Очистка вирусов

МЕТОДЫ ВЫДЕЛЕНИЯ И ОЧИСТКИ ВИРУСОВ 33 [c.33]

Рис. 8.22. Хроматографическая очистка вируса бешенства на модифицированном макропористом стекле (ПВП-МПС-2 ООО, dn = 200 нм, dp = 0,1—0,3 мм). Колонка 100 X 1200 мм, линейная скорость подачи элюента 2 см/мин. Элюент — 0,1 М трис-НС1, pH 7,8. PD — протективная активность. Выход вируса 85 %

МЕТОДЫ ВЫДЕЛЕНИЯ И очистки ВИРУСОВ [c.24]

Для характеристики вирусов в первую очередь важны их биохимические и биофизические свойства. Чтобы исследовать эти свойства, вирусы необходимо очистить. Разные вирусы требуют специфических методов очистки, и привести их все в данной главе не представляется возможным. Описание методов очистки вирусов животных читатель найдет в других главах книги. Здесь же я рассматриваю принципы, на которых основана разработка методов очистки вирусов растений, и привожу отдельные примеры. После очистки методология исследования биофизических и биохимических свойств одинакова для большинства, если не для всех, вирусов животных, растений и бактерий. В этой главе рассмотрены методы изучения только простейших вирусов, состоящих из белковой оболочки и геномной нуклеиновой кислоты. [c.12]

Наконец, следует указать, что если количество оседаю--щего вещества достаточно велико, седиментометры и специальные препаративные ультра центрифуги могут быть использованы для препаративного разделения и выделения фракций с различными размерами частиц или молекул. В последние годы препаративные ультрацентрифуги широко применяются при выделении и очистке вирусов и входящих в их состав нуклеиновых кислот и белков. [c.47]

Очистка вирусов растений [c.12]

Сделаны попытки выделения и очистки вирусов с помощью ионитов. Внедрен в производство метод деионизации и нейтрализации антитоксичных сывороток с помощью катионитов и анионитов, [c.126]

Кроме посуды и обычного оборудования, необходимы камеры глубокого и сверхглубокого замораживания (с температурой -30...70°С), холодильные камеры (с температурой -20°С), центрифуги со скоростью вращения 1500 — 3000 об/мин и более для очистки вируса от балластных веществ и концентрации его, а также гомогенизаторы для измельчения тканей, овоскоп, горелки для запаивания ампул, вакуумный насос. [c.443]

Производство антибиотиков, алкалоидов, витаминов (пенициллин, стрептомицин, биомицин, морфин, кофеин, кодеин и др.) получение ферментов и иммобилизованных ферментов консервирование кро-вИ извлечение токсических веществ (искусственная почка, очистка крови) выделение и очистка вирусов производство антитоксических сывороток медицинская диагностика и др. [c.254]

С некоторым успехом проведены изоляция и частичная очистка вирусов достигнуто и удаление некоторых примесей из вирусов на ионитах с оставлением очищенного вируса в растворе. В некоторых случаях полезной оказалась комбинация этих методов. Кроме того, специфическая адсорбция вирусов на ионитах по типу реакций антиген-антитело достигнута на специальных смолах. [c.621]

Последующие разделы этой главы будут посвящены рассмотрению прямого действия излучений на вирусы, поэтому здесь ограничимся разбором только тех опытов, в которых вирусы облучались либо в сухом состоянии, либо в растворе, но в присутствии такой концентрации вирусного или постороннего белка, при которой непрямое действие не играет уже существенной роли. Фактически это относится к большинству опытов, так как сделать непрямой эффект ощутимым можно лишь проводя опыты при достаточно низкой концентрации белка, которая достигается только путем тщательной очистки вирусов. [c.93]

Бракк (Вгакке) использовал центрифугирование в градиенте плотности сахарозы для очистки вирусов растений [c.211]

Методики очистки многих вирусов приведены в Описаниях вирусов растений , выпускаемых СМ1/ААВ [1], и в книге [2]. Хотя универсального метода и не существует, изложение основных принципов и фактов может оказаться полезным при разработке способов очистки вирусов. [c.12]

В курсе приведены многочисленные примеры практического применения главным образом газовой и молекулярной жидкостной хроматографии на адсорбци-онно или химически модифицированных адсорбентах для анализа углеводородов, их производных и гетероциклических соединений. Особое внимание уделено анализу вредных примесей, разделению углеводов, стероидов, гликозидов, азолов, азинов, а также таких важных галогенпроизводных, как фреоны и пестициды. Адсорбция микотоксинов, представляющих собой одну из серьезнейших пищевых и кормовых проблем, рассматривается как в аспекте хроматографического их анализа, так и в аспекте хроматоскопического исслв1Дования структуры их молекул. В конце курса приведены примеры адсорбции и хроматографии синтетических и природных макромолекул. Здесь рассматривается иммобилизация некоторых ферментов и клеток (например, для осахарнвания крахмала, изомеризации глюкозы, для решения проблем искусственной почки), а также вопросы хроматографической очистки вирусов, в частности, вирусов гриппа и ящура. [c.4]

На рис. 18.11 показан пример полной очистки вируса гриппа от сопутствующих белков на колонне, заполненной одним из макропористых сит — глюкозосилохромом. Вирус гриппа не удерживается необратимо на модифицированном так кремнеземе и из-за молекулярно-ситового эффекта выходит из колонны первым. Лишь после этого появляется пик сопутствующих ему белков. [c.344]

Аналогичные данные были получены прн очистке вируса утиного гриппа Кошице-56 (рис. 4). [c.86]

Для очистки вирусов используют общие методы выделения белков. Методы отделения вирусов от клеточных белков основаны, во-первых, на том, что вирусы по своей природе представляют собой обособленные частицы, а во-вторых,— на более высокой плавучей плотности вирусных частиц, обусловленной присутствием в них нуклеиновой кислоты. Однако для отделения вирусов от нуклеопротеидных частиц самой клетки, имеющих такой же состав и размеры, как и вирусная частица, требуются специальные методы. [c.33]

Итак, разрушающее действие хлора на вирусы обусловлено его окислительными способностями. В тоже время губительное действие хлора зависит от многих условий температуры обрабатываемой воды и ее pH, содержания примесей, концентрации свободного хлора и хлорпоглощаемости воды. Инактивация может зависеть от устойчивости вирусных штаммов, их концентрации, степени очистки вирусов от примесей и других условий. [c.84]

Ситовая (гель-фильтрационная) хроматография связана в основном с различием в скоростях диффузии молекул и макромолекул компонентов смеси в поры соответствующих сорбентов, в частности набухающих органических пористых полимеров — сефадексов, биогелей, а также ненабухающих макропористых силикагелей или силохромов и макропористых стекол. В этом случае вещества с большими молекулярными весами, образующие наиболее крупные частицы, практически не диффундируют в поры и поэтому элюируют первыми. Удерживаемые объемы таких веществ на подходящих по размерам пор ситах увеличиваются с уменьшением их молекулярных весов или объемов. Это позволяет разделять олигомеры и смеси полимеров по молекулярным весам и в благоприятных случаях определять их размеры или молекулярновесовое распределение, а также производить препаративное фракционирование полимеров, очистку вирусов и бактерии [8]. [c.414]

Книга принадлежит перу одного из создателей современной вирусологии. Чрезвычайно сжато, но вместе с тем очень шиво и интересно автор рассматривает на основе новейших данных все аспекты науки о вирусах методы выделения и очистки вирусов и их отдельных компонентов, свойства вирусных белков и нуклеиновых кислот, связь структуры вирусных частиц и их функций, природу инфекционности вирусов, их биологию и классификацию и т. д. Книга очень хорошо иллюстрирована многочисленными микрофотографиями, схемами и графиками. [c.4]

Но в книге X. Френкель-Конрата нас привлекла прежде всего ясность, оригинальность и свежесть изложения тех вопросов, которым уделено сравнительно мало места в большинстве других, близких по теме монографий. Это вопросы выявления, выделения и очистки вирусов, химического состава и структуры целых вирионов и их компонентов, взаимного расположения этих компонентов (гл. II—VIII), а также сборки и искусственного воссоздания вирусов (гл. X). Эти главы, которые составляют большую часть книги и материал которых наиболее близок личным научным интересам автора, являются, несмотря на компактность изложения, прекрасным и почти исчерпывающим введением в общую и структурную химию вирусов. Они дают полное представление не только о составе вирусных частиц, но и о современных методах их химического, биохимического и физико-химического исследования. Многочисленные указания на возможные методические ошибки и практику проведения экспериментов делают книгу особенно ценной для начинающих научных работников. [c.6]

Прежде чем приступить к очистке вируса или к использованию его в экспериментальных целях, следует убедиться в его стабильности, о которой судят по потере инфекционности в различных условиях. Находясь в инфицированной ткани, вирусы при замораживании обычно не повренч-даются, поэтому их лучше хранить при низких температурах, за исключением, однако, таких вирусов, которые при замораживании разрушаются. Многие очищенные вирусы (например, ВТМ) повреждаются при повторном замораживании и оттаивании. Большинство вирусов хорошо переносит воздействие высоких концентраций солей однако некоторые из них (например, вирус мозаики костра) разрушаются под действием одномоляр- [c.33]

С этой точки зрения даже наиболее высокоочищенные препараты вирусов можно рассматривать как статистически гомогенные лишь в первом приближении. Тем не менее, прежде чем использовать препарат вируса для физико-химических, биохимических или биологических экспериментов, важно установить, по возможности более тщательно, степень этой гомогенности или гетерогенности. Большинство методов очистки вирусов можно использовать также и для определения гомогенности вируса. Если при равделении в градиенте концентраций сахарозы вирус образует одну-едииственную резко ограниченную полосу, можно считать, что по седиментационным свойствам исследуемый препарат более или менее гомогенен. Однако если очистку вируса проводят только путем повторных циклов градиентного центрифугирования в растворе сахарозы, каждый раз удаляя материал, седиментирующий быстрее или медленнее, чем вирус, то в этом случае равномерность скорости седиментации уже не может служить показателем гомогенности. Иными словами, только сочетая при очистке и (или) проверке на гомогенность самые разнообразные методы, основанные на разных принципах, можно быть уверенным, что мы действительно имеем дело с каким-то определенным типом гомогенных частиц. К таким разнообразным критериям относятся константа седиментации, [c.47]

Какой из основных методов очистки вирусов основан главным образом на таких особенностях, как вес вирусных частхщ их плавучая плотность свойства поверхности белка [c.284]

Разрушающее действие хлора обусловлено его окислительными способностями. Так, скорость инактивации вируса при температуре 37° С и pH 7,0 прямо пропорциональна величине окислительно-восстановительного потенциала [97]. Следовательно, губительное действие хлора зависит от многих условий. Оказывают влияние температура обрабатываемой воды и ее pH, содержание примесей, концентрация свободного хлора и хлорпогло-щаемость воды. Инактивация может зависеть от устойчивости вирусных штаммов, их концентрации, степени очистки вирусов от примесей и других условий. [c.79]

Рис. 8.23. Хроматографическая очистка вируса клещевого Э1щефг1лита на сорбенте Диасорб-750-Диол к = 75 нм, dp = = 0,15—0,35 мм). Колонка 100 х 500 мм, линейная скорость подачи элюента 1,5 см/мин. Элюент — 0,1 М фосфатный буфер, pH 7,8.

Справочник химика 21

Химия и химическая технология