Получение раствора яичного альбумина

Ход работы. Яичный белок смешать с пятикратным объемом воды и выпавший яичный глобулин отфильтровать. В полученном фильтрате определить наличие альбумина осаждением путем нагревания и применением алкалоидных реактивов, а затем для подтверждения альбуминового характера обнаруженного белка- определить границы высаливания. Для этого в девять пробирок налить (в каждую ) по 1 мл раствора белка. После этого долить различное количество воды так, как это указано в приведенной форме, а затем в первые восемь пробирок добавить возрастающий объем насыщенного раствора сернокислого аммония, а в девятую твердой соли (МН4)2304 до полного насыщения. [c.178]

В одну пробирку наливают 5 мл золя берлинской лазури, полученного в предыдущей работе. В четыре другие пробирки наливают по 5 мл гидрофильных золей крахмала, желатина, яичного альбумина и казеина. В каждую из 5 пробирок по каплям из бюретки добавляют насыщенного раствора сульфата аммония до коагуляции коллоидного раствора, отмечая количество электролита, необходимое для коагуляции каждого раствора. Полученные результаты записывают в таблицу. [c.218]

Нетрудно также видеть, что все рассмотренные методы количественного учета ферментов дают представление не об абсолютном количестве фермента, но лишь об относительном его содержании. Однако для практических целей и эти относительные показатели имеют большую ценность. Так, при количественном определении пепсина в. желудочном соке по методу Метта полученные величины ничего не говорят об абсолютном содержании пепсина в желудочном соке больного, но они все же достаточно ясно-показывают, насколько исследуемый сок по своей активности, т. е. по своей способности растворять денатурированный яичный альбумин, отличается от нормального л<елу-дочного сока здорового человека. Очевидно, эти величины для клиники представляют большой интерес и вполне заменяют цифры, характеризующие содержание пепсина в желудочном соке в абсолютных весовых единицах. Точно так же для характеристики осахаривающей (амилолитической) способности слюны или вытяжки из проросших зерен ячменя (солода) совершенно достаточно для практических целей выражать эту способность в условно принятых единицах. [c.124]

Исследуя наиболее хорошо изученные к тому времени белковые вещества (альбумины плазмы крови и яичного белка, фибрин, казеин и т. д.), Мульдер установил, что они содержат различные количества фосфора и серы, которые, как тогда полагали, входили в состав белков в виде фосфорнокислых или сернокислых солей натрия, калия или кальция. Мульдер считал, что кроме этих связанных форм фосфора и серы белки содержат некоторые количества свободной серы, а в отдельных случаях — свободного фосфора. При этом подразумевалось, что свободные сера и фосфор как-то связаны только с радикалами белковой молекулы. Количественно анализируя полученную при сжигании белков золу и определив в ней содержание серы и фосфора, ученый, сопоставив полученные им данные процентного содержания этих элементов, а также углерода, кислорода, водорода и азота и вычисленные им молекулярные веса отдельных белков, пришел к результатам, почти ничего не добавившим к уже известным тогда фактам [330, 334]. Выведенные им молекулярные веса отдельных белковых веществ и процентное содержание в них отдельных элементов представляли собой величины такого Же порядка, что и найденные его предшественниками. После этих предварительных опытов Мульдер попытался выделить из белковых веществ отдельные, составляющие их фрагменты, используя для этого уже известные ранее приемы — воздействие слабых растворов кислот при 50—60° С. Для гидролиза белка он впервые использовал щелочь. При этом было обнаружено, что при обработке раствором едкого калия при 50° С фибрина, сывороточного или яичного альбумина, предварительно очищенных смесью спирта, эфира и слабой соляной кислоты, происходило полное растворение белков. При нейтрализации полученного раствора слабой уксусной кислотой выпадал белый хлопьевидный осадок, который, как и предполагал Мульдер, был полностью лишен свободной серы и свободного фосфора. Определив элементарный состав и процентное содержание углерода, водорода, азота и кислорода и вычислив молекулярный вес этих осадков, ученый обнаружил, что независимо от того, какой белок [c.30]

Работа 4. Получение раствора яичного альбумина [c.9]

Опыт 1. Обратимая коагуляция яичного белка. Белок, взятый из одного или двух яиц, растворяют в 100 Му2 дистиллированной воды. На воронку Бюхнера (воронка для отсасывания) кладут бумажный фильтр, смачивают его дистиллированной водой, включают водоструйный насос и отсасывают раствор белка. К 40—50 мл полученного раствора прибавляют небольшими порциями порошок сульфата аммония и взбалтывают для ускорения растворения. При насыщении из раствора выделяется альбумин в виде хлопьев или сгустков. Отфильтрованный осадок альбумина высушивают фильтровальной бумагой и переносят в чистую воду при этом альбумин вновь растворяется. [c.234]

Оформление работы. Кратко описывают условия получения яичного альбумина записывают результаты цветных реакций вычисляют и записывают концентрацию белка в растворе. [c.10]

Рассмотренные нами способы получения коллоидных систем применяются преимущественно для получения лиофобных коллоидов. Что касается лиофильных коллоидных систем, то в огромном большинстве случаев для их получения не требуется применения специальных методов, так как они представляют собой коллоидные растворы таких веществ, которые сами собой диспергируются в соответствующей дисперсионной среде. Таковы, например, водные растворы гуммиарабика, яичного альбумина, агар-агара, желатины и некоторых красителей или растворы каучука, нитроцеллюлозы и ацетилцеллюлозы в различных органических растворителях. [c.357]

Нетрудно также видеть, что все рассмотренные методы количественного учета ферментов дают представление не об абсолютном количестве фермента, но лишь об относительном его содержании. Однако для практических целей и эти относительные показатели имеют большую ценность. Так, при количественном определении пепсина в желудочном соке по методу Метта полученные величины ничего не говорят об абсолютном содержании пепсина в желудочном соке больного, но они все же достаточно ясно показывают, насколько исследуемый сок по своей активности, т. е. по своей способности растворять денатурированный яичный альбумин, отличается от нормального желудочного сока здорового человека. Очевидно, эти величины для клиники представляют боль- [c.131]

В три другие пробирки добавить раствор альбумина (яичного белка), наблюдая коагуляцию его. Записать в журнал цвета полученных осадков. Какая кислота коагулирует альбумин [c.227]

Альбумины — белки, хорошо растворимые в воде. Из растворов их не удается осадить поваренной солью (как многие другие белки). При прибавлении к раствору альбумина сернокислого аммония альбумин осаждается лишь тогда, когда концентрация (МН4)2304 достигнет 65% той концентрации, которая необходима для полного насыщения раствора Ряд альбуминов был получен в кристаллическом состоянии. Альбумины содержатся в белке яйца (яичный альбумин), молоке (молочный альбумин), сыворотке крови (сывороточный альбумин). [c.341]

Опыт 2. Необратимая коагуляция яичного белка. Часть раствора альбумина яичного белка, оставшуюся от предыдущей работы, нагревают до кипения, медленно повышая температуру при температуре приблизительно 50—60 °С в растворе появляется белая муть, и при дальнейшем нагревании образуются хлопья. Осадок и находящийся над ним раствор оставляют охлаждаться полученный осадок в воде не растворяется, так как в результате нагревания произошли необратимые изменения в белке, называемые денатурацией. [c.234]

Довольно много измерений такого рода было проведено с яичным альбумином. Это один из сравнительно простых белков, который поддается тщательной очистке. Первые измерения с монослоями яичного альбумина и других белковых веществ, включая и определение их молекулярной массы, были осуществлены Гуа-сталла в 1945 г. со специально сконструированными поверхностными весами с чувствительностью 0,001 дин ( ). Он показал, что только при очень сильном разрежении поверхностного слоя (100 м /мг) зависимость двумерного осмотического давления от площади удовлетворяет уравнению состояния идеального монослоя. При этих условиях было установлено, что молекулярная масса яичного альбумина равна М = 40 ООО. В 1947 г. Булл, используя другой раствор-подложку (концентрированный водный раствор сульфата аммония вместо употреблявшейся Гуасталла подкисленной воды), добился существенного расширения области идеального двумерного состояния (до 1,5 м /мг). Из своих измерений, более точных, чем измерения Гуасталла, он нашел М = 44 ООО. В 1951 г. Мишук с помощью предложенной им более удобной измерительной системы и для гораздо более тщательно очищенного яичного альбумина получил М = 44 900 (на подложке из концентрированного раствора карбоната аммония). Полученная Мишу-ком кривая зависимости я от площади (в кв. метрах на 1 мг нанесенного вещества) показана на рис. 32. [c.131]

На основании результатов, полученных при изучении каталитического действия простых соединений, Брдичка [34—36, 55] пришел к выводу, что каталитическая активность белков связана с содержанием в их молекулах цистина или цистеина. Белки, богатые цистеином (например, инсулин), дают более высокие волны, чем белки, бедные цистеином (яичный альбумин). Белки, не содержащие цистеина (желатина), вообще не показывают каталитического эффекта. Выражая содержание цистеина с учетом объема молекулы белка, Миллар [19] нашел линейную зависимость между предельной высотой каталитической волны и содержанием цистеина. Он же показал, что если участие аминогрупп в образовании двойной волны и играет некоторую роль, то она очень незначительна, так как блокирование аминогрупп инсулина практически не вызвало изменение высоты каталитической волны в растворе кобальта . [c.397]

Наибольший интерес представляют результаты, полученные при 55° С (при температуре, близкой к температуре денатурации яичпого альбумина в объеме раствора). Наряду с ускорением процесса образования межфазного слоя и резким увеличением прочности (при 55° С прочность слоя в 10 раз выше прочности слоев, образующихся при 22° С) наблюдаются заметные максимумы на кривых. Максимумы прочности не наблюдаются для очень разбавленных растворов. Быстрое нарастание прочности, а затем спад во времени ярче проявляются при увеличении концентрации яичного альбумина до 0,5 и 1 з/ЮО мл. Это явление далее будет рассмотрено подробнее. Здесь только следует указать на одно сопутствующее явление. При температуре 55° С наблюдаются заметные складки и морщины в адсорбционном слое на границе раздела фаз слой можно было удалить с помощью стеклянной палочки. Обращает на себя также внимание тот факт, что прочность адсорбционного слоя а-казеина на границе с воздухом очень мала (10" дин1см), т. е. на 2—3 порядка меньше, чем на границе с бензолом. [c.201]

Такая система позволяет получить более четкое разделение. При нанесении образца (в объеме 40 л) элюат, не содержащий аминокислот, сливают в трап. После впитывания всех 40 л отсоединяют первую колонку и оставшиеся три промывают 0,15 н. водным раствором аммиака со скоростью 20 мл/мин, собирая элюат по фракциям объемом 250 мл. Анализ ведут методом бумажной хроматографии. Первую колонку, содержащую основные аминокислоты, соединяют с двумя небольшими колонками (2,5x20 см и 1,7x13,6 см), также заполненными полистиролом. Вытеснение ведут 0,075 н. раствором едкого натрия со скоростью подачи 6 мл/мин (объем фракций равен 250 мл). Профиль элюирования строят по данным хроматографии на бумаге. Объединяют фракции, характеризующиеся наиболее простым составом и максимальным содержанием аминокислот. Эти уже обогащенные смеси вновь фракционируют на сульфокатионите (Zeo-Karb-215) в различных условиях или на дауэксе-2 до получения чистых аминокислот. Не представляющие интереса промежуточные фракции отбрасывают. Условия рехроматографии выбирают с учетом состава смеси. Выход аминокислот составляет около 50% от веса исходного белка. В качестве источника аминокислот используют белковые гидролизаты например, яичного альбумина) или гидролизаты микроорганизмов (например, дрожжей) и даже биологические экстракты [90]. Важно лишь, чтобы смесь не содержала большого количества полисахаридов. [c.356]

Значения теплоемкостей, определенные при фиксированной средней температуре во всем диапазоне составов изучаемой системы, от сухого белка до разбавленного раствора, сообщались для яичного альбумина [9] и лизоцима [14]. В работе [15] измерены тем/плоемкости нескольких белков при максимальном и минимальном содержании белка. Значения теплоемкостей, полученные с помощью капельного калориметра при фиксированной температуре, отличаются особой точностью. Подобные измерения, произведенные при 25 °С (температура, которая лг-жит между температурами плавления и начала тепловой денатурации), выявляют изменения в термических свойствах системы, которые не обнаруживаются при измерениях на сканирую- [c.118]

Важным результатом, полученным при изучении электрофореза растворов белков, было открытие того, что многие белки, которые являются чистыми по другим критериям, в действительности состоят из нескольких видов молекул. Ярким примером этого может служить яичный альбумин (рис. 125). Этот белок кристалличен (поэтому свойственно предположить, что все молекулы являются почти абсолютно идентичными) и показывает однородность в ультрацентрифуге (отсюда следует, что все молекулы имеют один и тот л<е молекулярный вес и коэффициент трения). Этот белок также показывает однородность в экспериментах по электрофорезу при различных условиях, таких, какие использовал Лонгворс, чтобы получить данные, представленные на рис. 123 (см. также рис. 125, верхнюю диаграмму). Однако если используется поле большой напряженности и эксперимент проводится очень длительно, то появляются благоприятные условия для разделения компонентов с почти одинаковыми подвижностями. При данных условиях, как показывает рис. 125, было найдено, что чистый белок состоит из трех отдельных компонентов. Предполагают , что эти три компонента являются идентичными во всех отношениях, кроме количества фосфата, которое они содержат, причем в них могло быть два, один и ни одного фосфатного иона соответственно. Фосфат связан с белком через гидроксильную группу в боковой цепи, и каждая фосфатная группа, [c.489]

Объектом работы служит золь гидрата окиси железа, полученный методом пептизации осадка Ре(ОН)з раствором РеС1з. Содержание РегОз в золе 0,3—0,5%. Сенсибилизация и стабилизация золя производятся добавлением кровяного или яичного альбумина. Если ограничиться определением только стабилизирующего действия, то работа может быть проведена с желатиной. [c.174]

Субтилизин получен в кристаллическом виде культуральной жидкости Ba ielus subtilis [40]. Удивительная специфичность данного фермента обнаружена в опытах с ограниченным гидролизом яичного альбумина, который приводит к образованию нового кристаллического белка — пластинчатого альбумина (плакальбуми-на) — с отщеплением гексапептида Ала-Гли-Вал-Асп-Ала-Ала [41]. Другим примером такого ограниченного действия субтилизина является отщепление 20-членного N-концевого пептида от нативной рибонуклеазы [42]. Этот S-пептид и остаточный белок, называемый S-белок , не обладают ферментативной активностью. Оба компонента проявляют высокое взаимное сродство даже в очень разведенных растворах при их смешении происходит реконструкция фермента с восстановлением активности, близкой к исходной. [c.126]

Постоянную в называют константой взаимодействия. Как было показано при изучении осмотического давления, эта константа не зависит от М, но зависит от типа используемого растворителя. Уравнение (7.79) графически выражается в виде прямых линий, по которым легко оценить М. Именно это уравнение и используется для вычисления мол. веса макромолекул по данным светорассеяния. Халвер, Наттинг и Брайс [50] использовали уравнение (7.79) при изучении светорассеяния растворов лизоцима, яичного альбумина и лактоглобулина и построили графики в координатах ЯС/т — С, которые имели небольшой отрицательный наклон. Исключение составлял яичный альбумин, для которого наклон был равен нулю. На рис. 7.28 представлены данные, полученные при измерении светорассеяния гуммиарабика. На оси у отсекается отрезок, равный 1/М. Если требуется высокая точность, то в значение М следует внеЛ и поправку на поляризационный эффект, которую находят экспериментально, помещая на пути пучка рассеянного света поля-роидный анализатор. Введение такой поправки в большинстве случаев изменяет значение М всего лишь на несколько процентов, что обычно значительно меньше общей ошибки экспери- [c.444]

Опыт. Яичный белок смешивают со 100 мл воды и фильтрованием в вакууме удаляют нитевидный осадок. К 30 мл полученного золя при непрерывном перемешивании добавляют твердый сульфат аммония. Когда раствор почти насыщен, образуется белый осадон альбумина. После его осаждения сливают жидкость над осадком и добавляют 30 мл воды. Осадок снова растворяется. [c.548]

Смотреть страницы где упоминается термин Получение раствора яичного альбумина: [c.194] [c.309] [c.320] [c.332] [c.276] [c.200] [c.200] [c.139] [c.133] [c.59] [c.292] [c.340] [c.112] [c.348] [c.20] [c.340] [c.374] [c.58] [c.49] [c.24] [c.139]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология