Нанесение проб

В тонкослойной хроматографии большое значение для получения надежных и воспроизводимых результатов имеет овладение техникой эксперимента (приготовление сорбента, его нанесение, установление толщины слоя, подготовка пластинок, нанесение пробы вещества, подача растворителя, проявление хроматограмм и другие операции). [c.134]

Расстояние стартовой линии от края пластинки 1,5 см расстояние между точками при нанесении проб на стартовой линии 1—1,5 см расстояние крайних точек проб от краев пластинки по 1 см. [c.148]

На круг хроматографической бумаги накладывают шаблон и простым карандашом очерчивают линию финиша. В два противоположных сектора с помощью микрошприца в 2—3 приема в одну и ту же точку на линии старта (см. рис. 3,10) наносят по 4 мкл раствора чернил. После каждого нанесения пробы пятну дают подсохнуть. Диаметр пятна не должен превышать [c.222]

Хроматографические камеры для БХ отличаются большим разнообразием, и выбор их зависит от способа хроматографирования — восходящее, нисходящее, круговое, двумерное, препаративное и т. д. В качестве камер используют как обычные пробирки, колбы и цилиндры, так и специально изготовленные камеры. Для нанесения проб применяют тонкие стеклянные капилляры, специальные микропипетки или микрошприцы. [c.353]

Рис. IV. 18. Схема устройства для нанесения пробы вещества на пластинку непосредственно на выходе из газо-хроматографической установки

Капля раствора соли никеля, нанесенная на хроматографическую бумагу, пропитанную раствором диметилглиоксима, образует на ней розовое пятно. Если в месте нанесения капли диметилглиоксима меньше, чем это требуется для количественного связывания никеля, то избыточная часть ионов никеля при проявлении хроматограммы растворителем (водой или водным раствором глицерина) уносится из первичной зоны и реагирует по пути с новыми порциями диметилглиоксима, находяш,егося в порах бумаги. При этом в направлении движения растворителя образуется окрашенная зона в виде пика. Высота окрашенного пика пропорциональна концентрации никеля в анализируемом растворе или его количеству в нанесенной пробе. [c.342]

Градуировочный график строят в координатах А — С или Н — g, где А — высота пика, мм С — концентрация определяемого иона, мг/мл д—ыа.сса определяемого иона в нанесенной пробе, мкг. Одновременно мон но вести хроматографирование 40—50 проб, причем продолжительность разделения составляет 40—50 мин. [c.341]

Аппаратура для бумажной хроматографии. Основными элементами аппаратуры для БХ являются хроматографические камеры или сосуды, стойки с лотками, пипетки для нанесения проб, приспособления для сушки и элюирования, пульверизаторы, лампы для облучения хроматограмм, приспособления для измерения / /, планиметры и денситометры для количественных определений. [c.353]

Пластину с нанесенными пробами помещают в камеру для хроматографирования. Камера представляет собой плотно закрывающийся сосуд с плоскими стенками. Для получения правильной хроматограммы в камере необходимо создать атмосферу, насыщенную парами выбранного растворителя. Для этого в камеру помещают, располагая вдоль стенки, фильтровальную бумагу. Эта бумага пропитывается налитым на дно камеры (прн восходящей ТСХ) растворителем. Созда- [c.612]

Аппаратура для БХ включает хроматографические камеры или сосуды, стойки с лотками, пипетки для нанесения проб, приспособления для сушки, пульверизаторы, сосуды для элюента, лампы для облучения хроматограмм и др. Хроматографические камеры значительно различаются по форме и размерам, и это в большой степени зависит от характера процесса хроматографирования (восходящее, нисходящее, круговое, двумерное, препаративное), На рис. 9.15 изображена камера для восходящей хроматографии, на рис. 9.16 — аппаратура для нисходящей бумажной хроматографии. [c.239]

Метод электрофореза на носителе во многом подобен методу хроматографии. Камера для электрофореза состоит из трех частей, двух электродных сосудов и расположенной выше подставки для носителя, например бумаги. Камеры должны быть плотно закрыты для предотвращения испарения растворителя. Носитель укладывают горизонтально, уровень растворителей в обеих электродных камерах должен быть одинаковым. Электроды, платиновый или графитовый, встроены в диафрагму. Вещество наносят на носитель в виде точек или полос. Место нанесения пробы зависит от предполагаемого направления движения. При движении разделяемых, веществ к аноду пробу наносят на катодную сторону, и наоборот. Для количественной и качественной оценки процесса разделения (проявление вещества и т. д.) применяют методы, используемые в бумажной хроматографии. [c.387]

На стандартном листе хроматографической бумаги вырезают полоску шириной не более 1 см ( хвостик ) и укорачивают его на 1,5 см (рис. 3.13). Пробу исследуемого раствора 8— 10 мкл в 2—3 приема наносят в центр листа у основания хвостика , пользуясь микрошприцом. После каждого нанесения пробы пятну дают подсохнуть. Диаметр пятна на листе не должен превышать 3 мм. На дно чашки Петри наливают 10—15 мл подвижного растворителя. Квадратный лист хроматографической бумаги с нанесенной пробой кладут на чашку Петри, опустив хвостик (не перегибая его основания) в растворитель и накрывают такой же чашкой Петри. [c.219]

Рис. 44. Одномерная (а) и двумерная (б) хроматограммы /—место нанесения пробы 2 —пятно катионов Мп +, А + 3 — пятно катионов В1 +, Ай+ 4 — пятно катионов Ре +, Со +, С<1 + (стрелками показано направление движения растворителя)

Техника нанесения пробы анализируемого вещества. Решающую роль в получении четких хроматограмм и особенно в количественных расчетах играют и количество наносимой пробы, и правильное ее нанесение на тонкий слой сорбента. Применяются два способа нанесение пробы в виде точки и в виде полосы. Последним способом пользуются главным образом в препаративной хроматографии. [c.138]

Иногда одновременно с нанесением пробы разделяемых веществ на линию старта наносят небольшие количества вещества-стандарта, а также веществ-свидетелей (тех, которые предположительно содержатся в анализируемой пробе). [c.270]

Исследуемую белковую смесь растворяют в буферном растворе в объеме 1 мл (по 2—4 мг каждого белка) и вносят в колонку. Нанесение пробы на колонку проводят, как описано на с. 104, увеличив плотность раствора добавлением сахарозы до 0,5 М. [c.107]

Нанесение пробы требует большой аккуратности и тщательности, особенно при количественных определениях. Главным источником ошибок при количественных расчетах ( 6—20%) являются неточности измерения объема наносимой пробы. При нанесении капли на слой бывает нелегко отделить очень малые объемы раствора от кончика иглы шприца. Требуется большой опыт, чтобы не повредить при этом поверхность сорбента. Повреждение приводит V искажению формы пятна и затрудняет количественные измерения. Кроме того, источником ошибок является растекание вещества по поверхности иглы шприца. При пользовании микропипеткой, откалиброванной с учетом таких ошибок, степень точности повышается. [c.139]

Методика анализа в целом — способы нанесения проб, выдзр-живание пластин во влажной камере, проявление, сушка, иденги-фикация и количественное определение компонентов — мало отличается от методики проведения БХ. В то же время метод ТСХ обладает рядом преимуществ возможность применения раз1ых сорбентов и создания равномерных по структуре слоев любой толщины, легкое снятие пятен вместе с порошком сорбента, быстрота и более высокая чувствительность. [c.240]

При хроматографировании пластины с закрепленным слоем устанавливают в камере с растворителем как наклонно, так и вертикально, а пластины с незакрепленным слоем — т)лько в слегка наклонном положении. Сторону пластины, на котфой находится линия старта с нанесенными пробами исследуешх смесей и свидетелей , погружают в растворитель на 5—10 м. Процесс разделения останавливают, когда фронт растворител подойдет к противоположному от линии старта краю пластинЕ. Фронт растворителя должен продвинуться на 10—15 см. Более длительное хроматографирование приводит к заметному размывяию зон. [c.240]

На пластинке размером 25x75 мм отточенным мягким карандашом без нажима проводят осевую линию. Короткими поперечными штрихами на расстоянии 10 мм от начала линии и с интервалом 18 мм отмечают места нанесения проб. С помощью мик-ропипетки с оттянутым концом или калиброванного капилляра в эти точки вносят по 0,005—0,01 мл 0,5%-ного раствора смеси стандартных красителей в четырех хлористом углероде, диаметр образующегося пятна не должен превышать 2 мм (это соответствует содержанию веществ и пробе 0,025 0,05 мг). Затем в центр каждой нанесенной пробы [c.62]

Нанесение пробы на колонку. Колонку перед нанесением пробы уравновешивают 8—10 объемами (300—450 мл) исходного буферного раствора (0,01 М натрий-фосфатный буфер, pH 6,8). На поверхность геля наносят 2—3 мл сыворотки крови, разведенной в 2 раза этим же буфером или 2—3 мл отдиализированного раствора одного из белков. Колонку промывают 0,01 М фосфатным буферным раствором, pH 6,8. [c.115]

Нанесение проб испытуемых веществ на пластинку. Объем пробы играет существенную роль при разделении веществ с помощью хроматографии. Если нанести очень много вещества, то получатся чересчур большие и плохой формы пятна, которые сливаются с пятнами соединений, имеющих близкую величину / у. Пробы испытуемых веществ (обычно от 0,1 до 50 мкг) наносят на пластинку в виде растворов в эфире, хлороформе или другом подходящем растворителе точечными каплями при помощи стеклянного капилляра или пипетки емкостью 0,1 мл. Для препаративного ра зделения смесей веществ пробы наносят в виде сплоп ной линии. Расстояние между отдельными пробами при стандартной величине пластинки должно быть не менее 2 см. [c.71]

На круг хроматографической бумаги накладывают шаблон с пятью секторами и простым карандашом очерчивают линию фронта (на рис. 3.10 нанесена пунктиром). В четыре сектора с помощью микрошприца в 2—3 приема в одну и ту же точку на линии старта (на рисунке обозначено звездочками) наносят по 4 мкл растворов-свидетелей четырех аминокислот. После каждого нанесения пробы пятну дают подсохнуть. Диаметр пятна не должен превышать 3 мм и ни в коем случае пятно не должно касаться границ секторов. Чем меньше пятно, тем лучше разделение. Последовательность нанесения растворов-свидетелей аминокислот записывают в тетрадь. На стартовую линию пятого сектора микроширицом (объем пробы указывает преподаватель) наносят раствор, содержащий смесь аминокислот неизвестного состава. [c.216]

Принцип выполнения одномерной нисходящей хроматограммы легко понять из рис. 43. На конец полоски хроматографической бумаги, как и в предыдущем случае, микропипеткой наносят каплю испытуемого раствора. Полоска бумаги опускается верхним концом (тем самым, где нанесена капля) в лоток с растворителем и свободно свисает вниз. Растворитель впитывается бумагой и опускается по полоске вниз, смывая нанесенную пробу вещества. Разделение компонентов и дальнейшая обработка хроматограммы проводятся так же, как и при получении хроматограммы восходящим методом. [c.160]

Подготовка камеры. Отсеки для электродов наполняют буферным раствором до одинакового уровня (во избежание перетекания буфера), примерно по 800 мл в каждый отсек. Во внутренние части электродных отсеков погружают электроды. На листе хроматографической бумаги (18X45 см) (при использовании тонких сортов бумаги образцы лучше наносить на отдельные полоски шириной 4—5 см) на расстоянии 15 см от одного из его узких сторон простым мягким карандашом (графит препятствует растеканию жидкости) очерчивают места для нанесения проб. Они представляют собой прямоугольники (2X0,3 см), большие < тороны которых располагают перпендикулярно длине бумажной полосы. Расстояние между стартовыми зонами и краями электрофореграм-мы — 2 см. Электрофореграмму пропитывают буфером, в котором будет проходить электрофорез. Для этого ее протягивают через кювету с буферным раствором. Концы бумажных полос (6—8 см) не смачивают. От избытка буфера освобождаются, промокая полосы между дву-мя-тремя лисгами фильтровальной бумаги. Влажную электрофореграмму помещают в камеру на центральную горизонтальную пластинку (5), а концы опускают в наружные отделения электродных отсеков Прибор плотно закрывают крышкой, под которой находятся смоченные водой листы фильтровальной бумаги. [c.91]

Инжектор с резиновой мембраной по конструкции похож на предыдущий, в нем не используют кран остановки потока растворителя и на месте заглушки зажимается упругая резиновая мембрана. Ввод пробы осуществляют микрошприцем, рассчитанным на работу в герметичных условиях при высоких давлениях. Пробу вводят в поток растворителя без его остановки путем прокалывания мембраны, введения микрошприца до упора иглы в фильтр колонки и нанесения пробы. Инжектор прост по конструкции и легко может быть изготовлен. Основной недостаток — наличие резиновой мембраны, которая набухает в растворителях, теряет герметичность при многих проколах, выделяет в поток растворителя ингредиенты, дающие ложные пики и повышающие фон и шумы детектора. Частицы мембраны, выкрашивающиеся при проколах, загрязняют входной фильтр колонки, создают эффект памяти . Выбор для мемораны марки резины, наиболее устойчивой к данному растворителю, использование мембран многослойных с наружными слоями из фтор-полимеров или из металлической фольги позволяет уменьшить, но не исключить эти недостатки. Микрошприцы высокого давления также дороги, более трудно промываются и менее надежны, чем обычные. Этот тип инжектора также используют в основном для учебных целей. [c.147]

Растворы наносят полосами длиной 1—1,2 см каждая. Бо вре. нанесения проб пластинку подсушивают теплым воздухом. Пл стинку с нанесенными пробами высушивают на воздухе в течеш [c.150]

Смотреть страницы где упоминается термин Нанесение проб: [c.227] [c.273] [c.428] [c.453] [c.465] [c.490] [c.216] [c.139] [c.142] [c.143] [c.153] [c.239] [c.40] [c.83] [c.299] [c.89] [c.274] [c.611] [c.615] [c.441] [c.186] [c.109]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология