Сефадексы, типы

Разделение веществ зависит от степени сшивания сефадекса. Главные типы сефадекса приведены ниже. [c.205]

При определении молекулярной массы с помощью гель-фильтрации [70, 73] применяют сефадексы различного типа (0-50, 0-100, 0-150, 0-200), агарозы (сефарозы 2В, 4В, 6В) или полиакриламиды (биогели Р-100, Р-150, Р-300). Процесс проводят как в хроматографических колонках, так и на тонкослойных пластинках. Принцип метода уже рассматривался в разд. 3.3. [c.361]

Фирма рекомендует использовать для ТСГФ сефадексы типа Superfine в следующих количествах на 100 мл суспензии (в граммах) G-50-10,5 G-75-7,5 G-100-6,5 G-150-4,8 G-200-4,5. [c.164]

К молекулярным ситам относятся не только цеолиты, но и некоторые другие вещества, например ряд ионообменников, при помощи которых удается разделять молекулы по их величине. Внутрь зерен таких ионообменников (в набухшем состоянии) могут проникать ионы небольшого диаметра и удерживаться в большом внутреннем объеме. Ионы большей величины могут, наоборот, удерживаться на относительно небольшой внешней поверхности зерен ионообменника. Разделение веществ по величине их молекул можно производить также при помощи так называемых ультрафильтров, пропускающих или не пропускающих компоненты смеси в зависимости от величины их молекул. При фильтровании гелей через столб такого молекулярного сита скорость продвижения вещества зависит от размера его молекул. К этому типу молекулярных сит относится, например, сефадекс (см. стр. 204). [c.331]

У ионообменных сефадексов типов А-50 и С-50 емкость по низкомолекулярным ионам примерно такая же, как у целлюлоз, а емкость по белку в 2—4 раза выше, чем у микрокристаллических целлюлоз, и в 4—7 раз выше, чем у волокнистых набухают они тоже примерно в три раза сильнее. Зато зависимости объемов этих сефадексов от pH и пониой си.лы элюента вт.гражены очень сильно (рис. 114). Обращает [c.273]

Способы набивки колонки, ее уравновешивания прокачкой исходного элюента, внесения препарата, а также варианты и методы осуществления элюции подробно описаны в хл. . Однако следует отметить некоторые особенности, присущие использованию ионообменников. Главная из них связана с возможностью изменения объема обменника (высоты его столба в колонке) при изменении pH и концентрации соли в ходе элюции, особенно для ионообменных сефадексов типов А-50 и С-50. В связи с этим использование адаптора может оказаться неуместным, так что препарат приходится вносить в открытую колонку. Поверхность ионообменника в таком случае иногда защищают от взмучивания слоем сефадекса G-25 толщиной около 5 мм или кружком фильтровальной бумаги (следует убедиться, что препарат пе сорбируется на нем). В ответственных случаях фракционирования препарат имеет смыс. г подслаивать под буфер, как было описано в гл. 3. Следует помнить, что ионообменные сефадексы типов А-50 и С-50 гораздо мягче, чем сам сефадекс G-50. Их следует набивать в колонку с теми же предосторожностями, что были описаны в гл. 4 для сефадекса G-100. [c.281]

Декстрановые гели широко применяются для разделения, очистки и идентификации различных органических соединений методом гель-хроматографии Наиболее распространены Ь гидрофильные декстрановые гели, сшитые эпихлоргидрином (гели типа Сефадекс ). Мы проверили и уточнили условия получения подобных гелей. [c.56]

Для сефадексов типов А-50 и С-50 эта величина может доходить соответственно до 200 и 350 мг/мл, чему отвечает связывание до 6 и [c.288]

При нагревании до 120° сухой сефадекс приобретает коричневую окраску. Однако в набухшем состоянии он не изменяется при стерилизации в автоклаве в течение 40 мин при 110°. Сефадексы типа О набухают не только в воде, но также и в диметилсульфоксиде, формамиде и гликоле, причем степень набухания в этих растворителях иная, чем в воде. Набухание таких сефадексов в диметилсульфоксиде должно быть на 50—100% выше, чем в воде [42]. Добавление к водным гелям спиртов вызывает их значительную усадку. Сефадексы 0-10 и 0-15 набухают также в диметилформамиде. [c.50]

В последние годы для этих целей используются также методы жидкофазной адсорбции на активированном угле [23], Сефадексе [51] и метод адсорбционного разделения в паровой фазе на цеолитах типа 13Х [52]. [c.330]

Вместо цилиндрической колонки матрицу пористого геля можно нанести топким слоем на стеклянную пластинку и вести элюцию током жидкости, текущей вдоль пластинки с одинаковой скоростью по всей ее ширине. Такое течение можно осуществить в наклоненной под небольшим углом пластинке, на концы которой равномерно наложены фитили из фильтровальной бумаги, погруженные с другой стороны в резервуары с элюентом (рис. 83). В качестве гелей используют, например, сефадексы типа Superfine . Препараты наносят на стартовой линии в верхней части пластинки. Как и в колонке, высокомолекулярные компоненты смеси молекул будут двигаться между гранулами, вместе с током подвижной фазы, а компоненты меньшего размера (и молекулярной массы) будут продвигаться к нижнему краю пластинки тем медленнее, чем большая часть внутреннего объема гранул (F ) окажется для них доступной. [c.162]

К гидрофильным мягким гелям относятся сефадексы, или декст-рановыегели, имеющие мостики типа —О—СН2СН(ОН)СН2—О—, агарозные гели, обладающие водородными мостиками, связывающими цепи агарозы, полиакриламидные гели и крахмал. [c.230]

Отсюда можио сделать два практически важных вывода. Во-первых, колонки, заполненные крупнопористыми ионообменными сефадексами, должны быть с самого начала уравновешены элюентом, содер/кащ им не менее 0,1 М Na l, иначе в ходе элюции с увеличением концентрации соли их объем (высота набивки) может уменьшиться в 2—3 раза, что приведет к сущ ественному ухудшению разрешения пиков. Во-вторых, даже при использовании для элюции солевых растворов с концентрациями в диапазоне 0,1—0,3 М колонка сожмется весьма сущ ественпо, во всяком случае настолько, что ее уже нельзя будет регенерировать промывкой элюентом с исходной концентрацией соли. Прп такой промывке столб обменника не сможет подняться до прежнего уровня. Вместо этого увеличиваюш иеся в объеме гранулы будут деформироваться, утрачивать сферическую форму и заполнять свободные промежутки между ними — протекание элюента по колонке резко затруднится. Для регенерации ионообменных сефадексов типов А-50 и С-50 после элюции с увеличением концентрации соли колонки приходится опорожнять и обменники промывать декантацией в свободном объеме. [c.274]

Показана возможность применения сефадекса в качестве сорбента и носителя (в последнем случае в сочетании с динонилфталатом, полиэтиленгликольсукцинатом и дн-метилформамидом в качестве НФ). Высказано предположение, что наиболее эффективным является сефадекс типа LH-20 с алкилиро-ванными гидроксильными группами в дек- [c.138]

Разделение голубого декстрана и щавелевой кислоты на колонке с сефадексом G-15 происходит вследствие различия их молекулярных масс. Голубой декстран — окрашенное в голубой цвет вещество типа полисахаридов с молекулярной массой больше 2 млн. Щавелевая кислота Н2С204-2Н20 имеет молекулярную массу 126. Вначале во внешнем объеме вымывается из колонки голубой декстран, а затем — щавелевая кислота. [c.242]

Декстран ( Sephadex ) — очень гидрофильный материал. Присоединение ионогенных групп происходит также по гидроксилалг полисахарида. Пористость и жесткость матриц на основе сефадексов зависит от процентного содержания сшивки (эпихлоргидрина). Модифицированные сефадексы для ионообменной хроматографии выпускаются на основе только двух типов сефадексов G-25 и G-50. Размеры пор у модифицированных сефадексов значительно выше, чем у двух исходных типов матриц, за счет уже знакомого нам эффекта расталкивания одноименно заряженных ионогенных групп. Ионообменные сефадексы соответственно и менее жестки их объемы тоже могут изменяться в зависимости от pH и ионной силы элюента. Особенно сильно это выражено у ионообменников, полученных на основе сефадекса G-50. Рабочий диапазон pH 2—12. [c.251]

Ниже указаны области фракционирования ( fra tionation range ) макромолекул по их массе для всех типов и категорий сефадексов (все четыре категории размеров G-25 п G-50 имеют одинаковые характеристики. См. стр. 116). [c.115]

Как видно из приведенных данных, диапазоны пористости и соответственно области фракцпонпрованпя для этих биогелей примерно такие же, как у сефадексов. Первые четыре типа выпускаются в виде гранул четырех диапазонов размеров 150—300 мкм (50— 100 МЕШ), 80—150 мкм (100-200 МЕШ), 40—80 мкм (200-400 МЕШ) и менее 40 мкм (—400 МЕШ). Остальные типы представлены тремя диапазонами размеров (за вычетом 200—400 МЕШ). Биогели серии Р поставляются в сухом виде, поэтому выше указаны также объемы упаковапной набухшей матрицы. На рис. 64 в тех же координатах, что п на предыдущем рисунке, представлено семейство графиков селективности для бпогелеи типа Р. Матрицы этого тппа имеют некоторые преимущества перед сефадексами. Во-первых, [c.121]

Максимально допустимые скорости элюцин (а.п,х) и соответственно максимальные гидравлические напоры (в виде отноше -ния hlL см. рис. 68) для остальных типов матриц фирмы Pharma ia приведены ниже (в скобках — значения а ах для сефадексов категории Superfine ) [c.129]

Обессоливание, смену буфера и очистку нуклелновых кислот (ПК) от радиоактивных предшественников производят также, как для белков. Выбор пористости геля диктуется молекулярными размерами примесей, от которых очищ ают раствор ПК. Как и для белков, здесь можно использовать мелкопористые и достаточно жесткие гели типа сефадекс G-25, биогель Р-6 и сходные с ними. [c.143]

Наилучшими свойствами для эксклюзионной хроматографии биополимеров обладают TSK-гели типа SW. Поверхность этих материалов покрыта гидрофильными ОН-грутопами по особой технологии, обеспечивающей исключительную инертность сорбента, практически не уступающую сефадексу. Поэтому эксклюзионное разделение, как правило, не осложняется побочными сорбционными процессами. ТЗК-гели SW выпускают с тремя размерами пор и они перекрывают диапазон молекулярных масс от 5 10 до 4 10 (по декстрану) или до 10 (по глобулярным белкам). За счет большого объема пор колонки, с этими гелями характеризуются высокой разделительной способностью, а их гарантированная эффективность составляет 16 тыс.т.т./м. Калибровочные кривые для некоторых модифицированных жестких сорбентов приведены на рис. 4.11. [c.109]

Л. извлекают из водорослей горячей водой или разб. к-тами сопутствующие кислые полисахариды отделяют осаждением в виде нерастворимых солей (напр., с катионными детергентами типа цетилтриметиламмонийбромида) или ионообменной хроматографией. М-Цепи и G-цепи разделяют хроматографически с использованием в качестве сорбента диэтиламиноэтилцеллюлозы (ДЭАЭ-сефадекс) в мо-либдатной форме. [c.577]

Диализ [121] и ультрафильтрация [122] основаны на применении в качестве полупроницаемого барьера тонкой мембраны (например, из ацетата целлюлозы — целлофана), имеющей поры диаметром 1—10 нм (чаще всего 5 нм). Малые молекулы такая мембрана пропускает, а крупные задерживает. Диализ определяется диффузией, и его можно ускорить перемешиванием раствора, а скорость фильтрования зависит от разности давлений по разные стороны мембраны. Более сложный характер имеет гель-фильтрация [123]. Колонку наполняют материалом типа декстрана с большим числом поперечных сшивок (сефадекс ) . обычно он имеет вид спрессованных мягких шариков. Шарик представляет собой трехмерную сеть из углеводных цепей (рис. 2-18). Пространство между цепями (оно зависит от числа сшивок, образующихся в геле при его химической обработке) недостаточно для проникновения туда крупных молекул, но в нем вполне могут задерживаться малые молекулы. При пропускании через такую колонку смеси разных моле- [c.162]

В дополнение к полисахаридным гелям фирмой Bio-Rad (США) предлагаются биогели на полиакриламидной основе (табл. 3-4). Введение в практику макропористых полистирольных смол, ненабухаюшнх пористых стеклянных шариков и иммобилиза-Ш1Я гидрофобных радикалов на декстрановой матрице сделали возможным гель-хроматографическое фракционирование в среде органических растворителей. Алки-лированные декстраны (типа сефадекс-LH) находят широкое применение в синтетической пептидной химии [38]. [c.350]

Неподвижные фазы в эксклюзионной хроматофафии выбирают для решения конкретной аналитической задачи. Первоначально устанавливают, какая система растворителей может быть использована для анализа (водная или водно-органическая), что и определяет тип сорбента. Так, например, разделение водных смесей проводят на сшитых декстранах (сефадекс) или полиакриламиде (биогель Р). С органическими растворителями разделение проводят на гидрофобных полистиролах с различной степенью сшивки (стирогель, порагель, биобид С). Подобные гидрофобные гели обладают хорошей разделяющей способностью только в том случае, если полимер набухает в органическом растворителе. Такие набухшие гели неустойчивы к давлению, скорость потока очень низка. Для эксклюзионной хроматофафии при высоких давлениях колонки заполняют устойчивыми к давлению неподвижными фазами с жесткими матрицами — силикагелями. Недостаток таких сорбентов — высокая адсорбционная активность, которую можно подавить силанизацией поверхности либо выбором подходящего по полярности элюенга (см. разд. 8.7.1). Например, используя в качестве подвижной фазы метиленхлорид ипи тетрагидрофуран, на силикагеле можно разделить по молекулярным массам попистиропы. [c.326]

Фирма Pharma ia (Швеция) выпускает 18 типов сефадексов (без ионообменных свойств), которые отличаются друг от друга частотой поперечных сшивок. Важнейшие свойства сефадексов приведены в табл. 2. Символ, указывающий тип сефадекса (G-25, G-50 и т. д.), обозначает пористую структуру (G) и величину поглощения воды на грамм сухого веса сефадекса, т. е. указывает частоту поперечных сшивок декстрана. У сефадексов с высоким значением индекса цифра указывает нижний предел молекулярного веса веществ (в тысячах), не проникающих внутрь гранул геля. Например, вещества с молекулярным весом меньше Д00 ООО могут проникать внутрь гранул сефадекса G-100, тогда как вещества с более крупными молекулами выходят в свободном объеме раствора. [c.24]

При гель-фильтрации наиболее употребительны два типа гелей гели, полученные путем ферментирования декстрана (сефадексы), и синтетические гели акриламида (биогели). Акриламидные гели обладают низкой адсорбционной способностью, поэтому при равной разрешающей способности для них характерен больший выход фракционируемого вещества, чем для гелей декстрана. [c.37]

Смотреть страницы где упоминается термин Сефадексы, типы: [c.117] [c.273] [c.286] [c.307] [c.89] [c.92] [c.63] [c.172] [c.344] [c.112] [c.115] [c.122] [c.132] [c.272] [c.299] [c.174] [c.174] [c.163] [c.165] [c.439] [c.25] [c.578]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология