Детектирование опрыскиванием

Детектирование нятен осуществляли опрыскиванием 0,5 %-ным раствором нингидрина в смеси ледяной уксусной кислоты и бутанола (1 20) с последующим прогреванием пластинок (30 мин нри 80° или 10 мин нри 110°). [c.483]

В тонкослойной, или плоскостной, хроматографии сорбент имеет плоскую форму. В наиболее распространенном варианте тонкослойной хроматографии слой используется однократно для одного разделения. После разделения анализируемой смеси на отдельные компоненты элюирование прекращают и проводят качественное и количественное определение вещества в хроматографических зонах. Для определения бесцветных соединений чаще всего используют детектирование в ультрафиолетовом свете, опрыскивание химическими реагентами и экстрагирование зоны вещества с сорбента для последующего исследования полученных таким образом окрашенных соединений физическими и химическими методами [5—7]. [c.6]

Оптимальная величина сигнала зависит от метода фотометрического детектирования, характеристик усилителя фотометра, уровня шума в электронной схеме фотомет )а и метода хроматографического разделения, включающего в случае необходимости операцию опрыскивания пятен разделенных веществ. [c.208]

Наиболее распространенными неспецифическими обнаружителями являются кислотные обнаружители. Опрыскивание серной кислотой — концентрированной или разбавленной (иногда мета-нольным раствором) с последующим нагреванием хроматограммы до температуры 100°С — представляет собой очень чувствительный метод детектирования, дающий характеристическое окрашивание пятен отдельных групп веществ. Чувствительность и глубину ок- [c.69]

Универсальным обнаружителем является иод. Детектирование осуществляют опрыскиванием хроматографической пластинки 1%нным раствором иода в спирте или обработкой ее парами иода в замкнутом объеме [177]. Эффективен способ, согласно которому на чистую стеклянную пластинку наливают свежеприготовленный раствор иода в ацетоне ацетону дают испариться. На пластинке остается слой мелких кристалликов иода. Эту пластинку выдерживают в непосредственной близости от хроматограммы. Уже через несколько секунд начинают вырисовываться коричневые пятна [74]. Обнаружение иодом имеет то преимущество, что через некоторое время иод улетучивается с пластинки, что позволяет применить затем другие обнаружители. Обнаружение иодом удобно при проведении препаративного разделения или при количественном анализе. Пятна веществ можно сделать более контрастными дополнительным опрыскиванием хроматограммы раствором крахмала. Контуры пятен сразу после обнаружения необходимо обвести. Хотя вещества, изменяющиеся под действием иода, встречаются редко, все же с этой возможностью следует считаться, прежде всего при количественном анализе. [c.71]

При детектировании вторым способом в качестве универсальных реагентов используют концентрированные кислоты, в первую очередь — серную кислоту. После опрыскивания пластин некоторые химические соединения приобретают окраску и становятся видимыми уже на холоду, многие проявляются после нагревания при разных температурах. Для обнаружения химически инертных соединений к серной кислоте добавляют 5% азотной кислоты или окислители (перманганат калия или бихромат калия). В качестве общих реагентов на органические сое- [c.188]

Многочисленную группу (около 300) составляют специфические реагенты на индивидуальные соединения и отдельные классы соединений. Проявление (визуализация) пластинок осуществляется опрыскиванием пластин соответствующими реагентами с дополнительной (при необходимости) обработкой пластинок (например, нагреванием). Для опрыскивания пластин применяют пульверизаторы или продажные реагенты в аэрозольной упаковке. Следует иметь в виду, что точность количественных определений сильно зависит от качества и воспроизводимости детектирования, особенно при опрыскивании хроматограмм [2, 7]. [c.189]

Третьим этапом является анализ полученных экстрактов методом ТСХ на силикагеле или оксиде алюминия, причем для проявления хроматограмм (детектирования веществ) используют опрыскивание пластинок специфическими химическими реагентами (см. разделы 10.3—10.4). [c.210]

Процесс переноса растворенных веществ подвижной фазой через неподвижную называют проявлением. (Не следует путать проявление с опрыскиванием тонкослойных хроматограмм реагентами, которые образуют с бесцветными компонентами окрашенные производные и таким образом раскрывают присутствие разделенных компонентов. Этот процесс часто также называют проявлением, хотя его лучше называть обнаружением, выявлением или детектированием.) [c.307]

В жидкостной хроматографии, в отличие от газовой, отсутствие подходящих детекторов препятствовало распространению непрерывных методов детектирования. До сих пор значительное количество растворов, полученных в результате разделения методами жидкостной хроматографии, детектируют отдельными порциями. Одним из наиболее трудоемких методов является отбор фракций— порций элюата объемом от одного до нескольких миллилитров, которые затем последовательно исследуют соответствующими аналитическими методами. Другой сравнительно распространенный способ детектирования состоит в том, что сорбент извлекают из колонки, не проводя элюирования, после того как закончится разделение. Зоны разделенных веществ локализуют визуально, если вещества окрашены, или облучая УФ-светом можно также ис- пользовать для окрашивания специально подобранные реагенты, которые наносят на сорбент путем опрыскивания или контактным способом. Для количественного определения нужную фракцию экстрагируют из соответствующей части сорбента, например в аппарате Сокслета, и анализируют полученные экстракты подходящими методами. [c.69]

В ТСХ хроматографический процесс останавливают после разделения анализируемой смеси, не проводя элюирования с пластинки. Поэтому методы детектирования в ТСХ отличаются от аналогичных методов в КЖХ и ГХ. В этой связи важной проблемой является локализация и проявление зон веществ, большинство из которых не окрашено. Для проявления зон используют в основном три метода флуоресцентный, опрыскивание реагентами и обугливание. [c.76]

Весьма распространенным методом детектирования является опрыскивание пластин окрашивающим реагентом, т. е. использование химических реакций, которые, в принципе, могут проводиться как до, так и после хроматографирования [363, 364, 375]. Некоторые из этих реакций идут на холоду, чаще — требуется нагревание. Обработка хроматограмм химическим реагентом приводит к образованию окрашенных или флуоресцирующих зон, позволяющих обнаружить разделенные компоненты и количественно их оценить. Основное условие при этом, чтобы интенсивность окраски или флуоресценции оставалась стабильной в течение 30 мин. [c.391]

Для первой оценки достигнутого разделения смеси неизвестного состава обычно применяют универсальные реагенты. Наибольшее распространение среди них получили иод (пары иода растворяются в большинстве органических соединений), концентрированная серная кислота (при этом нельзя использовать в качестве неподвижной фазы оксид алюминия вследствие протекания химической реакции), бихромат натрия в серной кислоте (после опрыскивания свободной от растворителя пластины ее недолго нагревают). Далее возможно использование серии реагентов, специфических для определенных групп соединений. Информация об индивидуальном веществе складывается из совокупности результатов различных методов, подтверждающих присутствие данного вещества. В последнее время появилось немало публикаций об использовании ферментативных методов детектирования для обнаружения биологически активных веществ используют чувствительные к этим веществам микроорганизмы (биоавтография). [c.391]

Детектирование путем выдерживания в нарах проявляющего реагента пpeднoчтит Jгьтloe но сравнению с опрыскиванием, поскольку реакция протекает без образования капель, т. е. мелкодиснерсно и однородно, что важно при детектировании непосредственно на пластинке. Одна- [c.85]

При детектировании вторым способом в качестве универсальных реагентов используют концентрированные кислоты, в первую очередь — серную кислоту. После опрыскивания пластин некоторые соединения видны на холоду, многие проявляются после нагревания при разных температурах. Для обнаружения химически инертных соединений к серной кислоте добавляют 5% азотной кислоты или окислители (КМпО , К2СГ2О7). В качестве общих реагентов на органические соединения используют фосфорную, хлорную и другие кислоты. Широко применяют в ТСХ, как общий реагент, иод (пары, опрыскивание метанольным раствором иода). Описано много других общих реагентов, применяемых в ТСХ. [c.364]

Так, при исследовании состава сложных смесей липидов на пластинах с силиказолевым связующим пластину последовательно опрыскивают нингидрином (липиды со свободной аминогруппой), молибдатным реактивом (главные фосфолипиды) с последующим нагреванием при 180°С (все присутствующие в смеси липиды), реактивом на основе малахитового зеленого (контроль результатов, полученных с помощью молибдатного реактива, и обнаружение фосфолипидов, присутствующих в очень малых количествах). Для опрыскивания пластин применяют пульверизаторы разной конструкции или продажные реагенты в аэрозольной упаковке. Точность количественных определений сильно зависит от качества и воспроизводимости детектирования, в особенности при опрыскивании хроматограмм. [c.364]

Детектирование веществ на хроматограмме. Детектирование веществ, разделенных в тонком слое, проводят как реагентами, используемыми в бумажной хроматографии, так и специфическими, применение которых возможно только в условиях работы в тонком слое. К таковым следует отнести обработку концентрированной серной кислотой ее смесью с азотной и фосфорной кислотами путем опрыскивания пластинки и последующего нагревания в течение 10—15 минут при 80— 120°. Заслуживает внимания применение для этой цели 10% раствора H2SO4 с последующим нагреванием до 250° в течение 15—20 минут [172], так как при этом получают воспроизводимые результаты. Метод может быть использован для полуколичественного и количественного анализа. [c.43]

Мак-Рае и Мак-Кинли [283] предложили методику детектирования органических фосфорсодержащих инсектицидов, основанную на методике, разработанной Уэйдом и Моргано.м [284] для эфиров фосфорной кислоты. Инсектициды разделяли на бумаге Ватман № 1, пропитанной минеральным маслом [в % (масс.)] элюентом метанол — вода — 0,5%-ная аммиачная вода (19 1 1). Другим возможным вариантом являлось разделение на ацетилированной бумаге, пропитанной минеральным маслок (2%) и 70%-ньш водным ацетоном. Хроматограммы опрыскивали 0,1 %-ным раствором РеСЬ-бНгО в 80%-ном этаноле с последующим опрыскиванием 1 %-ным раствором салицилсульфокислоты в 80%-ном этаноле. Определение было основано на связывании ионов трехвалентного железа эфирами фосфорной кислоты. Свободные ионы железа реагируют с салицилсульфокислотой и окрашивают фон. Хроматограммы на бумаге Ватман № 1 выдерживали в парах брома для окисления эфиров тиофосфорной кислоты. При детектировании эфиров фосфорной кислоты стадию бромирования можно опустить. Необходимое окрашивание можно получить, только если остаточная влага в бумаге имеет рН=1,5-ь2,5. [c.330]

В методе ТСХ имеются свои трудности и ограничения. Одного этого метода недостаточно для полной и точной идентификации органических веществ-загрязнителей, экстрагируемых из водных истем. ТСХ следует использовать в сочетанииХС некоторыми другими аналитическими методами. Невозможно разработать простую и универсальную методику для выделения и разделения, например, всех классов органических пестицидов. Более того, подчас возникают трудности при разделении смеси пестицида и продуктов его разложения. То же можно сказать о фенолах, детергентах и т. д. В связи со значительной разницей в полярностях индивидуальных соединений использование однокомпонентных элюентов для ТСХ-разделения крайне нежелательно. Чтобы подобрать оптимальные условия разделения применительно к конкрет ной системе, необходимы предварительные опыты. Для каждой рассматриваемой системы следует определять Rf. При анализе следов веществ часто возникают ошибки, связанные с недостаточно высокой техникой эксперимента. Бевеню с сотр. [36] успешно исследовали многие проблемы, возникающие при проведении лабораторных анализов проб воды. Исследователи имели дело в основном с органическими пестицидами, но полученные ими результаты можно распространить на другие вещества-загрязнители. Первая проблема связана с размером пробы. Если экстрагируют небольшую быстро отобранную пробу объемом до 3,8 л, то из-за малого количества выделяемого вещества-загрязнителя становится невозможным детектирование с помощью проявляющего реагента, поскольку опрыскивание обычно дает результаты для микрограммовых количеств. Вторая проблема связана с удалением зоны вещества с подложки и элюированием вещества растворителем для последующего газохроматографического анализа. Посторонние помехи ( шумы ) усиливаются на диаграмме регистратора, если не принять специальных мер по полной очистке от органических загрязнений растворителей, стеклянной посуды и другого оборудования, а также ТСХ-адсорбентов. Так, органические растворители с маркировкой чистые нельзя использовать для анализа следов пестицидов, присутствующих в нанограммовых или пикограммовых количествах. Эти растворители перед использованием необходимо дважды перегонять в системе из стекла. [c.500]