Ингибиторы протеиназ

Ингибиторы протеиназ животных и растений, т. 2, стр. 113 [c.380]

Важной и многообещающей областью энзимотерапии является применение ингибиторов ферментов. Так, естественные ингибиторы протеиназ (а -трипсин, а -химотрипсин, а-макроглобулин) нашли применение в терапии острых панкреатитов, артритов, аллергических заболеваний, при которых отмечается активация протеолиза и фибринолиза, сопровождающаяся образованием вазоактивных кининов. [c.167]

Дополнение 7-В Ингибиторы протеиназ животных и растений [c.113]

Ингибиторы протеиназ. По химической природе растительные ингибиторы протеиназ представляют собой белковые вещества с молекулярной массой от 3 до 22 кДа [79]. [c.212]

В ячмене ингибиторы протеиназ локализуются в семенах и молодых проростках, но отсутствуют в дифференцированных вегетативных тканях [78, 86]. [c.213]

Установлено, что активность ингибиторов протеиназ в семенах начинает обнаруживаться, когда содержание сухого вешества составляет около 15 % [77]. [c.213]

Ингибиторы, действующие на пептидные связи (ингибиторы протеиназ). [c.235]

Семена вигны китайской, содержащие указанное выше количество ингибитора, нетоксичны для животных и человека. Впрочем, если бы такая опасность и существовала, можно было бы ограничить экспрессию гена ингибитора теми тканями растения, которыми предпочитают питаться основные насекомые-вредители, но которые не используют в пищу человек и животные. Так, клонированный ген ингибитора протеиназ мог бы работать в листьях и корнях растения, но не в его плодах. [c.393]

Природные ингибиторы протеиназ [c.338]

Ингибиторы протеиназ ---из плазмы спермы человека [c.338]

Можно считать установленным, что микроорганизмы имеют две системы общей деградации собственных белков. Одна из них активируется в условиях голодания и, видимо, не требует для функционирования затрат метаболической энергии. Другая, постоянно действующая система белковой деградации, служит для гидролиза аномальных белков, которые появляются в результате мутаций или ошибок биосинтеза, а также белков, играющих важную регуляторную функцию, время существования которых должно быть ограничено. Деятельность этой системы подавляется такими энергетическими ингибиторами, как цианиды или азиды. По-видимому, каждая из систем имеет свой набор протео-литических ферментов. Так, некоторые ингибиторы протеиназ подавляют протеолиз в условиях голодания, но не влияют на деградацию аномальных белков. [c.50]

В настоящее время ингибиторы гидролитических ферментов выделены из растений (бобов сои, семян раиса, картофеля, ржи, пщеницы, гречихи, черной и обыкновенной фасоли, зеленых листьев некоторых трав) или синтезированы [127, 128, 137] при приеме отмечено регулирующее влияние на секрецию панкреатических ферментов у людей [139]. Однако в клинической практике основными остаются ингибиторы протеиназ, выделенные из животного сырья (контрикал, тразилол, ини-прол), либо синтетические (аминокаироновая кислота). Номенклатура препаратов на основе ингибиторов протеиназ приведена в таб. 4. [c.236]

Преждевременное превращение таких проферментов, как трипсиноген, в активные протеиназы в поджелудочной железе может иметь губительные последствия. Чтобы предотвратить такую преждевременную активацию, поджелудочная железа должна вырабатывать также специфические ингибиторы. Панкреатический ингибитор трипсина представляет собой небольшой белок с мол. весом 6500, специфически связывающийся в активном центре трипсина (Л[г=10 М в щелочной среде) . Определение кристаллической структуры самого трипсина и его ингибитора показало, что эти две молекулы плотно прилегают друг к другуб. Ингибитор связывается таким образом, как будто он является пептидным субстратом один край молекулы ингибитора образует антипараллельную р-структуру с пептидной цепью фермента. Лизин-15, образующий часть этой р-структуры, входит в специфический связывающий центр для основной аминокислоты субстрата. Таким образом, ингибитор протеиназы представляет собой модифицированный субстрат, который фактически может подвергаться атаке в активном центре. Однако подгонка двух молекул является настолько тесной, что молекула воды не может участвовать в завершающей стадии каталитического акта, и комплекс остается нереакционноспособным. (В тонкой кишке количество ингиби- [c.113]

Ингибиторы протеиназ, блокирующие действие трипсина найдены также во многих растениях. Обычно наиболее высокая антипротеиназная активность обнаруживается в семенах и клубнях, но синтез ингибиторов протеиназ может быть индуцирован и в других частях растений повреждением поверхности. Возможно, эти ингибиторы защищают растения от насекомых . Была изучена структура соевого ингибитора трипсина и его комплекса с трипсином. Этот комплекс сходен с комплексом, включающим панкреатический ингибитор трипсина. Однако соевый ингибитор медленно расщепляется, и исследования дифракции рентгеновских лучей показали, что-комплекс существует в виде тетраэдрически связанного ад-дукта, как показано в уравнении (7-13). [c.114]

Еще сравнительно недавно протеиназы традиционно связывали только с процессами переваривания. В настоящее время появляется все больше данных о более широкой биологической роли протеолитических ферментов органов и тканей в регуляции ряда вне- и внутриклеточных процессов. Некоторые протеиназы выполняют защитную функцию (свертывание крови, система комплемента, лизис клеток), другие генерируют гормоны, токсины, вазоактивные агенты (ангиотензин, кинины). Ряд протеиназ регулирует образование пищеварительных ферментов, взаимодействие между клетками и клеточными поверхностями, процессы фертилизации (хитин-синтетаза) и дифференциации. Регуляция в большинстве случаев предусматривает превращение неактивного предшественника в активный белок путем отщепления ограниченного числа пептидов. Этот процесс, впервые описанный К. Линдерстрем-Лангом еще в 50-е годы, в последнее время называют ограниченным протеолизом. Значение его очень важно для понимания сущности биологического синтеза в клетках неактивных пре-и пробелков. Кроме того, этот процесс нашел широкое практическое применение в лабораториях и промышленности. В регуляции действия протеолитических ферментов участвуют также ингибиторы протеиназ белковой природы, открытые не только в поджелудочной железе, но и в плазме крови, курином яйце и т.д. [c.423]

Ингитрил (1пвНп1и1п) Легкие крупного рогатого скота Производства медпрепаратов при мясокомбинатах Ингибитор протеиназ Лиофилизиро-ванный порошок во флак. по 5 мл (6, 15 или 20 ЕД) Внутри- венно Ингибирующее протеолиз 56, 58 [c.173]

Домаш В.И. Участие белков-ингибиторов протеиназ в регуляции клеточного метаболизма//Тез. докл. 3 Съезда Всерос. о-ва физио.п. раст-Са и кт-Петербург 1993.-Вып. 1. -С.96. [c.244]

В. thuringiensis. Чтобы проверить, будет ли эта система функционировать в трансгенных растениях, был сконструирован фрагмент ДНК, кодирующий гибридный белок ингибитор протеиназ/укороченный токсин . Трансгенные растения табака, которые синтезировали небольшие количества такого рекомбинантного белка, были в значительной мере защищены от насекомых-вредителей. [c.394]

Каким образом ингибиторы протеиназ, ингибитор амилазы и холестеролоксидаза защищают растения от насекомых-вредителей [c.417]

В последние годы внимание многих исследователей обращено к регуляторным пептидам в связи с открывшимися возможностями медицинского их применения в качестве лекарственных препаратов, имитирующих действие эндогенных регуляторов организма. Как уже было сказано, большой класс нейропептидов обладает анальгезирующим действием, причем изучены молекулярные механизмы действия многих регуляторных пептидов. Так, установлено, что анальгетическое действие р-эндорфина связано с освобождением метэнкефалина в мозге. Для решения основной проблемы применения регуляторных пептидов в качестве лекарственных средств, а именно быстрой их деградации в организме используют метаболически стабильные структурные аналоги, а также ингибиторы протеиназ, катализирующих распад полипептидов до аминокислот. Эти ингибиторы, блокирующие также распад эндогенных энкефалинов, представляют собой особый класс анальгетиков смешанного типа. [c.28]

Препятствовать тромбообразованию могут также и белковые ингибиторы протеиназ — факторов свертывания крови. Среди них наиболее изучен антитромбин III он ингибирует все протеиназы каскада, за исключением Vila. Действие антитромбииа 111 усиливается полисахаридом гепарином. [c.237]

Основной трипсиновый ингибитор органов быка Двойной комплекс ингибитора Баумана — Бирка и химотрипсина Ингибиторы протеиназ широкой специфичности пз улитки (Helix pomatia) [c.337]

Используются в медицине ингибиторы протеиназ, в частности плазмина и трипсина. Если плазминоген крови активируется слишком интенсивно и в ней возникает слишком много плазмина, то при этом сильнодействующий фермент разрушит и фибриноген, и другие факторы из системы свертывания крови. При этом свертываемость крови сильно снижается и это часто является причиной обескровливания больных. Синтетический ингибитор — е-аминокапроновая кислота — тормозит активацию плазминогена в плазмин, а при более высоких концентрациях — и действие плаз.мина, предотвращая этим опасные изменения. Так называемый фактор Кунитца и Нортропа (инипрол) тормозит действие трипсина и химотрипсина. Он представляет собой полипептид (М = 6000) и используется при избыточном выделении ферментов, которое встречается при острых панкреатитах (заболеваниях поджелудочной железы, вырабатывающей целый ряд ферментов). Ингибиторы подобного рода защищают организм от ферментной интоксикации. [c.321]

Хольцер [2012] описал несколько протеиназ дрожжей, различающихся по специфичности и механизму действия и, по-видимому, ответственных за внутриклеточную деградацию белков. Были обнаружены пептиды, которые специфически ингибируют эти три фермента [2013]. Указанные протеиназы локализованы в вакуолях и, следовательно, изолированы от своих субстратов. Контроль процессов деградации би,лка может осуществляться в этом случае путем изменения кондентрации ингибиторов протеиназы (через изменение скорости их синтеза или распада) или самих протеиназ. В регуляции времени полуобновления ферментов эти эффекты следует рассматривать как дополнительные к способности субстрата подвергаться превращениям и компартментализации фермента и субстрата. [c.117]

Ингибитор протеиназы ВИЧ-вируса Убиквитин [c.217]

Наиболее богатым источником белковых ингибиторов сериновых протеаз является плазма крови. Содержание ингибиторов в плазме доходит до 10% от общего содержания белков [2758]. Наибольшую концентрацию в плазме имеет а,-антитрипсин (или -ингибитор протеиназ) [2761 1. Этит белок (М кДа ингиби рует ряд сериновых протеиназ, но подавляет, главным образом, активность лейкоцитарной эластазы [2762]. [Известна его полная аминокислотная последовательность [27631 и пространственная структура [2764,27651. В плазме со держатся также антитромбин III [27431, -антихимотрипсин [2751,2766], а -антиплазмин [2767,2768], ингибитор белка С [27691, ингибитор С1-фактора комплемента [2742,2770] и ряд других ингибиторов системы комплемента [2771, 2772]. [c.257]

Хотя эта гипотеза еще не может считаться окончательно доказанной, она подтверждается целым рядом экспериментов. Часть таких экспериментов основана на применении агентов, избирательно связывающих ионы кальция. Подведение этих агентов к клеткам, реагирующим на глутамат, нарушает состояние повышенной проводимости синаптического аппарата. Ингибитор протеиназ — лей-пептин — в ряде случаев препятствует формированию памяти. Кроме того, при электронно-микроскопическом анализе постсинаптических мембран глутаминергических синапсов показано, что после прохождения нервных импульсов здесь увеличивается число малых отростков, которые, по всей вероятности, являются рецепторами глутамата. Наконец, показательно, что под влиянием ионов кальция связывание глутамата увеличивается именно в тех областях мозга, которые, судя по нейрофизиологическим данным, принимают наиболее активное участие в процессах обучения и консолидации, а именно, в коре и гиппокампе. [c.382]

Аффинный сорбент, полученный путем иммобилизации данного ингибитора на faкpoпopи тoм силикагеле, испытан при лечении экспериментального острого панкреатита у собак. В результате лечения иммобилизованными ингибиторами все собаки выжили, в то время как нелеченные животные погибали в течение суток. Очень существенно, что при применении колонок с иммобилизованными ингибиторами протеиназ форменные элементы крови и уровень общего белка оставались без изменений и не уменьшалась антипротеолитическая активность крови. [c.133]

Как уже отмечалось в гл. 1, серьезным препятствием при получении штаммов-сверхпродуцентов может явиться протеолиз чужеродных белков в клетке. Так, есть данные о том, что время полужизни человеческого проинсулина в клетках Е. соИ составляет всего 2 мин (К-Talmadge, W. Gilbert, 1982). Для стабилизации чужеродных белков и пептидов можно получить мутации типа Ion или hptR и (или) клонировать в реципиентный штамм гены, контролирующие синтез ингибиторов протеиназ (например, ген pin фага Т4). [c.159]

Наиболее простой путь для преодоления этой проблемы- предварительное разделение активностей NPT-II и АТРазы. Для этого разработан ряд методов, наиболее удобный из которых основан на фракционировании с помощью неденатурирующего электрофореза в полиакриламидном геле [46]. Из исследуемого материала на холоду в присутствии смеси ингибиторов протеиназ готовят бесклеточные экстракты и фракционируют их методом электрофореза. Гель, содержащий фракционированный экстракт, вынимают из прибора и уравновещивают соответствующим буфером, который используют для проведения реакции. Фермент затем должен взаимодействовать с кофакторами и субстратами это достигается путем иммобилизации их в слое агарозы, плавящейся при низких температурах. На поверхность акриламидного геля наливают агарозу, и она застывает. Реакцию проводят, как и в обычной жидкой фазе, и образующийся в результате фосфорилированный канамицин переносится затем с геля на лист фосфоцеллюлозной бумаги посредством капиллярных сил, как при блоттинге по Саузерну. Бумагу затем npoj мывают, как описано выще, но в данном случае радиоактивный канамицин выявляют радиоавтографией. Судя по сообщениям, чувствительность данного метода позволяет в оптимальных условиях (чистый препарат фермента) обнаружить 1 нг активного фермента, но значительно снижается при использовании неочищенных препаратов. Известен и другой метод определения NPT-II с помощью специфических антител и вестерн-блоттинга (разд. 6.8). [c.347]

Большая скорость десорбции антител (иммунных комплексов), установленная в опытах in vitro, возможно, связана с их расщеплением протеиназами, находящимися в лимфоидных клетках. Этому благоприятствуют условия культивирования клеток, а именно, низкая концентрация сыворотки в среде, поскольку при этом низка концентрация содержащихся в сыворотке ингибиторов протеиназ. Действительно, инкубация при 37° С клеток селезенки иммунизированных мышей в цельной изологичной плазме крови резко замедляет процесс десорбции с поверхности клеток антител (иммунных комплексов). Значит, в организме антитела или их комплексы с антигеном могут продолжительное время оставаться сорбированными на поверхности лимфоцитов. Такие клетки способны взаимодействовать с антигеном, не будучи прекоммити-рованными к синтезу антител и рецепторов к этому антигену. [c.150]

Готовят 5%-ный раствор твина-40 в буфере трис/140 мМ Na l, pH 7,4 (для растворения твина-40 смесь надо подогреть, а после растворения вновь охладить). Добавляют равный объем раствора твина-40 к взвеси или гомогенату клеток. На этом этапе можно ввести ингибиторы протеиназ, например, 2,5 мМ иодоацетамида и 0,5 мМ ФМСФ. [c.189]

Супернатант наносят на колонку с иммобилизованными антителами или замораживают и хранят при —40 °С. После размораживания к препарату нужно вновь добавить ингибиторы протеиназ (1 мМ иодоацетамида и 0,2 мМ ФМСФ), перемешать в течение часа и затем центрифугировать, как описано выше. После размораживания в препарате всегда присутствует некоторое количество нерастворимого материала, однако потери антигенной активности при замораживании — оттаивании мы не отмечали. [c.190]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология