Пролин красный

Аминокислоты открывают цветной реакцией с нингидрином. Две капли 0,1%-ного раствора нингидрина в нитратном буфере наносят на фильтровальную бумагу. Высушивают в шкафу при 100— 105" С. На сухое пятно наносят две капли исследуемого раствора. Бумагу вновь сушат при той же температуре 5—10 мин. В присутствии аминокислот или аминов возникает синее, фиолетовое или красное пятно либо кольцо. Реакцию дают все а-аминокислоты (кроме пролина и оксипролина). [c.126]

Рис. 7-13. Две нестандартные аминокислоты, присутствующие в коллагене. Они образуются из стандартных аминокислот - пролина и лизина-путем их гидроксилирования (введенные гидроксильные группы выделены красным цветом).

Рис. 22-2. Биосинтез Ь-пролина. Все пять углеродных атомов пролина происходят из глутаминовой кислоты. Пролин действует как аллостерический ингибитор фермента, катализирующего первую реакцию на пути биосинтеза пролина. Эта регуляция по типу отрицательной обратной связи показана здесь красной стрелкой, а ингибируемая реакция отмечена поперечной красной полоской.

Смешивают 1 мл раствора, содержащего 0,02—0,4 мг а-аминокислоты [127], с 0,5 мл буферного раствора (рН = 5,3— 5,4) и 0,5 мл 3%-ного раствора нингидрина в метилцеллозольве. Нагревают 15 мин при 100 С, после чего добавляют 5 мл 50%-ного изопропилового спирта и взбалтывают. После охлаждения до комнатной температуры измеряют оптическую плотность красного раствора при 570 нм. Таким способом определяют аланин, аспарагиновую кислоту, аспарагин, валин, глицин, глутамин, глутаминовую кислоту, гистидин, изолейцин, лизин, метионин, орнитин, серии, таурин, тирозин, треонин, фенилаланин, этаноламин, а также аммиак. При определении пролина и оксипролина получают раствор, оптическую плотность которого измеряют при 440 нм. [c.169]

Проведение реакции. Хроматограмму опрыскивают раствором I и 10 мин нагревают при 110° в сушильном шкафу. Орнитин дает яркую желто-зеленую флуоресценцию в монохроматическом УФ-свете, лизин — слабую желто-зеленую флуоресценцию. После опрыскивания раствором II еще раз нагревают. Орнитин сначала окрашивается в розовый цет, а затем бледнеет, а пролин, оксипролин, пипеколиновая кислота и саркозин через несколько часов окрашиваются в красный цвет, гликоколь становится сине-зеленым, остальные аминокислоты окрашиваются в светло-коричневый цвет. [c.491]

Для обнаружения и идентификации аминокислот на хроматограммах помимо нингидринового теста могут быть использованы и другие цветные реакции. Так, гистидин и другие имидазольные производные можно обнаружить в виде красных пятен, применяя диазореакцию по Паули или варианты этой реакции. Пролин и оксипролин обнаруживаются в виде синих [c.42]

Пролин, оксипролин, а также о-, м- и п-аминобензойные кислоты не дают синего окрашивания, вместо этого появляется желтый цвет. Положительную пробу дают аммонийные соли, а некоторые амины (анилин) дают красно-оранжевое окрашивание, которое считается отрицательным результатом. [c.279]

Рис. 5-2. Общая структурная формула аминокислот (в неионной форме), входящих в состав белков. Часть структуры, показанная черным цветом, одинакова у всех а-аминокислот (кроме пролина). Буквой К, выделенной красным цветом, обозначена боковая цепь (К-группа). Каждая аминокислота имеет свою, характерную для нее К-группу. Во всех аминокислотах, за исключением глицина, а-атом углерода связан с четырьмя различными замещающими группами и, следовательно, является асимметрическим, или хиральным, атомом углерода.

Рис. 7-7. Наличие остатка пролина в полипептидной цепи вызывает ее изгиб. Серым цветом выделены жесткие пептидные группы. Жесткая К-группа пролина показана на красном фоне.

Витамин С Аскорбиновая кислота Участвует в окисли-тельно-восстанови-тельных реакциях. Особенно велика роль в гидроксилировании аминокислот пролина и лизина соответственно в оксипролин и оксилизин при синтезе белка коллагена, а также в синтезе гормонов надпочечников Цинга Цитрусовые, красный перец, смородина, рябина, клюква, квашеная капуста, хвоя 50-100 мг [c.92]

Окси-Ь-пролин найден только в гидролизатах эластина и коллагена, где на его долю приходится до 13% всех аминокислотных остатков. При обработке нингидрином оксипролин дает на хроматограммах желтую окраску, при обработке изатином он может быть обнаружен в виде синего пятна. Взаимодействие оксипролина с перекисью водорода с последующим подкисле-нием раствора приводит к образованию пиррол-2-карбоновой кислоты (стр. 352), которая дает с л-диметиламинобензальде-гидом (реактив Эрлиха) интенсивное красно-фиолетовое окрашивание. [c.19]

Исключение составляют пролин и оксипролин, которые образуют в реакции с нингидрином продукты желтого цвета. Количественное измерение поглощения при 570 нм (для красно-фиолетового продукта )и при 440 нм (для желтого продукта) лежит Б основе широко известной процедуры аминокислотного анализа [43]. [c.524]

Выполнение реакции. К раствору аминокислоты прибавляют 10%-ный раствор соды до слабощелочной реакции. Затем последовательно, маленькими порциями прибавляют 25%-ный раствор ацетата ртути (II) и 10%-ный раствор соды до тех пор, пока не прекратится образование осадка. При этом постепенно появляется устойчивая желто-вато-красная окраска. К жидкости, имеющей щелочную реакцию, прибавляют 5—8-кратный объем 96%-ного спирта. Осадок отфильтровывают, промывают спиртом, смывают с фильтра водой в коническую колбу и разлагают сероводородом. Сульфид ртути отфильтровывают и раствор выпаривают. Ртутное соединение глицина малоустойчиво. Валин и пролин осаждаются ацетатом ртути не полностью [c.706]

После окончания разделения хроматограмму высушивают на воздухе и проявляют, для этого ее опрыскивают из пульверизатора 0,2%-ным раствором нингидрина в ацетоне. Затем нагревают 15—20 мин при 60 °С в термостате или сушильном шкафу. Расположение аминокислот сверху вниз по направлению движения растворителя следующее цистин, лизин, аргинин, гистидин, аспарагиновая кислота, серии (три последние аминокислоты располагаются в виде тесно сближенных пятен) глутаминовая кислота, треонин, аланин, пролин, тирозин, валин, метионин, триптофан, фенилаланин, лейцин, изолейцин (последние три аминокислоты также часто располагаются в виде тесно сближенных пятен). Для того чтобы сохранить пятна на хроматограмме, их фиксируют 1%-ным раствором нитрата меди в ацетоне, погружая хроматограмму в этот раствор или опрыскивая ее из пульверизатора. После фиксации пятна приобретают красно-оранжевую окраску. [c.331]

Красный Пролин экстрагируют из воды бутиловым спирто.м, а при встряхивании со щелочью, содержащей восстановитель (для Предотвращения окисления кислородом воздуха и обесцвечивания), в водную фазу переходит синий анион. [c.172]

Одну каплю раствора смеси пролина, глицина и лейцина помещают в пробирку, добавляют каплю концентрированной соляной кислоты, каплю 0,3%-ного водного раствора нингидрина и нагревают 1—2 мин. на водяной бане. Рассматривают пробирку на белом фоне и отмечают появление красного окрашивания. Затем добавляют 0,5 мл (10 капель) воды и 0,5 мл бутилового спирта, смесь встряхивают и оставляют до расслоения. Толщина верхнего слоя должна быть не менее 1 мм (если нужно, добавляют бутиловый спирт). При этих условиях концентрация красного пролина в растворе достаточна для его открытия. [c.174]

Красный пролин находится в виде взвеси. При фильтровании он остается на фильтре и может быть извлечен бутиловым спиртом. При встряхивании окрашенного экстракта с щелочным гидросульфитом возникает чисто-синяя окраска. [c.174]

Опыт 8- На фильтровальную бумагу наносят две капли 0,170-ного раствора нннгидрина в цнтратном буфере и высушивают в шка-фу при 100... 105°С. На сухое пятно наносят две капли исследуемого раствора и вновь сушат при той же температуре 5... 10 мин. Б присутствии аминокислот возникает сииее, фиолетовое или красное пятно либо кольцо. Эту реакцию дают все а-амииокислоты. кроле пролина и гидроксипролииа. [c.97]

Реакцию с нингидрином дают не только а-, но и р- и у-аминокислоты, и т. д. пептиды, белки, амины и аммиак. Пролин дает с нингидрино.м Желтую окраску, которая при продолжительном нагревании переходит в красно-фиолетовую. Реакцию нингидрина с пролином изображают следующей гипотетической схемой [c.468]

В качестве группового локализующего агента применяется 0,25%-ный (масс./об.) раствор нингидрина в ацетоне. Пятна можно проявлять нагреванием при 100°С в течение 5 мин или с целью получения более светлого фона выдерживанием при комнатной температуре в течение нескольких часов. Аминокислоты дают пурпурные пятна гистидин и глицин красно-серые фенилаланин, тирозин и аспарагиновая кислота синие триптофан коричневые аспарагин грязножелтые пролин желтые. Чувствительность варьирует в диапазоне от 0,2 мкг для глицина до 2 мкг для гистидина. [c.389]

Актиномицин Сз (ярко-красные бипирамиды, темп, плавл. 232—235 ) состоит из гетероциклического хромофора, соединенного с двумя одинаковыми полипе-птидными цепями, содержащими по одному остатку -треонина, саркозина, N-метил-/-валина, /-пролина и d-аллоизолейцина, причем карбоксильная группа N-метил-валина и оксигруппа треонина соединены в лактонные кольца [c.700]

Обработку фракций проводят в штативах, рассчитанных на 50 пробирок. В каждый штатив помещают также пробирки со стандартными и контрольным растворами. К 2 мл анализируемого раствора автоматической пипеткой добавляют 1 мл нингидринового реагента и тщательно перемешивают. Затем штатив с пробирками помещают на 20 мин в кипящую водяную баню (100°С) и охлаждают в бане с проточной водой в течение 5 мий. Автоматической пипеткой в каждую пробирку вводят по 5 мл 60%-ного этанола и тщательно перемешивают пробирки выдерживают при комнатной температуре 1 ч, в течение которого в результате окисления кислородом воздуха исчезает красная окраска гидридантина. Наконец, определяют оптическую плотность при 570 нм, а фракции, содержащие пролин и оксипролин, анализируют при 440 нм. В качестве контроля (фона) используют среднюю величину оптической плотности, полученную при аналогичной обработке фракций, не содержащих аминокислот. Важно в процессе измерения проводить сравнение с контрольным раствором, содержащим буфер аналогичного состава. При градиентном элюировании наблюдается постепенное увеличение фона вследствие накопления в буфере нингидринположительных примесей. В этом случае в качестве контрольного раствора еле- [c.314]

Рис. 28-18. Строение актиномицина D-ингиби-тора транскрипции ДНК. Часть молекулы, показанная на красном фоне, интеркалирует в двухцепочечную спираль ДНК, встраиваясь между двумя соседними G -парами. Две циклические пептидные структуры молекулы актиномицина D располагаются в малой бороздке двойной спирали. Саркозин представляет собой N-метилглицин. Саркозин, L-пролин и D-валин соединены друг с другом пептидными связями.

РЕИНЕКЕ соль (тетрароданоаминохромиат аммония) NH4[ r(NH3)2(S N)4]-H20, мол. в. 354,43-кристаллы красного цвета хорошо растворяются в воде, спирте, эфире, образуя р-ры красного цвета в водном р-ре Р. с. постепенно разлагается, причем )-р синеет и выделяется свободная H N аналогично с. разлагается в кипящем спирте. При нагревании до 100—120° Р. с. теряет воду и далее разлагается при нагревании с р-ром NaOH также происходит постепенное разложение с образованием Сг(ОН)з. Применяют Р.с. для осаждения Hg , u +, d +, первичных и вторичных аминов, пролина, оксипролина и нек-рых аминокислот для отделения d + от Zn + в присутствии тиомочевины, с алкалоидами в водном р-ре образует малорастворимую соль. [c.314]

После электрофореза бумажные полоски высуц]ивают в течение 15 мин при 80°, погружают в нингидрин-кадмиевый реактив (Хайл-ман и др. [13]), высушивают на воздухе и оставляют на 18—20 час в сухой, свободной от аммиака атмосфере. Окрашенные в красный цвет пятна элюируют метиловым спиртом, не содержащим серы, и измеряют поглощение света при 500 ммк (325 ммк для пролина). Реактив Хайлмана приготовляют смешиванием (в указанной после- [c.51]

Нингидрин — ацетат кадмия 148. В отличие от иингидрина этот реагент дает прочное окрашивание (для всех аминокислот — красное, для пролина — желтое), не выцветающее со временем. [c.269]

С пролином и оксипролином образуются желтовато-красные продукты реакции, имеющие максимумы поглощения при 440 ммк. Окраски, образуемые различными аминокислотами, несколько различаются ниже приведены относительные величины интенсивности окраски, сопоставленные на эквимолярной основе с окраской, образуемой лейцином. [c.77]

Пролин может бы > количественно определен наряду с остальными аминокислотами после разделения их ка бумаге хроматографическим методом и проявления хроматограммы нингидрином. Определение основано на том, что желтое соединение пролина с нингидрином (колориметрирование которого невозможно) в сильно кислой среде переходит в красное, 1фичем [c.326]

При обработке нингидрииом нейтрального раствора смеси пролина с другими аминокислотами слабо-желтая окраска, обусловленная пролином, маскируется ярко-синей окраской красителей, образуемых другими компонентами. И, наоборот, солянокислые растворы всех аминокислот, за исключением пролина (и оксипролина), остаются бесцветными при нагревании с нпн-гидрином. Пролин при этом сначала превращается в желтый, затем в красный пролин [c.172]

Оставшийся (после гидролиза 100 мг волос, шелка или желатина) раствор белкового гидролизата (около 1 мл) обесцвег чивают, встряхивая его 1 мин. с углем, и фильтруют через воронку диаметром 2,5 см. Помещают 4 капли (0,2 мл) почти бесцветного фильтрата в пробирку размером 10X75 мм, добавляют 4 капли концентрированной соляной кислоты и 4 капли 0,3%-ного водного раствора нингидрина. Смесь нагревают на водяной бане 1—2 мин. Красная окраска, лучше всего наблюдаемая против света, свидетельствует о присутствии пролина. [c.174]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология