикционное картирование с гибридизацией по Саузерну, метод прогулки по хромосоме и ряд других стандартных методов исследования генома, которые будут рассмотрены во втором томе этой книги. После обнаружения таких перекрывающихся клонов проводят скрещивание гаплоидных клеток, содержащих требуемые YA , в полученных диплоидных штаммах индуцируют мейоз, при котором с высокой частотой возникают требуемые рекомбинантные YA с протяженными непрерывными последовательностями - контигами - исследуемого генома. Для предотвращения образования в результате рекомбинации дицент-рических и ацентрических YA , которые нестабильны, объединяемые вставки должны быть клонированы в одной и той же 5 3 -ориентации по отношению к маркерам вектора. После завершения клетками мейотических делений и споруляции в спорах обнаруживают требуемые рекомбинанты, конечная длина которых после проведения серии последовательных скрещиваний может превышать 2 млн п.о. [105, в]. [c.91]

Процесс интеграции ДНК в процессе трансформации грамположительных бактерий разделяют на пять стадий 1) интернализация ДНК и ее расположение в непосредственной близости от хромосомы 2) образование нестабильного донорно-реципиент-ного комплекса 3) образование стабильного нековалентного комплекса 4) образование ковалентного комплекса между до-норной и реципиентной ДНК 5) разрешение ковалентного гетеродуплекса, содержащего ошибочно спаренные нуклеотиды. Подробное рассмотрение всех этих вопросов выходит за рамки круга обсуждаемых нами проблем. Замечу только, что переход между стадиями 2 и 3 блокируется каумермицином, ингибитором ДНК-гиразы, что указывает на важную роль пространственной структуры ДНК в рассмотренном процессе рекомбинации между донорной ДНК и реципиентной ДНК бактериальной хромосомы. После установления компетентности клетки В. subtilis остаются в таком состоянии в течение нескольких часов. [c.146]

Определение локализации горячих точек хромосом в линиях способствует выявлению нестабильных районов хромосом, связанных с численными и структурными изменениями в хромосомах различных генов, в том числе и онкогенов. Перспективным, безусловно, являются совместные исследования цитогенетиков и молекулярных биологов, направленные на установление природы специфических хромосомных перестроек, отражающих неопластическую прогрессию и появляющихся при длительном культивировании различных клеточных линий. [c.96]

Морфологические изменения второго типа обнаруживаются в нормальных во всем остальном хромосомах и проявляются в атипичном характере исчерченности определенных областей при дифференциальном окрашивании (рис. 7.23) эти области называют гомогенно окрашивающимися (HSR). Как правило, они весьма протяженны, и хромосома, содержащая HSR, длиннее своего гомолога (рис. 10.88, ). В клетках, устойчивых к метотрексату, после гибридизации in situ с радиоактивным зондом, представляющим собой клонированный дигидрофолатредуктазный ген, и обработки фото-чувствительной эмульсией на HSR обнаруживаются зерна серебра. Таким образом, амплифицированные последовательности находятся внутри HSR. В хромосомах клеток сирийского хомячка, содержащих амплифицированные гены аспартат-карбамоил-трансферазы, также обнаруживаются лишние протяженные участки. Поскольку эти участки окрашиваются негомогенно, они не являются HSR, но тем не менее содержат амплифицированные сегменты ДНК (рис. 10.88, В). В некоторых случаях амплификация гена AD происходит и в нормальном локусе AD сирийского хомячка (в хромосоме В9р), хотя другие хромосомы тоже могут содержать много копий этого гена и иметь разнообразные аномалии (рис. 10.88, Г). Могут встречаться и двойные мини-хромосомы. Во всех исследованных случаях амплификация касается только одной пары гомологичных хромосом. В отличие от нестабильных амплифицированных генов в двойных мини-хромо- [c.309]

Смотреть страницы где упоминается термин Хромосом нестабильность: [c.137] [c.242] [c.70] [c.479] [c.207] [c.449] [c.260] [c.183] [c.168] [c.176] [c.9] [c.9] [c.98] [c.355] [c.12] [c.24] [c.38] [c.67] [c.79] [c.211] [c.216] [c.300] [c.311] [c.254]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология