Гелий разделение

Тонкослойная хроматография является вариантом жидкостной хроматографии, протекающей в тонком слое сорбента, причем толщина слоя существенно меньше его ширины (не менее чем в 5 раз). В тонкослойной хроматографии используются те же варианты, что и в колоночной жидкостной хроматографии. По составу фаз, участвующих в процессе хроматографического разделения, можно выделить следующие основные виды тонкослойной хроматографии [2] жидкость—[твердое тело], жидкость — [жидкость — твердое тело] и жидкость—[гель]. Разделение может быть реализовано при использовании различных принципов удерживания, поэтому тонкослойная хроматография бывает адсорбционной, распределительной, ионообменной, молекулярно-ситовой и аффинной. [c.5]

В т. иаз. диффузионной ОХ неподвижной фазой служит гель желатины или агар-агара, в к-рый заранее введен осадитель. Анализируемый р-р вносят в чашку Петри (плоскостной вариант) или в пробирку (колоночный вариант) с застывшим гелем разделение осуществляется благодаря диффузии. [c.413]

Адсорбция алифатических и циклических углеводородов на полярных адсорбентах является относительно слабой и не очень селективной. Тем не менее многие исследователи используют для разделения эти адсорбенты. Было показано, что силикагель может быть успешно использован в условиях программирования температуры колонки [4]. Однако установлено, что применение нескольких гелевых сорбентов более эффективно на таких гелях разделение углеводородов, особенно полициклических, происходит аналогично молекулярно-ситовому разделению. [c.7]

Наконец, необходимо указать еще на один вид хроматографии, получивший развитие сравнительно позднее других разновидностей хроматографии. Это гель-хроматография или, как ее часто называют, ситовая хроматография или гель-фильтрация. В основе гель-хроматографии лежит распределение компонентов разделяемой смеси веществ между подвижной фазой — растворителем, находящимся в свободном состоянии, и неподвижной фазой — жидкостью, находящейся во внутренних порах или полостях полимерных гелей. Разделение зависит от размеров молекул разделяемой смеси. Большие молекулы, которые не могут проникать в поры геля, первыми вымываются из неподвижной фазы. Полимерные гели в этом виде хроматографии играют роль сита, разделяющего смесь в соответствии с размерами составляющих ее молекул. [c.12]

Начинающееся после образования скелета геля разделение фаз сопровождается повышенным выделением летучих веществ [220]. Это явление особенно резко выразилось в опытах с постоянным объемом загрузки угля, выполненных Дэвисом и Моттом [221], которые наблюдали внезапное выделение летучих при отвердевании пластической массы угля, причем при искусственном охлаждении оно происходило ниже температуры конца интервала пластичности. [c.186]

После электрофореза в агарозном геле, так же как после электрофореза в других гелях, разделенные компоненты обнаруживают путем окрашивания различными красителями или методами денситометрии в УФ-свете. Поскольку высушивание агаровых гелей не представляет трудности, в УФ-свете можно получать контактные отпечатки с высушенных пленок геля. [c.370]

Разделение молекул по размерам и форме основано на свойствах молекулярного сита, которыми обладают многие пористые материалы. Наиболее часто для этой цели применяют органические полимеры с трехмерной сетчатой структурой, придающей им свойства гелей. Разделение веществ при помощи гелей, основанное на различиях в размере молекул, называется гель-фильтрацией. В последнее время в качестве молекулярного сита стали применять пористые стеклянные гранулы, а сам метод разделения получил название [c.92]

Впервые гели для ситового анализа жидких смесей (сефадексы) были применены Поратом и Флодином в 1959 г. [45]. Примерно в это же время было освоено промышленное производство гранулированных гелей, разделение на которых наиболее эффективно. [c.225]

Гранулированные гели. Разделение на гелях основано на распределении растворенных веществ между растворителем (подвижная фаза) и растворителем, содержащимся в порах геля (стационарная фаза). В отличие от распределительной хроматографии подвижная и стационарная фазы в этом случае одинаковы. Таким образом, распределение происходит на основе способности растворенных частиц проникать в поры разделение частиц определяется различной скоростью их диффузии. Сродство разделяемых веществ к гелю само по себе должно быть наименьшим во избежание побочных процессов. Для разделения гидрофильных веществ применяют гели на основе декстрана, полиакриламида или агаровый гель. Для разделения гидрофобных веществ необходимо применять гели, способные набухать в органических растворителях. Такие гели получают перезтерификацией гидроксильных групп декстранового геля. Этот способ можно применить для получения акриловых и полистироловых гелей, растворимых в жирах. [c.351]

Методы разделения изотопов редких газов описаны в литературе ни же. приводится описок работ, йоавящвиных разделению изотопов гелия разделению изотопов нео-.ндзэ, 40,42-44. разделению изотопов аргона -разделению изотопов криптона - - разделению изотопов ксе- [c.298]

Методы разделения изотопов редких газов описаны в литературе нирке приводится список работ, Поовя1цейных разделению изотопов гелия разделению изотопо-в нес-на39. 0. разделению изотопов аргона разделению [c.296]

На третьем этапе проводится электрофорез всех четырех проб в полиакриламидном геле. Для того чтобы условия разделения были идентичными во всех четырех пробах, пробы наносят на один гель и разделяют на четырех параллельных дорожках этого геля. Разделение, как уже говорилось в 7.1, проходит по длине, и положение каждого фрагмента, детектируемое радиоавтографически, дает его длину, а тем самым и положение соответствующего мономера в исходной цепи. Таким образом, на одной дорожке, если речь идет о ДНК-фрагменте, определяется положение всех остатков тимидина, на другой — всех остатков дезокси-цитидина, на третьей — всех остатков дезоксигуанозина и на четвертой — всех остатков дезоксиаденозина. В сумме это дает положение в исходном полинуклеотиде всех мономеров, а это и означает, что определяется его первичная структура. Эта структура в один прием считывается с геля, причем при достаточной длине дорожки геля одновременно может быть определено расположение сотен мономерных звеньев. Идеализированная схема такого разделения и определяемая последовательность приведены на рис. 77. [c.278]

В капиллярной О. х. носителем с осадителем заполняют капилляр, запаянный с одного конца другой конец погружают в исследуемый р-р. Твердой фазой в данном случае может служить и чистый осадитель, если р-римость его в применяемом р-рителе мала. В диффуз. О. х. в кач-ве твердой фазы использ. гель желатины или агар-агара, в к-рый заранее введен осадитель анализируемый р-р вносят в пробирку или чашку Петри с застывшим гелем разделение осуществляется благодаря диффузии. [c.417]

Фракционирование селективными осадителями. В тех случаях, когда можно подобрать осадитель, являющийся одно1временно растворителем для других компонентов, т. е. селективный осади-гель, разделение получается более совершенным. Так, селективным осадителем для системы натуральный каучук —полихлоро-прен служит петролейный эфир, осаждающий из бензольного [c.176]

Фильтрование через гели. Разделение веществ по молекулярному весу было впервые обнаружено при фильтровании через слои набухших зерен крахмала и агар-агара белков. Оказалось, что низкомолекулярные соединения достаточно глубоко диффундируют в объем зерен геля и по этой причине труднее вымываются носителем. Высокомолекулярные соединения, чья диффундирующая способность ниже, остаются в токе носителя и быстрее выходят из колонки. В настоящее время в качестве гелеобразующих веществ широко применяют декстраны с поперечными связями, известные под фирменным названием сефадексы . [c.89]

Наиболее простые вирусы, содержащие несколько белков,— это типичные пикорнавирусы животных, к числу которых относятся вирусы полиомиелита, мышиного энцефалита и др. Структурная и функциональная роль четырех белковых комионентов этих вирусов еще не изучена. Известно лишь, что при электрофоретическом (в геле) разделении вирусоспецифичных белков, синтезированных в клетке-хозяине, было обнаружено фактически значительно большее число белков, а именно 14. Некоторые из них относятся к высокомолекулярным белкам, причем [c.153]

Бирд и Джексон [121] несколько модифицировали описанный метод и предложили использовать в качестве подложки не стеклянные пластинки, а рентгеновскую пленку, что позволило избежать образования трещин в геле. Разделение они проводили в камере для бумажного электрофореза, а гель накрывали листом целлулоида, слегка смазанного минеральным маслом. [c.61]

Одной 1ИЗ наиболее сложных проблем, возникающих при проведении препаративного электрофореза, является извлечение из геля разделенных компонентов. Для этой цели можно использовать несколько способов агаровый гель подвергают элюции буферными растворами, центрифугированию, замораживанию и оттаиванию, обработке агаразой [1437]. Однако эта проблема до сих пор еще не решена, так как помимо самого агара в выделенные фракции могут попадать и содержащиеся в геле примеси. Наилучшие результаты были получены при использовашга для элюирования фракций электрофоретического процесса [451]. Местоположение разделенных зон выявляли при помощи реплики на фильтровальной бумаге. Выделение отдельной фракции осуществляли следующим образом. [c.66]

Методические преимущества электрофореза в полиакриламидном геле навели исследователей на мысль о создании таких его вариантов, которые позволили бы определять молекулярную массу макромолекул и в первую очередь белков, В разд. 1.11.1 пoдpoбiю обсуждался вопрос о том, что при электрофорезе в полиакриламидном геле разделение макромолекул зависит как от их размеров, так и от заряда. Отсюда следует, что для определения молекулярной массы необходимо исключить влияние заряда. Для этой цели разработано множество методов, которые можно разделить на две группы. В методах первой группы для определения молекулярной массы используют коэффициент задержки Д. Зависимость между Кт и молекулярной массой изучена еще недостаточно хорошо, и для ее выражения был предложен целый ряд уравнений [б 12, 1106, 1289, 1296]. Хедрик и Смит [538] построили графики зависимости коэффициентов задержки, определяемых по кривым Фергюсона, от молекулярной массы белков и обнаружили между ними линейную зависимость (рис. 75). Поскольку коэффициент задержки является функцией размера, а не массы молекулы [5, 1186, 1366], некоторые белки ведут себя аномально при электрофорезе, если отличаются от большинства других белков по форме молекулы или парциальному удельному объему. Так, например, полимеры ферритина и альбумина дают соответственно более низкие и более высокие значения Кг, чем можно было бы ожидать, исходя из их молекулярных масс [92, 538]. [c.217]

Наиболее часто для определения фенотипа трансферрина используют электрофорез в крахмальном геле. Разделение проводят в боратном буфере Смитиса [1199] или в неоднородной трис-цитратной системе Паулика [1028]. Для установления фенотипа трансферринов животных применяют и другие буферные системы, в частности систему Аштона и Брейдена [65]. Спунер и Бакстер [1221] использовали буфер трис-какодиловая кислота (pH 7,45). Кроме того, с этой целью проводят электрофорез в полиакриламидном геле в трис-глициновом буфере при pH 8,8 [960] или при pH 9,3 [1275]. Наличие в сыворотке человека того или иного вариантного трансферрина обнаруживают также с помощью электрофореза в агаровом геле [630], а для подтверждения полученных результатов осуществляют во втором направлении иммуноэлектрофорез [424]. Однако в этом случае картина оказывается менее четкой, чем при электрофорезе в крахмальном или полиакриламидном геле. В последнее время стали применять другой подход вначале сыворотку подвергают изоэлектрофокусированию в геле из специальной марки агарозы (лишенной электроэндосмоса), а затем проводят электрофорез в геле, содержащем антитела [492, 631]. [c.346]

Во всех гелях разделение идет в течение 16—18 ч при 4 °С и градиенте напряже-ння 4—5 В/см (160—180 В), NADP (5 мл в концентрацнн 0,005 М) добавляется к катодному буферу и к окрашивающему раствору при анализе ГФД. [c.122]