Мечен не люминесцентное

Важнейшими физико-химическими методами анализа являются 1) хроматографический, 2) полярографический, 3) радиохимический (с применением меченых атомов), 4) спектрофотометрический, 5) люминесцентный. [c.274]

Например, если немеченая антисыворотка была получена путем иммунизации кроликов, то на втором этапе используют меченую антивидовую кроличью сыворотку, полученную путем иммунизации кроличьими гамма-глобулинами ослов или каких-либо других животных. При этом антиглобулиновые меченые АТ покрывают вторым слоем исследуемый АГ (первый слой — за счет немеченых АТ, которые, в свою очередь, служат АГ для анти-глобулиновой сыворотки). В результате этого АГ становится видимым в люминесцентном микроскопе (как и в прямом варианте РИФ). [c.75]

На новую высшую ступень люминесцентная цитохимия была поднята Кунсом с сотрудниками [4], разработавшими метод люминесцентно-меченых антител. В основном он заключается в следующем. В результате иммунизации животного соответствующим антигеном получают специфическую сыворотку белковые их фракции, в которых преимущественно сосредоточены специфические антитела, обрабатывают флуорохромом и получают комплекс флуорохром — антитело, используемый для обнаружения соответствующего антигена. Наличие и локализация последнего в микроскопическом препарате выявляется в результате реакции антиген — антитело. Продукт этой реакции ярко люминесцирует и с помощью люминесцентного микроскопа может быть открыт даже в отдельных участках клеток [18, 14]. [c.317]

Люминесцентно-иммунохимические методы дают возможность определять локализацию в клетках и изучать динамику образования антител. Так как получение люминесцентно-меченых антигенов трудно осуществимо (антигены принадлежат к разнообразным классам химических веществ), были предложены непрямые методы выявления антител [4, 15, 16]. Одним из таких методов является следующий. Препарат, содержащий искомое антитело, обрабатывается соответствующим немеченым антигеном после того как произойдет образование комплекса антитело — антиген, этот же препарат обрабатывается люминесцирующим антителом, специфичным по отношению к данному антигену. Образующийся при этом тройной комплекс легко выявляется благодаря интенсивной люминесценции. [c.317]

Соотношения типа (1Х.2) применяли в ряде работ [281, Высокомол. соед., 1977 287, 288] дня оценок локальной концентрации звеньев в меченых макромолекулах, содержащих звенья с люминесцентными метками и звенья с тушителем. Изучали зависимость локальной концентрации от качества растворителя, концентрации полимера и других параметров. При этом использовали известное уравнение Штерна—Фольмера [c.257]

Реакции с люминесцентно-меченым белком, в особенности специфическими белками — антителами, отличаясь высокой специфичностью, позволяют проводить тончайшие цито-иммунохимические исследования с точной локализацией биологически важных веществ и процессов. [c.317]

Физические методы основаны на зависимости между физическими свойствами вещества и его химическим составом. Из них наибольшее значение имеют оптические методы спектральный, люминесцентный и рефрактометрический. Широко применяют в агрохимических исследованиях метод меченых атомов (изотопных индикаторов). [c.403]

Для тех случаев, когда тип разрушения нельзя установить визуально, имеется несколько методов - изучения характера разрушения 1) определение коэффициента трения по жесткой поверхности субстрата и после отслоения от субстрата адгезива 2) изменение поляризации света, отраженного от поверхности металла до и после удаления адгезива 3) окрашивание поверхности целлофана фуксином 4) люминесцентный анализ 5) метод меченых атомов. [c.56]

В явлениях ПЛ люминесцентно-меченых полимеров, ЯМР и ЭПР спин-меченых полимеров могут, вообще говоря, проявляться различные формы и характеристики молекулярного движения - как вращательной, так и поступательной диффузии частиц. В ЯМР или ЭПР молекулярное движение модулирует магнитные ядерные, электронные или электронно-ядерные дипольные взаимодействия спинов, находящихся во внешнем магнитном поле. Иными словами, броуновское движение изменяет локальные магнитные поля, в которых находятся электронные [c.170]

В настоящее время люминесцентная микроскопия находит все более широкое применение в различных областях научной и практической работы в вирусологии, микробиологии, гистологии (нормальной и иатологи-ческой), в физиологии, ботанике, онкологии, радиобиологии, а также нри проведении лабораторно-клинических анализов, в санитарных и судебно-медицинских исследованиях. Среди новых направлений большой интерес представляет предложенный в свое время Кунсом с сотрудниками [4] исключительно чувствительный люминесцентно-иммунохимический метод меченых антител. [c.310]

Физические методы анализа используют определенные зависимости между физическими свойствами вещества и его химическим составом. Из них наиболее важное значение имеют оптические методы спектральный, люминесцентный и рефрактометрический. Широко используется в агрохимических, биохимических и физиологических исследованиях метод меченых атомов (изотопных индикаторов). [c.7]

Физические методы анализа основаны на использовании таких физических свойств вещества как вязкость, плотность, радиоактивность и т. п. Из них большое значение приобрели сейчас метод меченых атомов (радио-акти-вационный метод), спектральный, люминесцентный и некоторые другие методы. [c.193]

Электрические методы обладают серьезными недостатками, поэтому они не получили распространения. Методы, основанные на явлении переноса вещества (метод меченых атомов, люминесцентных красок и т. п.) обладают специфическими особенностями и находятся в стадии усовершенствования. Их принципиальный недостаток заключается в невозможности определения площади контакта движущихся поверхностей. Методы определения площади контакта по сближению детально рассмотрены в работах [2, 23, 24]. В области трения полимеров они применяются редко. Наиболее распространены оптические методы исследования. [c.223]

С этой целью к песку наносов добавляется меченый песок, покрытый органическими люминофорами. Пробы, взятые с различных участков, позволяют судить о скорости и направлении перемещения песчаных наносов. Люминесцентный анализ при облучении пробы ультрафиолетовым светом позволяет обнаружить- присутствие меченого песка при разбавлении его естественным в отношении 1 10 000 000. Трудность состоит в получении долгоживущих под водой люминофоров. Тем не менее этот метод оправдал себя при его применении в гидрогеологических изысканиях и является по существу единственным эффективным способом решения данной задачи. [c.134]

Люминофоры — синтетические вещества, способные излучать холодный свет под воздействием солнечного света или одного из видов невидимого излучения. На их основе созданы экономичные источники света, по спектральному составу близкого к дневному. Без них нельзя изготовить рентгеновские и телевизионные экраны, физические приборы, в которых невидимые сигналы преобразуются в видимые. С помощью люминофоров автоматически контролируют дефекты деталей машин, бетонных блоков и кирпича тончайшие трещины ярко светятся в темноте под ультрафиолетовыми лучами. Меченные люминофорами частицы помогают проследить движение песка под водой, туманов и дымов в воздухе, течение подземных вод. По чувствительности и быстроте метод люминесцентных исследований в ряде случаев не имеет себе равных. [c.43]

Микроскопия. Из взятого материала готовят несколько мазков и фиксируют их в смеси Никифорова. Мазки окрашивают по Граму и параллельно — метиленовым синим по Леффлеру (см. цв. вклейку, рис. 1). С целью экспресс-диагностики мазки обрабатывают также меченой люминесцентной антисывороткой к Y. pestis (прямая РИФ). [c.172]

Для люминесцентной метки белков применяют флуорохромы изоцианат и изотиоцианат флуоресцеина, некоторые производные родамина, в том числе изоцианат тетраметилродамина, хлорид диметил-нафтил-ами-но-сульфокислоты и ядерный красный прочный. Наиболее широко используется изоцианат флуоресцеина. Его растворяют в смеси диоксана с ацетоном и в таком виде соединяют с белком (обычно глобулиновой фракцией в количестве 5 мг флуорохрома на 100 мг белка) при температуре О—5° С, перемешивая в течение 18 часов. Полученный коньюгат белка с флуоресцеином освобождают от несвязавшегося красителя сначала с помощью диализа против забуференного при рН=9,0 физиологического раствора. Дальнейшая очистка от избыточного красителя производится переосаж-дением белка сульфатом аммония (4—5 раз), пока надосадочная жидкость не перестает люминесцировать. Препараты (мазки, суспензии, замороженные срезы), как фиксированные ацетоном, так и нефиксированные, приводят в соприкосновение с люминесцентно-меченым белком в течение 30 минут, промывают в физиологическом растворе (рН=7ч-7,5) и заключают в забу-ференный глицерин. Исследовать такие препараты лучше при ультрафиолетовом возбуждении. Соответствующие антигены при этом люминесцируют очень ярко светло-зеленым светом. Этот метод позволяет определять внутриклеточную локализацию чужеродных полисахаридов и белков, ферментов и гормонов, устанавливать антигенное родство тканей и клеток, быстро идентифицировать под микроскопом бактерии й вирусы. [c.317]

Для определения концентрации веществ в большинстве иммунохимических методов к анализируемому раствору, содержащему определяемое соединение и его меченый аналог, добавляют реагент в количестве, намного меньшем необходимого по уравнению (7.12). Как немеченые, так и меченые соединения взаимодействуют с реагентом практически одана-ково, поэтому отношение их концентраций будет одним и тем же в растворе и в связанном состоянии. При этом возможность применения метода во многом определяется доступностью меченого антигена и соответствующих антител. Для введения метки используют различные реагенты радионуклиды, ферменты, красящие вещества, флуоресцентные и хеми-люминесцентные зонды, ионы металлов. До последнего времени в качестве маркеров антител применяли радиоактивные изотопы этот метод назьшается радиоиммунохимическим анализом (РИА). При этом степень [c.298]

ФОТОЛЮМИНЕСЦЕНЦИЯ — люминесценция, возникающая под действием световых квантов. Различают Ф. с коротким послесвечением — флуоресценцию, с длительным послесвечением — фосфоресценцию. Ф. применяется в люминесцентном освещении (лампы дневного света), изготовлении светящихся шкал (кристаллофосфоры), люминесцентном анализе (люминесцентные реактивы), микробиологии и медицине (люминесцентные индикаторы), машиностроении (дефектоскопия), в строительстье (меченые пески) и др. [c.268]

Для современной органической химии при решении структурных проблем все большее значение приобретают физические методы исследования. Теплоты сгорания, парахор, дипольные моменты, изучение кинетики, магнитная проницаемость, метод меченых атомов, константы хроматографии и электрофореза, скорость осаждения при центрифугировании, люминесцентный анализ, нефелометрия, по-ляриметрия, масс-спектроскопия, рентгеноструктурный анализ, но особенно, — спектроскопия в видимой, инфракрасной, ультрафиолетовой областях, изучение спектров электронного парамагнитного и ядернОго магнитного резонанса открыли необыкновенно широкие возможности для решения задач установления строения молекул. Физические исследования все чаще оказываются решающими для понимания структуры соединения. [c.19]

Очень перспективным методом исследования может при этом явиться электронный парамагнитный резонанс ЭПР. ЭПР-спектр иминоксильного радикала достаточно чувствителен к протонному окруженшо его и дает возможность регистрировать изменение этого окружения [3] Это свойство имяноксильной метки дает ей преимущество перед другими способами мечения стероидной молекулы — изотопным и люминесцентным. Необходимым условием подобного использования парамагнитных моделей биологически активных стероидов является расположение метни на таком расстоянии от активного центра лиганда, чтобы, с одной стороны, она не мешала взаимодействию этого центра с центром рецептора и, с другой стороны, чтобы Спектр радикала отражал происходящие в активном центре изменения. Желательным является также фнксированпость ориентации самого радикала, что снижает разброс значений, связанных с его вращением. [c.108]

Метка при этом должна содержаться в том компоненте, который образует комплекс с анализируемым веществом. Например, для анализа определенного антигена нужно располагать антителом, специфичным к этому антигену, ввести в него метку (радиоактивную, ферментную, люминесцентную и т.д.) и количественно перевести анализируемое вещество в комплекс. Для того чтобы достичь максимального уровня этого перехода, меченое антитело нужно брать в избытке. Но тогда нужно предусмотреть процедуру отдейения комплекса от избытка меченого антатела. Для этих целей используют иммобилизацию анализируемого компонента на твердой поверхности. В этом случае комплекс антиген — антитело остается на поверхности, тогда как избыток меченого антитела, не вошедший в состав комплекса, легко удаляется. [c.258]

Различают собственную (первичную) и наведенную (вторичную) флюоресценцию. При первичной флюоресценции исследуемый объект содержит вещества (витамины, пигменты и другие продукты обмена), способные флюоресцировать при освещении их ультрафиолетовыми лучами. Большая часть объектов микроскопии не обладает собственной флюоресценцией, поэтому при люминесцентной микроскопии их обрабатывают красителями (флюорохромами), способными флюоресцировать. В качестве флюорохромов используют аурамин (для микобактерий туберкулеза), акридиновый желтый (для гонококков), корифосфин (для коринебактерий дифтерии), флюоресцеинизотиоцианат, или ФИТЦ (для изготовления меченых антисывороток) и др. [c.10]

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ). РИФ основана на использовании флюоресцеинизотиоцианата (ФИТЦ) или других флюорохромов, химически связанных (конъюгированных) с АТ. При этом меченые АТ (в составе иммунофлюоресцирующих антисывороток) сохраняют иммунологическую специфичность и вступают во взаимодействие со строго определенными корпускулярными АГ. Комплексы АГ с мечеными АТ можно легко определять по интенсивному желто-зеленому свечению при изучении препарата в люминесцентном микроскопе. [c.75]

Для определения глубины проникновения чаще всего пользуются индикаторным методом . Суть его заключается в том, что из образца, определенное время экспонированного в испытуемой среде, делают тонкий срез в плоскости, совпадающей с направлением диффузии, и помещают этот срез в раствор подходящего индикатора. Через некоторое время в области, в которую проник электролит, индикатор изменяет цвет (проявление) и под микроскопом измеряют ширину этой области. Для некотор1.1х систем, например, поливинилхлорид — азотная кислота, за продвижением фронта диффузии удобно наблюдать в ультрафиолетовом свете, не прибегая к применению индикаторов. Для определения в непрозрачных материалах, например, резинах или наполненных пластмассах, используют специальные люминесцентные индикаторы или А1етоды, которые условно можно назвать методами отпечатка . Суть этих методов заключается в том, что срез прижимают к пластинке с индикаторным слоем, изменяющим оптическую характеристику под влиянием электролита. В случае использования меченых атомов — это метод авторадиографии. Следует подчеркнуть, что иногда обычным индикаторным методом пе удается обнаружить проникновение электролита в полимер, например соляной кислоты в полиэтилен НП. Это связано с тем, что нри проявлении электролит диффундирует из полимера быстрее, чем индикатор диффундирует в полимер. С помощью метода отпечатков диффузия хлористого водорода в полиэтилен НП легко наблюдается. [c.77]

Для научно-исследовательских и диагностических целей в вирусологии особый интерес представляют описанные нами выше методы с применением люминесцентно-меченых антител. Эти методы 120] уже позволили разрешить ряд сложных вопросов, касающихся внутриклеточной локализации и динамики развития вирусных скоплений в клетках. Они привели к разработке методов практического раснознавапия вирусных инфекций, в частности вируса гриппа [21], и исследования вируса полиомиелита [22]. [c.318]

В практической медицине исиользуют люминесцентно-микроскони-ческую диагностику бактериальных и вирусных инфекций. В этой области особенно ценны методы, основанные на применении люминесцентно-меченых антител. Эти же методы крайне полезны для изучения различного рода патологических состояний, связанных с образованием в организме вредных антигенов и токсинов [54, 55]. [c.320]

Диметиламйнобензилиден)-2-фенилоксазол-5-он нашел применение в люминесцентной дефектоскопии электровакуумных приборов, для получения люминесцентных меченых песков и других целей. [c.172]

Такую информацию получают, используя люминесцентный меченый песок. Его готовят, хорошо перемешивая суспензию люминофора в водном растворе агар-агара с обычным песком. После высыхания смеси на песчинках остается тонкая пЯенка, содержащая взвесь частиц люминофора. Меченый песок опускают в водоем и через некоторое время отбирают пробы грунта в разных местах водоема. По количеству меченых песчинок судят о направлении и интенсивности перемещения песчаных масс [2]. [c.299]

Применение. В электронной микроскопии в качестве пластификатора эпо- ксидных смол, применяемых для заливки объектов и в люминесцентио микроскопии в качестве иммерсионной жидкости. Недостатком препарата nq сравнению со специальными иммерсионными маслами для люминесцентной мик- роскопии является несколько худшая передача оранжевого и красного цвета. свечения из-за отсутствия удовлетворительной коррекции дисперсии. Однако для исследования препаратов с зеленым свечением, как это имеет место при ис- пользовании люминесцирующих сывороток, меченных флуоресцеином, димети- ловый эфир фталевой кислоты дает хороший результат [1]. [c.133]

Ф. находит применение в дюмпнесцентном освещении (лампы дневного света), изготовлении светящихся шкал (крпсталлофосфбры), люминесцентном анализе (люминесцентные реагенты), микробиолопш и медицине (микробиологич. люминесцентные индикаторы), в машиностроении (люминесцентная дефектоскопия), в строительстве (люминесцирующие меченые пески) и др. [c.271]

Многие из люмогенов являются ценными реактивами в химич. люминесцентном анализе. С помош,ью люмогенов изготовляют люминесцентные меченые пески для наблюдения стихийного неремеш,ения песка или грунта под водой пли на суше и т. д. Органич. люминесцентные вещества, нанр. антрацен, стиль-бен, нафталин с примесью антрацена и т. д., применяют в виде монокристаллов или в растворах как сцинтиллятор для регистрации ядерных излучений. [c.380]

В ПЛ, ЯМР и ЭПР мы наблюдаем либо квадратичные гармоники отдельных спин- или люминесцентно-меченых звеньев цепи (ЭПР и ПЛ), либо, 1екогерентную сумму вкладов от разных звеньев цепи (точнее, от межъядерных векторов различных звеньев цепи) в ЯМР. Иными словами, мы получаем непосредственную информацию о собственном движении данного звена, которая, конечно, отражает и движение увлекаемых ею хвостов цепи. [c.171]

Многочисленные экспериментальные данные, полученные в самое последнее время различными методами — от смачивания и применения меченых атомов до люминесцентного анализа, ультразвукового резонанса, лазерной голографии и рентгенофотоэлектронной спектроскопии, свидетельствуют о том, что разрушение адгезионных соединений, отвечающих трем названным условиям, закономерно носит когезионный характер (большое чис- [c.19]

Заметим, что тех данных, которые приведены на рис. 24.19, недостаточно для того, чтобы мы могли однозначно установить геометрию взаимного расположения меченых участков молекулы. Всего в суммарной молекуле тРНК получилось, таким образом, шесть точек, к которым были присоединены молекулы красителей 3 - и 5 -концы, 4-тиоуридин и основания соответственно в антикодоновой петле, петле с последовательностью СТ С и дигидроуридиловой петле. Измерения количества энергии, переданной от одной точки молекулы к другой, могут дать лишь расстояния, которые являются скалярной величиной, а не вектором. Для того чтобы определить взаимное расположение N точек в пространстве, в общем случае требуется определить 4N — 10 расстояний между этими точками (для/У 4). При наличии шести точек в тРНК с люминесцентными метками, ковалентно присоединенными к молекуле, это означает, что необходимо измерить 14 из 15 возможных расстояний между этими точками, чтобы определить их расположение в пространстве. Пять расстояний — это слишком мало. Даже если мы измерим все 14 расстояний, фигура все равно будет не определена относительно преобразования зеркального отражения. Расстояния, поскольку они являются скалярами, инвариантны по отношению к этому преобразованию, чего нельзя сказать о геометрической фигуре, которая, вообще говоря, асимметрична. Однако в совокупности с другой имеющейся в нашем распоряжении информацией о структуре молекул тРНК даже несколько цифр, полученных для внутримолекулярных расстояний описанным выше способом, оказываются весьма полезны и сушественно уменьшают число возможных третичных структур, заслуживающих того, чтобы ими занимались в дальнейшем. [c.428]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология