Связь с колоночной хроматографией

Область применения тонкослойной хроматографии практически безгранична, что объясняется возможностью большого выбора слоев различных сорбентов. Для разделения полярных веществ применяют слои адсорбентов, для гидрофильных — распределительную хроматографию на целлюлозе или силикагеле, для гидрофобных — импрегнированные слои (обращенные фазы). Можно применять также ионообменную или гель-хроматографию в тонком слое. Метод тонкослойной хроматографии в настоящее время применяют в основном для целей качественного анализа. Количественное определение возможно в такой же степени, как и в бумажной хроматографии. При проведении определений можно работать с очень небольшими количествами веществ, разделение проходит быстро и с умеренными затратами. Тонкослойную хроматографию в связи с этим можно применять для предварительных опытов по выбору фаз для разделения больших количеств веществ методом колоночной хроматографии. [c.361]

Основной областью применения колоночной хроматографии является препаративное разделение химически сходных соединений. Этим способом можно, например, разделить а- и р-каро-тины, отличающиеся только положением двойной связи. Инте- [c.243]

М. С. Цвет пропускал раствор анализируемых веществ и подвижной фазы через столб адсорбента, находящегося в стеклянной трубке. В связи с этим его метод получил название колоночной хроматографии. В 1938 г. Н. А. Измайлов и М, С. Шрайбер предложили видоизменить метод Цвета и проводить разделение смеси веществ на пластинке, покрытой тонким слоем адсорбента. Так возникла тонкослойная хроматография, позволяющая проводить анализ с микроколичеством вещества. [c.10]

В основе адсорбционной хроматографии лежит разделение липидов в соответствии со степенью их полярности. Адсорбентом при тонкослойной хроматографии чаще всего служит силикагель. При колоночной хроматографии широкое применение получили три адсорбента силикагель, окись алюминия, флоризил (силикат магния). Прочность взаимодействия липида с адсорбентом определяется главным образом водородными и ионными связями, в меньшей степени — силами Ван-дер-Ваальса. [c.69]

В индивидуальном виде колоночной хроматографией удалось выделить продукт 109. Преобладание его в смеси может быть объяснено большей доступностью двойной связи циклопентена для атаки в т/>анс-направлении к арильному заместителю. [c.18]

Это следует из того, что существует определенная связь между основными параметрами удерживания в ТСХ и в колоночной хроматографии [c.333]

Плохая воспроизводимость в ТСХ связана с условиями разделения. Колоночная хроматография отличается от ТСХ тем, что в последней присутствует третья фаза — газовая. [c.152]

В то время как в КЖХ хроматографическая система жестко связана с детектором, в ТСХ разделение проводят Б камере независимо от типа детектора. В связи с этим ТСХ является более гибким методом для решения разнообразных задач разделения и для разработки новых методик. Показания фотометрической детектирующей системы в ТСХ обычно не зависят от состава элюента. Жидкостную колоночную хроматографию целесообразно использовать в лаборатории для однотипных анализов, тогда как ТСХ с последующим фотометрическим детектированием — в лабораториях, где имеют дело с самыми различными задачами разделения. Для количественной оценки хроматограмм пригоден только фотометрический метод , поскольку даже опытный оператор при визуальном определении допускает ошибку не менее 10%. Дополнительным приемом при проведении количественного детектирования является удаление пятна вещества вместе с сорбентом с подложки. После этого проводят жидкостное извлечение вещества из сорбента. Количественное определение поглощения или флуоресценции раствора осуществляют с помощью фотометра [1]. Широкому распространению этого метода мешает ряд препятствий. [c.174]

Метод разделения веществ, называемый хроматографией в сухих колонках, в настоящее время описан во всех деталях . Этот мощный метод имеет ряд преимуществ перед обычной колоночной хроматографией. Они связаны с повышением разделяющей способности и скорости разделения компонентов изучаемой смеси. Кроме того, этот метод позволяет использовать почти без всяких изменений результаты тонкослойной хроматографии (разд. 3.2). [c.438]

СВЯЗЬ С КОЛОНОЧНОЙ ХРОМАТОГРАФИЕЙ [c.127]

Аналитические методы. Многие из аналитических методов, используемых в клинической лаборатории, похожи на те, которые применяются в заводских лабораториях. Так, титриметрия, колориметрия, газовая и жидкостная, плоскостная и колоночная хроматография в данном случае входят в число рутинных методов [11]. Однако в связи со специфическими особенностями об- [c.27]

Для отделения летучих примесей от полимеров наиболее часто используются следующие методы экстракция, растворение с последующим осаждением полимера, термическая десорбция в потоке газа-носителя и т. п. Несомненно целесообразно использовать для отделения летучих компонентов и другие эффективные, в первую очередь хроматографические, методы разделения гель-хроматографию, тонкослойную и колоночную хроматографию. В связи с большой трудоемкостью и слон ностью многостадийных методов их целесообразно использовать в тех случаях, когда более простые методы не эффективны (например, вследствие термической нестабильности полимера), или для разовых, единичных определений, когда специальная разработка простого метода не оправдана. Исключение составляют, по-видимому, только методы, в которых предварительной стадией является не процесс разделения, а разбавление анализируемого раствора полимера или растворение твердого полимера. Этот простой прием позволяет свести более сложную задачу — определение летучих компонентов в твердом полимере или [c.123]

Теория, основанная на понятии эквивалентных тарелок, включает ряд приближений. Например, предполагается, что коэффициент распределения — величина постоянная, т. е. характеризует распределение на протяжении всей колонки и, кроме того, не зависит от концентрации, а также что диффузия между отдельными тарелками пренебрежимо мала, определяемое вещество в начале хроматографии находится полностью в первой тарелке и т. д. Естественно, имеются расхождения между теорией и практикой хроматографии, но идеализированная концепция эквивалентных тарелок позволяет наглядно показать связь между колоночной хроматографией и экстракцией. Влияние динамических процессов на высоту эквивалентных тарелок обсуждается в гл. 1. [c.34]

Очевидно, что отмеченные выше возможные отклонения от идеальности не ограничиваются ламинарными системами, но могут иметь место также и в неорганических экстракционных колонках с обращенными фазами и, по-видимому, тесно связаны с общей проблемой изменения объемов фаз (а иногда и с образованием третьей фазы), наблюдаемого во многих экстракционных системах. Этим, вероятно, объясняется ряд аномальных и неожиданных результатов, которые получены во многих экстракционно-хроматографических работах. Однако, несмотря на интересные возможности приложения уравнения (2) как в ламинарной, так и в колоночной хроматографии, каких-либо дальнейших попыток проверить интерпретацию Барка или с большей точностью определить параметры, отражающие неидеальность систем, сделано не было. В настоящее время, таким образом, нет уверенности в том, что уравнение (2) отражает процессы, происходящие в реальных системах. [c.468]

В настоящее время имеется огромное количество работ, в которых описывается или упоминается применение колоночной хроматографии для разделения стероидов. В связи с этим интересно было бы оценить процент работ, посвященных стероидам, в которых бы не упоминалась хроматография. Принимая во внимание то, что число разнообразных стероидов так же велико, ясно, что в данном обзоре невозможно рассмотреть все приложения (или даже большую их часть) колоночной хроматографии в области стероидов. Все, что можно здесь сделать,— это свести обзор к наиболее поздним работам, указать различные хроматографические методы, сравнить их (если они поддаются сравнению) и попытаться рекомендовать определенные хроматографические методы, применимые для разделения определенных типов стероидов. [c.211]

Хроматография производных аминокислот получила интенсивное развитие в связи с разработкой методов определения первичной структуры белков. Вероятно, трудно найти в органической химии и биохимии более удачный пример столь тесной взаимосвязи развития представлений о структуре и функциях большого класса веществ, каким являются белки, с хроматографическими методами анализа. Основное внимание было направлено на разработку методов определения N-концевых остатков аминокислот в белках, причем в идентификации соответствующих производных большое значение имели тонкослойная (ТСХ) и бумажная хроматография (БХ) (см. обзоры [1, 2]). Газожидкостная и жидкостная колоночная хроматографии находят в этой области ограниченное применение, однако интерес к последнему методу постепенно растет. Интерес к жидкостной хроматографий вызван вполне определенными причинами. Во-первых, постоянно появляются новые методы избирательной модификации остатков аминокислот в белках, а идентификация производных аминокислот требует развития хроматографических методов. Во-вторых, исследованию подвергают все более труднодоступные белки, что в свою очередь вызывает необходимость создания надежных методов количественного анализа. Интерес к колоночной хроматографии возрастает также в связи с выделением и получением необычных аминокислот, а также в связи с необходимостью предотвращения ошибок при определении аминокислотной последовательности. Понятия современный и классический метод используют здесь условно, поскольку новые методики обычно создают на базе стандартной аппаратуры примером может служить автоматический анализ ДНФ- и ДНС-аминокис-лот [3, 4]. Насколько известно, до сих пор не пытались использовать скоростную хроматографию высокого разрешения для разделения производных аминокислот, хотя некоторые соединения, например ДНС-аминокислоты, являются для этого метода довольно удобным объектом. Производные аминокислот использовали в структурном анализе белков крайне неравномерно. По-видимому, всеобщее увлечение ДНФ-аминокислотами проходит окончательно, уступая место повышенному интересу [c.360]

Несмотря на то, что методы колоночной хроматографии за последние годы подверглись значительному упрощению, при разделении веществ с близкими свойствами приготовление растворов и манипуляции с ними все еще занимают много времени. Во многих случаях качественные и полуколичественные определения могут быть выполнены гораздо проще с помощью тонкослойной хроматографии. Этот метод известен ужо более 20 лет, но только недавно, в связи с появлением усовершенствованной аппаратуры, он приобрел популярность. Некоторые применения ионитов в качестве сорбентов уже описаны, и можно надеяться, что этот метод получит широкое распространение в микрохимическом анализе. [c.214]

Продолжая промывание колонки растворителем, достигают выхода из нее разделяющихся веществ, которые обнаруживают путем анализа последовательных порций вытекающего из колонки раствора (элюата). Если построить выходную кривую, т. е. график зависимости концентрации элюата (С) от объема пропущенного через колонку раствора (V), то на этой кривой выходу компонентов исходной смеси из колонки соответствуют хроматографические пики (рис. 98,а). Часто не происходит полного разделения компонентов и отдельные пики взаимно перекрываются. Построение выходных кривых является наиболее распространенной формой колоночной хроматографии, так как не связано ни с окраской разделяемых компонентов, ни с цветом адсорбента. [c.316]

ОСНОВНЫЕ СООтаОШЕНИЯ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ Связь колоночной хроматографии (ВЭЖХ, жидкостная хроматография низкого давления) с плоскослойными вариантами (ТСХ) [c.498]

Основные трудности в анализе следовых количеств органических суперэкотоксикантов связаны с тем, что для большинства соединений практическл отсутствуют типовые схемы, ана.по1 ичные схемам разделения и концентрирования, применяемым в анализе следовых количеств неорганических соединений В лучшем случае можно применять типовые схемы их разделения на фуппы. Классическим примером может служить схема разделения ХОС методом колоночной хроматографии на силикагеле [16-18 Однако добиться полного фуппового разделения, как правило, не удастся Полнота разделения зависит от характеристик сорбентов, способов модификации поверхности, условий ее активирования и т.д. [c.154]

Колоночная хроматография является макрометодом. Применение зто-го метода для проведения микро- и полумикроопределений связано с использованием чувствительных детекторов, имеющихся лишь для некоторых веществ, действие которых основано, например, на измерении радиоактивности. За последние два десятилетия колоночная хроматография потеряла прежнее значение. В области аналитической химии ее вытеснили такие методы, как бумажная и тонкослойная хроматография. Однако колоночную хроматографию можно применять в области препаративной химии. Эта тенденция развития не характерна для ионообменной и гель-хроматографии. [c.354]

Термин распределительная жидкостная колоночная хроматография , строго говоря, предполагает наличие двух жидких фаз, неподвижной и подвижной, при том, что неподвижность одной из них обусловлена ее связью с твердой матрицей, заполняющей хроматографическую колонку. Этот вид хроматографии базируется па явлении растворимости. По самой сути хроматографического процесса компоненты фракционируемой смеси веществ должны быть лучше растворимы в неподвижной фазе, чем в подвижной К > 1). Если при этом неподвижная фаза водная, а подвижная фаза представлена органическим растворителем или водно-органической смесью, вещества в целом гидрофильны и разделение идет по степени этой гидро-фильности, то распределительную хроматографию принято называть нормальнофазовой (НФХ). Движение хроматографических зон по колонке и элюция пиков подвижной фазой происходят в направлении от "менее гидрофильных к более гидрофильным компонентам смеси. При изократической элюции последние лишь понемногу и с трудом диффундируют от неподвижной водной фазы в подвижную. Для ускорения их элюции можно постепенно (градиентно) увеличивать полярность подвижной фазы, например уменьшая в ней содерн апио органического растворителя в пользу воды. [c.168]

Наиболее эффективным и широко применяемым методом фракционирования сложных смесей липидов является хроматография. Главную роль при аналитическом фракционировании играет адсорбционная хроматография в тонком слое сорбента. Этот метод также применяется в препаративных целях, когда разделению подвергается небольшое количество липидов (50—300 мг). Если масса липидов превышает 300 мг, используют колоночную хроматографию, хотя по разделяющей способности и времени разделения этот метод часто уступает тонкослойной и газовой хроматографии. Однократного хроматографирования обычно бывает недостаточно для выделения индивидуальных веществ, в связи с этим полученные фракции подвергают препаративной тонкослойной хроматографии или колоночной хроматографии другого типа. При колоночрюй хроматографии липидов используют не только принцип адсорбции, но и принцип распределения между двумя несмеши-вающимися жидкостями, гель-фильтрации, ионного обмена. [c.69]

Классифи1сация методов колоночной хроматографии по природе используемых подвижной и неподвижной фаз предстгшлета в табл. 5.1-1. Два основных механизма хроматографического разделения—это распределение н адсорбция. Адсорбционная хроматография основана на непосредственном взаимодействии разделяемого вещества с поверхностью неподвижной фазы, иапример, в ГТХ или ЖТХ. Распределительная хроматография связана с ваишчием иммобилизованной жидкой неподвижной фазы (ГЖХ, ЖЖХ). [c.231]

Диоксид хлора является промышленно доступным реагентом, действие которого на алкениланилины ранее не изучалось, в связи с чем было проведено пробное окисление. Действие 1 эквивалента СЮг в ацетонитриле на амид 7 приводит к образованию смеси ос,(3-енона 107 и гидрохлорида бензоксазина 106 (выходы 34 и 32 % соответственно), наблюдалось значительное осмоление реакционной смеси. Продукты были разделены колоночной хроматографией на силикагеле. [c.17]

Все три способа разделения, колоночная, линейная ТСХ и круговая ТСХ, характеризуются продольной диффузией, не мешающей разделению, одпако колоночная хроматография характеризуется еще диффузией в двух поперечных направлениях, которая мешает разделению. В линейной ТСХ диффузия протекает в двух взаимно перпендикулярных направлениях (условное допущение), причем поперечная диффузия не мешает разделению. В круговой ТСХ продольная диффузия ухудшает разделение, тогда как поперечная диффузия его улучшает в связи с тем, что радиусы сфер диффузии, в которых происходит движение молекул, суммируются в поперечном направлении. Исследования, посвященные установлению подлинности чисел разделений, не превышающих 100, нашли положительное подтверждение (см. табл. 2.3). Здесь следует рассмотреть тот факт, что число разделений (модель III) получено при ширине пика о = 0,03 и bj = 0,06. Величина — й., = 0,03 соответствует числу тарелок Л эфф = 1500 для даггной конкретной системы. Необходимо также выполнение ряда других условий ширина стартового пятна (например, после фокусировки, как это описано в гл. 3 и 5) и величина молекулярной диффузии вместе не должны превышать 3% длины пути разделения, температура и длительность разделения должны быть достаточно низкими. Величину = 0,03 трудно получить. [c.59]

Следует помнить, что при препаративной хроматографии в слоях сорбента отношение количества хроматографического материала к количеству разделяемой смеси веществ много выше, чем в колоночной хроматографии, поэтому этот метод менее экономичен. С другой стороны, хроматография в слое связана с меньшим расходованием растворителя и занимает меньше времени, что особенно важно для выделения нестойких соединений сравнительно малое время контакта с сорбентом уменьшает риск их разложения. [c.123]

Из полисахаридной фракции растительного клея семян Be ium filamentosum с помощью колоночной хроматографии на ДЭАЭ-целлюлозе выделен полисахарид, содержащий L-рамнозу, /)-галактозу, -арабинозу в соотношении 1 2 2. Молекула этого полисахарида разветвлена. Основная цепь построена из остатков D-галактопиранозы, соединенных (1— -4)-связями. Часть остатков несет в положении С-6 боковые цепочки из остатков .-арабинозы, соединенных связью (1—>-5), на невосетанавливающем конце которых расположены остатки L-рамнозы. [c.100]

Хроматографический процесс может соответствовать разделительному процессу в лотке Сигнера лишь в том случае, когда условия опыта принципиально идентичны. При хроматографии в тонких слоях, в ее обычной форме, зто предположение не выполняется в начале опыта колонка не содержит растворителя и имеется возможность размытия вещества в результате поперечной диффузии. При теоретическом рассмотрении этим различием не следует пренебрегать. Аналогичная проблема возникает, естественно, и при хроматографии на бумаге. Излагаемый ниже анализ основан поэтому на опытах, проведенных обоими методами. Параллельно с этим имеются различия между хроматографией в тонких слоях и хроматографией на бумаге. Кратко коснемся также этого вопроса и в заключение укажем на практически важную связь между хроматографией в тонких слоях и колоночной хроматографией. [c.107]

Методы переработки для выделения подвергаемых хроматографическому разделению экстрактов определяются свойствами исходного материала, формой применения и количеством находяш ихся в нем витаминов. В природных продуктах витамины находятся не в свободном состоянии, а каким-то образом связаны. Искусственно полученные препараты для стабилизации часто заключают в желатину. Из однородных проб (раствор, порошок) витамины известным способом экстрагируют непосредственно или после гидролиза. Полученные таким образом экстракты после концентрирования и дальнейшей очистки (например, методом вымораживания или колоночной хроматографии) наносят на пластинки для ХТС и подвергают одно- или двумерному хроматографированию, используя соответствующ ие растворители. Обнаружение витаминов на пластинке осуш ествляют либо при рассматривании в свете с различной длиной волны, либо при опрыскивании соответствую-пщми реактивами . Для количественных расчетов целесообразно проводить сравнение со стандартом, прошедшим стадии хроматографического разделения, элюирования и последуюш,его физико-химического определения. Для определения витаминов можно использовать также биоавтографию, т. е. [c.212]

Рис. 120. Разделение холестериновых эфиров аорты человека (выделены методом колоночной хроматографии) на слое силикагеля Г смесью четыреххлористый углерод — хлороформ (96 + 4). Обнаружение реактив № 123, затем реактив № 120 в. Холестериновый эфир 1 — жирной кислоты с одной двойной связью 3 — кислоты с двумн двойными связями 3 — кислоты с тремя двойными связями и т. д.

Жидкостная адсорбционная колоночная хроматография прочно завос вала ведущее место среди хроматографических методов анализа нефтепродуктов. Другие методы жидкостной хроматографии в значительно меньщей степени используют при исследовании нефтепродуктов. Связано это как с ограниченностью области применения этих методов, так и с трудностью надежной интерпретации получаемых результатов. Так, ионообменная и координационная хроматография могут быть использованы лищь для вьщеления и разделения неуглеводородных компонентов тяжельпх нефтепродуктов, обладающих свойствами кислот или оснований. Эксклюзионная (ЭХ), или гель-хроматография, несмотря на все увеличивающееся число попыток использования ее для исследования нефтепродуктов, пока еще не завоевала должной популярности, что объясняется в первую очередь трудностью надежной количественной интерпретации результатов разделения. Тонкослойную хроматографию в основном применяют как вспомогательный метод для подбора условий адсорбционного разделения в колонках или для качественной идентификации нефтепродуктов и вьщеленных из них фракций. Бумажная хроматография практически не нашла применения в анализе нефтепродуктов. [c.71]

Колоночная хроматография весьма тщательно разработана и позволяет добиться прекрасного разделения однако низкомолекулярные осколки нуклеиновых кислот можно столь же успепшо разделить и методом ХТС на ионообменниках при меньшей затрате труда и времени. Хотя до настоящего времени метод ХТС применяли только для разделения пуриновых и пиримидиновых оснований, нуклеозидов и мононуклеотидов, можно полагать, что на слоях эктеола и ДЭАЭ можно разделить также олигонуклеотиды, анури-новые кислоты и высокомолекулярные рибо- и дезоксирибонуклеиновые кислоты. Этот метод может оказаться пригодным также для анализа углеводных компонентов нуклеиновых кислот (841 (см. стр. 456) — в виде их обратных комплексов (см, [211),—- а также о-фосфорной кислоты и полифос-форных кислот [77] (см. стр. 473). В связи с этим следует отметить анализ методом ХТС птеридинов [63], фармацевтически важных пуриновых и пиримидиновых производных (см. стр. 310) и водорастворимых витаминов (см.стр. 236). Особенно важной является работа Нюрнберга по анализу методом ХТС витаминов группы Ве и амида никотиновой кислоты [64]. [c.451]

Учитывая большое различие в адсорбируемости на молекулярном сите 5А к-парафиновых углеводородов и углеводородов других структур [44, 45 ], оформление процесса по типу жидкостной колоночной хроматографии заменяют простым контактированием в стеклянной колбе [45—48 ]. С цеЦъю увеличения скорости адсорбции -парафинов может быть использовано молекулярное сито в виде кристаллов" (диаметром 0,5—5 мкм) без связующего материала. Процесс проводят в среде несорбирующегося растворителя (изооктан — 100 Л1Л на 1 г образца парафинов), при повышенной температуре (99,3 °С) и перемешивании (500 сб/мин). В этих условиях [45] предварительно активированные при 350 °С в течение 24 ч кристаллы молекулярного сита 5А практически полностью (на 99,3%) адсорбируют в течение 1 ч к-парафиновые углеводороды из образцов с температурами плавле-вмя 53—67 °С (содержание 70—95% к-парафинов до С40) при соотношении молекулярное сито парафиновые углеводороды 7—10 1 (по массе). [c.30]

По классификаци11 Гиддингса [13], тонкослойная хроматография (ТСХ) представляет собой зонный неэлютивный хроматографический процесс. В отличие от элютивной колоночной хроматографии (КХ) при ТСХ время движения по хроматографическому слою одинаково для всех компонентов анализируемых веществ, а их разделение происходит вследствие различия во времени пребывания в подвижной и неподвижной фазах хроматографической пластинки. В результате при ТСХ хроматографическое размывание за счет факторов подвижной фазы (продольной диффузии, внешнедиффузионной массопередачи) связано с подвижностью компонентов. В то же время в КХ подобное размывание у всех компонентов одинаково. [c.255]

Название книги достаточно точно соответствует ее содержанию Здесь детально описываются практические приемы подготовки и проведения исследований в области жидкостной хроматографии в колонках и хроматографии в тонких слоях, причем под словом "подготовка" следует понимать не только обеспеавш е эксперимента необходимыми материалами и oбopyдoБaниe i ,4Sюивa iиe каждого вида колоночной хроматографии предшествует краткое теоретическое введение. Задача такого введения - дать физическую картину описываемого явления и процесса, установить связь между различными параметрами. Изложение этого материала имеет цепью помочь читателю ра- [c.5]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология