Антигены внутриклеточные

Эти сложнейшие биополимеры выполняют в организме жизненно важные функции они входят в состав клеточных и внутриклеточных мембран, являются антигенами и т. д. Присутствие большого количества гликолипидов в высших отделах нервной системы невольно ассоциируется с особыми функциями мозга. [c.586]

IgG — локализован во внутриклеточных жидкостях организма. В больших количествах синтезируется при вторичном иммунном ответе. Активирует комплемент, способствует массовому фагоцитозу антигенов. Состоит из одной субъединицы с молекулярной массой 150 kDa. [c.485]

Антитело — это молекула, синтезируемая организмом животного в ответ на присутствие чужеродного вещества, называемого антигеном. Антитела представляют собой белки, известные как иммуноглобулины. Молекула любого иммуноглобулина состоит из двух тяжелых (Н-цепи) и двух легких (Е-цепи) полипептидных цепей (рис. 14.38). В ней различают константные (неизменные) и вариабельные (изменчивые) участки. Последние и распознают строго определенный антиген, структурно соответствующий им, как ключ замку, а проще говоря, — связывают его. Человеческий организм способен образовать примерно 100 млн. различных антител, распознающих практически любые чужеродные вещества, в том числе и те, с которыми мы никогда не сталкивались. Это возможно благодаря своего рода внутриклеточной перетасовке частей генов, кодирующих вариабельные области иммуноглобулинов (аналогично сборке разных конструкций из стандартного набора деталей). [c.175]

Общий антиген (меченное вещество, специфически осаждаемое антисывороткой к фагу Т2 освобождается при искусственном лизисе клеток Е. соН, зараженных в среднем пятью частицами фага Т2 па клетку). Зараженные бактерии выращиваются в минимальной среде, к которой в момент заражения добавлены II. Избыточный антиген — разность между числом фаговых диниц общего антигена на клетку и числом внутриклеточных инфекционных частиц на клетку в разные моменты времени. ( Фаговая единица — это количество серы, присут- ствующее в одной частице фага, или 1.5-10—мкг.) Ill — инфекционное потомство фага. [c.267]

Выявление внутриклеточных антигенов [89] в интактных бактериях представляет собой более сложную задачу, чем локализация поверхностных антигенов, так как антитела не способны проходить через интактную клеточную оболочку. Поэтому методы решения задач такого рода опираются прежде всего на приготовление тонких срезов бактерий, переносимых затем на поверхность растворов с мечеными антителами, после чего следует промывка, иногда окрашивание и затем исследование с помощью электронного микроскопа. Главная трудность заключается в выборе среды для заливки, которая должна давать доступ для связывания антителам в водном растворе. В этих целях испробовано много различных веществ (метакрилаты, сшитый альбумин, различные протравленные пластмассы и эпоксидные смолы), но ни одно из них не может считаться удовлетворительным во всех отношениях в этой области необходимы дальнейшие исследования. Интересующиеся могут получить общее представление о методах и проблемах иммуноцитохимии или иммуноэлектронной микроскопии, изучив предлагаемую литературу [87—91]. [c.126]

Первичное введение антигена в интактный организм приводит к его захвату макрофагами, внутриклеточной деградации части антигена и экспрессии образующихся антигенных фрагментов (пептидов) на клеточной поверхности в комплексе с молекулами И класса МНС (рис. 9.4). Комплекс пептид молекула II класса распознается наивными D4 Т-клетками (ТнО), которые дифференцируются в D4 Т-клетки воспаления (Тн1) и хелперные D4 Т-клетки (Тн2). При повторном введении того же самого антигена дифференцированные Тн1 и Тн2 быстро вступают в реакцию взаимодействия с макрофагом, поглотившим антиген. Результатом [c.205]

Антитела других изотипов (IgG, IgA, IgE), имея меньший молекулярный вес и соответствующие молекулярные механизмы взаимодействия с эпителиальными клетками (см. ниже), значительно легче преодолевают клеточные барьеры и достаточно широко распространяются по организму из мест синтеза. Другой отличительной чертой антител этих изотипов является их большая по сравнению с IgM аффинность. Как отмечалось выше, два процесса — переключение внутриклеточного синтеза иммуноглобулинов с одного изотипа на другой и селекция клонов по признаку наибольшего сродства к антигену — требуют времени, но при этом потеря времени компенсируется у рассматриваемых изотипов повышением аффинности и проницаемости через эпителий, что говорит об их большей функциональной активности. [c.254]

Таким образом, как сами инфекционные агенты при внеклеточном паразитизме, так и контролируемые их геномами антигены в сочетании с антигенами хозяина (внутриклеточный паразитизм) служат источником перекрестно реагирующих антигенов, способных сорвать состояние толерантности к собственным антигенам макроорганизма. [c.236]

В. Выявление внутриклеточных антигенов [c.177]

В. Выявление мембранных и внутриклеточных антигенов в одной и той же клетке [c.178]

Иммунофлуоресцентное окрашивание с помощью поликлональной антисыворотки представляет собой удобный и точный метод подсчета зараженных клеток и выявления места размножения вируса при анализе фиксированных срезов зараженных тканей. Используя моноклональные антитела против индивидуальных вирусных полипептидов, иммунофлуоресцентным методом можно изучать и внутриклеточную локализацию вирусных антигенов. [c.139]

Предназначение иммунной системы — сохранение антигенного постоянства клеток и тканей многоклеточного организма в течение его жизни. Основные задачи иммунитета заключаются в защите от 1) мутантных или состарившихся своих клеток 2) вторжения генетически чужеродных клеток, способных самостоятельно размножаться в организме, в частности от микроорганизмов, простейших, дрожжей, грибов, а также продуктов их жизнедеятельности 3) многоклеточных агрессоров , например гельминтов, и клеток или тканей любых других организмов 4) внутриклеточных паразитов, вирусов, риккетсий, лептоспир. [c.8]

Т-Киллер (первый) может служить мишенью для другого Т-киллера (второго), специфичного к антигенам поверхности первого. В этом случае установление контакта приводит к векторным изменениям. Переориентация внутриклеточных органелл происходит только во втором киллере, а гибнет только первый (рис. 33). [c.79]

Т-лимфоциты защищают организм от клеточных инфекций, в частности от внутриклеточных паразитов (микробных клеток, живущих внутри кле-ток-хозяев). Т-лимфоциты могут узнавать инфицированную клетку, если соответствующий антиген расположен на ее поверхности. Контакт с антигеном является ключевым моментом активации Т-клеток и их клонального отбора. Взаимодействие с антигеном возможно только в комплексе с поверхностными маркерами, которыми являются группы белков гистосовместимости МНС (от англ. Major histo ompatibility omplex). Идентифицированы гены, кодирующие три класса белков МНС, при этом во взаимодействии с антигеном принимают участие белки только классов 1 и 2. [c.477]

Для люминесцентной метки белков применяют флуорохромы изоцианат и изотиоцианат флуоресцеина, некоторые производные родамина, в том числе изоцианат тетраметилродамина, хлорид диметил-нафтил-ами-но-сульфокислоты и ядерный красный прочный. Наиболее широко используется изоцианат флуоресцеина. Его растворяют в смеси диоксана с ацетоном и в таком виде соединяют с белком (обычно глобулиновой фракцией в количестве 5 мг флуорохрома на 100 мг белка) при температуре О—5° С, перемешивая в течение 18 часов. Полученный коньюгат белка с флуоресцеином освобождают от несвязавшегося красителя сначала с помощью диализа против забуференного при рН=9,0 физиологического раствора. Дальнейшая очистка от избыточного красителя производится переосаж-дением белка сульфатом аммония (4—5 раз), пока надосадочная жидкость не перестает люминесцировать. Препараты (мазки, суспензии, замороженные срезы), как фиксированные ацетоном, так и нефиксированные, приводят в соприкосновение с люминесцентно-меченым белком в течение 30 минут, промывают в физиологическом растворе (рН=7ч-7,5) и заключают в забу-ференный глицерин. Исследовать такие препараты лучше при ультрафиолетовом возбуждении. Соответствующие антигены при этом люминесцируют очень ярко светло-зеленым светом. Этот метод позволяет определять внутриклеточную локализацию чужеродных полисахаридов и белков, ферментов и гормонов, устанавливать антигенное родство тканей и клеток, быстро идентифицировать под микроскопом бактерии й вирусы. [c.317]

Гликолипидами назьгвают соединения, молекулы которых содержат липидный и углеводный фрагменты, соединенные ковалентной связью. Гликолипиды охватывают разнообразные по структуре соединения и представлены в различных организмах животного, растительного и бактериального происхождения. В последнее время значительно возрос интерес к данному классу соединений, что обусловлено их важной биологической ролью. Полагают, что гликолипиды выполняют как метаболические, так и структурные функции. Они входят в состав клеточных и внутриклеточных мембран, обладают антигенными свойствами [ИО]. [c.259]

Одна из линий исследования внутриклеточных предшественников фагового белка основывалась на использовании того факта, что Т-четные фаги обладают ярко выраженными антигенными свойствами. При инъекции фаголизата кролику или лошади ( )тги вызывают специфическую иммунологическую реакцию у животного. Иными словами, в сыворотке крови иммунизированного животного появляется класс глобу-лярШ)1х белков, или антител, обладающих специфическим сродством к белкам фага и способных, следовательно, сиеи.ифически соединяться с ними. (П ои,есс образования антител более подробно будет рассматрив.ать-ся в гл. XXI.) [c.266]

Зрелые Т-клетки, имеющие D8, узнают антиген, связанный с белками МНС класса II. Первые - это клетки-киллеры или Т-цитотоксические клетки, вторые - Т-хелперы [283-285]. Итак, функционирование белка D8 обусловлено его ассоциацией с неполиморфными областями молекул МНС-1 клетки-мишени [286, 287]. С помощью мутационного анализа бьша идентифицирована гептапеп-тидная последовательность аЗ домена МНС класса I, с которой связывается D8 [288, 289]. Экспериментально показано, что белки DS и T R узнают различные домены молекулы МНС-1. Следовательно, Т-клеточная активация может включать образование тройного комплекса, в котором находящиеся на Т-клеточной поверхности D8 и T R ассоциированы с одной и той же молекулой МНС-1 клетки-мишени. По всей видимости, взаимодействие D8 с молекулами МНС-1 запускает внутриклеточную сигнальную систему через белок рЗб , sr -связанную тирозинкиназу, непосредственно ассоциированную в липоид-ных клетках как с D4, так и D8 [290]. В этом случае комплекс D8-р56 может функционировать практически тем же путем, что и рецепторы фактора роста, в которых связь с внутриклеточным доменом активирует внутриклеточную тирозинкиназу. [c.70]

В случае развития бактериальной инфекции или поражения организма одноклеточными паразитами стратегия иммунитета выглядит иначе. Для внутриклеточных патогенов, таких как микобактерии или возбудители чумы, в процесс уничтожения инфекционного агента вступают Т-клетки воспаления, имеющие маркер D4 (Тн1). Эти клетки после распознавания бактериального антигенного эпитопа, комплексированного с молекулами II класса МНС, активируют макрофаги, зараженные бактериями, к внутриклеточному уничтожению (киллингу) возбудителя. [c.92]

Внутриклеточные собьпня, определяющие активацию Т-клеток, аналогичны тем, которые происходят в В-клетках после антигенной стимулящ1и. Образовавшийся агрегат из антигенпредставляющих молекул МНС, Т-клеточного рецепторного комплекса, включающего D3 молекулы, D4 или D8 молекул, провоцирует внутриклеточное взаимодействие различных тирозинкиназ с цитоплазматической частью полипептидов. Среди СВЗ-белков наибольшей связывающей активностью обладает D3 , представленный в цитозоле не хвостовой, а головной частью. Активированные в результате взаимодействия киназы обеспечивают каскад реакций, следствием которых является индукция специфической транс-108 [c.108]

Основными продуцентами ИЛ-2 являются Т-хелперы. Субпопуляция данного клеточного типа неоднородна по такому показателю как синтез различных цитокинов. Тем не менее, приблизительно 75% ее клеток синтезируют именно ИЛ-2. Около 20% цитотоксических Т-клеток также способны к продукции данного цитокина. На синтез ИЛ-2 в этих клетках влияют не только антигены или митогены, но и ряд других биологически активных соединений. Так, определенные цитокины (ИЛ-1, ИЛ-6, ФНО, ИФН), продуцируемые другими классами клеток, стимулируют продукцию ИЛ-2 у преактивированных антигеном Т-клеток. Гормоны тимуса (тимозин, сывороточный фактор тимуса) обеспечивают дифференцировку незрелых тимоцитов в клетки-продуценты ИЛ-2. Ионофюры, увеличивающие уровень внутриклеточного Са , также усиливают продукцию данного цитокина. [c.114]

Прошедшая постантигенная дифференцировка Т-клеток создает пул функционально активных клеток, действующих на периферии. Основные субпопуляции Т-клеток, призванные эффективно нейтрализовать чужеродный антиген, как уже неоднократно отмечалось выше, представлены цитотоксическими Т-клетками ( D8 Т-клетками), Т-клетками воспаления (Тн1) и хелперны-ми Т-клетками (Тн2). Первые две субпопуляции обеспечивают клеточную форму защиты, либо непосредственно разрушая инфицированные соматические клетки ( DS Т-клетки), либо активизируя макрофаги к внутриклеточному разрушению паразитов (Тн1 клетки). Третья субпопуляция (Тн2 клетки), являясь производной Т-системы иммунитета, проявляет-свое вспомогательное, эффекторное действие не только в клеточном иммунитете, но и при формировании гуморального иммунного ответа. Функциональная активность этой субпопуляции рассмотрена ниже в этой главе в связи с вопросами защиты организма от патогенов с помощью антител. [c.228]

Участие антител в иммунном ответе проявляется в трех формах нейтрализации, опсонизации, активации системы комплемента (рис. 9.15). Вирусы и внутриклеточные бактерии для своего воспроизведения должны первоначально проникнуть из жидкостей организма в клетку — место своей жизнедеятельности. Оказавшись даже на короткое время, во внеклеточном пространстве, патогены подвергаются нейтрализующему действию антител, что проявляется в блокаде рецепторного взаимодействия патогена и инфицируемой клетки. Иначе, антитела препятствуют предетерминиро-ванному взаимодействию клеточных рецепторов с лигандом на поверхности патогена. Процесс нейтрализации проявляется не только в случаях с корпускулярными антигенами, но и с бактериальными токсинами. [c.238]

При реальной бактериальной или вирусной инфекции, как и в эксперименте, Т- и В- клетки распознают разные эпитопы одного и того же комплексного в антигенном отношении патогена. Это явление распознавания В- и Т-клетками разных эпитопов одного и того же антигена получило название сцепленного распознавания. На примере вирусной инфекции цепь событий выглядит следующим образом. Поверхностные белки вирусных частиц, взаимодействуя с предетерминированными антигенраспознающими рецепторами (sig) В-клеток, оказываются поглощенными этими В-клетками. В результате внутриклеточной переработки на клеточной поверхности оказываются пептиды вирусных белков в комплексе с молекулами II класса МНС. Комплекс образуется с пептидами не только внешних вирусных белков, но и внутренних, недоступных для поверхностных иммуноглобулинов В-клеток. Таким образом, В-клетка оказывается подготовленной к встрече со зрелыми хелперными Т-клетками. Т-хелперы проходят свой путь примирования, взаимодействуя с тем или иным типом антигенпрезентирующих клеток. Среди Т-клеток будут те, которые способны реагировать с иммуногенными комплексами, включающими пептиды как внешних, так и внутренних белков. Таким образом помощь В-клеткам усиливается способностью Т-клеток распознавать множество пептидных вирусных фрагментов, но при этом специфичность секретируемых В-клеткой антител будет только к поверхностному белку вируса, так как первоначальная встреча В-лимфоцитов была именно с поверхностными эпитопами. Образовавшиеся вирусспецифические антитела обладают как нейтрализующей, так и опсонизирующей активностью, т.е. с одной стороны, препятствуют взаимодействию вируса с клеткой-мишенью, а с другой — усиливают контакт с фагоцитирующими клетками через F -фрагмент антител. [c.246]

Нейтрализация антигенов представляет собой лишь начальный этап освобождения организма от патогенов. Следующий, наиболее результативный этап связан с опсонизацией корпускулярных, или растворимых антигенов, их захватом фагоцитирующими или иными иммунологически активными клетками, внутриклеточным разрушением патогенов. [c.257]

Процесс поглощения антигена сопряжен с активацией внутриклеточных молекулярных механизмов, направленных на разрушение чужеродных агентов. Образовавшаяся в результате поглощения опсонизированного антигенного материала фагосома сливается в клетке с одной или несколькими лизосомами, образуя фаголизосому. В фаголизосоме бактериальные и другие антигены оказываются в резко кислой среде (pH 3,5-4,0), которая сама по себе обладает бактериостатическими и бактерицидными свойствами. Кроме того, в результате фагоцитоза происходит усиленное образование кислородпроизводных продуктов, которые крайне токсичны для бактерий. В процесс разрушения и активного переваривания бактерий обязательно включаются антимикробные пептиды (дефенсины и катионные белки), а также основные ферменты лизосом — ЛИЗОЦИ.М и кислые гидролазы. Совместное действие всех этих механизмов приводит к успешному разрушению чужеродных антигенов до биологически инертных низкомолекулярных соединений. [c.258]

Поверхностный иммуноглобулин В-клеток несет двойную нафузку в процессе созревания плазмоцитов. Во-первых, он выполняет роль антигенраспознающей структуры, передавая сигнал о встрече с антигеном внутрь клетки. Во-вторых, служит фактором захвата антигена для его переноса внутрь клетки. После внутриклеточной переработки антигенные пептиды в комплексе с молекулами II класса МНС выносятся на клеточную поверхность. Иммуногенный комплекс распознается антигенспецифическими хелперными Т-клетками, которые и обеспечивают второй сигнал для В-клеточной пролиферации и дифференцировки. В процесс функционального созревания В-клеток включаются также цитокины и мембраносвязанные белки Т-лимфоцитов. Существенным моментом процесса распознавания антигена является феномен сцепленного распознавания. Суть его состоит в следующем. При инициации иммунного ответа на сложный антиген взаимодействующие В- и Т-клетки должны распознать этот антиген, но не обязательно те же самые антигенные эпитопы. Это яштение получило название сцепленного распознавания. [c.264]

Процесс коммитирования в ту или иную сторону развития наивных D4 Т-клеток зависит также от плотности антигена на антигенпрезентирующих клетках. При внутриклеточной локализации патогена экспрессия антигенных фрагментов этого патогена в комплексе с молекулами II класса выражена сильнее, чем в ситуации, когда основным местом пребывания патогена является эк-страцеллюлярная среда. Эти различия определяют доминантное включение в ответ либо Тн1, либо Тн2. При высокой плотности антигена на антигенпрезентирующих клетках дифференцировка наивных D4 Т-клеток смещается в сторону образования D4 Т-клеток воспаления.(Тн1). Напротив, при низкой плотности антигена формируются в основном хелперные D4 Т-клетки (Тн2). [c.334]

В заключение этого раздела следует заметить, что в условиях конкретного ответа на тот или иной антиген дифференцировка наивных D4 Т-клеток в сторону либо D4 Т-клеток воспаления (Тн1), либо хелперных D4 Т-клеток (Тн2) не имеет абсолютного значения. Так, преимущественное накопление Тн1 при внутриклеточном размножении патогена не означает полного отсутствия антигенспецифических Тн2 и синтеза антител, также как при внеклеточном размножении микроорганизмов доминантное участие в ответе Тн2 не исключает реактивности Тн1. [c.335]

В качестве примера можно взять реакцию на пыльцу растений (сенную лихорадку). Первая встреча с аллергеном не приводит к проявлению каких-либо признаков повышенной чувствительности. Однако проникшая через дыхательные пути пыльца сенсибилизирует организм через активацию как В-, так и Т-клеток. Продукция антител класса IgE начинается после распознавания аллергена В-клетками и их взаимодействия с хелперными Т-клетками (Тн2), секретирующими интерлейкин-4. Как уже отмечалось ранее, этот цитокин обеспечивает переключение внутриклеточного синтеза иммуноглобулинов В-клетками на продукцию IgE. Образовавшийся IgE взаимодействует с соответствующим рецептором (F R) на поверхности тучных клеток. На этой стадии завершается сенсибилизация организма после первичной встречи с аллергеном. Когда пыльца растения того же вида вновь попадает в дыхательные пути, белки такой пыльцы проникают через эпителий в подслойку, где они взаимодействуют с предсуществующим на поверхности тучных клеток IgE. Факт образования комплекса антиген-антитело на мембране тучных клеток является сигналом к активному выбросу медиаторов этими клетками, что вызывает быстрое развитие симптома, получившего название аллергический ринит, или сенная лихорадка. [c.357]

Для выявления внутриклеточных антигенов клетки обрабатывают фиксаторами, которые до такой степени нарушают структуру поверхностной мембраны, что она становится проницаемой для флуоресцирующих антител. Ниже будет описан метод выявления интрацитоплазматических антигенов в отдельных клетках. [c.177]

Описанные выше приемы окрашивания поверхностных и внутриклеточных антигенов можно объединить. Сначала клетки окрашивают в суспензии для выявления мембранных антигенов, обычно с помощью антисыворотки, меченной ТРИТЦ. После отмывания клетки ресуспендируют (в соответствующей концентрации) в 3% БСА — ЗФР и готовят препараты на стеклах с помощью цитоцентрифуги, как описано выше, фиксируют в этаноле в течение 10 мин и проводят внутриклеточное окрашивание второй антисывороткой, меченной флуоресцеином. [c.178]

В исследовательской работе часто требуется оценивать скорость биосинтеза и содержание конкретных белковых молекул в живой клетке, следить за их перемещением во внутриклеточном пространстве или выделять труднодоступные белки в индивидуальном виде из сложной смеси. В этом случае белки-репортеры оказываются незаменимыми. Например, присоединив к С-концу анализируемого белка в качестве белка-репортера -галактозидазу, можно производить очистку рекомбинантного белка по активности -галактозидазы или отслеживая ее антигенные детер- [c.382]

Лизосомотропия — эндоцитоз связанного с полимерным носителем ФАВ с последующим перевариванием в лизосомах и внутриклеточным выделением свободного ФАВ [123] по-видимому, не единственный механизм, обеспечивающий попадание ФАВ в опухолевые клетки. Описан синергизм действия хлорамбуцила и опухоль-специфического глобулина, когда вообще никакой химической связи между ФАВ и полимером (во всяком случае к моменту введения в организм) не было [125]. Связывание противоопухолевых ФАВ с опухоль-специфическими антителами в форме комплексов или ковалентных конъюгатов приводит к увеличению эффективности терапии в результате целевого транспорта цитотоксичного ФАВ [125]. Наибольший эффект достигнут при связывании ФАВ с полиглутаминовыми цепями, присоединенными к иммуноглобулину С [120]. Однако широкому применению иммунологически специфичных ФАП препятствует малая доступность соответствующих иммуноглобулинов. Первоначально казалось, что гибридомная техника позволит получать антитела против опухоль-специфических антигенов в необходимых количествах. Однако эти надежды пока не оправдались, в частности потому, что опухоль-специфические антигены подвержены изменчивости и к тому же детектируются не во всех случаях. [c.115]

Т-клетки Имеется несколько субпопуляций Т-клеток с различными функциями. Одни взаимодействуют с В-клетками, помогая им размножаться, созревать и образовывать антитела. Другие взаимодействуют с мононуклеарными фагоцитами, способствуя разрушению локализованных в них микроорганизмов. Обе эти субпопуляции Т-клеток названы хелперными Т-клетками (Тх). Третья субпопуляция Т-клеток осуществляет разрушение клеток организма, зараженных вирусами или иными внутриклеточно размножающимися патогенными микробами. Этот тип активности Т-клеток назван цитотоксичностью, а сами клетки соответственно цитотоксически ми Т-лимфоцитами (Тц). Как правило, распознавание антигена Т-клетками происходит только при том условии, что он презентирован на поверхности других клеток в ассоциации (комплексе) с молекулами МНС. В распознавании участвует специфичный к антигену Т-клеточный рецептор (ТкР), функционально и структурно сходный с той поверхностной молекулой 1 . которая у В-клеток служит антигенсвязывающим рецепто- [c.5]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология