Выращивание 32р-меченой

Для повышения эффективности применения хим. и физ.-хим. методов изучения структуры анализу подвергают не только прир. в-ва, но и их производные, содержащие характерные, специально вводимые группировки и меченые атомы, напр, путем выращивания продуцента на среде, содержащей меченые аминокислоты или др, радиоактивные предшественники, в состав к-рых входят тритий, радиоактивный углерод нлн фосфор. Достоверность данных, получаемых при изучении сложных белков, значительно повышается, если это изучение проводят в комплексе с исследованием строения соответствующих генов. [c.288]

Путем выращивания лекарственных растений в атмосфере, содержащей радиоактивный углекислый газ, получаются меченые лекарства, за перемещениями и превращениями которых в организме можно проследить. [c.511]

В процессе выделения и очистки меченых нуклеиновых кислот можно выделить три главные стадии выращивание организма в присутствии радиоактивного изотопа, отделение суммарной фракции нуклеиновых кислот от друт их клеточных компонентов и выделение специфической нуклеиновой кислоты с последующим определением нуклеотидной последовательности. Первую стадию обычно проводят в условиях, близких к тем, которые используют для выращивания нерадиоактивных клеток. Некоторые отличия наблюдаются лишь в том случае, когда стремятся как можно полнее заменить нерадиоактивный элемент на его радиоактивный изотоп. Так меченные Р клетки часто выращивают на среде, содержащей минимальное количество нерадиоактивного фосфата. [c.224]

Направление научных исследований выращивание кристаллов в растворах гравиметрический аиализ полярография неводных растворителей полярография комплексов благородных металлов с органическими лигандами газовая хроматография очистка неорганических солей, контролируемая радиоактивными индикаторами спектроскопия неорганических комплексов химия алкоголятов металлов методы и механизм восстановления органических соединений гидридами металлов металлорганические соединения замещенные фенолы бензальдегид синтез меченой индолилуксусной кислоты и примеиение ее в изучении физиологии растений. [c.270]

N-Деалкилированные метаболиты идентифицированы в опытах по выращиванию растения гороха в присутствии меченных в кольце атразина или прометрина. При применении прометрина выделен метаболит, в молекуле которого отсутствует одна изопропильная [c.77]

Представьте следующую гипотетическую ситуацию вы выделяете культуру новой бактерии, о которой не знаете ничего, кроме того, что она растет в комплексной среде неопределенного состава, содержащей глюкозу. Ваша задача — описать в общих чертах пути метаболизма этой бактерии. Как бы вы приступили к решению этой задачи Прежде всего возникают вопросы какие биоэнергетические пути использует бактерия какое количество углерода глюкозы ассимилируется при биосинтезе, если только это вообще имеет место в какие макромолекулярные компоненты включается углерод Чтобы справиться с поставленной задачей, потребуется ответить на все эти вопросы (как и на многие другие, естественно). Экспериментальное определение радиоизотопного баланса служит серьезным фундаментом, на основе которого можно сделать попытку решить эту задачу. Культуру выращивают в течение времени, достаточного для диссимиляции 30—70% добавляемой глюкозы, меченной (равномерно или специфически в положениях С-1, С-3,4 или С-6). В конце выращивания подводят баланс С. Полученные при этом данные служат отправной точкой в определении путей метаболизма. [c.430]

Существенное значение как для понимания процесса гумификации, так и для решения прикладных природоохранных экологических задач имеют методы, использующие радиоактивную метку. Для общих оценок пригоден метод тотального меченая фитомассы радиоуглеродом. Он предусматривает выращивание растений в атмосфере СО2, при этом с включается в процессы метаболизма и тотально метит углерод фитомассы, которую затем используют в модельных опытах. Метод тотального мечения позволяет выявить генетические связи между различными фуппами гумуса, мифационные характеристики гумусовых веществ и химических зафязняющих веществ в почвенном профиле, [c.242]

Было высказано много предположений о возможности образования активного изопренового фрагмента из таких соединений, как лейцин и сенециевая (Р, 3-диметилакриловая) кислота. Многие ранние исследования в основном были посвящены изучению стероидов вследствие их важного биологического значения. Первые исследования биосинтеза начались вскоре после установления структуры этих соединений. В 1937 г. Зондерхоф [4] одним из первых применил метод меченых атомов для решения биосинтетических проблем. При выращивании дрожжевых клеток на среде, содержащей тридейтероуксусную кислоту, он обнаружил, что образующиеся в них стерины содержат большое количество дейтерия. Исследования, начатые в 1946 г. Блохом [5], Корнфортом и Прп-чаком [6], с использованием уксусной кислоты (1), меченной " С по метильной или по карбоксильной группе [1], привели к установлению пути ее превращения в стероиды. Этими экспериментами было показано, что атомы углерода метильной и карбоксильной групп чередуются в углеродном скелете холестерина (7) [7], а боковые метильные группы образуются из метильной группы уксусной кислоты. [c.483]

Включение в аминокислоты. В 1955 г. Робертс и его сотрудники опубликовали результаты своих экспериментов по выращиванию Es heri hia oli на среде, содержавшей в качестве единственного источника углерода равномерно меченную С-глюкозу. Исследователи рассчитывали таким способом пометить радиоактивным углеродом биомолекулы клетки. Оказалось, что при выращивании бактерий на С-глюкозе метка быстро включается во [c.401]

Первые крупные исследования по изучению интенсивности обновления белков в тканях растений были выполнены Ф. В. Турчиным с сотрудниками в начале пятидесятых годов. В этих опытах овес подкармливали сульфатом аммония, меченным тяжелым изотопом азота Ы , и через различные промежутки времени определяли количество включившегося в аминокислоты, белки и хлорофилл. Первые опыты показали, что аминокислоты и белки в растениях обновляются очень интенсивно. Например, в молодых растениях овса через 24 часа хлорофилл обновлялся на 27%, запасные белки на 25%, а конституционные белки, -составляющие структурную основу протоплазмы, —на 53%. Через 48 часов. хлорофилл обновлялся на 58%, запасные белки на 37%, консгитуционные белки на 63%, а через 3—5 суток все белки молодых растений овса обновлялись практически полностью. На более поздних фазах развития или при выращивании растений в условиях недостатка калия интенсивность обновления белков была более низкой. Последующие исследования в основном подтвердили эти данные о высокой скорости обновления белков в растениях. [c.302]

Известно, что при включении гексоз, пентоз Это было установлено путем выращивания и уроновых кислот в полисахариды перегруп- растений на полисахаридах, меченных в опре-пировки их углеродного скелета не происходит, деленных положениях Затем экстрагиро- [c.164]

Когда желательно исследовать метаболизм содержащих органических веществ у целых растений в течение длительных интервалов времени, этот прием оказывается неудобным, так как длительное выращивание растений в замкнутой камере е радиоактивной углекислотой связано с рядом затруднений. Наши опыты показали (Заленский, 1954), что меченый углерод можно обнаружить в различных органах растения еще через 5—7 дней (вероятно, и более) после кратковременной (10— 40 мин.) экспозиции его листьев в камере с радиоактивной углекислотой. Следовательно, у растений, находящихся в естественных или экспериментально созданных условиях, можно изучать метаболизм и передвижение органических веществ с меченым углеродом в течение длительного времени после поглощения его листом. [c.45]

Получая меченое по углероду органическое вещество путем выращива ния растений в атмосфере, содержащей меченый углекислый газ, и определяя затем изотопный состав углекислоты, выделяющейся при разложении меченой растительной массы в почве, удается проследить как за разложением внесенного в почву растительного материала, так и за одновременно идущим разложением органического вещества почвы. Аналогичным образом проводятся наблюдения при помощи меченого азота. Меченая по азоту растительная масса получается путем выращивания растений на питательной смеси, содержащей обогащенную тяжелым изотопом азота аммиачную или нитратную соль. Определяя изотопный состав азота минеральных соединений, образующихся при разложении такой растительной массы в почве, можно судить о том, какая часть минерализованного азота получена от разложения внесенной в почву меченой растительной массы и какая за счет разложения азотистых органических веществ почвы. [c.515]

Для проблем селекции и фитопатологии большое значение имеет изучение распространения пыльцы растений и спор грибов. Это успешно может быть сделано путем радиоактивной маркировки, достигаемой обменом с растворами меченых солей или выращиванием в радиоактивной среде [1230]. Последний способ может быть также применен для маркировки и изучения путей распространения патогенных бактерий. Насекомых можно метить, давая им радиоактивные вещества с пищей или выращивая личинки в радиоактивной среде. Чаще всего для этого применяют меченые фосфаты, довольно стойко удерживаемые в организме. Такие меченые насекомые были применены для изучения распространения ими болезней человека, скота и растений [1237]. В частности, было изучено поведение и распространение малярийного комара Anopheles, москита желтой лихорадки Aedes и др. Было обнаружено, что москиты питаются нетолько кровью, но и растениями, воспринимая от последних радиоактивный фосфор. Найдено, что москиты в озерах поедаются в большом количестве некоторыми видами насекомых, которым они передают радиоактивность. [c.466]

При выращивании яровой пшеницы на питательном растворе содержащем 10 мг/л меченного С бентазона, через 173 дня носле начала опыта в собранных растениях пшеницы почти вся метка находилась в соломе и притом в нижней части (от корневой шейкр до третьего узла). Из соломы /з общей активности не экстрагировалось, по-видимому, вследствие образования прочных комплексо действующего вещества с веществами растения. Растворимы комплексы действующего вещества составляли 25% приблизитель но 8% приходилось на свободное действующее вещество. В опыта с условиями, приближенными к практическим, в собранной спело пшенице остаточные количества бентазона (0,2 мг/кг) обнаружень только в стебле от корневой шейки до третьего узла. При обра ботке бентазоном листьев сои не установлено перемещения дейст вующего вещества или его метаболитов внутрь растения. Следо [c.212]

Значительный интерес представляют работы, посвященные выяснению механизма биосинтеза микофеноловой кислоты 2 " 2 . В этих работах было показано, что если выращивание Peni illium, brevi ompa tum проводить на среде, содержащей СНз СОзН, то образующийся антибиотик оказывается меченым в тех положениях, которые обозначены звездочками в формуле (172). Эти результаты согласуются с предположением, что основной углеродный скелет микофеноловой кислоты, как [c.486]

Биосинтез хлорамфепикола являлся предметом многочисленных экспериментальных и теоретических исследований, и они привели к осуществлению крупномасштабного производства антибиотика уже в тот период, когда еще не существовало эффективных химических методов синтеза. Поскольку 7 является продуктом микробиологического превращения, то, изменяя условия выращивания культуры и отбирая мутанты, можно максимально увеличить выход желаемого метаболита. Одно из важнейших условий выращивания культуры (которое можпо легко варьировать) — присутствие специфических субстратов, способных выступать в роли достаточно эффективных предшественников метаболита. Это условие положено в основу методики исследования путей биосинтеза, ибо меченые предшественники можно использовать для измерения суммарных скоростей включения метки и для определения происхождения отдельных атомов в конечном метаболите. [c.164]

В течение ночи, после чего бутыль устанавливают вертикально и продувают воздухом, содержащим 5% СОг. Клетки можно удалять трипсинизацией, что создает существенное неудобство при изучении импульсного мечения или- свойств клеточной поверхности. Бутыль можно также разрезать горячей проволокой, а прикрепившиеся клетки можно соскоблить со спирального листа. При выращивании в этих бутылях клеток ВНКК21С13 можно получить 20-кратное увеличение их количества в течение [c.35]

Передача продуктов фотосинтеза цианобактерий растительным клеткам. При использовании меченного по С бикарбоната было показано, что С. frits hii при росте на свету способна к значительному (до 16%) выделению С, фиксированного в процессе фотосинтеза. Инкубация клеток женьшеня в культуральной среде после выращивания в ней С. frits hii приводила к включению метки (до 74% растворенных органических веществ) из среды в клетки женьшеня. Более того, культуральная жидкость С. frits hii, добавленная к полной среде МС, лишенной сахарозы, [c.71]

В недавнее время появились сведения о том, что,фрагменты рецепторов, сбрасываемых с клетки, включают внеклеточные участки их молекул (/ -белки). Это было установлено при изу-чении состава культуральной жидкости от клеток макрофагоподобной линии Р3880ь выращивание которых производили в присутствии С-глицина. При пропускании культуральной жидкости через колонку с иммобилизованным арсанилаттирозином был обнаружен и выделен меченый белок. Последний характеризовался избирательным сродством к указанному выше гаптену и имел молекулярную массу, не превышающую 60 000. Аналогичный по специфичности белок, как показано в гл. 3, удается снять с поверхности тех же клеток с помощью трипсина. Поскольку макрофаги не продуцируют антител, белок, содержащийся в культурной жидкости этих клеток, который взаимодействует с простым гаптеном, можно отнести к продуктам катаболического распада рецепторов, распознающих указанный гаптен. [c.83]

ИХ рестриктазами, разделяются электрофоретически на агарозе или полиакриламидном геле. Специфические фрагменты ДНК обнаруживаются затем путем гибридизации с помощью проб радиоактивно меченной нуклеиновой кислоты. Гибридизацию проводят после того, как фрагменты нуклеиновой кислоты будут физически перенесены с геля на мембранный фильтр (процедура, получивщая название перенос пятен , англ. blotting). Перенос производится таким образом, чтобы зафиксировать расположение пятен, которое было на геле. Это позволяет локализовать сегменты ДНК, комплементарные выбранной радиоактивной нуклеиновой кислоте (обычно РНК). Если для определенного белка радиоактивная РНК является информационной, то метод позволяет выделить ген этого белка. После идентификации гена его можно связать с соответствующим вектором клонирования и клонировать выращиванием в подходящем бактериальном штамме. [c.321]

Syne ho o us способен расти при температурах ниже оптимальной температуры роста, хотя и с меньшей скоростью. Электрофорез в геле клеточных белков, меченных с " С гидролизатом белка, из обработанных ХОЛОДОВЫМ и тепловым шоком клеток, обнаружил различия в уровнях синтеза ряда белков. Молекулярный вес индуцируемых холодом (10-22 0) полипептидов был определен как 74, 64.5, 23, 17 и 14.7 кДа. Изучение синтеза белков во времени показало прогрессирующую индукцию некоторых белков холодового шока ( SP) при 13 0. Тепловой шок вызвал немедленную репрессию синтеза большинства нешоковых белков. Результаты исследований показали, что фотосинтетическая активность и области критических температур у Syne ho o us зависят от температуры выращивания. Уменьшение потребления О2 колебалось в пределах изученной низкотемпературной области от 37% до 47%. Нри температуре [c.64]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология