Контрастирование

Электронная микроскопия (сканирующая - СЭМ и трансмиссионная - ТЭМ) превосходит оптическую по разрешающей способности и позволяет исследовать как ненаполненные, так и наполненные смеси. Однако при использовании электронной микроскопии могут возникнуть проблемы с контрастированием фаз, что требует или тонирования одной из фаз, или физической обработки. При близкой ненасыщенности эластомеров приходится применять более сложную процедуру травления. [c.576]

Микроскопия. Методом оптической микроскопии с контрастированием фаз определяется гетерогенность при размерах порядка 0,2—10 мкм. Во многих случаях гетерогенность можно оценить с помощью электронной микроскопии, позволяющей определить гетерогенность в частицах до 0,01 мкм (рис. 1.19). Гетерогенность, обнаруживаемая микроскопическими методами, весьма относительна. [c.34]

Форма молекулы может быть также определена путем измерения вязкости, а также методом двойного лучепреломления в потоке. С помощью электронной микроскопии возможно прямое определение формы молекулы. При этом пользуются методом негативного контрастирования при применении тетраоксида осмия или других тяжелых металлов в качестве контрастирующих средств. [c.363]

Сердцевинное положение РНК и более периферическая локализация белков в рибосомных частицах может быть продемонстрирована также с помощью специальной техники электронной микроскопии, где частицы погружены в среды с разной электрон-рассеивающей плотностью. Здесь используется тот же принцип контрастирования, что и в случаях диффузного рассеяния в растворе. Так, когда частицы погружены в глюкозу, то электрон-рассеивающие плотности среды и белкового компонента оказываются уравненными и видна только РНК. В других средах видны как белок, так и РНК. Этим методом удалось подтвердить как тот факт, что РНК образует центральное ядро в рибосомной частице, так и многочисленные указания, что в то же время РНК далеко не вся покрыта белками, а в ряде мест образует поверхность частицы. [c.106]

Возможно исследование этим методом вулканизованных эластомеров, однако для этого необходимо применять специальные методики. Например, при изучении структуры вулканизованного изопренового каучука методом ТЭМ образцы растворяют или подвергают набуханию в стироле с последующей его полимеризацией. После контрастирования образцов тетраоксидом осмия наблюдается сетчатая структура с размером ячейки, хорошо согласующимся со среднеквадратичной длиной фрагмента каучука между узлами сшивания. По данным распределения по размерам можно построить кривую распределения плотности сшивания. В образцах, полученных из раствора, наблюдаются сферические частицы с диаметром, соответствующим ассоциатам из 10 макромолекул. [c.356]

Во многих случаях имеет смысл применять цветные телевизионные установки или проводить цветовое контрастирование изображения (см. 5.9), что повышает достоверность контроля. Одной из существенных составляющих погрешности в толщинометрии является влияние нелинейности изображения вдоль экрана, создаваемой отклоняющими системами трубок. Для снижения этой погрешности градуируют выходной экран с помощью тест-объектов или координатных сеток либо помещают их в зону контроля. Если известно предположительное направление дефектов, то следует располагать приемную телевизионную камеру так, чтобы строки были перпендикулярны этому направлению, поскольку при этом снижается вероятность пропуска дефектов. Телевизионные методы позволяют обнаруживать дефекты, минимальный размер которых равен [c.258]

Наряду с типовыми методиками радиационного контроля ведутся разработки различных способов получения и обработки информации, повышающих его чувствительность и достоверность. К таким способам относятся применение цветных радиограмм и цветное контрастирование изображений, получение стереоизображений, [c.340]

Дальнейшее развитие техники электронной микроскопии, сопровождавшееся улучшением разрешениями в частности применение нового метода, основанного на негативном контрастировании мембранных препаратов, позволило выявить морфологически более сложную картину структурной организации биологических мембран. Оказалось, что во многих случаях, и особенно на микрофотографиях внутриклеточных органелл, мембрана выглядит не как сплошная трехслойная линия, а как гранулярная структура, имеющая разрывы (или поры) и состоящая из отдельных глобулярных частиц. [c.582]

При прямых методах исс.иедования, т. о. при исследовании непосредственно объекта в виде ультратонких срезов и пленок, часто также прибегают к методам контрастирования, которые ос]юваны на пропитывании объекта веществами, содержащими тяжелые металлы с большой рассеивающей способностью по отношению к электронам. Этот метод, по аналогии со световой микроскопией, применяющей окрашивание животных илп растительных тканей, используют, главным образом, нри исследовании биологических объектов или полимеров для получения сведений об их морфологической структуре. [c.189]

Известны два метода контрастирования ультратонких с])езов и пленок при электронно-микроскопическом исследовании. [c.189]

Позитивное контрастирование. Оно основано на присоединении различного количества контрастирующего агента к отдельным элементам структуры обт1екта, в результате чего и создается контрастность препарата. [c.189]

Негативное контрастирование. Оно заключается в том, что срез образца обрабатывают растворалги солей тяжелых металлов соли подбирают таким образом, чтобы они не присоединялись к исследуемым элементам структуры, а создавали темный фон. На этом фоне располагаются более светлые частицы исследуемого объекта, что по.чволяет четче выявить структурные особенности. Метод негативного контрастирования применяют для изучения синтетических но.]1имеров и биополимеров. [c.189]

Частицы небольшого размера, в том числе макромолекулы, выявляют методом напыления. Для этого металл —хром или платину — испаряют в вакууме и напыляют под определенным углом на поверхность исследуемого образца. Так можно увидеть отдельные молекулы ДНК, хотя и при сравнительно низкой разрешающей способности. Собственно, видны не сами молекулы, а только их тени , которые в 2—3 раза шире. При исследовании белков часто применяют метод негативного контрастирования. Суть метода состоит в следующем тонкий слой раствора, содержащего исследуемые белки и электроноплотное вещество (например, фосфоволь-фрамовокислый натрий в концентрации 1%), наносят на углеродную пленку-подложку и высушивают. Образуется однородный электроноплотный слой, характеризующийся тем, что в местах локализации молекул белка отсутствует соль фосфовольфрамовой кислоты отсюда и термин негативный контраст . [c.20]

РИС. 2-23. А. Двойная спираль ДНК В-форма. (Arnott S., Hukins D. W. L.. JMB, 81, 93—105, 1975.) Б. Электронная микрофотография молекулы ДНК бактериального вируса (бактериофаг Т7) в момент ее репликации. Вирусная ДНК представляет собой длинный ( 14 мкм) дуплексный стержень, содержащий около 40 000 пар оснований. Виден небольшой репликативный глаз — участок, где происходит удвоение ДНК. Синтез ДНК начинается в особой точке (точке инициации), расположенной иа расстоянии, равном 17% длины молекулы, от одного из концов дуплекса. Окраска уранилацетатом негативное контрастирование. (С любезного разрешения Т. Wolfson [c.131]

Микрофотография концевой части бактериального жгутика внутри чехла (негативное контрастирование фосфовольфрамовой кислотой). Жгутик принадлежит неидентифи-цированной бактерии, обнаруженной в пруду. Назначение неплотно прилегающего чехла неясно. (С любезного разрешения F. D. Williams.) [c.282]

На базальных концах жгутиков грамотрицательных бактерий имеются два дополнительных кольца. На этой электронно-микроскопической фотографии" показан жгутик Е. oli (контрастирование уранилацетатом). На конце жгутика видны N- и S-кольца. Выше их имеются Р-кольцо (которое служит, вероятно, для прикрепления жгутика к пептидогликановому слою) и L-кольцо (с помощью которого жгутик, по-видимому, прикрепляется к наружной мембране или к липополисахаридному слою) (рис. 5-8). Стрелка указывает место присоединения крючка> к более тонкой части нити. Крючок часто изгибается, принимая форму угольника. [c.283]

Уже давно было показано что во всяком случае эукариотические рибосомы прикрепляются к мембране своей большой (60S) субчастицей. По-видимому, существует специальный участок на 60S субчастице, который имеет сродство к мембране эндоплазматического ретикулума, и, таким образом, все рибосомы прикрепляются к мембране строго определенной точкой, в одной и той же ориентации. Эта ориентация такова, что ось, соединяющая большую субчастицу и малую субчастицу, приблизительно параллельна поверхности мембраны (рис. 126). Данные электронной микроскопии негативно контрастированных эукариотических рибосом указывают, что длинная ось малой субчастицы должна быть приблизительно параллельна поверхности мембраны, и заставляют предполагать, что прикрепление рибосомы к мембране должно, скорее всего, иметь место со стороны боковых выступов субъединиц (эквивалентных Ll-гребню 50S субчастицы и платформе 30S субчастицы Е. соИ, см. Б.1.2) таким образом, район предполагаемого кармана для тРНК (см. рис. 86) и стержень большой субчастицы (см. B.L3), по-видимому, должны находиться на стороне, обращенной от мембраны. [c.276]

Методы изучения гомогенности и морфологии смесей поли меров включают изучение процессов стеклования, оптическую, флуо ресцентную, атомно-силовую и электронную микроскопию, малоут ловое рассеяние рентгеновских лучей и нейтронов и ядерный магнит ный резонанс. Все эти методы применимы при исследовании полимеров в массе, однако могут быть некоторые ограничения, связанные присутствием наполнителей [4]. Наиболее информативными оказываются методы микроскопии, так как контрастирование фаз дает воз- [c.574]

Такое разделение фаз внутри макромолекулы можно уже наблюдать непосредственно методом рассеяния нейтронов, с помощью дейтериевого контрастирования. Рассеяние нейтронов по сравнению с рассеянием света или рентгеновых лучей происходит в полимерных системах только на протонах. Замена в макромолекуле всех атомов водорода на дейтериевые приводит к тому, что она становится прозрачной для нейтронов, т. е. больше не рассеивает. [c.63]

Рис. 9. Микрофотография срезов клеток мицелия фруктозного варианта A t. roseoflavus var. roseofungini (ув. 75000) а — гифы культуры на СР-1 с глюкозой б — на овсяном агаре в — культура на СР-1 с глюкозой вокруг клеток нидно большое количество трубочек, лежащих в различных плоскостях г — тонкая структура отдельных трубочек при негативном контрастировании 0,5% раствором уранилацетата (ув. 150 000) — клеточная стенка ЦМ — цитоплазматическая мембрана М — мембранные образова- иия ОГ — осмиефильные гранулы Н — нуклеоид В — вакуоль Т — трубочки (Черни и др., 1972)

Количество и размер электронно-светлых зон, выявляемых на ультратонких срезах (рис. 20, 6 и аморфных гранул, выявляемых на сколах, значительно увеличиваются при дальнейшем культивировании мицелия и достигают максимума на третьи сутки. В этот период, когда содержание антибиотика достигает максимального значения, наблюдается заметное просветление цитоплазмы и интенсивное развитие мембранного аппарата, окружающего многочисленные гранулы (рис. 20, б). Размеры гранул настолько велики, что в некоторых случаях они заполняют большую часть пространства гифы между двумя смежными септами. Аналогичные по форме п размерам гранулы наблюдаются и на негативно контрастированных препаратах (рис. 20, е). На последних этапах культивирования (7— 8 сутки) цитоплазма полностью просветляется, а содержимое клетки представлено скоплениями мембран и многочисленными крупными гранулами. Электронно-микроскопические исследования показали, что появление гранул, увеличение их числа и размеров коррелирует с содержанием антибиотика в культуре. Обнаружение у гранул люминесценции, характерной для флавофунгина, было прямым доказательством их природы (рис. 20, г). [c.175]

Определение микроколичеств бромидов [875]. Аликвотную часть анализируемого раствора с содержанием брома около 1 мг разбавляют до 40 л1л, добавляют 10 лы 10%-иого раствора Na l в 10 H SO и 0,5 мл пергидроля. Смесь нагревают до 70 + 2 С и, непрерывно помешивая, титруют раствором, содержащим в 1 л 0,8185 мг метилового оранжевого. КТТ считают достигнутой, если после прибавления очередной капли титранта он пе обесцвечивается в течение 15—20 сек. В присутствии 1 — 2 капель метиленового синего, который вводят для контрастирования КТТ, окраска изменяется от синевато-красной до зеленой. Поправка на глухой опыт обязательна. 1 мл титранта отвечает 0,20 мг брома. [c.91]

Сочетание душистых веществ, независимо от резкости их контрастирования, особенно если это сочетание предназначается для духов или цветочных одеколонов, нуждается в наложении сочетания на соответствующий фон, на котором как бы разверты ваегся основной сюжет. Фон, этот должен гармонировать с запахом композиции, придавать ей законченность полноту, цельность, иногда осмысленность, и главное придавать букету впечатление реальности. Он необходим абсолютно для всех парфюмерных композиций с тонким запахом тяжеловатых, легких и сладких, для цветочных и фантазийных. Парфюмерная техника оказывается в этом отношении в выгодном положении благодаря наличию таких универсальных фонов, как роза, флёрдоранж, тубероза и в особенности жасмин. Эти фоны оттеняют основную идею, оживляют ее и сообщают нежность и иллюзию свежего цветка пли букета. Масло жасмина своим теплым бархатным запахом украпюет и розу, и флердоранж, и туберозу. [c.36]

Хофман и Парамесваран (цит. по [71 ]) иутем электронной микроскопии делигнифицироваипых трахеид ели с предварительно окисленными и контрастированными ионами железа, серебра, свинца или перманганатом калня полисахаридами наблюдали наиболее высокую концентрацию ГМЦ в слое Si, особенно на гра-н[ще слоев Si и So. [c.375]

Дефектоскопия телевизионными методами в настоящее время осуществляется путем оперативного анализа изображения на зкране видеоконтрольного устройства. Телевизионные методы в этом случае по сравнению с визуально-оптическим методом обеспечивают повышенную достоверность и разрешающую способность за счет дополнительного электронного увеличения мелких деталей изображения, улучшения условий работы оператора и вторичной обработки изображения устранения помех и увеличения контрастности, построения линий равной яркости, введения цветового контрастирования и др. Автоматизированная дефектоскопическая аппаратура не получила пока распространения в связи с отсутствием в настоящее время достаточно четкого и широкого описания дефектов. Вместе с тем при необходимости высокоскоростной оптической дефектоскопии можно использовать принципы построения и аппаратуры и устройства для распознавания образов, аналогичные приборам и установкам, предназначенным для анализа по размерам, яркости или цвету макрочастиц. [c.262]

Получение цветных радиограмм возможно с помощью цветной или черно-белой фотопленки. Слои цветной фотопленки должны иметь различную чувствительность к интенсивности излучения и за время экспозиции степень засветки слоев будет различной. Если интенсивность излучения, пришедшего после контролируемого объекта, будет изменяться, то на фотопленке после соответствующей фотообработки получится цветное изображение, несущее информацию о толщине и дефектах контролируемого объекта. При этом дефекты обнаруживаются в изменении цвета. Однако работать с цветной пленкой гораздо сложнее, что затрудняет получение качественных цветных изображений. Поэтому часто производят экспозицию на черно-белую пленку, но 3 раза с разными параметрами источника (интенсивность, спектр) и после специальной фотообработки получают три монохроматических изображения, накладывая которые, переходят к цветному изображению. Оператор воспринимает больше оттенков цвета, чем градаций яркости, что облегчает контроль качества и повышает его достоверность за счет учета одновременно большего объема информации, что подобно многопараметровому контролю. Вместе с тем при работе на пределе чувствительности и наличии помех цветное изображение по эффективности приближается к черно-белому и применение цветных изображений из-за сложности фототехнологии не всегда целесообразно. Аналогичным образом обстоит дело и с цветным контрастированием (см. 5.9), которое эффективно, когда надо четко выделить необходимую информацию при большом отношении сигнал/шум. [c.341]

Препараты для ЭМВ готовят методом негативного контрастирования. Для этого смешивают равные объемы вирусной суспензии и 1%-го раствора фосфорно-вольфрамовой кислоты ( негативная краска ) на формваруглеродной подложке. Краска окружает вирусную частицу и контрастирует наружную оболочку вириона, а иногда проникает внутрь капсида, в результате чего получают профильное изображение наружной оболочки. Для выявления вирусов в биологическом материале применяют также метод ультратонких срезов. [c.267]

В РИФ исследуют мазки содержимого элементов кожных высыпаний, отделяемого носоглотки, соскоба оспенных пустул. Для исключения ложно-положительных результатов при проведении РИФ используют заведомо положительные и отрицательные кон-троли, применяют контрастирование препаратов бычьим альбумином, меченым фторидом сульфородамина, истощение иммунной сыворотки (удаления специфических антител) и другие пробы. [c.287]

Модифицированный метод Хенкса. После приготовления мазка и фиксации его в пламени горелки на него в избытке наливают раствор карболового фуксина и выдерживают 5 мин. Затем краску сливают, заливают мазок 50%-м этанолом и сразу промывают мазок водой. Для обесцвечивания фона на мазок наносят 1 %-ю серную кислоту, после чего тщательно промывают мазок водой. Для контрастирования фона мазок докрашивают 2,5%-м метиленовым синим (в 95%-м этаноле) в течение ] мин. No ardia spp. и другие кислотоустойчивые грибы окрашиваются в бордово-красный цвет, фон — голубой. [c.315]

Микроскопия. Микроскопическое исследование включает изучение неокрашенных и окрашенных препаратов. Чешуйки кожи, соскоб ногтей, некротизированные ткани помещают в каплю КОН, осторожно подогревают над пламенем горелки в течение 1 мин, перемешивают и накрывают покровным стеклом (см. гл. 5). Материал жидкой консистенции можно вносить в глицериново-спир-товую смесь или смесь глицерина с раствором Люголя (для контрастирования оболочек и глыбок гликогена). Микроскопируют вначале с объективом 8х, а затем 40х. В препаратах обнаруживают круглые или овальные почкующиеся дрожжеподобные клетки размером от 3 до 6 мкм и псевдомицелий длиной 20—30 мкм или более (рис. 6.1). [c.320]

Прямым доказательством существования зернистой структуры в эластомерах можно считать результаты исследования методом дифракционной темнопольной электронной микроскопии [69]. Этот метод не нуждается в дополнительной обработке препарата с целью контрастирования и, следовательно, свободен от опасности получения артефактов [53]. Для атактического полистирола на электронограмме обнаружено четыре дифракционных максимума с брегговскими радиусами от 0,90 до 0,126 нм. Максимумы (кольца) при 0,126 и 0,223 нм относятся к внутримолекулярному взаимодействию углеродных атомов, а при 0,478 нм и 0,9 нм к межмолекулярному взаимодействию. Последний максимум трудно учитывать из-за близости к центральному пучку, поэтому Иех [66] для проецирования изображения использовал углы, соответствующие межмолекулярному взаимодействию с максимумом 0,478 нм. Полученное изображение указывает на зернистое строение полимера. [c.41]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология