Длинные полосы от стартовой линии

Ширина полоски бумаги в случае нанесения одной капли обычно составляет 2—5 см. Длина определяется условиями разделения. При одновременном хроматографировании ряда растворов берут широкую полосу бумаги и вдоль ее нижнего края, на так называемую стартовую линию наносят капли исследуемых растворов с интервалом в 2—3 см. [c.255]

На полосках хроматографической бумаги, не имеющей складок, заломов и загрязнений, длиной 48 см, шириной 18 см, отмечают простым карандашом стартовую линию, отмечая таким образом место нанесения исследуемого раствора. Полоски бумаги смачивают в буферном растворе того же состава, в котором предполагают проводить электрофорез. Далее полоски бумаги слегка отжимают между листами фильтровальной бумаги н помещают на пластинки с шипами, находящимися на дне мостика камеры, таким образом, чтобы погруженные в буферный раствор участки были равны. Закрывают мостик крышкой так, чтобы резиновый ободок плотно прилегал по периметру камеры. Через правую прорезь в крышке микрокапилляром наносят по 0,005—0,02 мл раствора анализируемого арсеназо HI, эталонного раствора и растворов свидетелей в виде полос или пятен. Места нанесения растворов на отдельных лентах располагают по одной линии. [c.57]

Проведение анализа. Все три фильтра с отобранной пробой переносят в один аппарат Сокслета, заливают 140—150 мл бензола и экстрагируют 6—8 ч при кипячении на водяной бане. Бензольный экстракт упаривают в фарфоровых чашках на водяной бане при температуре 50—55°С до 0,2—0,3 мл. Во избежание дальнейшего испарения чашки накрывают часовым стеклом. Далее проводят хроматографию в тонком слое незакрепленной окиси алюминия с толщиной слоя 1,5 мм. Для этого весь объем сконцентрированного бензольного экстракта наносят полосой на стартовую линию (1,5 см от края пластины). Чашки промывают 0,2 мл бензола, и растворы наносят на те же пластинки. Одновременно с пробой на пластинку наносят стандартный раствор (свидетель) в том же растворителе. Для этого справа по длине пластинки отделяют полосу шириной 20 мм. После испарения растворителя пластинку помеща- [c.107]

Получение восходящей одномерной хроматограмм ы. При использовании любого метода получения бумажной хроматограммы необходимо избегать испарения растворителя с полоски бумаги, поэтому разделение проводят в герметически закрытых камерах. Атмосфера этих камер должна быть предварительно насыщена соответствующим растворителем. Для этого можно использовать стеклянные цилиндры емкостью 100—500 мл с притертой крышкой, к которой крепятся бумажные полосы шириной 3—5 см и длиной 20—25 см. На расстоянии 3—4 см от края полосы карандашом проводят стартовую линию. Из микропипетки или капилляра в центре этой линии наносят каплю исследуемого раствора. Если исследуют растворы одного вещества с различными концентрациями, то для хроматограммы используют широкие полосы и на стартовую линию наносят капли этих растворов с интервалами в 2,5—3 см. Стараются нанести раствор так, чтобы полученная капля не расплывалась чем меньше ее размер, тем более четкая будет хроматограмма. Затем бумажную полосу подсушивают и осторожно погружают в камеру, на дне которой налит растворитель (обычно органический растворитель, смешанный с водой или раствором кислоты). Конец бумажной полосы должен быть погружен в растворитель не более чем на 2—3 см. Камеру с бумажной полосой герметично закрывают крышкой. Таким путем можно подготовить и одновременно опустить в камеру несколько бумажных полос, но с условием они не должны касаться стенок камеры и друг друга. [c.83]

Восходящая одномерная хроматограмма. Для получения хроматограммы можно использовать стеклянные цилиндры вместимостью 100—500 мл с притертой крышкой, к которой крепятся бумажные полосы шириной 3—5 см и длиной 20—25 см. На расстоянии 3—4 см от края полосы карандашом проводится стартовая линия. Из микропипетки или капилляра в центре линии наносится капля исследуемого раствора. Если исследуются растворы одного вещества с различными концентрациями, то для хроматограммы используются широкие полосы и на стартовую линию наносятся капли этих растворов с интервалами в 2,5—3 см. [c.108]

Диизоамиловый эфир сравнивали также с четыреххлористым углеродом. Оба они почти не отличаются антибиотики, остающиеся на стартовой линии в одном из них, как правило, не движутся и во втором. В обоих случаях 30—34% антибиотиков дают дополнительные пятна на стартовой линии. Эти данные показывают, что может быть использован только один из растворителей. Так как в четыреххлористом углероде чаще образовывались длинные полосы, чем в диизоамиловом эфире, то предпочтение было отдано последнему растворителю. [c.92]

На стартовую линию пластинки Силуфол (15X15 см) наносят 0,08 мл надосадочной жидкости полосой длиной 5 см на расстоянии 1,5 см от края. Рядом наносят 0,08 мл 0,1 % раствора ГСО гиперозида. Пластинку с нанесенными пробами высушивают на воздухе в течение 5 мин и хроматографируют в системе хлороформ — метиловый спирт (8 2) (смесь растворителей заливают в камеру непосредственно перед хроматографированием). Когда фронт растворителей дойдет до конца пластинки, ее вынимают из камеры, высушивают в вытяжном шкафу в течение 2 мин и вторично хроматографируют в той же системе. Затем пластинку вновь высушивают в вытяжном шкафу в течение 2 мин и просматривают в УФ-свете при длине волны 360 нм. Отмечают пятна гиперозида испытуемого раствора и стандартного образца. Вырезают участки пластинки с пятнами, а также чистый участок равной площади этой же пластинки для контрольного опыта, разрезают каждый на кусочки размером 0,3—0,5 см, помещают в колбу со шлифами вместимостью 50 мл, прибавляют по 10 мл смеси диоксан — вода (1 1), закрывают пробками и встряхивают в течение 1 ч. [c.243]

Качественные реакции. Проводят экстракцию и очистку суммы флавоноидов на колонке с полиамидным сорбентом согласно методике, описанной в разделе Количественное определение . На стартовую линию хроматографической пластинки Силуфол (15X15 см) наносят макропипеткой 0,05 мл раствора А в виде полосы длиной 2 см и шириной 0,5—0,6 см. Рядом, на расстоянии [c.284]

Попытки применить описанный выше метод для идентификации аминокислот мелассы не дали положительных результатов. Последнее объясняется не только сложностью мелассы, но и искажением простой распределительной хроматографии рядом побочных явлений. При хроматографировании водного раствора мелассы (4 1) и (9 1) па проявленных листах обнаружена сплошная полоса неразделившихся аминокислот или одно пятно глютаминовой кислоты и длинный до старта хвост . На стартовой линии остается расплывшееся пятно неизвестного [c.214]

Хроматографическое разделение экстракта на бумаге. Для хроматографического разделения эндогенных гиббереллиноподобных веществ используют бумагу быстрая или средняя Ленинградская № 2, промытую 20%-ным раствором химически чистой муравьиной кислоты, разрезанную на полосы размером 15 X 40 см, с продольным расположением волокон по длине полосы. Разделение проводят нисходящим током растворителя в цилиндрических камерах (высотой в 60 см) с притертой крышкой, стеклянной подставкой и хроматографической лодочкой (объемом 50 мл) для помещения растворителя. Спиртовой экстракт наносят на стартовую линию пипеткой сплошной полосой в объеме 1 мл на специальном станке в токе холодного воздуха. При хроматографии используют растворитель изопропиловый спирт (С3Н7ОН) — вода (5 2), для насыщения атмосферы хроматографической камеры на дно наливают ту же смесь растворителя в другом соотношении (2 5). В системе растворителей с нейтральной реакцией, в отличие от системы с кислой реакцией изопропиловый спирт — уксусная кислота — вода (4 1 5) и системы со щелочной реакцией изопропиловый спирт — МН40Н — вода (10 1 1), гиббереллиноподобные вещества располагаются компактным пятном с хорошо очерченными краями. [c.52]

Хроматография. На пропитанную бумагу, нарезанную по форме, предложенной. А. Т. Аствацатурьяном [7], наносят раствор жирных кислот (1 —100 мкг) в метаноле на стартовую линию в виде полосы. Жирные кислоты с длиной цепи от С22 до 24 следует растворять при температуре 35—40°. Анализ проводят в три приема. [c.20]

Образованием нерастворимых соединений с примесями, содержащимися в бумаге, можно объяснить появление дополнительных пятен на стартовой линии при хроматографировании актино-родина на бумаге без предварительной обработки [206]. В 1 кг такой бумаги (например, марки быстрая ) может содержаться до 70 мг железа и 30 мг меди. При хроматографировании в смеси н-бутанол — пиридин — вода (1 0,6 1) актинородин частично остается на стартовой линии, а частично перемещается в виде длинной полосы. Этого явления не наблюдается при использовании той же бумаги, тщательно промытой водой или смесью н-бутанол— уксусная кислота — вода (2 1 1) актинородин перемещается в виде компактного пятна. По-видимому, в первом случае актинородин образует нерастворимые комплексы с металлами. [c.28]

Трудности хроматографической классификации обусловлены несколькими обстоятельствами. Во-первых, использование стандартного набора растворителей исключает индивидуальный подход к каждому веществу. Между тем, наилучшее качество хроматограмм может быть обеспечено только в специфических для каждого соединения условиях. Хроматографирование не в оптимальных условиях может привести к образованию на хроматограммах длинных полос вместо компактных пятен, что сильно затрудняет определение величины Кг. Во-вторых, источником ошибок при хроматографической классификации антибиотиков может быть неконтролируемое влияние примесей (особенно солей). Так как хроматографическую классификацию используют на самых ранних этапах исследования, когда изучаемое вещество в чистом виде еще не получено, то вполне естественно, что изучаемые препараты содержат примеси, которые могут исказить хроматографическое поведение. В-третьих, результаты хроматографии могут быть искажены ошибками самого метода образованием дополнительных пятен, сильной адсорбцией на стартовой линии и т. д. И, наконец, еще одно обстоятельство (вероятно, не последнее) должно быть принято во внимание. На подвинчиость хроматографируемых веществ оказывают влияние такие трудно стандартизируемые факторы, как сорт бумаги, размер и форма камер, температура, количество веществ, наносимых на хроматограммы. Все эти причины порождают значительные трудности при истолковании результатов хроматографических опытов. [c.69]

Аналогичное заключение может быть сделано и в отношении четыреххлористого углерода, насыщенного водой (рис. 38, Л, кривая б). В 84% случаев хроматографируемые вещества остаются на стартовой линии. Для этого растворителя характерно частое образование дополнительных пятен на стартовой линии (около 7з тех случаев, когда величина К( выше 0), а также образование длинных полос вместо четких пятен (также около 7з случаев). Недостатком растворителя является также то, что такие антибиотики, как спирамицин, с одной стороны, и ми-цетин А и цинерубии, с другой, отделяются от близких к ним веществ, соответственно, антибиотиков группы макролидов и антибиотиков группы родомицииа. Эти данные позволяют сделать вывод, что четыре.ххлористый углерод, насыщенный водой, неудобен для целей классификации антибиотиков. [c.87]

Результаты сопоставления двух других растворителей — метанола и бутанола, насыщенного водой,— показали, что обе системы однотипны, различия между ними несущественны, так как кривые Кг почти повторяют одна другую. Если принимать во внимание только те антибиотики, которые движутся хотя бы в одном из этих растворителей, то различия в значениях Кг менее 0,2 наблюдаются у 76% антибиотиков, причем в 64% они будут менее 0,1. Оба растворителя почти не отличаются по числу случаев образования дополнительных пятен на стартовой линии (около 15%), но в метаноле длинные полосы образуются в 26% случаев, тогда как в бутаноле, насыщенном водой,—только в 12% случаев. Вероятно, причина более редкого образования полос в случае бутанола заключается в том, что этот растворитель насыщен водой. Следовательно, можно рекомендовать использование только одного бутанола, насыщенного водой. Тем не менее в отдельных случаях использование хметанола дает хорошие результаты. В частности, антибиотики — полнены при хроматографировании в метаноле дают более высокие значения Кг, чем в водонасыщенном бутаноле. [c.90]

Два листа хроматографической бумаги шириной 12 см погружают в свежеприготовленную смесь пропиленгликоля, метилового спирта и муравьиной кислоты (50 50 1 по объему), просушивают между листами фильтровальной бумаги и помещают на 2 мин в термостат при 60°. Затем на каждом листе выполняют две хроматограммы — одну образца, другую — стандартного раствора пентахлорфенола. Растворы для хроматографирования наносят на стартовую линию в форме полосы 25 мм длины в 20 мм друг от друга. Используют 100 мкл раствора образца (соответствует 2,5 г образца) и 20 мкл стандарта (20 мкг пентахлорфенола). Сразу же начинают проявление и ведут его до тех пор, пока фронт растворителя не достигнет 20—30 см от стартовой линии. В качестве проявляющего растворителя используют верхний слой свежеприготовленной смеси изооктана, муравьиной кислоты и пропиленгликоля (10 1 2 по объему). Просушивают хроматограммы в течение нескольких часов на воздухе и затем опрыскивают одну из них меднопиридиновым реактивом. [c.200]

Длинные полосы от стартовой линии к собственно нятиу [c.153]

Вейдекамм и др. [1389] описали быстрый и исключительно чувствительный метод анализа негативов, полученных при фотографировании полиакриламидных гелей, в которых разделенные компоненты выявлялись по их флуоресценции или путем окрашивания. Авторы воспользовались проекционной опознавательной системой PIQVANT, представляющей собой управляемое ЭВМ сканирующее устройство с подвижным лучом. Негатив проектируется на растр со следящей системой таким образом, чтобы продольная ось геля располагалась строго вертикально. Площадь, выбранная для измерений, автоматически сканируется в горизонтальном и вертикальном направлениях с помощью растровой системы. Растровое расстояние равно 36,5 мкм, но ЭВМ учитывает площадь круга с радиусом около 8 мкм вокруг каждой растровой точки. Ее яркость оценивается по линейной серой шкале с 64 уровнями яркости. Изображение геля на негативе разбивается по длине на 700—900 строчек. В каждой поперечной строчке измеряется примерно 80—100 точек. Такая система способна различать полосы, расстояние между которыми составляет всего 21 мкм. Анализ одного негатива занимает примерно 1 с. Результаты выдаются в обычной форме, т. е. в виде графика зависимости оптической плотцости от расстояния между данной точкой и стартовой линией. [c.194]

Подготовка хроматографической бумаги. Вырезают 2 полосы бумаги длиной 40 см, ширина зависит от размеров хроматографической камеры. Снизу на расстоянии 3 см от нижнего края бумаги карандащом проводят стартовую линию. На расстоянии 3 см от левого края отмечают первую точку для нанесения пробы, расстояние между точками нанесения пробы на хроматограмму должно составлять 3 см. [c.372]

I. Предварительно насыщают хроматографическую камеру парами растворителя. Для этого наливают на дно камеры растворитель I. Закрывают камеру и оставляют на час для насыщения пространства парами. Вырезают из хроматографической бумаги три полоски размером 30 X 40 см . Нижняя часть полоски оформляется как на рис. 136. Посередине узкой части карандашом наносят окружность диаметром 6 мм и отмечают линию старта. От линии старта отмечают чертой каждый сантиметр полосы и нумеруют полученные участки. На стартовой кружок микропипеткой наносят 0,05 мл соответствующего раствора изотопов на первую полоску кадмия-115, на вторую—цинка-65 и на третью—их смесь с общей активностью около 4000 имп/мин. мл (смесь выдается преподавателем). Бумага осторожно высушивается под инфракрасной лампой, и полоски подвешиваются так, чтобы половина нижней части погружалась в растворитель. Хроматограмму для проявления оставляют стоять на 3—12 час. Большее увеличение времени экспозиции ухудшает результаты. По окончании экспозиции хроматограмму осторожно вынимают, карандашом отмечают фронт растворителя и бумагу высушивают. Производят измерение активности вдоль всей полосы. Для этого хроматограмму разрезают на отдельные отрезки длиной 1 см, и измеряют активность каждого отрезка на торцовом счетчике, помещая препарат в пакете из кальки на специальный держатель. Если позволяет защитное устройство, полоску, не разрезая, передвигают под [c.311]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология