Алкогольоксидаза

В химической промышленности техническая уксусная кислота производится окислением ацетальдегида. Пищевую же уксусную кислоту получают окислением этилового спирта под действием фермента алкогольоксидаза, вырабатываемого уксусно-кислыми бактериями [c.428]

Биосенсоры на основе электрода Кларка позволяют определять лактаты, Ь-аминокислоты, салицилаты, оксалаты, пируваты (табл. 14.1). В основном применяются оксидазы (холестериноксидаза, пероксидаза, оксидазы аминокислот, алкогольоксидаза и др.), гид- [c.501]

Разработан датчик для определения этанола в крови. Для этого используют иммобилизованнзто на поверхности платинового электрода алкогольоксидазу. При потенциале -0,6 В контролируют убыль кислорода, пропорциональную содержанию этанола [c.502]

Реакцию образования уксусной кислоты катализирует фермент алкогольоксидаза. Уравнение реакции имеет вид [c.144]

Для создания тест-систем удобны не нативные (в свободном состоянии), а иммобилизованные ферменты, притом наиболее устойчивые и относительно недорогие (хотя ферменты практически всегда дороже обычных химических реагентов). Известно применение пероксидазы, глюкозоксидазы, уреазы, холинэстеразы, моноаминоок-сидазы, алкогольоксидазы, лактатдегидрогеназы, липазы, эстеразы, диафоразы, каталазы, дегидрогеназы. [c.217]

Этанол, алифати- ческие спирты Алкогольоксидаза. пероксидаза, о-дианизидин А I - Растворы [c.240]

Алкогольоксидаза, пероксидаза, 2,6- дихлорфенолиндофенол А 1 Растворы [c.240]

Алкогольоксидаза, пероксидаза, 1,7-дигидроксинафталин, 4-аминоантипирин А I Растворы [c.240]

Алкогольоксидаза, пероксидаза, 3,5-дихлоро-2-гидроксибензол-сульфокислота, З-метил-2-бензотиазолин гидразон А 1 (20 мМ) Растворы [c.240]

Алкогольоксидаза, пероксидаза, билирубин А 1 10-2000 Растворы [c.240]

Для определения спиртов чаще всего используют ферментативные реакции с алкогольоксидазой как селективным ферментом [4]. [c.244]

Весьма перспективны такие ферменты микроорганизмов, как холестеринок-сидаза, для определения холестерина в крови, алкогольоксидаза для обнаружения спирта и др. Ферменты используют также для изучения первичной структуры высокомолекулярных соединений нуклеиновых кислот, белков, полисахаридов. [c.63]

Уксуснокислое брожение Если брожение осуществляется в присутствии кислорода, то в качестве основного продукта получают уксусную кислоту В атмосфере воздуха возникающий в процессе брожения спирт окисляется кислородом при катализе алкогольоксидазой, выделяемой уксуснокислыми бактериями (A etoba ter) [c.780]

Дрожжи, использующие метанол, могут быть источником флавинов и каталазы. Алкогольоксидазу дрожжей предлагают использовать в аналитических целях для определения содержания этанола. [c.152]

Алкогольоксидаза локализуется в пероксисомах, которые имеют кристаллическую структуру. Именно пероксисомы помогают удалять Н2О2 из микроорганизма (рис. 7.9). [c.169]

Алкогольоксидаза катализирует окисление первичного алифатического спирта с небольшим числом атомов углерода. Протекает следующая реакция [c.88]

Иммобилизованную алкогольоксидазу распределяют по поверхности платинового электрода (Бекман 39273) под найлоновой пленкой, прикрепленной к корпусу электрода эластичными кольцами электрод хранят в буферном растворе (0,1 М фосфатный буфер, pH 8,2) при комнатной температуре. [c.88]

На рис. 7.1 показано изменение тока ферментативного электрода во времени. Добавленный в буферный раствор этанол диффундирует в слой химически связанной алкогольоксидазы и под действием растворенного кислорода превращается к перекись водорода и ацетальдегид. [c.89]

Кривая 1 на рис. 7.1 описывает поведение электрода через 7 дней после изготовления, при потенциале -1-0,6 В по нас. к. э. Характер кривой явно свидетельствует об образовании перекиси водорода на иммобилизованной алкогольоксидазе. Однако через 12 дней ферментный электрод не реагирует на присутствие этанола при +0,6 В по нас. к. э. В то же время при потенциале —0,6 В по нас. к. э. электрод становится более чувствительным, следовательно, фермент потребляет растворенный кислород быстрее, чем на нем накапливается перекись водорода. Установлено, что начальная скорость снижения концентрации кислорода, или начальная скорость ферментативной реакции (что то же самое), пропорциональна количеству добавленного этанола на электродах, изготовленных более чем за две недели до начала эксперимента [255]. [c.89]

Известно, что алкогольоксидазы специфичны по отношению к низшим первичным алифатическим спиртам [256 — 258]. Однако ферментный электрод обладает слабой чувствительностью к метанолу при — 0,6 В по нас. к. э. Скорость реакции максимальна при —0,6 В по нас. к. э. при концентрации метанола 0,5 моль/л, а затем падает. Следовательно, при указанной концентрации доминирует образование, а не потребление перекиси водорода [255]. [c.90]

Этот электрод успешно применялся для определения этанола в крови. Ошибка при определении этанола в сыворотке крови может быть обусловлена, во-первых, непосредственной реакцией фермента с другими субстратами и, во-вторых, расходом кислорода на неферментативные реакции, например с аскорбиновой кислотой или цистеи-ном. В первом случае некоторые карбоновые кислоты и оксикислоты (уксусная, муравьиная, молочная, оксимасляная, пировиноградная и хлоруксусная кислоты) окисляются алкогольоксидазой и тем самым мешают определению спирта в крови. Мешающее действие молочной кислоты, содержащейся в сыворотке крови, можно снять, добавив к пробе перед анализом лактатдегидрогеназу. Во втором случае мешающие вешества предварительно определяют при тех же условиях с платиновым электродом в отсутствие фермента [255]. Установлено, что ни одно из веществ, обычно имеющихся в крови, например аскорбиновая кислота, цистеин, фенилаланин, глюкоза, мочевая кислота, не реагирует на электроде. В то же время ферментный электрод чувствителен к альдегидам и карбоновым кислотам так же, как и к спиртам, и поэтому его можно использовать для определения и альдегидов, и кислот. [c.90]

Алкогольоксидаза катализирует окисление низших первичных алифатических спиртов в соответствии с реакцией [c.340]

Иммобилизацию алкогольоксидазы осуществляли посредством растворения энзима (100 мг) и альбумина плазмы (100 мг) в 5 мл фосфатного буфера (0,1 М, pH = 8,2), после чего добавляли пять капель глутарового альдегида и смесь тщательно перемешивали. Раствор замораживали охладительной смесью сухого льда и ацетона, а затем медленно размораживали в холодильнике в течение дня. Губчатый полимер промывали буферным раствором, наносили на поверхность платинового электрода и хранили в буферном растворе. Изготовленный таким образом электрод и каломельный электрод сравнения помещали в перемешиваемый буферный раствор и прикладывали потенциал —0,6 В (против НКЭ). Когда ток достигал постоянного уровня, добавляли исследуемый раствор (0,01—0,1 мл) и, как и прежде, измеряли начальную скорость изменения тока и конечное значение тока в стационарном состоянии. По калибровочным кривым находили количество субстрата в исследуемом образце [57 ]. [c.341]

Электроды с алкогольоксидазой обратимы не только к спиртам, но и к альдегидам, и карбоновым кислотам. Чувствительность электрода к формальдегиду, ацетальдегиду, уксусной и муравьиной кислотам такая же, как к этанолу [57 ]. Если задавать электроду потенциал 0,6 В (против НКЭ) вместо —0,6 В, можно судить о количестве альдегидов и кислот в исследуемом растворе по скорости образования Н2О2 в ферментативной реакции. [c.341]

Селективность электродов к различным субстратам алкогольоксидазы характеризуют данные табл. XI.3. Избирательность по [c.341]

Большой интерес представляет приведенное Бухнером и его сотруд-никaми доказательство, что уксуснокислое брожение спирта определяется деятельностью оксидазы. Эту оксидазу, которая была названа алко-гольоксидазой, можно получить из убитых ацетоном колоний уксуснокислых бактерий. Указанные авторы нашли в обработанных ацетоном уксуснокислых бактериях оксигеназу, пероксидазу и каталазу, и считают возможным, что алкогольоксидаза не является индивидуальным ферментом. Сок, получающийся при отжатии уксуснокислых бактерий под прессом, не оказывает никакого окисляющего действия на спирт в присутствии воздуха. Таким образом, алкогольоксидаза либо разрушается при приготовлении сока, либо, как нерастворимое вещество, остается в остатке после прессования. [c.30]

Работы Г. Бертрана дали сильный толчок исследованию вопроса об окислительных ферментах и привели к открытию целого ряда оксидаз, К. Оппенгеймер ( Die Fermente und ihre Wirkungen ) дал следующую классификацию их 1. фенолаза 2. тирозиназа 3. алкогольоксидаза [c.73]

Причинная связь между образованием уксусной кислоты из спирта и присутствием уксусных бактерий была установлена Пастером. Как известно, Пастер был строгим виталистом и смотрел на брожение, как на функцию живой клетки. Замечательно, однако, что при объяснении уксуснокислого брожения Пастер сильно смягчил свои виталистические воззрения. Принимая во внимание тот факт, что окисление спирта в уксусную кислоту можно произвести при помощи платиновой черни и других катализаторов, он допускал возможность, что ири уксусном брожении клетка каталитически содействует окислению спирта. Э. Бухнеру наука обязана установлением того огромной важности факта, что уксусное брожение, как и спиртовое брожение сахара, не есть неотделимый от жизни процесс, что оно остается в силе и после умерщвления клетки. Лучшим способом для умерщвления клетки является обработка бактериально культуры ацетоном, который не оказывает почти никакого действ 1я на фермент, вызывающий окисление С1 ирта в уксусную кислоту. Фермент этот Бухнер назвал алкогольоксидазой. [c.78]

Алкогольоксидаза не содержит марганца, но содержит железо. Она чувствительна к кислотам и окисляет 4%-ный раствор спирта лучше всего в присутствии мела. Кроме этилового спирта, она может окислять и другие спирты (амиловы ). [c.78]

Алкогольоксидаза была найдена в животных тканях Бателли и сотр. Больше всего алкогольоксидазы содержит печень лошади. 100 г печени окисляют в течение часа при 40° от 0.15 до 0.20 г этилового спирта. Другие органы содержат значительно меньше этого фермента или совсем ого не содержат. [c.78]

Алкогольоксидаза растворима в воде. В твердом состоянии ее можно получить, обрабатывая мелкоизрублонную печень двойным объемом ацетона. По окислительное действие этого препарата на спирт быстро уменьшается и через короткое время совсем исчезает нагреванием до температуры кипения алкогольоксидаза разрушается. [c.78]

Действие солей на даваемые ею первичные продукты окисления еще более явственно, чем при фенолазе, но заменить здесь соли пероксидазой или оксигеназу перекисью до сих пор не удалось. Что касается алкогольоксидазы и пуриноксидаз, то они еще слишком мало исследованы, чтобы можно было высказать какое-либо заключение относительно их состава. [c.97]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология