Антигены выявление

Исследуемую пробу инкубируют с иммобилизованным антигеном, после отмывки несвязавшихся компонентов для выявления образовавшегося специфического комплекса проводят инкубациЮ " с меченным ферментом антигеном. Выявление образовавшихся на первой стадий иммунохимических комплексов происходит за счет взаимодействия свободных центров связывания с добавляемым в избытке меченным ферментом антигеном. [c.91]

Эти методы основаны на специфичности антител при выявлении на срезах тканей клеток локализации антигенного белка среди всех других белков. Для идентификации антител в местах их специфического связывания антитела метили флюоресцентны- [c.105]

Любой эффективный диагностический тест должен быть 1) высокоспецифичным в отношении молекулы-мишени 2) достаточно чувствительным для выявления небольших количеств мишени 3) достаточно простым, позволяющим без труда получать однозначные результаты. Существуют два типа методов молекулярной диагностики один основан на сродстве антитела к конкретному антигену, другой - на идентификации специфических нуклеотидных последовательностей с помощью гибридизации или ПЦР. [c.201]

Область применения. Метод позволяет непосредственно сравнивать различные белки (антигены) или специфические иммунные сыворотки. Он используется для выявления определенных белков в белковых смесях, для определения антигенной идентичности, общности или различий между белками. [c.131]

Серологическая диагностика. Антитела у больных листериозом обнаруживают со второй недели заболевания. С сывороткой крови и стандартным антигеном ставят РСК (диагностический титр 1 5 и выше). Применяют также РНГА (для выявления хронического листериоза). [c.181]

Реакцию проводят по общепринятой методике для выявления антител в сыворотке крови больных и переболевших. Кровь у больного берут на 5 —7-й день болезни. Сыворотку разводят от 1 10 до 1 2560. В качестве антигена используют хорошо очищенную и высушенную в вакууме взвесь инактивированных риккетсий (корпускулярный антиген). [c.237]

Если в материале содержится специфический антиген, он соединяется с сывороткой, адсорбированной на поверхности лунок, и, в свою очередь, связывает иммуноглобулины на поверхности эритроцитов. В результате происходит агрегация эритроцитов (гемагглютинация). В описанной модификации реакция применяется для выявления антигенов ротавирусов и других вирусов в фекалиях больных. [c.279]

Важным аспектом в проведении иммунологических исследований является подбор источников антигенов для выявления противовирусных антител. В доступных коммерческих тест-системах для обнаружения антител IgM vi IgG к вирусу 5-19 используются рекомбинантные антигены — аналоги белков вируса VPX и VP2. Следует отметить, что использование синтетических пептидов снижает чувствительность метода. [c.309]

Иммунологические исследования. Для выявления антител в сыворотке крови применяют серологические реакции — РП, РСК, ИФА и др. В качестве вспомогательных методов диагностики используют аллергические пробы с соответствующими антигенами. [c.324]

Высокая специфичность антител по отношению к антигену делает их гибким и действенным инструментом, который можно использовать для выявления, количественного определения и локализации множества разнообразных веществ, представляющих интерес для биолога. Но как можно обнаружить или измерить взаимодействие антитела с антигеном Начальная реакция связывания антигена с антителом-так называемая первичная реакция-может быть измерена многими различными способами. При радиоиммунном анализе, позволяющем определять даже ничтожные количества материала, известное количество радиоактивного антигена вместе со стандартным количеством антител добавляют к образцу, содержащему неизвестное количество того же антигена в нерадиоактивной форме. Немеченый антиген конкурирует с меченым за связывающие участки антител, и чем больше данного антигена в образце, тем меньше радиоактивного антигена будет связано с антителом. Свободный радиоактивный антиген можно отделить от связанного, а затем измерить количество того и другого с помощью ряда методов, использующих различия в свойствах свободных и связанных молекул один нз общих подходов состоит в осаждении (преципитации) комплексов антиген-антитело антителами к иммуноглобулинам (рнс. 17-28). [c.27]

Для выявления генов 1г нужно использовать простые антигены, например синтетические полимеры, имеющие лишь небольшое число различных антигенных детерминант. Поскольку природные белки-это сложные антигены с весьма разнообразными антигенными детерминантами, очень мала вероятность того, что особь не сможет ответить ни на одну из них (и будет поэтому зачислена в неотвечающие ). [c.60]

Люминесцентно-иммунохимические методы дают возможность определять локализацию в клетках и изучать динамику образования антител. Так как получение люминесцентно-меченых антигенов трудно осуществимо (антигены принадлежат к разнообразным классам химических веществ), были предложены непрямые методы выявления антител [4, 15, 16]. Одним из таких методов является следующий. Препарат, содержащий искомое антитело, обрабатывается соответствующим немеченым антигеном после того как произойдет образование комплекса антитело — антиген, этот же препарат обрабатывается люминесцирующим антителом, специфичным по отношению к данному антигену. Образующийся при этом тройной комплекс легко выявляется благодаря интенсивной люминесценции. [c.317]

Области применения методики флуоресцентных антител крайне многочисленны, поэтому приводим лишь некоторые примеры а) локализация антигенов в тканях, в том числе выявление антигенов пневмококков, риккетсий и патогенных вирусов б) специфическое выявление микроорганизмов (серологическая идентификация) в) выявление специфических антител в тканях и жидкостях организма г) локализация гормонов в клетках разных органов и тонкая локализация. [c.292]

Структурные зонды для идентификации специфических особенностей на поверхности клеток Наборы реактивов ддя диагностики беременности Выявление эстрогенных рецепторов для диагностики некоторых форм рака молочной железы Точное определение количества специфических антигенов Очистка антигенов, например интерферона [c.18]

Тематика восемнадцати глав настоящего тома в известной мере отражает основные тенденции развития современной иммунологии. В семи главах в центре внимания находятся моноклональные антитела и антигены клеточной поверхности три главы посвящены использованию новейших достижений техники разделения биологических макромолекул и изучения поверхностных явлений в иммунологических взаимодействиях далее описаны новые, усовершенствованные варианты ряда известных экспериментальных подходов (методика гаптенизирова шых антител, выделение и клонирование Т-хелперов, определение хелперных факторов, обратный пассивный локальный гемолиз, метод лимитирующих разведений) в трех главах представлены новые методы клинической иммунологии (типирование HLA DR-антигенов, выявление антител к ДНК, оценка первичного иммунного ответа лимфоцитов человека in vitro). [c.5]

Была предпринята попытка разработать тест-систему и при использовании двух других латексных антигенов - акролеинового и белкового. В случае применения латекса на основе БСА агглютинация происходила лишь при больших концентрациях морфина 500 мкг/мл и данный метод нельзя рекомендовать для практической диагностики. Использование морфина, меченого акролеиновым латексом, позволило разработать метод с высокой чувствительностью выявления опиатов 100 нг/мл. Однако, результаты плохо воспроизводились из-за происходящей в ряде случаев спонтанной агглютинации. [c.203]

Определение константы связывания. Используют метод радиоиммунного анализа (РИА). Постановка метода сходна с постановкой ИФА (с. 320), с тем исключением, что вместо конъюгатов антител с ферментной меткой для выявления связывания антител с антигеном используют антимышиные антитела с радиоактивной меткой. В каждую лунку вносят по 50—100 мкл антимышиных антител (10—30 нг около 20 000 срт). Инкубируют при комнатной температуре около 2 ч. Затем микропланшеты тщательно отмывают (с. 321), разрезают и индивидуальные лунки просчитывают в Y-счетчике. [c.324]

Загадочная, но практически очень важная особенность иммунной системы состоит в том, что в организме могут образовываться антитела против собственных клеток, как это имеет место при аутоиммунных болезнях. К числу таких болезней относится, по-видимому, ревматоидный артрит при этом заболевании сыворотка крови и суставная жидкость содержат комплексы IgG с неизвестными антигенами, причем такие комплексы не встречаются у здоровых лиц. При тяжелом аутоиммунном заболевании, системной красной волчанке, иммунная система часто образует антитела против собственной ДНК больных. Эти антитела атакуют клетки различных тканей, например эритроциты. Хотя клетки иммунной системы обычно отделены от нервных клеток гематоэнцефа-литическим барьером, все же у мышей нетрудно вызвать аллергический энцефаломиелит, при котором антитела повреждают миелиновые оболочки (т. 1, стр. 354), Другим примером таких заболеваний, называемых болезнями иммунных комплексов, служит амилоидоз, характеризующийся отложением белково-углеводных комплексов во внеклеточном пространстве [196]. Было сделано важное наблюдение, что количество аутоантител и отложения амилоида с возрастом увеличиваются. Предполагается, что болезнь иммунных комплексов является основной причиной старения. Огромное значение для медицины имело выявление природы основного заболевания почек—первичного гломе-рулонефрита, который, как показали исследования, обусловлен перекрестной реакцией между мембраной стрептококка и базальными мембранами почечных клубочков. [c.366]

Рис. 1.21. Реакция агглютинации на стекле с диагностической сывороткой СВ И для выявления плазмид-ассоциированных антигенов вирулентных Yersinia entero oliti a

Выявление антигенов бореллий осуществляются с использованием иммуноферментного метода. Характерные нуклеотидные последовательности ДНК боррелий можно обнаружить с помощью ПЦР. [c.235]

Экспресс-методом диагностики хламидиозов можно считать обнаружение в клиническом материале (моча, отделяемое половых органов, материал соскобов) группового антигена возбудителя. Для выявления антигенов как элементарных, так и ретикулярных телец используют ИФА, но чаще — РИФ (прямой и непрямой варианты). На рис. 25 (цв. вклейка) представлены результаты прямой РИФ с исследуемым материалом. При использовании антител, меченных флюорохромом, свечение измеряют с помощью прибора — флюорометра. [c.246]

Серологическое исследование. РСК, РНГА ставят с парными сыворотками крови больных по обычной методике, используя стандартный орнитозный антиген (орнитин). Диагностическое значение имеет 4-кратное нарастание титра антител в парных сыворотках. Для выявления антител в сыворотке больного используется также непрямая РИФ и реакция микроиммунофлюоресценции. [c.249]

Выявление с помощыо прямой РИФ. Как и при ИЭМ, в данном случае происходит взаимодействие вирусных антигенов с АТ диагностической иммунной сыворотки или моноклональными антителами (см. подразд. 1.4.5). С помощью РИФ также удается обнаружить специфический вирусный антиген в культурах клеток, инфицированных вирусом. [c.267]

Встречный иммуноэлектрофорез. РВИЭФ в вирусологической диагностике широко применяется для обнаружения в сыворотках больных не антител, а поверхностных антигенов (например, HBsЛg у больных гепатитом В), а также для выявления других вирусных антигенов, имеющих отрицательный заряд. [c.278]

Экспресс-диагностика. Быстрое обнаружение вируса основано на прямом исследовании материала от больного и дает возможность установить ориентировочный диагноз заболевания, вызванного одним из вирусов оспенной группы. Для выявления вирионов используют электронную микроскопию, а антигенов вирусов — РИФ, РОПГА, РПГ, ИФА. [c.287]

Серологическое исследование. Серодиагностика позволяет поставить диагноз ретроспективно, на основании увеличения титра противооспенных антител в крови больных, выявленного с помощью РТГА, РСК, PH на куриных эмбрионах и в культурах клеток. Антигенами для серологических реакций служат 10%-е центрифугаты суспензии ХАО, зараженной вирусом вакцины. Результаты PH с сывороткой больного в культуре ткани учитывают по ЦПД и РГадс, а на куриных эмбрионах — по образованию оспин на ХАО и накоплению гемагглютининов в РГА. [c.289]

Серологическое исследование. Серодиагностика основана на изучении парных сывороток крови. При выборе антигена учитывают эпидемиологическую обстановку и клинические данные. Для выявления нарастания титра антител гемагглютинируюших арбовирусов используют РТГА, для всех остальных арбовирусов — РСК и PH. Трудность диагностики заключается в том, что циркуляция в очаге какого-либо вируса может сопровождаться выработкой групповых антител к антигенно-родственным вирусам. В таких случаях целесообразно применение РСК и PH, которые более специфичны, чем РТГА. Диагностическое значение имеет 4-кратное и более увеличение титра антител в одной из указанных реакций. Следует отметить, что комплементсвязываюш,ие антитела сохраняются непродолжительный период. [c.295]

Серологическое исследование. Для выявления антител к антигенам применяются РПГ, РВИЭФ. Наиболее чувствительными и специфичными являются РИА, ИФА, а также РНГА с использованием эритроцитов, нагруженных HBsAg. [c.304]

Высокоспецифичным для диагностики ВИЧ-инфекции является метод иммунноблотинга (см. подразд. 1.4.5). При этом проводится электрофоретическое разделение вирусных белков с последующим перенесением их на мембрану из нитроцеллюлозы. Затем мембрана обрабатывается исследуемой сывороткой. Заключительный этап исследования состоит в выявлении антител к различным белкам ВИЧ. Для этого в систему добавляют антивидовые меченые сыворотки. Индикацию образующихся иммунных комплексов проводят с использованием ИФА или РИА. Результаты иммуноблотинга считают положительными при обнаружении антител к определенным вирусным антигенам р24, рЪ1, а также к gpЛ или к gp]20. [c.308]

Серологическое исследование. Для выявления антител в сыворотке крови больных проводят РА, РСК и ИФА со споротрихоз-ными антигенами, а также реакцию агглютинации латекса. Хороший результат дают аллергические пробы со споротрихином. [c.335]

Серологическое исследование. Для серодиагностики амебиаза применяют РНГА (с антигеном из разрушенных ультразвуком Е. histolyti a), реакцию латексной агглютинации, РСК, РВИЭФ (как для обнаружения антител, так и для выявления специфического амебного антигена), ИФА и др. Наиболее эффективно применение серологических реакций для диагностики внекишечных форм амебиаза. При поражении печени исследуют ее пунктат, а также применяют рентгенологические и радиологические методы исследования. [c.368]

Серологическое исследование. Серологические методы имеют большое практическое значение для выявления инвазии на ранних этапах развития, до достижения гельминтом половой зрелости и начала откладывания яиц, а также при эпидемиологическом обследовании в эндемических очагах. Ограничение в использовании серологических реакций для диагностики гельминтозов связано со сложностью получения очищенных антигенов многих гельминтов. В большинстве случаев антигены, применяемые для серологической диагностики, представляют собой неочищенные и неохарактеризованные препараты (дезинтегрированные целые организмы или их экстракты), что обусловливает многочисленные перекрестные реакции. Эффективность серологической диагностики гельминтозов будет возрастать по мере совершенствования методов выделения и очистки соответствующих антигенов. [c.385]

Эмбриональные и другие ткани для репродукции вирусов и получения вирусных вакцин. Из эмбриональных тканей наиболее широко используемыми являются эмбриональные ткани цыпленка, мыши и человека. Особенной выгодой отличаются куриные эмбрионы (по доступности) десяти-двенадцатисуточного возраста, используемые преимущественно для репродукции вирусов и последующего изготовления вирусных вакцин. Куриные эмбрионы введены в вирусологическую практику в 1931 г. Г. М. Вудруфом и Е. У. Гудпасчером. Такие эмбрионы рекомендуют также для выявления, идентификации и определения инфицирующей дозы вирусов, для получения антигенных препаратов, применяемых в серологических реакциях. [c.544]

Всем Ф. присущи антигенные, иммуногенные и аллергенные свойства. Пороги аллергенного и токсического действия в хронических опытах для большинства Ф. практически совпадают. Ферментные препараты способны вызвать сенсибилизацию организма, приводящую к развитию аллергических заболеваний. Имеются указания на аллергические поражения кожных покровов при пользовании синтетическими моющими средствами, содержащими Ф. мезентерии, протомезентерин, протосубтилин. Уменьшение содержания энзимов в детергентах снижает заболеваемость дерматитами. Случаи дерматита и экзем описаны у рабочих мясокомбинатов, имеющих контакт с соками и промывными жидкостями ЖКТ, особенно при разделке и обработке поджелудочной железы. Дерматиты у этих лиц сопровождаются изъязвлениями ладоней и ногтевых фаланг, имеют тенденцию к рецидивам и переходу в экзему. Роль Ф. подтверждена резко положительными кожными тестами с 1% раствором пищеварительных энзимов. Специфическим фактором вредности в производстве Ф. помимо мелкодисперсной пыли готового продукта являются также микроорганизмы — продуценты энзимов, которые сами по себе и особенно в комбинации с Ф. обладают сильными аллергенными свойствами. У рабочих предприятий микробиологической промышленности, производящих Ф., во многих случаях встречаются аллергические риниты, дерматиты, астматические бронхиты. Изучение состояния здоровья рабочих основных профессий крупнотоннажного ферментного производства обнаружило у 70 % заболевания кожи, у 64,4 % — ЛОР-органов, у 59,4 % — нервной системы, у 50,5 % — внутренних органов, у 34,6 % — женских половых органов. Рентгенологические изменения легких выявлены у 63,5 % рабочих, нарушение функции внешнего дыхания с преимущественной обструкцией бронхов мелкого калибра — у 35 %. Среди патологии кожи наиболее часто наблюдались микозы (27,4 %), гнойничковые заболевания (14,3 %), аллергический дерматит (12 %) в структуре заболеваний ЛОР-органов — хронический субатрофический ринит (46,7 %), фарингит (41,3 %) и ларингит (26,2 %) хронический гастродуоденит отмечен у 35,4 %. Число хронических воспалительных заболеваний верхних дыхательных путей нарастало с увеличением стажа работы. Хронический бронхит при стаже работы до 1 г. выявлен у 4,8 % рабочих, при стаже до 5 лет — у 15,8 %, до 10 лет — у 18 %. [c.762]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология