Матрицы декстран

Еще одна особенность хроматографии макромолекул связана с проблемой доступности всего объема неподвижной фазы внутри гранул. Ограничение такой доступности вследствие статистического разброса размеров пор пространственной сеткн гранул используется для фракционирования макромолекул по размерам в методе гель-фильтрации, одиако в других вариантах хроматографии ограничение доступности не только уменьшает емкость системы, но и существенно затрудняет установление равновесия в неподвижной фазе. В этом плане обычные микропористые обменники на основе силикагеля, стекла п полистирола существенно уступают крупнопористым матрицам из целлюлозы и даже декстрана. К сожалению, матрицы двух последних типов легко деформируются и потому непригодны для хроматографии при повышенном давлении. Правда, в последние годы путем специальной обработки удалось получить крупнопористые, пригодные для фракционирования белков матрицы и из перечисленных выше жестких материалов их марки и характеристики приведены ниже. [c.47]

Полезное развитие указанного метода заключается в том, что образец с эталоном помещаются в капсулу подходящей органической матрицы из желатины, альбумина, декстрана, поливинил-пиролидона (ПВП) и т. д. и срезы готовятся одновременно [193]. Масса элемента, приходящаяся на единичный объем (С ), рассчитывается умножением отношения интенсивностей элементов в образце (/ ) и эталоне (/( )) на известную весовую концентрацию элемента в растворе эталона (С(г)). [c.79]

В дополнение к полисахаридным гелям фирмой Bio-Rad (США) предлагаются биогели на полиакриламидной основе (табл. 3-4). Введение в практику макропористых полистирольных смол, ненабухаюшнх пористых стеклянных шариков и иммобилиза-Ш1Я гидрофобных радикалов на декстрановой матрице сделали возможным гель-хроматографическое фракционирование в среде органических растворителей. Алки-лированные декстраны (типа сефадекс-LH) находят широкое применение в синтетической пептидной химии [38]. [c.350]

Идеальная матрица должна работать только по принципу молекулярного сита. Сшитые декстраны и полиакриламидные гели нельзя считать идеальными матрицами, и это необходимо учитывать при проведении эксперимента. Во-первых, эти материалы сильно сорбируют пептиды, содержащие остатки ароматических аминокислот (триптофана, тирозина и фенилаланина). При элюировании буферными растворами, содержащими вещества ароматической природы, мочевину или роданид калия, адсорбция несколько снижается, однако полностью не исчезает. Известно также, что адсорбция на сефадексе несколько возрастает при увеличении ионной силы [19], однако удовлетворительного объяснения этому явлению не дано. Во-вторых, матрица содержит небольшое количество карбоксильных групп. Вследствие этого независимо от молекулярного веса пептидов может наблюдаться ускорение компонентов, несущих отрицательный заряд, и удерживание или необратимая адсорбция основных пептидов. Этот эффект подавляется в том случае, если ионная сила буферного раствора превышает 0,02. [c.396]

Из анионитов для разделения белков наиболее часто используют материалы, несущие диэтиламиноэтильную группу. Если это ионит на основе целлюлозы или декстрана, то нижний предел рабочего диапазона pH определяется стабильностью самой матрицы (pH < 2,7—3,0). Однако в этой области недостаточно устойчивы многие белки. В области высоких значений pH верхняя граница определяется константой диссоциации функциональной группировки ионита. [c.432]

Для гелей сефадекса это значение можно считать )авным удельному объему растворенного декстрана 2] (согласно Гранату [3], эта величина составляет ),61). Для каждого типа сефадекса известна также плотность (1 в набухщем состоянии. В табл. 47 приведены численные характеристики различных сефадексов, отнесенные к 1 г сухого геля. С возрастанием пористости внутренний объем увеличивается сравнительно медленно, поскольку частицы геля с более высокой степенью набухания уже не могут образовывать плотной упаковки. В результате этого одновременно увеличивается внещний объем Уо. Для сильно набухающих гелей можно пренебречь третьим членом уравнения— объемом матрицы Ут- [c.104]

Применяются гидрофильные гели. В подавляющем больщинстве случаев используют гель декстрана — сефадекс 0-25 при этом для всех веществ с молекулярным весом выше 5000 объем выхода равен свободному объему. Однако нередко изучаемые соединения имеют больший молекулярный вес тогда можно использовать более сильно набухающий сефадекс 0-50. Этот гель по сравнению с сефадексом 0-25 имеет существенные преимущества 1 г сухого геля при набухании увеличивается в объеме вдвое (что делает эксперимент более экономичным). Благодаря этому сам полисахарид занимает лишь половину объема колонки, что значительно снижает возможность взаимодействия разделяемых веществ с матрицей. [c.136]

Остальная часть этой главы посвящается описанию свойств неподвижных фаз, применяемых для разделения методом ситовой хроматографии в невод1П>1Х средах. Авторы хотели бы дать читателю некоторое представление о выпускаемых промышленностью материалах этого типа. В зависимости от состава указанные неподвижные фазы можно разделить на две группы. Пористые силикагели и стекла являются неорганическими полимерами, в то время как алки лированные сшитые декстраны, поливинилацетаты и полистирол имеют органическую матрицу. Эти органические полимеры имеют поперечные связи и поэтому, если они не разрушаются, нерастворимы во всех растворителях. Однако они набухают в определенных растворителях, причем степень набухания зависит от растворителя, степени сшитос-ти и метода приготовления. [c.114]

Весьма простым методом синтеза пролонгаторов физиологически активных веществ является модификация природных или синтетических полимеров низкомолекулярными лекарственными препаратами. Такой способ позволяет использовать полимеры на основе доступных мономеров, для которых известна кинетика полимеризации, строение макромолекулярной цепи и величина молекулярного ряда. Из получаемых в промышленности полимеров в качестве матриц для создания полимерных пролонгаторов нашли применение поливиниловый спирт, полиакриловая и полиметакриловая кислоты, поливинилниридины, декстраны и др. [c.318]

При правильной форме хроматографической зоны следует определить исключенный объем колонки Уо как объем элюата, вытекающий к моменту элюирования максимума пика. Если используются твердые сефадексы, то на их матрице иногда происходит частичная адсорбция синего декстрана. Адсорбированный синий декстран можно элюировать из колонки неболь-щим объемом раствора сывороточного альбумина. [c.370]

Влияние термодинамической совместимости полимера и полимерной матрицы геля. Влияние на термодинамической совместимости полимеров и набухшей в элюенте матрицы полимерного сорбента наблюдали [157] при изучении элюционного поведения четырех типов макромолекул декстрана, поливинилпирроли-дона (ПВП), поливинилового спирта (ПВС) и полиэтиленгликоля (ПЭГ) в воде на хроматографических колонках, заполненных сефадексами (декстрановыми гелями) С = 75 и С = 100. Экспериментальные зависимости = / ([ч] 1 Л1) существенно различаются для декстрана и ПВП с одной стороны, и ПВС и ПЭГ — с другой (рис. 111.21), хотя показатели степени а близки. Декстра-новые и полиэтиленгликолевые водные растворы термодинамически [c.83]

Пример влияния концевой группы на элюционное поведение олигомеров показан на рис. И 1.23, на котором приведены зависимости Каи = Я ——Ущ) ОТ ДЛЯ гомологов ОЛИГО-этиленгликоля на сефадексе ЬН-20 в различных растворителях [165]. Значение Ка > 1 свидетельствует о взаимодействии концевых —СОН-групп с полимерной матрицей гидроксипропилирован-ного сшитого декстрана. В ДМФА и метаноле концевые гидроксилы не вносят отрицательного вклада" в ДС. В воде наблюдается частичная адсорбция, однако Ка не превышает единицы. Наконец, в ацетоне и ТГФ влияние концевых групп значительно, поэтому низкомолекулярные гомологи сорбируются тем сильнее, чем меньше центральных звеньев в цепи р. Возможен и обратный случай, показанный крестиками на рис. 111.23. Растворимость спиртов в воде ухудшается с ростом р, поэтому Кап для них растет по мере удлинения углеводородной цепи. [c.87]

При получении биологических материалов редко создаются такие химические условия, которые могли бы вызвать разрушение матрицы геля. Однако мы приведем здесь в качестве ориентиров некоторые общие характеристики устойчивости нескольких гелей. Декстраны, такие, как сефадекс, устойчивы в растворах солей, органических растворителях, растворах щелочей и слабокислых растворителях, но гидролизуются в сильных кислотах. Декстраны во влажном и в сухом состоянии устойчивы при выдерживании их в течение 30 мин при 121 °С и pH 7,0. [c.227]

Одной из основных задач при изготовлении лекарственных препаратов иа основе ферментов наряду с проблемой иммуногенности является выведение препарата целиком из организма. Если пути выведения фермента в общем ясны, то какова судьба полимера-матрицы Первое условие, предъявляемое к такому полимеру,— отсутствие токсичности. Кроме того, его молекулярная масса должна быть такой, чтобы ои мог выводиться почками. Вещества с высокой молекулярной массой (выще 60 000) будут забивать почечные канальца, что может привести к непредвиденным осложнениям. Исключение могут составить биодегра-дируемые полимеры, которые разрущаются в организме до нормальных метаболитов. К таким полимерам, например, относится D,L-пoлимoлoчнaя кислота, щироко применяются декстраны. В ряде случаев в синтетический полимер вставляют биоде- [c.127]

В аффинной хроматографии и твердофазном секвенсировании часто бывает необходимо определить количество белка, связанного с инертной матрицей, такой, как агароза, декстраны и целлюлоза. В принципе это может быть сделано гидролизом образца с последующим определением общего азота, но в матрицу может быть включен небелковый азот, например когда исполь- [c.313]

Производные поперечно-сшитого декстрана были бы идеальной матрицей для аффинной хроматографии, но низкая степень пористости механически наиболее стабильных форм (от G-10 до G-75) сводит на нет их преимущества. Меньшая степень поперечной сшивки приводит к менее стабильным гелям. Активация декстрановых гелей обычными методами может вызывать дальнейшую поперечную сшивку геля, в результате чего молекулы ферментов даже с низкой молекулярной массой фактически не могут проникать внутрь шариков геля. [c.22]

Карбоксиметилирование носителей с первичными или вторичными гидроксильными группами можно осуществить классическим синтезом простых эфиров по Вильямсону, что было продемонстрировано Петерсоном и Собером [17] в случае КМ-целлюлозы. Вицинальная конфигурация диолов не обязательна, и метод применим ко всем полигидроксилированным матрицам, выдерживающим обработку сильной щелочью в течение нескольких часов, таким, как целлюлоза, агароза, поперечно-сшитые декстраны, поли (гидроксиэтил) метакрилаты или поливиниловые спирты. Реакция проводится с хлороуксусной кислотой в избытке водного едкого натра [c.77]

Обычно в качестве матрицы применяют однородные твердые сферические гранулы таких соединений, как агароза и поперечно-сшитые декстраны (например, сефароза 4В) применяются также синтетические полиакриламидные гели, производные целлюлозы, полистирольные смолы и пористые стеклянные шарики. [c.102]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология