Антигены Т и t большие и малые

Белки имеют тенденцию адсорбироваться на различных материалах, это свойство можно использовать для разделения. Целлюлоза, стекло и силикагель — все они нашли применение для адсорбции белков. Классический способ удаления растворенного вещества из раствора — использование измельченного древесного угля, но в случае белков адсорбция затрудняется из-за несоответствия между большим размером молекул белка и малыми порами угля. Древесный уголь модифицируют, покрывая его декстраном и 1 С, и в растворе сохраняется комплекс 1 С-антиген, тогда как антиген адсорбируется на древесном угле. В случае меченого антигена этим способом удаляют из раствора свободную метку, оставляя связанную метку для определения в растворе. [c.577]

Преимуществом колоночной хроматографии является возможность количественного фракционирования больших количеств веществ без превращения их в какие-либо производные. Однако хорошее разделение часто возможно лишь при малых скоростях элюирования, поэтому были разработаны новые виды колоночной хроматографии. Методы аффинной и адсорбционной хроматографии основаны на избирательной адсорбции молекул на нерастворимом адсорбенте, который содержит группы (молекулы), специфически взаимодействующие с молекулами подлежащих очистке соединений, например ингибиторы (для очистки ферментов) или антитела (для очистки антигенов) в настоящее время эти методы нашли широкое применение и для разделения углеводов. Невзаимодействующие с адсорбентом примеси удаляются, а связанный с адсорбентом сахар затем десорбируют способом, не приводящим к его разрушению. Десорбцию можно осуществить, изменяя pH, ионную силу среды или применяя соответствующий ингибитор взаимодействия, удерживающего вещество на адсорбенте. Для разделения ряда полисахаридов были использованы иммобилизованные формы (см. разд. 26.3.7.6) конканавалина А [40], являющегося фитогемагглютинином (лектином), который специфически взаимодействует с разветвленными полисахаридами определенного строения в настоящее время применяют и другие иммобилизованные фитогемагглютинины. Колоночная хроматография на носителях, покрытых полиароматическими соединениями [41], также находит применение для разделения полисахаридов. Благодаря достижениям в производстве носителей для жидкостной хроматографии под высоким давлением можно осуществить хроматографическое разделение быстро и избирательно описаны методы фракционирования небольших олигосахаридов, продолжающегося менее 1 ч [42]. [c.224]

Наиболее выпукло способность к узнаванию выражена у белков иммунной системы — уже упоминавшихся в 1.4 иммуноглобулинов, или антител. Иммуноглобулины определенной специфичности начинают активно вырабатываться организмом в ответ на появление чужеродного антигена и обладают способностью избирательно связывать именно этот антиген. Если в роли антигена выступает большая молекула, например молекула белка, то антитело опознает не всю молекулу, а некоторый ее участок, называемый антигенной детерминантой. Белковые молекулы обычно имеют серию антигенных детерминант, и уже по этой причине в ответ на появление в организме чужеродного белка вырабатывается целый набор антител, направленных на разные детерминанты. Более того, к каждой детерминанте вырабатывается, как правило, несколько различных иммуноглобулинов. Поэтому даже иммуноглобулины, специфичные к одному определенному антигену, представляют собой не индивидуальные белки, а смесь большого числа сходным образом построенных молекул. А так как организм непрерывно встречается с разнообразными антигенами, то фракция иммуноглобулинов сыворотки крови представляет собой смесь огромного числа различных антител, причем содержание каждого из них, как правило, очень мало. Трудность выделения индивидуальных иммуноглобулинов долгое время была препятствием для их биохимического исследования, в том числе для установления их первичной структуры. [c.38]

У взрослого животного создать иммунологическую толерантность к чужеродным антигенам, как правило, гораздо труднее, чем на ранней стадии раз-. вития. Но в отношении некоторых антигенов это можно сделать экспериментально, вводя антиген 1) в очень больших дозах, 2) многократно в очень малых дозах, 3) вместе с иммунодепрессантом или 4) внутривенно после ультрацентрифугирования антигена с целью удалить все агрегаты (это позволяет обойти нормальные механизмы представления антигена, см. ниже). В таких случаях повторное введение того же антигена (в условиях, когда в норме индуцируется ответ) не только не вызывает вторичного иммунного ответа, но [c.18]

Когда антиген присоединяется к молекулам антител на поверхности покоящейся В-клетки, это обычно инициирует сложную и малоизученную цепь событий, приводящую к клеточной пролиферации и диффереицировке с образованием клеток, секретирующих антитела. Такие клетки вырабатывают больщие количества растворимых (не связанных с мембраной) антител с тем же антиген-связывающим участком, что и у антител на поверхности клетки, и выделяют эти антитела в кровь. Активированные В-клетки могут начать секретировать антитела, будучи еще малыми лимфоцитами конечная стадия этого пути дифференцировки-большая плазматическая клетка (см. рис. 17-4, Х которая выделяет антитела со скоростью около 2000 молекул в секунду. По-видимому, плазматические клетки используют для производства антител столь значительную часть мощности своего белоксинтезирую-щего аппарата, что не способны к дальнейшему росту и делению и погибают после нескольких дней секреции антител. [c.20]

Следующий контраргумент основывается на новых экспериментальных данных. Если способные к производству антител клетки каждый раз возникали путем мутаций, то вероятность одновременного образования не одного, а большего числа типов антител очень мала. Следовательно, клон плазматических клеток всегда должен был бы синтезировать только один тип антител. На самом деле бывают случаи, когда одна клетка может производить два различных типа антител. Мало того, когда ставился опыт с четырьмя различными антигенами, клетки одного клона фактически порождали четыре различных типа антител Конечно, эти факты в значительной мере обесценивают клонально-селекционную гипотезу, что вынужден признать даже ее создатель. [c.351]

Мы уже видели ранее, что степень специфичности бывает различной. Специфичность антител обозначают как малую, если они реагируют с большим числом антигенов вообще и с большим числом химически родственных антигенов в частности о высокой специфичности антител можно говорить в том случае, если антитела реагируют с небольшой группой химически очень близких друг другу антигенов. Если антитело реагирует только с одним антигеном, то речь идет об абсолютной специфичности. [c.95]

Суперантигены — это особая группа антигенов, которые в очень малых дозах вызывают поликлональную активацию и пролиферацию большого числа Т-лимфоцитов. Суперантигенами являются бактериальные энтеротоксины, стафилококковые, холерные токсины, некоторые вирусы (ротавирусы). [c.56]

Влияние кооперативного эффекта на интеисивность иммунного ответа оказывается существенным в том случае, когда популяции клеток, участвующих в распознавании данного антигена, малы. Это можно отчетливо проследить в опытах с облученными мышами [9], которым одновременно с антигеном (эритроцитами барана) вводили различные количества лимфоцитов от животных той же линии. (При облучении погибают не только все лимфоциты, но и кроветворные клетки, так что у животных полностью отсутствует собственная иммунная реакция.) Через четыре дня в селезенке реципиента определяли количество клеток, образующих антитела к эритроцитам барана (АОК). Построив зависимость числа АОК М от числа введенных лимфоцитов N , авторы нашли, что при малых значениях Ый (<2 10 ) М растет пропорционально N, а при больших зависимость М. (Л/о) становится линейной (рис. 5.3). Действительно, в нижней области концентраций обнаружен кооперативный эффект, который как бы исчезает при повышении дозы введенных лимфоцитов. [c.107]

В промежуточном случае, когда — коэффициент истинного размножения антигена — подчиняется условию (5.14), в зависимости от начальных условий может быть как смертельный исход, так и частичное выздоровление. В модели (5.12) в этом случае существует три положительных особых точки, две из них — седла, а между ними — устойчивый узел или фокус (рис. 5.4, в). Сепаратрисы, входящие в седловую точку 3, делят плоскость на две части, являясь как бы границей жизни и смерти . Справа от границы всегда будет отрицательный исход борьбы с инфекционным началом, т. е. организм оказывается не в состоянии собственными силами справиться с болезнью. Слева от границы все интегральные кривые идут в устойчивую точку 2, соответствующую малым стационарным значениям концентрации антигена g и значительному напряжению иммунных сил — большим концентрациям специфических антител а. Это состояние лишь условно можно считать выздоровлением хотя иммунная система и справляется с болезнетворным началом и не дает антигену неограниченно размножаться, однако без вмешательства извне (например, лекарственного) полностью антиген не может быть выведен. [c.111]

Феномену проскальзывания посвящена обширная работа Гроссмана и Берке [11]. Математическая модель здесь строится в предположении запаздывания момента дифференциации иммунных клеток-предшественников в киллеры относительно момента их стимуляции опухолевым антигеном. Кроме того, предполагается наличие другого (растворимого) антигена, блокирующего трансформацию иммунных клеток в киллеры. Численное интегрирование модели, состоящей в самом упрощенном варианте из четырех уравнений с двумя запаздывающими функциями, показало наличие двух порогов в действии иммунной системы — при очень малых и очень больших начальных размерах опухоли. Наличие блокирующего фактора, растущего вместе с опухолью, позволяет объяснить, почему в некоторых случаях малым опухолям удается миновать промежуточную зону, в которой иммунный ответ мог быть значительным и привести к элиминации опухоли. В работе подробно обсуждается, какие агенты могут играть роль блокирующих факторов, однако никаких количественных данных на этот счет не приводится. Следует отметить, что остальные параметры системы определены достаточно достоверно, и поэтому модель в целом носит убедительный характер. [c.137]

Малые антигенные детерминанты связываются на ограниченном участке активного центра, комплементарном данной детерминанте. Большие детерминанты могут занимать практически всю область связывания. В этом случае можно выделить подцентры связывания отдельных частей антигенной детерминанты. Именно такое многоточечное взаимодействие активного центра антител с антигеном обеспечивает их уникальную специфичность и является весьма характерным для многих биологических систем, например фермента и субстрата, клеточных рецепторов и гормонов. Хорошей моделью подобного взаимодействия может служить соответствие между рукой и перчаткой или ключом и замком. [c.102]

В геноме SV40 закодировано шесть белков. На ранней стадии образуются два белка, так называемые большой (Т) и малый (Л антиген ны. Затем — после начала репликации вирусной ДНК — идет синтез главным образом трех структурных белков вариона (VPI, VP2 и VP3). Функция и динамика синтеза шестого белка — агнопро-теина—изучены недостаточно. Регуляция экспрессии вирусного генома осуществляется прежде всего на уровне транскрипции. Так, вскоре после инфекции в зараженных клетках начинают накапли- [c.299]

Химерные антитела, несушие антигенсвязы-вающий участок моноклонального антитела мыши к поверхностному антигену клеток рака толстой кишки человека, тестировали на больных с раком толстой и прямой кишки. Антитела оставались в кровотоке примерно в шесть раз дольше обычных антител мыши, тем самым оказывая свое действие в течение большего времени. При этом лишь у одного пациента из 10 наблюдался слабо выраженный иммунный ответ. К сожалению, в этих испытаниях не удалось получить противоопухолевого эффекта антител возможно, это было связано с введением их в слишком малых дозах или с тем, что раковый процесс находился на поздних стадиях. В опытах in vitro химерные антитела проявляли высокую эффекторную активность, что позволяет надеяться на успешное их применение в других случаях. [c.216]

В ряду с осмотическими процессами находится диализ, когда происходит непрерывная диффузия малых молекул в циркулирующий растворитель с удерживанием больших молекул. При этом отсутствует выраженный перенос растворителя против градиента концентрации. Диализ применяют, например, при очистке антигенных препаратов, представляющих собой протеины, гликопротеины или более сложные комплексы. С помощью диализа через раличные мембраны освобождаются от неорганических солей. [c.391]

Подавляющее большинство Т- и В-лимфоцитов все время переходит нз крови в лимфу и обратно. Онн покидают кровоток, протискиваясь между специализированными эндотелиальными клетками, имеющимися в некоторых малых венах, и попадают в различные тканн, в том числе в лимфатические узлы. Пройдя через ткань, они накапливаются в малых лимфатических сосудах, связанных с лимфатическими узлами. Переходя во все более и более крупные сосуды, лимофциты в конце концов попадают в главный лимфатический сосуд (грудной проток), по которому возвращаются в кровь. Такая постояш1ая циркуляция, по-вндимому, обеспечивает контакт как можно большего числа соответствующих лимфош1тов с антигеном (и друг с другом, см. ниже) и служит для распределения Т- н В-клеток, активированных в результате этого контакта, по лимфоидным тканям всего тела. [c.11]

Рис. 17-32. Концентрации антитела и антигена влияют на размеры образующихся комплексов антиген-антитело. Самые большие комплексы образуются, когда те и другие молекулы присутствуют щжмерно в одинаковых молярных концентрациях ( эквивалентность ), а самые малые-при большом избытке антигена. В последнем случае комплексы содержат всего лишь по одной молекуле антитела, поэтому внеклеточные жидкости плохо очищаются от таких комплексов макрофагами.

О молекулярных механизмах взаимодействия между лимфоцитами известно очень немногое. Одна нз возможностей состоит в том, что они связываютс между собой мостиками нз антигена или же непосредственно (за счет взаимодействия идиотип-антиндиотип), как показано на рис. 17-60 в этом случае могли бы использоваться сигнальные молекулы ближнего действия-мембраносвязанные нли секретируемые. Однако лимфоциты, способные взаимодействовать прн ответе на определенный антиген, составляют лишь очень малую долю всей популяции лимфоцитов, и кажется сомнительным, чтобы две клетки надлежащего рода могли объединиться в результате узнавания. По этой причине многие иммунологи пришли к мысли о том, что лимфоциты, возможно, передают друг другу сигналы путем секреции специфических молекул, действующих на относительно больших расстояниях. [c.56]

Антигены главного комплекса гистосовместимости (МНС) примечательны по меньшей мере в двух отношениях. Во-первых, они занимают совершенно особое место среди антигенов-мишеней по своему значению при Т-клеточных трансплантационных реакциях, хотя Т-лимфоциты узнают также множество других антигенов на поверхности клеток. Во-вторых, узнавать чужеродные МНС-антигены может необычно большая доля Т-лим(1юцитов если на какой-либо обычный антиген иного типа отвечает менее 0,1% Т-клеток организма, то на МНС-антигены любого другого индивидуума реагируют уже около 5-10% Т-клеток Этот последний факт очень трудно объяснить с помопц>ю теории клональной селекции, которая предсказывает, что на любой антиген нли даже на любую группу антигенов должна реагировать лишь очень малая доля всех лимфоцитов. [c.58]

Метод, разработанный Коном и Эдсоллом, включает фракционное осаждение спиртом при низкой температуре и подходящей вариации значений pH и имеет то преимущество, что в этих условиях на растворимость белков заметно влияет ничтожно малое изменение концентрации солей. Этим методом были получены пять основных фракций, которые не были гомогенными, но оказались пригодными для клинических целей и дальнейшего фракционирования на индивидуальные компоненты. Одна фракция состоит в основном из альбумина и особенно эффективна как противошоковое средство. Другая фракция содержит у-глобулин, который захватывает большое количество антител. Эти белки образуются в живом организме ш ответ на проникновение чужеродных тел (антигенов), например белков различных патогенных организмов. Эта фракция находит клиническое применение для предохранительной временной пассивной иммунизации к различным болезням. Примерно десять глобулинов, принадлежащих к этим трем типам, были получены в индивидуальном, состоянии. Два, из них являются липопротеннами или, может быть, различными формами одного и того же липопротеина. Липопротеины крови состоят из белка, фосфолипи- [c.656]

Однако сразу же приелвкаот внимание тот факт, что почти все антигены — высокомолекулярные вещества. Малые молекулы сами по себе неактивны (вероятно, потому, что они легко выводятся из организма), если только они не подвешены к большой молекуле, а это, как мы сейчас увидим, вещь вполне возможная. И все же одна лишь большая величина молекул или соответственно молекулярных комплексов еще не определяет антигенных свойств. Тут необходим по меньшей мере еще один фактор. Что же это за фактор [c.330]

ЧТО найденные величины АЯ° в некоторых случаях больше, чем относительно малые величины, которые были вычислены другими авторами для иных систем антитело — антиген и антитело — гаптен. Однако наиболее любопытная особенность табл. 35 заключается в том, что она показывает заметную разницу в величинах анти-В-изоагглютининов, полученных из крови людей с различными группами крови или даже принадлежащих к различным генотипам. Эти данные были подтверждены исследованием сывороток 36 лиц с генотипом А1О, 6 — с генотипом АхА и 8 — с генотипом 00. Фракция анти-В-изоагглютининов в сыворотке любого данного индивидуума, по-видимому, всегда гомогенна. Эта гомогенность находится в заметном противоречии с установленньй фактом гетерогенности иммунных антител (см. стр. 23) и, если она подтвердится, будет служить сильной [c.180]

В лаборатории Паулинга на основании исследования влияния сотен различных гаптенов и стереохимически сходных с ними веществ на реакции преципитации противосывороток, приготовленных против большого числа азопроизводных белков, была развита теория дополнительности в реакции антиген — антитело. Помимо использования для серологических исследований, соли диазония широко применялись для введения соединений, представляющих интерес с точки зрения физиологии или фармакологии. Несмотря на общеизвестность реакции сочетания белков с соединениями диазония, мы мало что можем сказать о физических свойствах измененных таким образом белков, хотя часто для этой цели можно было бы применять спектроскопические методы. Во многих случаях в реакцию сочетания с азосолью вступает вся сыворотка целиком, а не один только чистый белок. [c.328]

Химическая индивидуальность, или видовая специфичность, белков легко выявляется серологическим путем. Если животному, например кролику, ввести в кровь чужеродный ему белок (антиген), то в организме вырабатываются специфические антитела, являющиеся белками глобулино-ной природы и находящиеся, главным образом, в у-глобулиновой фракции белков сыворотки крови. Антигены и антитела взаимодействуют друг с другом с образованием осадков (преципитата), что можно наблюдать при добавлении к сыворотке крови животного, которому ввели в кровяное русло чужеродный белок ( иммунизированного животного), того же белка (антигена). Образование осадка носит название реакции преципитации . Эта реакция весьма тонкая и позволяет выявить свойства белков, неуловимые при их хими ческом изучении. Так, например, тщательное химическое изучение гемоглобина крови лошади, овцы и собаки не выявляет каких-либо особенностей в их химической структуре. Между тем при введении этих гемоглобинов в кровь кролика образуются специфические для каждого из них антитела. Известны, однако, некоторые белки, почти не вызывающие образования антител. Гормоны белковой природы (инсулин, некоторые гормоны гипофиза и др.), изолированные из желез внутренней секреции крупного рогатого скота, при введении их в кровь человека (а также животных) практически не вызывают образования антител. Надо полагать, что химические различия в структуре белков-гормонов животных и белков-гормонов человека настолько малы, что они не всегда выявляются серологически. Это обстоятельство имеет большое практическое значение, так как оно позволяет широко применять в медицинской практике белки-гормоны без опасения вызвать при повторном введении их в организм человека реакцию преципитации. [c.38]

При транскрипции ранних генов 8V-40 синтезируются два белка Т (называемый большим Т-антигеном ) и t (называемый малым t-антигепом ). Эти белки имеют идентичные N-концевые последовательности, но различающиеся С-концевые последовательности. Кодируются белки одним и тем же участком ДНК, как это показано на рис. 20.21. [c.257]

Ферментативное расщепление ИгГ имеет особое значение при исследовании различных биологических свойств молекулы. Продолжая работы, начатые по исследованию действия нескольких протеолитических ферментов, ряд авторов показали, что папаин расщепляет ИгГ кролика на три крупных фрагмента — I, ПиШ — с образованием очень малого количества мелких пептидов. Фрагменты I и II имеют молекулярный вес около 42 ООО, III — несколько больше. Как I, так и II содержат участки со свойствами антител, обладающие сродством к специфическому антигену, что было показано несколькими методами [1, 20, 21, 22]. Фрагмент III легко кристаллизуется и содержит в основном изотипические (т. е. видоспецифические) антигенные участки. Аллотипические антигенные участки (т. е. участки, определяющие отличия между иммуноглобулинами разных индивидуумов одного и того же вида) связаны с фрагментами I и II, тогда как способность фиксироваться на KOHie и проходить через плаценту, но-видимому, связана со структурными особенностями фрагмента III. Связывание комплемента после реакции ИгГ со специфическим антигеном представляет собой сложную реакцию, в которой принимают участие все части молекулы, входящие во фрагменты I, II и III [23]. Вполне возможно, что наиболее важным моментом для выяснения структуры молекулы является тот факт, что все указанные биологические свойства сохраняются после расщепления молекулы на три части. Это дает веские основания для предположения, что папаин гидролизует пептидные связи на небольшом уязвимом участке и что исходная молекула состоит из определенных частей, пространственная структура которых не затрагивается при гидролизе. Нисонов и сотр. [24] показали, что при гидролизе пепсином образуется одна фракция с молекулярным весом около 100 ООО, в которой сохраняются оба участка антитела. При восстановлении цистепном в низкой концентрации эта фракция расщепляется на равные части, которые по биологическим и химическим свойствам очень сходны с фрагментами [c.104]

Т- и В-лимфоциты становятся морфологически различимыми только после стимуляции антигеном. Нестимулированные ( покоящиеся ) Т- и В-клетки выглядят очень сходно даже в электронном микроскопе это небольшие - лишь немногим крупнее эритроцита-клетки, в которых большую часть объема занимает ядро (рис. 18-4, Л). Те и другие активируются антигеном, вызывающим их пролиферацию и дальнейшее созревание. Активированные В-лимфоциты становятся в дальнейшем продуцептами антител. Из этих клеток наиболее зрелые-плазматические клетки с чрезвычайно развитым гранулярным эндоплазматическим ретикулом (рис. 18-4, Б). В отличие от этого активированные Т-лимфоциты содержат очень мало элементов ретикулума и не секретируют антител (рис. 18-4, В). [c.219]

У взрослого животного создать иммунологическую толерантность к чужеродным антигенам, как правило, гораздо труднее, чем на ранней стадии развития. Но в отношении некоторых антигенов это можно сделать экспериментально, вводя антиген 1) в очень больших дозах, 2) многократно в очень малых дозах, 3) вместе с иммуно депрессантом или 4) виутривенно после химической сшивки антигена с поверхностью В-лимфоцитов или ультрацентрифугирования антигена с целью удалить все агрегаты (это делает неэффективными нормальные механизмы презентации антигена, см. разд. 18.6.10). Таким образом, связывание антигена с комплементарными ему рецепторами на Т- или В-лимфоцитах может либо стимулировать лимфоцит к делению и созреванию, в результате чего он превращается в активную клетку или клетку памяти, либо элиминировать или инактивировать лимфоцит, что приводит [c.227]

Полиморфные аминокислотные остатки гликопротеииа МНС (т. е. те остатки, которые варьируют в зависимости от аллельной формы молекул этого типа) локализованы большей частью либо внутри бороздки, где они могли бы связывать антиген, либо на ее краях, где были бы доступны для узнавания рецепторами Т-клеток. Полагают, что вариабельность молекул МНС класса 1-результат отбора, приведшего к тому, что > них появилась способность связывать и представлять множество различных пептидов вирусиого происхождеиия. Тем ие мепее продолжает удивлять то, что малое число различных антиген-связыва- [c.270]

При малой плотности ангигенных детерминант на поверхности опухолевой клетки присутствие антител с низкой молекулярной массой (IgG) может препятствовать проявлению клеточного иммунитета. Отдельные молекулы IgG, в противоположность большим молекулам IgM, не способны привлечь комплемент, осуществляющий лизис клеток-мишеней, в то же время, занимая антигенные детерминанты, они экранируют клетки как от распознающих лимфоцитов, так и от киллеров. В результате скорость деструкции опухолевых клеток уменьшается, а фактическая скорость роста опухоли увеличивается. Это явление носит название эффекта усиления и особенно сильно проявляется при предварительной иммунизации животных убитыми опухолевыми клетками (см. [3, 6]). [c.123]

Заканчивая эту главу, отметим, что мы здесь подходили к проблеме противоопухолевой защиты только с точки зрения действия специфических иммунных сил. Из исследования моделей как будто бы следует, что против, спонтанных, слабоантигенных опухолей практически нет иммунной защиты. Однако сравнительно редкб наблюдаемое развитие неоплазмы указывает на то, что система надзора должна существовать. И действительно, в последние годы большие надежды в этом плане возлагаются на естественную резистентность , связанную с противоопухолевым действием так называемых натуральных киллеров (НК) [33]. Эти клетки, в отличие от специфически действующих Т-лимфоцитов, поражают раковые клетки всевозможной специфичности. Клетки НК пред-существуют в организме в больших количествах (I—2% всех лимфоцитов), поэтому лизис ими опухолевых клеток начинается сразу же, без латентного периода, тогда как для развития популяции Т-киллеров нужны дни и даже недели. К сожалению, возможность-этой системы защиты ограничена, она действует только против малых опухолей. При больших количествах опухолевых клеток начинается противоположная реакция — инактивация и даже лизис НК-клеток опухолевыми [34, 35]. Тем не менее, роль НК в организме значительна именно в смысле противоопухолевого надзора. Самое существенное при этом — способность НК узнавать опухолевые клетки независимо от их антигенности. По-видимому, в основе процесса узнавания клетки-мишени для НК лежит реакция на изменение свойств клеточной мембраны. В следующей главе мы как раз и будем обсуждать свойства мембран злокачественных клеток, отличающие их от нормальных. [c.138]

Иммунометрическне. Вторая группа методов — иммунометрические, основана на принципе сэндвич -анализа. Особенность этих методов заключается в том, что на твердой фазе иммобилизован избыток антител, с которыми проводят инкубацию антигена. После удаления несвязавшихся компонентов в систему добавляют избыток меченых антител, которые взаимодействуют с антигеном. Очевидно, этот метод применим только к поливалентным антигенам (рис. 24, а). Чувствительность и точность иммунометри-ческих методов принципиально существенно выше конкурентных, так как используя избыток антител на твердой фазе, можно адсорбировать из раствора сколь угодно малое количество антигена, а затем избытком меченых антител определить его содержание. Кроме того, в этом случае гораздо менее строгие требования к количеству добавляемых компонентов. Чувствительность иммунометрических методов в большей степени зависит от нижнего предела детекции маркера. Однако на практике предельной чувствительности достигнуть трудно в силу того, что при большом избытке первичных и вторичных антител наблюдается значительная иеспецифическая сорбция, которая фактически и лимитирует чувствительность этих методов. Использование моноклональных антител в иммунометрическом анализе очень эффективно, так как, сорбируя на твердой фазе антитела одной специфичности, а проявляя связавшийся с ними антиген мечеными антителами другой специфичности, удается не только повысить избирательность детекции антигена, но и сократить время анализа (рис. 24,6). [c.118]

Основным принципом организации антигенсвязывающих центров иммуноглобулинов является полицентровая структура. Малые антигенные детерминанты связываются иа ограниченном участке ак-тивного центра, комплементарном данной детерминанте. Большие детерминанты могут занимать практически всю область связывания. [c.29]

Нанесение антигенов на мембрану. Технология dot-ELtSA способствует сохранению антигенности препаратов и позволяет проводить большое количество анализов с ограниченным количеством антигена. Концентрированные препараты антигена, нанесенные на твердую подложку, дают четкую цветную реакцию. Пятно антигена наносят в объеме от 0,1 [4] до 3 мкл [И, 14]. Для этой цели лучше всего подходят стеклянные гамнльтоновские шприцы объемом до 10 мкл и ценой деления 0,1 обеспечивающие постоянство диаметра пятна. В случае препаратов солюбилизированных антигенов предпочтительнее использовать мембраны с малым диаметром пор, так как на них белки связываются в основном с поверхностью. Напротив, при применении целых клеток простейших, имеющих размеры 5-10 мкм, величина пор не играет большой роли [7 ]. [c.118]

Активным центром антитела называют участок молекулы, пространственно комплементарный детерминантной группе антпгена (гаптена). Комплемен-тарность (пространственное соответствие) активного центра антигенной детерминанте обеспечивает большое число нековалентных связей, возникающих между лигандом и образующими активный центр отрезками пептидных цепей антитела. Эти нековалентные связи стабилизируют комплекс. Хотя между детерминантной группой (гаптеном) и аминокислотными остатками в активном центре не возникают ковалентные связи, однако за счет большого числа слабых связей образуется относительно мало диссоциирующий комплекс. В силу этого равновесие в системе антиген-антитело сильно смещено вправо [c.91]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология