Оксидаза глюкозы

Высокая эффективность биологических катализаторов и специфичность их действия делают ферменты идеальными реагентами для аналитической химии. Благодаря этим особенностям с помощью ферментов обнаруживаются вещества при предельно низкой концентрации в присутствии множества дрзтих соединений. К настоящему времени созданы искусственные аналитические системы различных конструкций (биосенсоры, датчики, ферментные электроды, проточные анализаторы), содержащие иммобилизованные ферменты и клетки и предназначенные для автоматического детектирования продуктов энзиматического превращения. Например, если использовать иммобилизованную глюкозо-оксидазу, то концентрацию окисляемой кислородом глюкозы определяют, регистрируя количество выделившегося в ходе реакции пероксида водорода [c.101]

Эта реакция катализируется ферментом глюкоз-оксидазой. Скорость реакции определяют по количеству выделившегося пероксида водорода. Для идентификации последнего можно использовать реакцию окисления какого-либо бесцветного органического вещества, окисленная форма которого окрашена, например окисление о-толуидина. Тогда скорость увеличения оптической плотности прямо пропорциональна исходной концентрации глюкозы необходимо только, чтобы кислород и восстановленная форма красителя находились в большом избытке по отношению к количеству определяемой глюкозы. [c.450]

Скорость каталитического окисления глюкозы кислородом в присутствии оксидазы глюкозы при О °С, pH = 5,6 и концентрации фермента 1,17 -10" Л1 может быть выражена как [66] [c.442]

Другими исследователями было найдено, что скорости окисления оксидазами а- и Р-О-глюкозы различны. Показано также, что в ряде процессов (например, транспорт сахаров через клеточные мембраны) участвует ациклическая форма углевода. [c.75]

Под действием инвертазы из сахарозы получают глюкозу. Для определения количества глюкозы в жидкостях тела в клиниках в последнее время стала широко использоваться глюкозо-оксидаза — как в свободной форме, так и иммобилизованная. [c.169]

Специфичность оксидазы глюкозы [c.626]

Некоторые ферменты высоко специфичны к одному оптическому изомеру (например, оксидаза глюкозы), другие могут оказывать каталитическое действие на реакции ряда близких веществ. Так, оксидаза -аминокислот реагирует со многими субстратами [52]. Относительные скорости реакций составляют с тирозином 100, пролином 78, метионином 42, аланином 34, серином 22, триптофаном 19,5, валином 18,4, фенилаланином 13,7, изолейцином 11,6, лейцином 7,4 и гистидином 3,3. [c.437]

При дыхании расходуется сахароза, которая вначале гидролизуется инвертазой до инвертного сахара глюкозы и фруктозы, а затем (под действием оксидазы) окисляется до СО2 и воды с выделением тепла (см. формулу на стр. 34). [c.47]

Существуют и более короткие пути окисления органических веществ с помощью специфических оксидаз. Например, глюкозооксидаза окисляет глюкозу за счет кислорода воздуха до глюконовой кислоты (Р-В-глюкоза кислород — оксидоредуктаза, К.Ф.1.1.3.4) [c.118]

Оксидаза глюкозы (нотатин) [c.624]

Оксидаза глюкозы представляет собой флавопротеин, образуемый Peni illum notatum она катализирует окисление глюкозы в глюконовую кислоту согласно уравнению [c.624]

Массей [241] исследовал спектр комплексов субстрат — фермент для флавопротеинов, оксидазы глюкозы и оксидазы D-аминокислот и предположил, что образуется FH-, поэтому необходимо, чтобы другие компоненты комплекса находились в форме радикалов субстрата (S ), связанных в комплекс с радикалом FH-. В спектре ЭПР сигналов свободных радикалов не наблюдалось, однако при низких температурах должен наблюдаться сигнал дирадикала (Дт = 2). Если это предположение верно, то реакцию можно представить уравнениями (58) и (59). Этот процесс окисления будет обратным процессу восстановления, приведенному в уравнении (50), если дигидропиридины заменить на флавин. [c.88]

Аэробные дегидрогеназы, для которых единственным акцептором водорода служит молекулярный кислород, называются оксида з а м и. Отнимая водород от окисляемого субстрата и передавая его кислороду воздуха, оксидазы могут образовывать воду или перекись кислорода. Из оксидаз важную роль играют полифенолокси-даза и глюкозооксидаза, окисляющие соответственно полифеноль-ные соединения (например, пирокатехин в хинон) и глюкозу в глюконовую кислоту. [c.117]

Ферментное ингибирование в присутствии олигомеров кремневой кислоты может быть следствием либо направленности активных центров фермента в сторону кремнеземной поверхности, либо денатурации молекулы фермента по механизму Марголиса. Глюкоза-6-фосфатаза из микросом клеток печени крыс ингибируется олигокремневыми кислотами при их содержании 0,01—0,025 % S1O2 в отличие от некоторых других фос-фатаз, например дегидрогеназы и оксидазы [279]. Кинг и др. [c.1061]

Изучение цитохромных оксидаз в грибах белой и коричневой гнили показало, что окисление глюкозы и солей пировиноград-ной кислоты измельченным мицелием грибов тормозилось 0,001 М цианистого калия и 0,001 М азида натрия. В то время как лакказа легко экстрагируется из размолотого мицелия, цито-хромные оксидазы, присутствующие в клеточносвязанном состоянии, экстрагировать не удавалось. [c.691]

Описано определение серебра по ингибиторному действию в присутствии тиомочевины на каталитическое участие фермента р-фруктофураносидеазы (инвертазы) в реакции инверсии сахарозы [1206], а также микрокалориметрическое определение по ингибиторному действию серебра на катализируемую оксидазой реакцию между глюкозой и кислородом [1637]. [c.123]

Приготовление энзимо-хромогенного реактива в мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 80—90 мл ацетатного буфера (0,25 моль/л, pH 4,8), в котором растворяют 2 мг глюкозо-оксидазы (ТУ 6-09-10-1382—79), а затем 1 мг пероксидазы (фирмы Реанал , Венгрия), прибавляют 1 мл 1 %-ного растворао-то-луидина и доводят объем раствора ацетатным буфером до метки. Срок годности реактива 3—4 нед. при хранении в защищенном от света месте при температуре от 8 до 10 °С. [c.302]

Глюкозо- оксидаза Стеклоуг- леродный Аминофенил-борная кислота Комплексообразова- ние Водные растворы Циклич. ВА, ИДИВ [c.815]

На 3-й день исследования для идентификации чистой культуры у нее выявляют оксидазную активность и делают посев на среды с углеводами (табл. 2.4). Менингококки обладают оксидазой, ферментируют глюкозу и мальтозу с образованием кислоты, лактозу, сахарозу и фруктозу не ферментируют, полисахарид из сахарозы не образуют, не растут в присутствии 0,2 % желчи. Для выявления оксидазной активности на кусочек фильтровальной бумаги, смоченной каплей свежеприготовленного 1%-го раствора солянокислого парадиэтилфенилендиамина, петлей наносят культуру менингококков. Культуры, обладающие оксидазной активностью, в течение 30 — 60 с вызывают вначале порозовение, а затем почернение бумаги с реактивом. Для определения способности образовывать полисахарид культуры нейссерий засевают на бескрахмальную среду с 1 % сахарозы и инкубируют при 37 °С в течение 24 — 48 ч, после чего на рост наносят каплю йодного раствора Люголя. В случае образования полисахарида сразу развивается буро-лиловое окрашивание. [c.118]

Результаты определения глюкозы с помощью ферментного электрода в меньшей степени зависят от присутствия посторонних веществ, чем результаты анализа, проведенного каким-либо другим методом без использования ферментов. Гибсон и др. [507] и Кейлин и Хартри [508, 509] исследовали селективность реакции, катализируемой глюкозо-оксидазой. Если условно принять скорость окисления (З-о-глюкозы за 100, то 2-дезокси-о-глюкоза окисляется со скоростью 25, из восьми альдо-о-гексоз окисляются только о-манноза, о-альтроза и о-галактоза (с очень маленькой скоростью). Фермент ингибируется ионами Ag , Hg , u , н-хлормеркаптобензоата и фенилмеркуриацетата [510] эти ионы не должны присутствовать в определяемом растворе, если необходимо получить оптимальную функциональную зависимость тока электрода от концентрации глюкозы. Стабильность показаний электрода в течение всего срока службы исследовалась испытаниями в растворе глюкозы с концентрацией 5-10 моль/л (фосфатный буфер с pH 6,6). Испытания показали, что снижение тока по сравнению с максимумом составляет примерно 0,1%/сут за время хранения электрода при комнатной температуре в течение более 10 месяцев. [c.173]

Гюильбо и Нейджи [546] разработали чувствительный к ь-фенила-ланину электрод на основе иодидного ион-селективного электрода. Активная поверхность иодидного электрода представляет собой поверхность диска, спрессованного из смеси Ag2S и Agi 1 1 (по массе). Этот диск подсоединяют к корпусу стеклянного электрода. В качестве внутреннего раствора используют раствор нитрата серебра, а электродом фавнения служит погруженная в него серебряная полоска. Ффментная система фактически представляет собой смесь оксидазы ь-аминокислоты и пероксидазы, иммобилизованных в полиакриловом геле. Последний распределяют тонким слоем на поверхности электрода под слоем диализной бумаги. Как уже отмечалось в разд. 14.1, электрод, чувствительный к глюкозе, имеет аналогичное устройство. Образовавшаяся при разложении фенилаланина перекись водорода окисляет иодид, добавленный (в известном количестве) к пробе. Описанный выше электрод регистрирует снижение концентрации иодида. [c.189]

В Ф. м. а. используют нередко комбинации из нескольких ферментативных реакций, последовательно проводимых в одном р-ре. При этом продукты, образующиеся в ходе первой (или нескольких) вспомогательной реакции, вступают в последнюю ферментативную реакцию, являющуюся и н д и к а-т о р н о й. По концентрации продуктов индикаторной реакции судят о количестве исходного (определяемого) вещества. Очень часто в качестве вспомогательных реакций подбирают такие, к-рые приводят к образованию веществ — субстратов действия дегидрогеназ, а также оксидаз или перокспдаз, являющихся катализаторами индикаторных реакций. Напр., широко распространенный высокоспецифичный метод определения 5-В-глюкозы основан на окислении глюкозы под действием глюкозооксидазы (ГО) с образованием перекиси водорода (вспомогательная реакция) 3-В-го [c.206]

Я позволю себе сказать здесь несколько слов о работе, которую я только начал, но которая, может быть, приведет к решению интересующего нас вопроса. Некоторые соображения привели меня к выводу, что дегидратация глюкозы в растениях может происходить только при помощи специального фермента, действующего в обратном направлении, чем амилаза. Существование этих двух ферментов с диаметрально противоположными функциями не является неожиданным, так как мы теперь знаем, что в живом организме существуют один или несколько окислительных ферментов — оксидазы — и один гидрогенизирующий фермент. Если существует гидратирующий фермент, то вполне возможно существование и дегидратирующего. Следующий характерный факт делает это предположение весьма правдоподобным. Известно, что амилаза не действует на крахмал в присутствии концентрированного раствора глюкозы. Допустим, что растение содержит наряду с амилазой дегидратирующий фермент. В тот период, когда в листьях идет с полной интенсивностью процесс ассимиляции углерода и образуется глюкоза, эта последняя нашим гипотетическим ферментом превращается в крахмал. В присутствии избытка глюкозы амилаза не действует на крахмал, отложенный в листьях. Но как только ассимиляция прекращается, количество глюкозы уменьшается, и амилаза вновь приобретает активность она превращает крахмал в растворимые сахаристые вещества, необходимые для жизнедеятельности растения. [c.9]

Действие пуриноксидаз, благодаря которым гипоксантип окисляется в ксантин, ксантин — в мочевую кислоту, а последняя — в аллантоин (с отщеплением углекислоты), сейчас ужо почти полностью разъяснено это позволяет предположить, что окислительный распад продуктов питания в организме идет ступенями, как и гидролитический распад. Зибер наблюдала сравнительно быстрое окисление глюкозы в углекислоту животными оксидазами и пероксидазами. Это, однако, единичное наблюдение. [c.45]

Что касается вопроса о том, могут ли известные нам окислительные ферменты окислять предполагаемые продукты распада сахара или для этого требуется содействие еще не известных нам оксидаз, то дать теперь на него определенный ответ нет возможности. Если наши окислительные ферменты и не окисляют молочную кислоту или диоксиацетон, то это еще не значит, что они не в состоянии окислять эти вещества in statu nas endi, т. е. в момент распада глюкозы. [c.105]

Смотреть страницы где упоминается термин Оксидаза глюкозы: [c.273] [c.437] [c.25] [c.239] [c.80] [c.400] [c.376] [c.449] [c.168] [c.393] [c.138] [c.82] [c.179] [c.93] [c.412] [c.251] [c.470] [c.59] [c.224] [c.88] [c.235] [c.372] [c.129] [c.91] [c.331]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология