Фазово-контрастный микроскоп

Создание фазово-контрастного метода, изобретение фазово-контрастного микроскопа [c.778]

В каждом мышечном волокне в полужидкой саркоплазме по длине волокна расположено, нередко в форме пучков, множество нитевидных образований - миофибрилл (толщина их обычно менее 1 мкм), обладающих, как и все волокно в целом, поперечной исчерченностью. Поперечная исчерченность волокна, зависящая от оптической неоднородности белковых веществ, локализованных во всех миофибриллах на одном уровне, легко выявляется при исследовании волокон скелетных мышц в поляризационном или фазово-контрастном микроскопе. [c.645]

Повторяющимся элементом поперечно-полосатой миофибриллы является саркомер-участок миофибриллы, границами которого служат узкие 7-линии. Каждая миофибрилла состоит из нескольких сот саркомеров. Средняя длина саркомера 2,5-3,0 мкм. В середине саркомера находится зона протяженностью 1,5-1,6 мкм, темная в фазово-контрастном микроскопе. В поляризованном свете она дает сильное двойное лучепреломление. Эту зону принято называть диском А (анизотропный диск). В центре диска А расположена линия М, которую можно наблюдать только в электронном микроскопе. Среднюю часть диска А занимает зона Н более слабого двойного лучепреломления. Наконец, существуют изотропные диски, или диски I, с очень слабым двойным лучепреломлением. В фазово-контраст-ном микроскопе они кажутся более светлыми, чем диски А. Длина дисков [c.646]

Установка света по Келеру рекомендуется как щ обычной микроскопии в проходящем свете, так и уЩ)И фазово-контрастной микроскопии и микроскопии в/темном поле. [c.15]

ФАЗОВО-КОНТРАСТНАЯ МИКРОСКОПИЯ [c.17]

Фазово-контрастная микроскопия. Известно, что оптическая длина пути света в любом веществе зависит от показателя преломления. Световые волны, проходящие через оптически более плотные участки объекта, отстают по фазе от волн, не проходящих через эти участки. При этом интенсивность света не меняется, а изменяется только фаза колебания, не улавливаемая глазом и фотопластинкой. Для повышения контрастности изображения в объектив микроскопа вкладывают специальную полупрозрачную фазовую пластинку, в результате чего между лучами фона и объекта возникает разность амплитуд световых волн. Если она достигает /4 длины волны, то возникает заметный для глаза эффект, когда темный объект отчетливо виден на светлом фоне (положительный контраст), или наоборот (отрицательный контраст), в зависимости от структуры фазовой пластинки. [c.9]

Фазово-контрастная микроскопия не увеличивает разрешающей способности оптической системы, но помогает выявить новые детали структуры живых микроорганизмов, изучить различные стадии их развития, влияние на них химических веществ, антибиотиков и других факторов. [c.9]

Выделенные культуры идентифицируют по морфологии (в мазках, окрашенных по Граму), характерной винтообразной подвижности (при темнопольной или фазово-контрастной микроскопии), биохимическим свойствам и чувствительности к антибиотикам (табл. 2.23). [c.220]

При темнопольной или фазово-контрастной микроскопии выявляют характерную подвижность клеток возбудителя. Кроме морфологических признаков, для идентификации возбудителя проводят биохимические и другие тесты (см. табл. 2.23). [c.223]

Рис. III.78. Сноповидные кристаллы полиэтилена, выращенные из 1%-ного раствора в ксилоле (фазово-контрастная микроскопия)

Сравнительная оценка модификации с применением фазово-контрастной микроскопии и метода А. С. Разумова при определении общего числа микроорганизмов в одних и тех же пробах воды Горьковского водохранилища показала довольно близкие результаты. Однако общее число бактерий, определяемое методом фазовоконтрастной микроскопии, выше (в среднем на 15%), чем полученное прямым счетом с окрашиванием. [c.85]

Применение. В фазово-контрастной микроскопии для наклеивания срезов по методу Белла [1]. [c.297]

Внутри клеточной оболочки находится цитоплазма, в которой взвешены многочисленные включения. Самое крупное из них — ядро, расположенное ближе или дальше от центра ядро окружено двойной мембраной, пронизанной большим числом пор. При тщательном изучении цитоплазмы лживой клетки, предпочтительно путем фазово-контрастной микроскопии, можно ясно различить [c.125]

Наряду с этими данными имеются сообщения о неплоскостной форме пластинчатых кристаллов. Некоторые авторы утверждают, что простейший монослойный кристалл полиэтилена в естественных условиях имеет форму полой пирамиды. При высыхании (которое необходимо для исследования образцов в электронном микроскопе) кристаллы становятся плоскими. Действительно, при исследовании монокристаллов полиэтилена непосредственно в суспензии методом фазово-контрастной микроскопии были получены представления о пирамидальной форме кристаллов полиэтилена [c.64]

Методика предназначена для определения размера частиц каучуковой фазы на разных стадиях полимеризации методом фазово-контрастной микроскопии. [c.60]

При разделении фаз система мутнеет, если показатели преломления компонентов различаются достаточно сильно. В этот момент система под фазово-контрастным микроскопом представляет собой эмульсию, в которой дискретной дисперсной фазой является раствор полистирола в стироле и непрерывной (дисперсионной) фазой — раствор каучука в стироле. [c.113]

Сталлами. Однако это ограничение редко встречается в работе с полимерными материалами. Система двух диафрагм имеет одно существенное преимущество перед методом центрального освещения. Оно состоит в том, что в первом методе соответствие между образцом и иммерсионной жидкостью устанавливается при резкой наводке на образец, тогда как во втором случае для наблюдения линии Бекке микроскоп приходится выводить из фокуса. Это не только увеличивает чувствительность сравнения, но и позволяет проводить тонкие исследования локальных изменений показателя преломления в образце. Благодаря этому метод двойного диафрагмирования дает возможность различать отдельные детали образца на основании небольших изменений показателя преломления. В этом методе микроскоп работает по принципу фазово-контрастного микроскопа, который улучшает видимость частиц, немного отличающихся от окружающей их среды только показателем преломления или толщиной. Для некоторых исследований метод двойной диафрагмы может превосходить метод фазового контраста. Промышленные фазово-контрастные микроскопы дают чрезвычайно контрастные изображения с ярким ореолом вокруг частиц, отличающихся от окружающей их среды. Ореол и крайняя степень контрастности изображения уменьшают число наблюдаемых деталей, тогда как метод косого освещения с двойной диафрагмой дает более мягкое изображение с большим числом деталей. Последний метод особенно удобен для исследования волокон или стержневидных образцов, которые легко расположить под определенным углом к щели между диафрагмами. Метод двух диафрагм осуществляли как с петрографическим, так и со сложным светлопольным микроскопом. Точная юстировка диафрагм возможна почти для всех сложных микроскопов. [c.264]

С помощью фазово-контрастного микроскопа можно изучать живые бактерии, однако чаше клетки все же предварительно фиксируют и окрашивают. [c.59]

Для преодоления других, обосновавшихся в учении о фотосинтезе неправильных представлений, также понадобилась напряженная работа коллективов ученых различных стран. Успеху исследований способствовало широкое использование великих завоеваний физики и химии нашего времени и созданных на основе этих успехов новых, высокоэффективных методов исследования. В числе этих методов спектрометрия, включая импульсную, дифференциальную, а также флуоресцентную спектрофотомет-рию, электрометрия, включая и измерения фотопроводимости, магнитные измерения, меченые атомы, дифференциальное центрифугирование, электронная, фазово-контрастная микроскопия и др. Полученные в ходе исследований материалы легли в основу современных представлений о фотосинтезе как о сенсибилизируемой хлорофиллом системе сопряженных окислительно-восстановительных реакций. Специфика фотосинтеза состоит в том, что в ходе этого процесса имеет место превращение электромагнитной энергии света в энергию химических связей конечных фотопродуктов. [c.145]

Фазово-контрастная микроскопия показывает, что митохондрии живых клеток испытывают изменения размеров и формы, связанные с дыханием. Происходят циклы набухания и сокращения двух типов. Обратимый цикл малой амплитуды, в котором объем меняется на 1—2%, наблюдается у всех видов митохондрий in vitro. Набухание происходит в отсутствие АДФ в состоянии покоя. При добавлении АДФ происходит сокращение и окислительное фосфорилирование АДФ. Цикл блокируется разобщителями окислительного фосфорилирования. [c.431]

Вблизи ядра дислокации обычно наблюдается скопление примесей ( облако Коттрелла ). Иногда примесей скапливается такое количество, что они выделяются как самостоятельная фаза в виде коллоидных частиц. Это может быть обнаружено даже просто в проходящем свете под микроскопом. Обычно же требуются более сложные методы наблюдения, чаще всего фазово-контрастная микроскопия (см. Физический энциклопедический словарь — ФЭС, 1962—1966 гг.). [c.7]

Для смесей полимеров, по-видимому, весьма характерна и специфическая двухфазная структура, в которой обе фазы непрерывны. Впервые на возможность возникновения таких структур указывали Роватти и Бобалек [77]. Они пришли к выводу, что наибольшая прочность и сопротивление удару смеси ПВХ и бутадиен-нитриль-ного каучука достигается тогда, когда обе фазы полимеров непрерывны и образуют волокнистое переплетение. Аналогичное наблюдение сделал и Мацуо [2, 3, 78] в отношение смеси ПВХ с сополимером бутадиен-нитрильного каучука и 20% нитрила акриловой кислоты. Методом фазово-контрастной микроскопии было обнаружено, что в смесях бутилкаучука со СКЭПТ или с полихлоропреном при соотношении компонентов близких к 1 1 возникают сетчатые структуры в виде контактирующих частиц шириной 2—4 и длиной несколько микрон [79]. Авторами работ [62, 80, 81] обнаружены сетчатые структуры двух непрерывных фаз в смесях полиэтилена высокой плотности и полипропилена. Свойства каучуков, усиленных термореактивными смолами, объясняют возникновением непрерывной структуры смолы в матрице каучука [82]. Имеются и другие работы [117], в которых прямо или косвенно было установлено наличие двух взаимопроникающих сеток каучуков, образующих смесь. [c.26]

Рис. 13. Спиральная фигура, наблюдаемая в поперечном сечении бугорка панциря краба. Сечение перпендикулярно оси бугорка, как это показано на рис. 22. Расположение волокон воспроизведено на рис. 26. Серии арок образуют двойную спираль. Более контрастная одиночная спираль, наложенная на двойную, является артефактом микротомии (Сагстиз таепаз, фазово-контрастная микроскопия (Х255) [4, 5].

Рис. 15. Двойная спираль метоксибензилиденбутиламина (МББА), переведенного в холестерическую фазу добавлением небольшого количества холестерин-бензоата (ХБ), образованная между предметным и покровным стеклами. Фазово-контрастная микроскопия (Х280) [4].

Было также установлено, что толш ина кристаллов линейного полиэтилена в виде плоских пластинок, выращенных из разбавленных растворов при температуре около 80 °С, составляет величину порядка 100 А. Изменяя условия кристаллизации (температуру, концентрацию полимера в растворе, природу растворителя и т. п.), можно получить различные морфологические формы кристаллов [7]. Как правило, эти морфологические структуры не имеют форму плоских пластинок, как это видно из наблюдений их объемной конфигурации с помощью метода фазово-контрастной микроскопии [8]. Кроме того, при кристаллизации в идентичных условиях образуются различные (хотя и в чем-то сходные) морфологические структуры. Примеры таких кристаллических образований показаны на рис. П1.8— [c.170]

Модификация метода прямого подсчета с применением фазово-контрастной микроскопии. А. Г. Кокина (1956), А. С. Разумов, Л. Е, Корш (I962), Ri hards, КгаЬек (1954) использовали фазово-контрастную микроскопию для подсчета общего числа бактерий, предварительно сконцентрированных на мембранном фильтре. После высушивания мембранного фильтра (без окрашивания) готовят препарат и просчитывают бактерии под микроскопом с помощью фазово-контрастного устройства. При подсчете бактерий используют зеленый светофильтр, благодаря которому получается поле зрения спокойного зеленого цвета. Бактерии на зеленом поле выглядят довольно контрастно, как черные точки или палочки различных размеров. [c.85]

Фазово-контрастную микроскопию можно применять для прямого подсчета бактерий на мембранных фильтрах при изучении качества воды. Это ускоряет и упрощает анализ, исключает необходи.мость окраски бактерий. При подсчете необ.ходимо вносить поправку, уменьшая ре з льтат на 15%. [c.85]

Красители я контрастирующие вещества. Многие детали исследуемых объектов трудно или вовсе не различимы в поЛе зрения микроскопа и не столько по причине недостаточной разрешающей способности прибора, сколько вследствие недостаточной контрастности изображения объекта. Это привело к тому, что уже в прошлом веке, когда еще не были известны методы фазово-контрастной микроскопии, для усиления контрастности изображения стали применять кармин 1849 г.),"гематоксилин (1865 г.), эозин, метиленовый голубой (1875 г.) и другие красители. Число красителей, пpи ieняeмыx в микроскопии для указанной цели, достигает в настоящее время 200 наименований. К, этой группе химических препаратов относятся также витальные красители и флуо-рохромы. Сюда же должны быть отнесены вещества, применяемые в, электронной микроскопии качестве красителей для контрастирозання. [c.3]

Первые сведения об общей организации и тонкой структуре клетки были получены с помощью оптических методов. По мере совершенствования оптических приборов и улучшения техники микроскопирования росли и наши знания о микроморфологии клетки и ее отдельных компонентов. Дальнейшее развитие световой микроскопии, а также ультрафиолетовой и электронной микроскопии позволило существенно повысить разрешающую способность оптических приборов темнопольная и фазово контрастная микроскопия облегчила наблюдение живой клетки. Несомненно, и поныне микроскопия, особенно электронная, в сочетании %о сложной предварительной обработкой биологического материала остается важнейшим методом исследования. Для получения дополнительных сведений о молекулярном уровне приходится прибегать к косвенным физическим и химическим методам, с помощью которых стало возможным вьщелять и исследовать отдельные клеточные компоненТ1Е% [c.22]

Качество ядерных препаратов оценивается па основании следующих критериев 1) морфологические особенности при наблюдении в обычном световом микроскопе, фазово-контрастном микроскопе и электронном микроскопе 2) наличие таких ферментов, как НАД-пирофосфорилаза (К. Ф., 2.7.7.1), которые встречаются исключительно в ядрах 3) отсутствие цитоплазматических ферментов, например цитохромоксидазы (К. Ф., 1.9.3.1) или глюкозо-6-фосфатазы (К. Ф., 3.1.3.9). [c.137]

А fio]. Для контроля поверхностей подложек также используются такие методы оптической микроскопии, как светоразделительная микроскопия, многолучевая интерференция и фазово-контрастная микроскопия (интерференция с использованием поляризованного света и двулучепреломляющей призмы). В этих методах для измерения толщины использованы принципы, описанные в гл. 1. В отличие от наблюдения колец на ступеньке пленкн, в них рассматривается вся подложка, в силу чего интерференционные кольца образуют контурную карту поверхности. [c.507]

Привитые сополимеры не растворялись в воде и в ди-метилформамиде, но легко растворялись в диметилсуль-фоксиде и в концентрированных растворах солей, при этом не наблюдалось сшивания. Из этих сополимеров были получены оптически прозрачные пленки визуальное наблюдение и исследование при помощи фазово-контрастного микроскопа показали, что концентрированные растворы сополимеров однофазны. [c.32]

Рис. 6. Представители наиболее распространенных морфотипов бактерий (микрофотографии в фазово-контрастном микроскопе)

Беннет и сотр. [15] составили обзор, посвященный технологическому применению фазово-контрастного микроскопа к ряду материалов. Так, например, прозрачные пластики можно исследовать на неоднородность и на содержание примесей. В листовых материалах этим методом удается идентифицировать волокна и другие наполнители. Покрытия можно изучать в виде поперечных срезов или тонких пленок. Для исследования поверх-1Юстей применяют метод отпечатков некоторые поверхности, обладающие достаточно высокой отражательной способностью, можно изучать с помощью фазово-контрастного вертикального освещения. Метод фазового контраста позволяет определять характеристики бумажных волокон, отсутствие в них лигнина и других примесей. Реймут [200] указал ряд применений этого метода в текстильной промышленности. К их числу относятся наблюдения за бактериальным и ферментативным разложением шерсти, исследования деталей поперечных срезов шерсти, бактерий и плесени в волокнах, частиц, включенных в волокна, и изломов волокон, возникающих при стирке и глажении ткани. Ройер и Мареш [209] сообщили о результатах исследования поперечных срезов искусственного волокна и тонких пленок на тканях, целлюлозных волокнах и коже. Можно также изучать животные волокна со слабой пигментацией. С пигментированных волокон можно снять отпечатки [90, 264]. Фазово-контрастная оптика позволяет хорошо 5азличать структуру набухших волокон [49]. [c.247]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология