Обращение с хроматограммами и элюирование их

На рис 7-47 изображена хроматограмма компонентов сапонина, применяемого в качестве отхаркивающего средства И наконец, на рис 7-48 представлена хроматограмма фенольной смолы Обычно такого рода анализы проводят методом эксклюзионной хроматографии, однако, если необходима более детальная ин( юрмация о иизкомолекулярных компонентах, целесообразнее прибегнуть к обращенно-фазовому методу Правда, при этом высокомолекулярные компоненты фенольной смолы сильно удерживаются колонкой, и для полного их удаления необходимо градиентное элюирование В рассматриваемом эксперименте низкотемпературные компоненты смолы разделены с [c.205]

ОБРАЩЕНИЕ С ХРОМАТОГРАММАМИ И ЭЛЮИРОВАНИЕ ИХ [c.89]

Одно из преимуществ метода пропитки адсорбента жидкостью после нанесения слоя адсорбента реализуется при двумерной хроматографии. В этом случае пропитку адсорбента проводят по окончании первого проявления хроматограммы. При этом адсорбент можно модифицировать таким образом, что он при втором элюировании приобретет новые адсорбционные характеристики и в результате улучшится разделение. Так, например, Кауфман и сотр. [451] вначале проводили обычное адсорбционное хроматографическое разделение в одном направлении, после этого пропитывали адсорбент на пластинке парафиновым маслом или ундеканом [452] и проводили в перпендикулярном направлении разделение методом распределительной хроматографии с обращенной фазой. Урбах [423] сначала проводил разделение на оксиде алюминия в одном направлении, далее пропитывал адсорбент 2-феноксиэтанолом и хроматографировал в перпендикулярном направлении. Бергельсон и сотр. [445] при разделении мононенасыщенных жирных кислот первое элюирование проводили на силикагеле, пропитанном додеканом, затем наносили на пластинку комплексообразователь (нитрат серебра) и элюировали еще раз в поперечном направлении. [c.99]

Обращенно-фазовую распределительную хроматографию применяют для разделения как свободных стеринов [48, 53], так и их сложных эфиров [54]. Обычно смеси хроматографируют на колонках с г-бондапаком is, причем наилучшие результаты дает элюирование безводными органическими растворителями [55, 56]. На рис. 6.2 приведена хроматограмма смеси стеринов одного гомологического ряда, показывающая, что время их удерживания на обращенной фазе возрастает с уменьшением числа углеродных атомов в молекуле, а при одинаковом числе этих атомов — с увеличением степени ненасыщенности. [c.293]

ИЛИ 4,4. При незначительном изменении концентрации уксусноэтилового эфира в хлористом метилене, например вследствие разбавления, к значительно меняется. Если, кроме того, возможны вторичные эффекты удерживания , то меняется не только время удерживания, но и относительное удерживание отдельных пиков (см. хроматограмму барбитуратов на рис. У1.9) и становится возможным даже обращение последовательности в ряду элюирования. Поэтому, чтобы не опасаться расслоения на адсорбенте и сильной зависимости к от незначительного изменения состава элюента, смеси следует составлять из растворителей с близкой элюирующей силой. То же самое можно сказать о выборе компонентов для градиентного элюирования. [c.124]

Высшие жирные кислоты можно хроматографировать в исходном состоянии, поскольку они нелетучи, используя обращенно-фазные системы. Хроматограмму погружают в раствор ун-декана или керосина в бензоле с добавкой уксусной кислоты (соотнощение компонентов 14 18 1) избыток раствора удаляют, промокая хроматограмму с обеих сторон фильтровальной бумагой и затем подсушивая ее 5—10 мин на воздухе. Элюирование проводят 90—95%-ной уксусной кислотой. Результаты хроматографирования можно улучшить, применяя более плотную бумагу и нанося пробы в виде тонкой горизонтальной линии или полосы. Чтобы отделить насыщенные кислоты от ненасыщенных, Клячко-Гурвич и др. [66]. добавляли к подвижной фазе нитрат серебра. [c.112]

Подход с проточной ячейкой — наиболее простой вариант работы ЖХ-ФПИК. Хроматографический элюат проходит через проточную ячейку непосредственно после колонки, и интерферограмма непрерывно записывается в течение всего анализа. Использование алгоритма Грама—Шмидта, как в ГХ-ФПИК, для расчета отдельной хроматограммы поглощения в режиме реального времени неосуществимо, поскольку подвижная фаза сильно поглощает и небольшие изменения в поглощении при элюировании определяемых веществ с трудом детектируются. Поэтому обработка данных обычно проводится по окончании хроматографического анализа после вычитания спектра поглощения подвижной фазы. Чтобы предотвратить полное поглощение в полосе растворителя, необходимо использовать короткий оптический путь, обычно менее 0,2 мм для органических подвижных фаз и менее 0,03 мм для водных смесей. Вместе с тем обстоятельством, что коэффициенты поглощения в среднем ИК-диапазоне значительно меньше по сравнению с коэффициентами поглощения в УФ- и видимом диапазонах спектра, это приводит к сравнительно низкой чувствительности этого метода, порядка 0,1-1 мкг. Дополнительным недостатком этого интерфейса является то, что в области поглощения растворителя никакой информации о поглощении определяемого вещества не может быть получено, поскольку правильное вычитание затруднительно, особенно для обращенно-фазовых смесей растворителей. Более того, вычитание фонового сигнала не может быть проведено удовлетворительно, если необходимо градиентное элю- [c.630]

На рис 5-3 показана хроматограмма трех органических кислот, элюирование которых проводилось СВзСЫ Детектирование осуществлялось на частоте деформационных колебаний связи С-Н Еще один пример такого разделения приведен на рис 5-4, где изображена хроматограмма пропаиола, полученная в обращенно-фазовом режиме при элюировании 020 [c.127]

На рис 5-11 изображена типичная масс-хроматограмма, полученная на установке ВЭЖХ-МС с движущейся лентой В данном случае в колонке проводилось обращенно-фазовое разделение антибиотиков (спектнномицина и актинамина) с применением градиентного элюирования Детектирование осуществлялось посредством масс-спектрометра с метановой химической ионизацией [19] [c.133]

Эта разновидность хроматографии известна также как распределительная хроматография. Здесь мы рассмотрим системы, в которых гранулированный твердый материал служит только подложкой неподвижной фазы, совсем как в ГЖХ, а подвижной фазой является вторая жидкость. Поскольку эти две жидкости не должны смешиваться, они должны заметно различаться по степени полярности. Фиксировать можно и более полярную, и менее полярную жидкость. Обычно полярный растворитель, например спирт или воду, наносят на пористую подложку из силикагеля, оксида алюминия или силиката магния. Неполярный растворитель может удерживаться на тех же субстратах после их си-ланизации, после проведения которой они становятся гидрофобными. Такие системы принято называть распределительными хроматографическими системами с обращенными фазами. На рис. 21-2 показаны две хроматограммы, полученные при анализе смеси эфиров фталевой кислоты при помощи хроматографии с нормальными и обращенными фазами [1]. Обратите внимание, что время отложено в противо-поло> <ных направлениях (рис. 21-2, а и б) сделано это для того, чтобы подчеркнуть изменение порядка элюирования. [c.431]

Обращенно-фазпую бумажную хроматографию применяют для очистки экстрактов, содержащих хлор- и фосфорорганические пестициды [34]. В качестве неподвижной фазы используют силиконовый эластомер ЗЕ-ЗО, подвижной фазы —90%-ный раствор этилового спирта в воде (хлорорганические пестициды) и 50%-ный раствор диметилформамида в воде (фосфорорганические пестициды). Значительно более часто для очистки экстрактов используется тонкослойная хроматография [28]. В этом случае зоны хроматограммы с пестицидами вырезают и пестициды элюируют бензолом или гексаном. Описаны специальные устройства для элюирования пестицидов с сорбентов [35]. В качестве сорбента для очистки экстрактов с помощью тонкослойной хроматографии наиболее часто применяют силикагель. [c.225]

На рис. 187 приведена хроматограмма ароматического полиола (молекулярная масса 254—400), разделенного на колонке с обращенной фазой при градиентном элюировании. Полученные данные, а также показанная на рис. 188 хроматограмма того же полиола, разделенного на колонке стерического вытеснения, дают полное представление о возможностях применения высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения реагентов в процессе получения полиуретанов. Полиолы, как правило, представляют собой смеси олигомеров гликоля, различающихся между собой по числу повторяющихся единиц в молекуле. Обращенно-фазовую жидкостную хроматографию можно использовать для разделения индивидуальных [c.563]

В работе [50] описана обращенно-фазовая хроматография метиловых эфиров железосодержащих уро-, копро-, гемато-, дейтеро-, мезо- и протопорфиринов на бумаге, пропитанной силиконовым маслом. Наилучшее разрешение было получено путем последовательного элюирования хроматограммы сначала смесью керосин — хлороформ, а затем смесью керосин — пропанол-1. В этих условиях соединения, различающиеся по числу сложноэфирных групп, полностью отделяются друг от друга, тогда как эфиры четырех порфириндикарбоновых кислот обладают одинаковой хроматографической подвижностью. [c.228]

Авторы всех трех цитированных выше работ получили вполне хорошие хроматограммы, поэтому, основываясь на результатах этих трех работ, трудно прийти к заключению, какая из методик является наилучшей (впрочем, не исключено, что определение наилучшая в данном случае вообще неуместно). Приготовить высокоэффективную колонку для жидко-жидкофазной хроматографии и в процессе эксплуатации поддерживать ее в таком состоянии, чтобы неподвижная фаза не вымывалась, довольно сложно. В настоящее время очень широкое распространение получила обращенно-фазовая ВЭЖХ. Отчасти это обусловлено тем, что в данном случае, меняя состав элюента (обычно путем изменения содержания воды), можно добиться кардинального изменения картины элюирования. Выбор подходящей системы жидкостной хроматографии в определенной мере зависит от природы анализируемого образца и от степени его предварительной очистки, однако помимо этого он, по-види-мому, определяется и причинами более частного характера некоторые исследователи предпочитают лишь определенные, хорошо им знакомые методики. Кроме того, при выборе системы следует учитывать и практические соображения если данная лаборатория выполняет ряд различного типа анализов с использованием какой-то стандартной методики жидкостной хроматографии, то вполне естественно применить именно эту методику для анализа смесей многоядерных ароматических углеводородов. [c.402]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология