Упаковывающие клетки

В ретровирусную векторную систему внесены дополнительные усовершенствования увеличено число образующихся вирусных частиц, повышена эффективность трансдукции, осуществлена генноинженерная модификация, обеспечивающая их проникновение в неделящиеся клетки, повышена специфичность инфекции. В последнем случае геном рекомбинантного ретровирусного вектора упаковывается в оболочку другого вируса, белок которой и определяет специфичность связывания ретровируса и спектр [c.493]

Рис. 21.7. Аденовирусный вектор. В клетку-хозяина, несущую интегрированный в геномную ДНК функциональный ген Е1 аденовируса, вводят встроенную в сегмент аденовирусного генома (0-17 единицы карты) плазмиду с терапевтическим геном (ТГ) и участок геномной ДНК аденовируса (9-100 единицы карты). Длина генома аденовируса равна 100 единицам. В результате рекомбинации (штриховая линия) между перекрывающимися участками плазмиды и ДНК аденовируса образуется молекула ДНК, эквивалентная полноразмерному вирусному геному. Рекомбинантная ДНК, содержащая терапевтический ген, упаковывается и высвобождается из клетки после лизиса. Образующиеся вирусные частицы дефектны по репликации. Плазмидная ДНК, входящая в состав конечной генетической конструкции, не влияет на упаковку рекомбинантной ДНК (не показано).

Подобный же процесс, только в обратной последовательности, называется экзоцитозом. В эукариотических клетках постоянно секретируются различные типы молекул с помощью процесса экзоцитоза. Некоторые из них могут оставаться на мембране клетки и становиться ее частью, другие — выходят во внеклеточное пространство. Так, секреторные белки упаковываются в транспортные пузырьки в аппарате Гольджи и затем переносятся непосредственно к мембране. [c.314]

Вирусы прокариот, или бактериофаги, в большинстве своем имеют структурно-функциональное сходство В частности, они содержат лишь один какой-то тип нуклеиновой кислоты — ДНК или РНК в качестве генетического материала (у большинства фагов имеется двунитевая ДНК), нуклеиновая кислота упаковывается в головку фага, преобладающее большинство фагов имеет хвостовой отросток для прикрепления к поверхности реципиентной клетки, наконец, бактериофаги сходны по характеру индуцируемых ими событий, развивающихся в клетке после ее заражения — фаги являются облигатными паразитами [c.84]

Упаковку, маркировку, хранение и транспортирование масла АУП производят по ГОСТ 1510—60 со следующими дополнениями масло заливают в бидоны (банки) из белой жести емкостью 18—20 л вкладыши горловины запаивают и проверяют на герметичность (2% от партии). Обнаружив негерметичность, проверяют всю партию. После контроля на герметичность бидоны с маслом окунают в расплавленный петролатум или другую консервационную смазку внутреннюю поверхность крышек также смазывают. Бидоны (банки) с маслом упаковывают в деревянные клетки, обеспечивающие сохранность бидонов при транспортировании и хранении. Отбор проб производят по ГОСТ 2517—60 контрольную пробу отбирают в количестве 2 кг из 20% бидонов (банок) всей партии. [c.195]

Бидоны со смазкой смазывают по всей наружной поверхности смесью ружейной и пушечной смазки (1 1) и упаковывают в деревянные прочно сколоченные клетки. [c.287]

Смазку затаривают в жестяные бидоны емкостью ие более 20 л. На боковой поверхности каждого бидона делают по трафарету надпись с указанием наименования смазки и года ее изготовления. Надпись должна быть сделана черной эмалью, не смываемой водой и минеральным маслом. Наполненные бидоны смазывают по всей поверхности смесью смазок по ГОСТ 3005—51 и по ГОСТ 3045 —51 (1 1) и упаковывают для транспортировки в деревянные клетки, отвечающие чертежам и техническим условиям Министерства обороны СССР. [c.293]

Надпись должна быть сделана черной эмалью, не смываемой водой и минеральным маслом. Наполненные бидоны смазывают по всей поверхности смесью смазок по ГОСТ 3045—51 и ГОСТ 3005—51 (1 1) и упаковывают для транспортирования в деревянные клетки, изготовленные по техническим условиям, согласованным с потребителем. [c.427]

Бидоны (банки) с маслом упаковывают для транспортирования в деревянные клетки, изготовленные по чертежам и ТУ и обеспечивающие сохранность бидонов (банок) при транспортировании и хранении [c.148]

Рулоны профилированных протекторов упаковываются в деревянные ящики (клетки) по 4 или 8 шт. в горизонтальном положении. Не допускается укладка протекторов на торцы рулонов во избежание смятия кромок. [c.63]

Для выделения и исследования более длинных генов или группы соседних генов с прилежащими к ним последовательностями необходимо клонировать фрагменты ДНК еще большей длины (30—45 т. н. п.). Для клонирования таких фрагментов были сконструированы специальные векторы с большей емкостью — космиды, представляющие собой гибридную молекулу, содержащую специальный os-участок генома фага, за счет чего они могут упаковываться в головку фага X, и специальные последовательности, позволяющие им реплицироваться по плазмидному типу. Размер космиды довольно мал по сравнению с фаговым вектором — всего 5 т. н. п. и, следовательно, в космиду можно вставить чужеродную ДНК значительных размеров (30—45 т. н. п.). Фаговые головки, содержащие такую рекомбинантную ДНК, не могут размножаться как фаги. Ими трансформируют клетки Е. соИ. Гибридная молекула, содержащая эукариотическую ДНК, обрамленную os-сайтами, размножается в Ё. соИ как плазмида, и каждая фаговая частица вызывает образование колонии индивидуального бактериального трансформанта [c.41]

Вырабатывается из технических жиров зубатых китов кашалотовый (МРТУ 42 № 15—97—67) витаминизированный жир от светло-желтого до темно-желтого цвета, без прогорклости и постороннего запаха. В 1 г жира содержится 600 И.Е. витамина А и 100 И.Е. витамина Да. Расфасовывают в стеклянные бутыли емкостью 20 л, железные бочки емкостью до 200 л, банки, бидоны из белой жести до 20 л. Бутыли упаковывают в деревянные клетки, ящики или корзины, бидоны и банки — в деревянные ящики или клетки. [c.470]

ВИЧ принадлежит к числу так называемых ретровирусов, т. е. вирусов, в геноме которых закодированы зависимые транскриптазы (обратные транскриптазы). В результате репликация генома РНК-содер-жащих вирусов катализируется собственной обратной транскриптазой, которая упаковывается в белковую оболочку вируса — капсиду при каждой репликации вирусов в клетке-хозяине. Но в отличие от других ретро-вирусов (вирус саркомы кур Рауса, вирус полиомиелита) ВИЧ в своем геноме содержит пять дополнительных открытых участков, которые кодируют белки, оказывающие активирующее или подавляющее действие на белковый синтез и, возможно, на другие функции. Летальный эффект ВИЧ вызван тем, что, убивая специализированные Т-лимфоциты, он повреждает иммунную систему, поскольку без этих клеток В-лимфоциты не способны размножаться в ответ на проникновение в организм нового антигена. Молекулярный механизм летального действия ВИЧ таков при инфицировании клеток ВИЧ его капсидный белок связывается с трансмембранным клеточным белком, после чего вирусный капсид сливается с мембраной клетки, а вслед за этим вирусная РНК освобождается в клетку, где она после конверсии в двухцепочечную ДНК включается в хромосому в качестве провируса. Белок, синтезируемый под генетическим контролем провируса, позволяет инфицированным Т-лимфоцитам сливаться с неинфицированными Т-лимфоцитами, что ведет к их разрушению. Следовательно, человек погибает от потери способности организма к иммунологической защите от тех инфекций, которые сами по себе не являются смертельными. [c.491]

В случае соответствующих компартментов у бактерий и эукариотических клеток это расхождение еще больше. ДНК содержится только в какой-то ограниченной области, а не заполняет всего компартмента. В бактериальной клетке она организована в нуклеоид, а в интерфазном ядре эукариот представлена массой хроматина. Среди примеров, приведенных в таблице, кульминации достигает необходимость разместить ДНК человека длиной 1,8 м в ядре, диаметр которого может составлять всего лишь 6 мкм (6 X 10 м). При делении эукариотической клетки генетический материал упаковывается еще более плотно и образует индивидуально различимые митотические хромосомы. [c.344]

Некоторые вирусы растений состоят из нескольких частей их геномы разбиты на фрагменты, каждый из которых упаковывается в отдельный капсид. Примером может служить вирус мозаики люцерны, геном которого состоит из четырех различных одноцепочечных РНК. Каждая цепь упаковывается независимо в оболочку, состоящую из субъединиц одного и того же белка. Инфекционный процесс протекает успешно в том случае, когда в клетку попадает по одной из копий каждой цепи. [c.347]

В некоторых дифференцированных клетках, где полностью подавлена транскрипция, встречаются специфические основные белки, частично или полностью заменяющие гистоны. Так, в эритроцитах птиц гистон HI частично заменен на сходный с ним гистон Н5. В сперме рыб гистоны заменены на протамины. Прота-мины — это белки длиной около 35 а, о., а которых представлена основными остатка.ми, главным образом аргинина. Протамины принципиально отличны от гистонов, так как не образуют нуклеосом и плотно упаковывают ДНК иным способом. [c.238]

К числу гидролаз относятся ацетилхолинэстераза нервных клеток (дополнение 7-Б) и большое число пищеварительных фермеитов. Среди последних наиболее изучены протеиназы и пептидазы. Пепсин, трипсин, химотрипсин и карбоксипептидаза являются высокоэффективными катализаторами расщепления белков. Все оии секретируются в виде неактивных проферментов (гл. 6, разд. Ж,2), или иначе, зимогенов [26]. После синтеза на рибосомах эндоплазматического ретикулума особых секреторных клеток проферменты упаковываются в виде зимогеновых гранул, которые затем мигрируют к поверхности клетки и секретируются в окружающую среду. Пепсиноген является компонентом желудочного сока, в то время как химотрипсиноген, трипсиноген и другие панкреатические проферменты через проток поджелудочной железы попадают в тонкую кишку. Достигнув места своего действия, зимогены превращаются в активные ферменты под действием молекулы другого фермента, отсекающей от предшественника фрагмент (иногда довольно большой) полипептидной цепи [25]. [c.104]

MOM без El-области и последовательности, ответственной за упаковку, провели котрансфекцию клетки-хозяина, экспрессирующей Е1-гены. Молекула ДНК аденовируса, дефектная по репликации и упаковке, поставляет гены для синтеза компонентов вируса, а продукт лигирования реплицируется и упаковывается в вирусные частицы. При этом около 99% высвобождаемых вирусных частиц содержат молекулу ДНК с терапевтическим геном (генами). С помощью центрифугирования их можно отделить от дефектных по репликации вирусов, которые все же образуются в незначительном количестве. ДНК-клонирующая емкость такой системы достигает 28 т. п. и. [c.496]

Большинство систем доставки генов на основе HSV предполагает использование вируса-по-мощника, который поставляет белки, необходимые для репликации и сборки вируса, но не образует инфекционные вирусные частицы, поскольку его геном модифицирован и не способен упаковываться. Для получения рекомбинантного HSV осуществляют трансфекцию ампликон-плазмиды в инфицированную вирусом-помощником клетку-хозяина. ДНК ампли- [c.498]

Рекомбинантный HSV можно получить и с помощью котрансфекции клеток-хозяев, в которых вирус может реплицироваться, с помощью ДНК HSV дикого типа и плазмиды, которая содержит терапевтический ген, фланкированный последовательностями ДНК из вспомогательных участков HSV-генома. ДНК HSV дикого типа реплицируется в ядре клетки-хозя-ина, при этом в результате рекомбинации терапевтический ген может встроиться в HSV-re-ном. Затем частицы как рекомбинантного, так и дикого типа HSV упаковываются и высвобождаются из клеток. Доля рекомбинантных HSV в общем вирусном пуле очень мала, поэтому вирусы размножают, а затем с помощью ПЦР или гибридизации выявляют терапевтический ген в образовавшихся бляшках. Рекомбинантный вирус хранят в условиях, не допускающих его загрязнения HSV дикого типа (рис. 21.10). [c.498]

Рис. 21.9. Вектор на основе HSV-ампликон-плазмиды. Точка инициации репликации HSV (ori HSV), сигнал упаковки HSV и терапевтический ) ген (ТГ) встраивают в плазмиду Е. соН (HSV-ампликон-плазмида). Проводят трансфекцию клетки-хозяина, инфицированной вирусом-помощником HSV, полученной плазмидой. ДНК ампли-кон-плазмиды реплицируется по типу катящегося кольца . 10 амп-ликонов, соответствующих полноразмерному геному HSV, упаковываются в HSV-капсид, который поставляет вирус-помощник HSV. Геном этого вируса не упаковывается. HSV-частицы, несущие множество копий терапевтического гена, высвобождаются при лизисе клетки и используются для трансдукции нейронов.

Рис. 21.10. Образование HSV-вектора с помощью рекомбинации. Проводят котрансфекцию кдетки-хозяи-на плазмидой, которая содержит терапевтический ген, фланкированный последовательностями ДНК из вспомогательных областей HSV-генома, и ДНК HSV дикого типа. HSV-геном реплицируется в клеточно1М ядре по типу катящегося кольца , при этом между фрагментами ДНК HSV, входящими в состав плазмиды, и ДНК HSV дикого типа может произойти рекомбинация (штриховая линия). Молекулы ДНК HSV дикого типа и рекомбинантного HSV упаковываются в вирусные частицы, высвобождающиеся из клетки после лизиса. Вирусы размножают и проводят скрининг бляшек для идентификации рекомбинантных HSV. Полученные HSV-векторы хранят в условиях, исключающих их загрязнение HSV дикого типа.

Углеводы пищи деградируют в желудочно-кишечном тракте до моносахаридов (преимущественно глюкозы), транспортируются кровью в ткани, где окисляются и используются как источники энергии и углерода, необходимые для реакций биосинтеза. В печени и мышцах избыток глюкозы может резервироваться в виде гликогена (см. рис. 27.1 6, 11). В печени глюкоза может также превращаться в триацилглицеролы, которые упаковываются в ЛОНП и транспортируются кровью в адипоциты — клетки жировой ткани (см. рис. 27.1 7, 12). В адипоцитах жирные кислоты, входящие в эту фракцию, используются для синтезалипидов(27.1 14). [c.440]

Для получения товарных дрожжей необходимо отобранную из дрожжерастильного аппарата дрожжевую суспензию сгустить и высушить Первоначальное сгущение производят во фло таторах, где пена расслаивается, выделяющиеся пузырьки увлекают дрожжевые клетки и образуют новую, более плотную пену, обогащенную дрожжами до концентрации 60—80 г/л По следнюю сгущают на сепараторах до 150—250 г/л, дрожжи промывают водой, вновь сгущают на сепараторах до концентрации 500—600 г/л и промывают Затем суспензию нагревают до 80 °С для придания дрожжам текучести за счет разрушения оболочек дрожжевых клеток (плазмолиза) Плазмолизат высушивают в распылительных сушилках (на некоторых заводах его предва рительно упаривают в вакуум выпарных установках) и товар ные дрожжи упаковывают в бумажные мешки Выработка дрожжей 9—10 т/сут на каждый действующий дрожжерастиль ный аппарат вместимостью 600 м [c.32]

Упаковку, маркировку, хранение, транспортирование и прием щелочного состава производят по ГОСТ 510—60 со следующими изменениями поставляют его в жестяных бидонах. Горловины бидонов после налива запаивают. На боковой поверхности каждого бидона указывают по трафарету наименование составй и год его изготовления. Надпись должна быть сделана черной эмалью, не смываемой водой и минеральным маслом. Наполненные бидоны смазывают смесью смазок по ГОСТ 3045—51 и ГОСТ 3005—51 (1 1) и упаковывают для транспортирования в деревянные клетки, изготовленные по техническим условиям, согласованным с потребителем. Отбор проб щелочного состава производят по ГОСТ 2517—60, для контрольной пробы берут 1 л щелочного состава. [c.385]

Неожиданно эффективным оказалось введение чужеродной ДНК в клетки растений с помощью специального ружья. Нужная ДНК упаковывается в золотые или вольфрамовые бусинки диаметром 1 мм. Их размещают на кончике пластиковой пули, которую вставляют в ствол специально сконструированного ружья. В первоначальном варианте пуля выстреливалась обычным способом, т. е. с помошью взрывного заряда, однако сейчас для выстрела используют сжатый газ. Пуля разрывается в камере на поверхности, имеющей микроскопические отверстия. Некоторые из частичек упакованной ДНК попадают через эти отверстия в мишень, которой являются растительные кпетки или ткани. Выстрел производится в вакууме, поэтому частички ДНК не оседают. [c.230]

Таким образом, совершенно очевидно, что предшественники фага (белокиДНК) синтезируются в зараженной клетке отдельной лишь позднее объединяются, образуя зрелые инфекционные частицы фага. В процессе созревания происходит агрегация примерно тысячи или более идентичных белковых субъединиц, в результате которой появляется оболочка головки фага и создается четвертичная структура белка. Оболочка головки заполняется длинной и тонкой нитью ДНК - предшественника фага, которая упаковывается в компактное многогранное тело. Наконец, заполненная ДНК головка фага снабжается отростком и после этого достигает состояния инфекционности. Такую последовательность внутриклеточного созревания впервые наблюдал Келленбергер, разработавший в 1958 г. метод приготовления тонких срезов бактерий, проницаемых для пучка электронов в электронном микроскопе. На фиг. 135 представлена серия электронных микрофотографий срезов Е. соН, сделанных Келлен-бергером в разные промежутки времени после заражения клеток фагом Т2. [c.269]

Обратная транскриптаза упаковывается вместе с геномом в вирусную частицу. Фермент превращает РНК в линейную двухцепочечную молекулу в цитоплазме инфицированной клетки. Линейная ДНК самостоятельно проникает (неизвестным способом) в ядро, где она превращается в кольцевую молекулу. Одна или несколько копий ДНК интегрируют в геном хозяина. Интегриро- [c.490]

Но эволюция использует все возможности. Вне зависимости от происхождения некодирующей ДНК сейчас она, наверняка, выполняет какую-то важную функцию. Например, часть этой ДНК играет структурную роль, позволяя генетическому материалу конденсироваться или упаковываться определенным образом. Другая часть лишней ДНК - регуляторная и участвует во включении и выключении генов, направляющих синтез белков, играя, таким образом, ключевую роль в сложных механизмах регуляции экспрессии генов эукариотической клетки. [c.40]

Различия в природе боковых групп аминокислот обусловливает замечательное разнообразие возможных типов пространственной структуры белков. Рассмотрим в качестве примера крайних случаев два типа белков, секретируемых клетками соединительной ткани, - коллаген и эластин, которые относятся к белкам внеклеточного матрикса. В коллагене три отдельные полипептидные цепи, богатые пролином и содержащие в каждом третьем положении глицин, закручены одна вокру другой и образуют тройную спираль (см. разд. 14.2.6). Эти молекулы коллагена в свою очередь упаковываются в волокна, в которых соседние молекулы скреплены ковалентными сшивками между соседними лизиновыми остатками В результате формируются волокна, способные выдерживать исключительно большую нагрузку (рис. 3-28). [c.142]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология