Смолы антигены

Для проведения реакции используют боратный раствор хлорида натрия (pH 8,2), для получения которого смешивают 50 мл 0,1 М раствора борной кислоты, 5,9 мл 0,1 М раствора гидроксида натрия и 100 мл дистиллированной воды с последующим добавлением 0,85 г хлорида натрия на каждые 100 мл смеси. Из технического латекса (синтетическая смола, имеющая вид жидкости молочно-белого цвета) готовят рабочее разведение на дистиллированной воде, причем дивинилстирольный латекс разводят I 20, полистирольный —1 2. Антигеном служит жидкость из эхинококкового пузыря человека или овцы. [c.386]

В качестве примера можно привести хроматографию специфических антител из образцов плазмы на смоле, имеющей в качестве активного участка специфический антиген [132, 133], который можно затем удалить. [c.37]

Промышленными химическими аллергенами, как правило, являются низкомолекулярные простые химические соединения. То, что во многих случаях сенсибилизацию вызывают сложные промышленные продукты (замасли-ватели, смазки, компаунды, пропитки и т. д.) или полимерные материалы (синтетические ткани, кожи, облицовочные, строительные и протезные медицинские материалы, лаки, клеи, смолы, эластомеры, резины и т. д.), по-видимому, в большинстве случаев обусловлено комбинированным (реже изолированным) действием мигрирующих из них в окружающую среду химически простых ингредиентов. Конечно, полностью отрицать возможность существования полноценных химических антигенов нельзя, поскольку некоторые сложные и полимерные продукты расщепляются в организме до достаточно крупных молекул, содержащих специфическую детерминанту и могущих сами по себе возбуждать иммунный ответ. Подтверждением этого являются данные об иммуноген-ности искусственных сополимеров, аналогичных некоторым промышленным аллергенам, например сополимер стирола и малеинового ангидрида. [c.10]

С некоторым успехом проведены изоляция и частичная очистка вирусов достигнуто и удаление некоторых примесей из вирусов на ионитах с оставлением очищенного вируса в растворе. В некоторых случаях полезной оказалась комбинация этих методов. Кроме того, специфическая адсорбция вирусов на ионитах по типу реакций антиген-антитело достигнута на специальных смолах. [c.621]

В процессе пропускания концентрата через смолу теряется 30% -антигенной активности. Мы попытались снизить процент потерь, пропуская через смолу после концентрата раствор элюента. Путем применения в качестве элюента Vis М раствора фосфатного буфера (pH 7,6) нам удалось снизить потери (до 13—20%). [c.221]

Успехи ионообменной хроматографии были в значительной мере обусловлены синтезом ряда специальных ионообменных полимеров или смол (ионитов). Различают два основных вида ионитов 1) катиониты, способные к обмену катионов, представляющие собой сетку высокомолекулярных полиэлектролитов с многочисленными сульфогруппами (рис. 105), карбоксильными группами и др. (амберлит JR-100, дауэкс-50, отечественные КБ-4, СБС и др.) 2) аниониты, способные к обмену анионов (0Н , С1 и др.) и представляющие собой сетку высокомолекулярных катионов (амберлит JRA-400, дауэкс-2, вофатит-М, отечественные ЭДЭ-10, ПЭК и др.). Поглотительные емкости ионитов доходят до 3—10 миллиграмм-эквивалентов на 1 г ионита. Имеются также окислительно-восстановительные иониты (получаемые поликонденсацией гидрохинона, пирогаллола и пирокатехина с формальдегидом и фенолом), иониты с оптически активными группировками (для разделения оптических изомеров), иониты с антигенными группировками (для отделения антител) и др. [c.239]

В. М. Лауфер показали, что необходимо специальное исследование физиологической безвредности ряда анионитов, например, ММГ-1, ТН и других. Во всяком случае, применение ионитов, открывает новые возможности перёд медициной и позволяет вмешиваться по новому в ряд важных биохимических и физиологических процессов, протекающих в организмах человека, животных и растений. Метод ионного обмена позволяет более тонко и дифференцированно изучать различные процессы жизнедеятельности, протекающие в организме. Наиболее важным является возможность разделения, концентрирования аминокислот, витаминов, антибиотиков. Ионообменные смолы можно также применять для медицинской диагностики различных заболеваний, для очистки антител при помощи антигенов, связанных с зернами ионитов, и в других случаях. [c.276]

Выявление внутриклеточных антигенов [89] в интактных бактериях представляет собой более сложную задачу, чем локализация поверхностных антигенов, так как антитела не способны проходить через интактную клеточную оболочку. Поэтому методы решения задач такого рода опираются прежде всего на приготовление тонких срезов бактерий, переносимых затем на поверхность растворов с мечеными антителами, после чего следует промывка, иногда окрашивание и затем исследование с помощью электронного микроскопа. Главная трудность заключается в выборе среды для заливки, которая должна давать доступ для связывания антителам в водном растворе. В этих целях испробовано много различных веществ (метакрилаты, сшитый альбумин, различные протравленные пластмассы и эпоксидные смолы), но ни одно из них не может считаться удовлетворительным во всех отношениях в этой области необходимы дальнейшие исследования. Интересующиеся могут получить общее представление о методах и проблемах иммуноцитохимии или иммуноэлектронной микроскопии, изучив предлагаемую литературу [87—91]. [c.126]

Заполните колонку смолой с иммобилизованным антигеном до такой высоты, чтобы скорость протекания составляла не более 1 мл/мин. [c.167]

Для заполнения колонки смолу суспендируйте в PBS промойте колонку для удаления нековалентно связавшегося антигена. Для предотвращения возможного загрязнения элюируемых антител свободным антигеном проводите элюцию буфером с высокой ионной силой (например, содержащим [c.167]

Перед использованием матриксы, особенно сыворотки, должны быть проверены на патогены, например на поверхностный антиген вируса гепатита, а также соответствующим образом обработаны с целью удаления или снижения до минимума содержания определяемого вещества. Для этих целей используют обработку антителами, активированным углем, силикагелем и ионообменными смолами. Некоторые из этих методов и реагентов дают плохо воспроизводимые результаты например, различные партии активированного угля имеют различные адсорбционные характеристики. Большинство методов, разработанных для удаления определяемого вещества из сыворотки в промышленном масштабе, хранится в секрете. [c.28]

Выделение чистых И. проводится с помощью ионообменных смол с послед, гель-фильтрацией. Для мн. целей используют препараты миеломных И., особенно минорных классов. Антитела выделяют с помощью иммуносорбентов - фиксированных на нерастворимых носителях (напр, целлюлозе) антигенов. Обнаружение и количеств, определение И. разных классов проводят иммунологич. методами с помощью соответствующих антисывороток. Для определения кол-ва антител используют методы преципитации (иммунная р-ция осаждения антигена антителом), агглютинации (взаимод. антитела с двумя клетками), нейтрализации бактерий и вирусов и др. Широкое распространение получают радиоиммунные и ферментно-иммунные методы, обладающие исключительно высокой чувствительностью и позволяющие определять очень малые кол-ва антител (или антигенов) в смесях с др. в-вами. [c.217]

В основе принципа аффинной хроматографии лежит отличительная особенность биологически активных веществ образовывать стабильные, специфические и обратимые комплексы. Если иммобилизовать один из компонентов комплекса, то получится специфический сорбент для второго его компонента, при этом, разумеется, предполагается, что соблюдаются все условия, необ.ходимые для образования этого комплекса. Связывающие участки иммобилизованных веществ должны сохранять хорошую стерическую доступность для второго участника комплекса даже после связывания с нерастворимым носителем и не должны деформироваться. Примерами первых специфических сорбентов, приготовленных путем ковалентного связывания с нерастворимым носителем, были иммобилизованные антигены (Кемпбелл и др. [5]) . Методы, созданные для присоединения антигенов и антител к нерастворимым носителям, были сразу же применены для получения иммобилизованных ферментов. В то же время ранее предложенный азидный способ привязки ферментов к целлюлозе [25] стал использоваться для приготовления иммуносорбентов. Параллельное развитие обоих направлений, основанных на использовании связывания биологически активных веществ с нерастворимыми носителями, наглядно демонстрируют названия первых обзорных статей Реакционноспособные полимеры и их использование для приготовления смол с антителами и ферментами (Манеке [23]), Водонерастворимые производные ферментов, антигенов и антител (Сильман и Качальский [39]) и Химия и использование производных целлюлозы для изучения биологических систем (Великий и Витол [47]). Оба направления продолжали развиваться параллельно и после открытия других более эффективных носителей и разработки методов связывания, позволяющих сохранять свойства иммобилизуемых веществ в растворе. [c.11]

Были сделаны попытки применения образующегося in vivo конъюгата, выделяемого из тканей лабораторных животных. Так, мы использовали в РПГА в качестве антигенов экстракты кожи морских свинок, смазанной 10% ацетоновыми растворами ДНХБ, эпоксифурфурило-вого эфира или эпоксидной смолы ДЭГ-1. Хотя, по нашим данным, такие антигены и не уступают в чувствительности искусственным конъюгатам [10], приготовление их достаточно сложно, так как различные химические аллергены образуют конъюгаты с различными белковыми фракциями эпидермиса и дермы, и скорость их всасывания колеблется в широких пределах [6]. Следовательно, и этот путь не подходит для практических целей. [c.216]

В качестве исходного материала для работы со смолой применяли первичный концентрат анатои сина, который получали при осаждении нативного анатоксина liV соляной кислотой в изоэлектрической точке и растворении полученного осадка в физиологическом растворе-(в объеме V30 от исходного объема анатоксина). Опыты проводили в статических и динамических условиях. Антигенную активность анатоксина определяли в опытах in vitro по лев итовителлиновой реакции, цветность — на фотоэлектроколориметре М-1, pH — на потенциометре. [c.220]

Было испытано шесть различных катионитов и анионитов в статических условиях. Положительный результат был получен только со смолой НО. Остальные смолы оказались непригодными одни из них вызывали осаждение анатоксина (КУ-1, КУ-9), другие не адсорбировали ни анатоксин, ни пигмент (анионит Декальсо), третьи адсорбировали преимущественно анатоксин. При использовании смолы НО (2,0 г на 10,0 мл концентрата время контакта — 15 мин.) был получен менее пигментированный (с оптической плотностью, в 3—4 раза меньшей но сравнению с исходным концентратом), лучше фильтруемый анатоксин (вЗ раза быстрее). Потери антигенной активности при этих условиях были равны 20-30%. [c.220]

Эта Методика аналогична описанной для белковых антигенов. Ей следует отдать предпочтение в том случае, когда требуется максимальная чувствительность теста. Эритроциты,, фиксированные диметилсуберимидатом, тоже могут быть нагружены, с помощью хлорного хрома [17], однако эта методика обладает незначительными преимуществами. Она может использоваться для количественного определения антигенов в в клеточных. э к страктах, содержащих неионные детергенты, но если избыток детергента удаляется при до бавлении смолы, То можно Использовать и обычные нефиксированные нагруженные антителами клетки [25]. [c.263]

Как в РИА, так и в ИФА критической является стадия разделения связанного и несвязанного лиганда (Rateliff, 1976 Odell et al., 1975 ollins et al., 1975). Наиболее широкое при- менение в РИА малых антигенов получил метод разделения при помощи адсорбции. Этот метод основан на отделении метки, не связавшейся с антителами, за счет адсорбции на таких носителях, как древесный уголь с декстрановым покрытием, тальк, смолы он привлекает своей простотой и воспроизводимостью. Разработанные на сегодняшний день ва- рианты ИФА, за исключением гомогенного ИФА, основаны главным образом на осаждении вторыми антителами или ад- [c.257]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология