Элюирование и регенерация

СТАДИЯ ЭЛЮИРОВАНИЯ (РЕГЕНЕРАЦИИ) [c.107]

Процесс элюирования характеризуют интегральные кривые элюирования (регенерации), выражающие зависимость степени элюирования (в %) от времени или от объема элюата (ср. рис. 5. 17). Иногда более полезными оказываются дифференциальные кривые элюирования. Эти кривые, для простоты называемые кривыми элюирования, выражают зависимость концентрации элюата Сэл от его объема Два типичных примера приведены на [c.107]

Стадия элюирования [регенерации] 111 [c.111]

Стадия элюирования (регенерации) [c.168]

Для элюирования (регенерации) поглощенных аминокислот из катионитов используется 1 н. раствор соляной кислоты для элюирования из слабоосновных анионитов — 0,1 и. раствор уксусной кислоты для элюирования из сильноосновных анионитов— буферный раствор с pH =4,0 (0,1 и. раствор ацетата патрия + уксусная кислота). [c.191]

Простота регенерации методом элюирования с помощью некоторых полярных органических растворителей типа метанола, ацетона и других низкомолекулярных спиртов и кетонов, причем регенерацию можно проводить непосредственно в адсорбере. При этом, во-первых, отпадает необходимость в дорогостоящем оборудовании для регенерации во-вторых, практически исключаются потери сорбента при регенерации в-третьих, снижаются эксплуатационные затраты, особенно при относительно высоких концентрациях органических загрязнений в сточных водах. [c.96]

Следует также отметить, что при работе в обращенно-фазном режиме с системой метанол — вода, вязкость которой не аддитивна, а меняется от 1 до 1,5 и затем до 0,6 Мпа с при переходе от 100% воды к 100% метанола, колонка находится в неблагоприятных условиях, так как при постоянном расходе давление на колонку сначала возрастает в 1,5 раза, а затем падает в 2 раза к концу градиентного элюирования. Картина повторяется в процессе регенерации колонки, при возврате к слабому растворителю. Это сокращает срок службы колонки и затрудняет работу с колонками, содержащими мелкий сорбент (менее 5 мкм). [c.68]

Адсорбционные материалы после проведения хроматографии и элюирования полностью дезактивируются, так как их поверхность оказывается занятой молекулами элюента или невымытых компонентов смеси. Для того чтобы адсорбент можно было снова использовать, все вещества должны быть с него удалены и его следует снова активировать. При этом необходимо учитывать, что большинство обычных адсорбентов регенерировать невыгодно, так как промывание их органическими растворителями и другие операции, связанные с регенерацией, обходятся дороже, чем новый адсорбент. Кроме того, всегда существует опасность неполного удаления загрязнений с регенерированного адсорбента. [c.350]

УФ-детектирование в случае использования элюентов с хорошим пропусканием не позволяет установить действительное уравновешивание колонки. Рефрактометрические детекторы намного более чувствительны к небольшому дрейфу в составе растворителя и поэтому могут дать лучшую информацию о состоянии разделительной системы в процессе уравновешивания колонки. Сигнал рефрактометрического детектора может быть обусловлен не только элюированием образцов, но и также изменением состава в распределительной системе жидкость — жидкость (ср. разд. 1.4.4.2), происходящим в результате элюирования образца. В таких случаях рекомендуется собирать весь элюат во фракции нужного размера. Соответствующие фракции могут быть объединены после дальнейшего анализа методом офф-лайн (вне потока) ьа присутствие компонентов образца. Фракции, содержащие только растворитель, могут быть отброшены или подвергнуты соответствующей регенерации. [c.100]

Устройство приборов для хроматографии и осуществление самого эксперимента сравнительно просты. Выбрав подходящую систему ионного обмена и проведя рекомендованную обработку (регенерацию) ионообменника, при идентичных условиях элюирования (скорость потока, температура и т. д.) можно получать хорошо воспроизводимые хроматограммы. Благодаря этому фракционирование белков с помощью ионообменной хроматографии имеет широкое распространение. [c.23]

Вода является базовым растворителем в обращенно-фазовой и ионообменной хроматографии. Обычная дистиллированная вода после надлежащего фильтрования может быть использована преимущественно в тех работах, где не требуется достижения максимальной чувствительности. Она может оказаться недостаточно очищенной для более тонких работ, в особенности с применением градиентного элюирования. В последнем случае имеющиеся в ней примеси могут при регенерации колонки накапливаться в ней, а при повышении в ходе разделения элюирующей силы выходить из колонки в виде ложных пиков. Поэтому желательна помимо дистилляции дополнительная очистка воды в специальных фильтрующих системах (например, фирмы Милли-пор ), удаляющая Остаточные ионы и органические примеси. [c.295]

Под элюированием понимается промывка смолы, обеспечивающая перевод сорбированных ионов в раствор. Когда разделение ионов осуществляется на стадии поглощения (например, при разделении анионов и катионов), смысл элюирования состоит в регенерации смолы, т. е. в вытеснении сорбированных ионов и "переводе в исходное состояние. В этом случае для элюирования применяют раствор, содержащий тот же ион, который был адсорбирован на смоле до обмена. [c.158]

В вытеснительной хроматографии некоторое количество более или менее разбавленной пробы вводится в колонку и поток газа-носителя немедленно заменяется потоком смеси этого газа и пара, который взаимодействует с неподвижной фазой более сильно, чем любой компонент смеси. Этот пар вытесняет пробу впереди себя, и каждый компонент этой пробы вытесняет компоненты, которые взаимодействуют менее сильно с неподвижной фазой, чем он сам. На выходе из колонки происходит последовательное элюирование зон компонентов смеси. Эти зоны следуют близко друг за другом, и соседние зоны несколько перекрываются. Для правильного проведения вытеснения требуется относительно большая концентрация пробы. По этим причинам данный метод больше подходит для препаративных, чем для аналитических, применений. Кроме того, прежде, чем может быть проведен второй цикл разделения, требуется регенерация колонки с удалением вытеснителя. Это может занимать значительное время. [c.16]

При дальнейшем рассмотрении под сорбционным процессом или установкой подразумевается цепочка — собственно сорбция, т. е. извлечение целевого компонента из раствора или его очистка от примесей промывка сорбента от загрязнений его регенерация, или элюирование целевого продукта последующая отмывка сорбента от регенерационного раствора. [c.88]

ЭТОМ оказалось, что оптимальная скорость элюирования основных аминокислот достигается лишь при использовании более концентрированных буферных растворов. Однако при значительном изменении концентрации и pH буфера наблюдалось увеличение объема набухшего ионита и возрастание гидродинамического сопротивления колонки. Одновременно повышался уровень базовой линии. Кроме того, в этих условиях после каждого опыта приходилось извлекать иониты из колонки, а затем, после их регенерации, вновь набивать колонку. В итоге оказалось удобнее проводить анализ образца на двух колонках. На первой осуществляли анализ кислых и нейтральных аминокислот, а сумму основных аминокислот вытесняли в конце анализа гидроокисью натрия. На второй, более короткой колонке вначале в виде суммарного пика элюировали смесь кислых и нейтральных аминокислот, а затем осуществляли разделение основных аминокислот. После получения более качественных ионитов и усовершенствования метода детектирования был разработан современный одноколоночный аминокислотный анализ. [c.306]

При наличии некоторых других анионов последние также адсорбируются в большей или меньшей степени к таким анионам относятся ванадий, молибден, анионный комплекс сульфата окисного железа, хлорат, кобальтицианид и политионаты. Некоторые из этих анионов удаляются вместе с ураном во время последующих операций по элюированию (регенерации) и вызы вают лишь незначительное уменьшение емкости ионита по отношению к урану, однако имеются и такие анионы, которые являются серьезными ядами для ионообменной смолы. Эти яды, как например политионаты, кобальтоцианиды и молибден, не могут быть полностью удалены при помощи обычного элюирования и постепенно накапливаются, что приводит к большим потерям емкости и к уменьшению скорости реакции ионного обмена. [c.314]

Фракционирование белков сыворотки крови на КМ-целлюлозе осуществляют с помощью ступенчатого элюирования, подавая на колонку последовательно следующие растворы 0,02 М натрий-ацетатный буфер, pH 4,6 ( стартовый буфер), затем 0,05 М натрий-ацетатный буфер, pH 5,2 0,08 М натрий-ацетатный буфер, pH 6,0 0,1 М фосфатный буфер, pH 7,0 и, наконец, 0,1 М фосфатный буфер, содержащий 0,5 М Na l, pH 8,3. Каждый новый раствор подают на колонку только после того, как полностью элюируется пик, вымываемый предыдущим раствором. Скорость тока приблизительно составляет 50 мл/ч. Элюат собирают порциями по 2—3 мл. Обработку результатов см. на с. 108. Идентификацию белков осуществляют методом электрофореза на бумаге или в полиакриламидном геле (с. 112). Регенерацию КМ-целлюлозы проводят вне колонки. [c.113]

Для создания определенного pH и поддержания на необходимом уровне готовят соответствующий буферный раствор. Если это возможно, то буферный раствор подбирают таким образом, чтобы его функциональная группа была похожа на функциональную группу образца. Так, ацетатный буферный раствор приемлем для анализа карбоновых кислот, фосфатный — для люирования нуклеотидов. Большое значение имеет чистота буферного раствора, так как он не должен детектироваться выбранным детектором, что особенно важно при работе в режиме градиентного элюирования. Чистота буферного раствора зависит от фирм-производителей, и даже разные партии одной фирмы могут различаться по составу. Каждая новая партия буферного раствора тестируется двумя холостыми хроматографическими опытами перед использованием. Второй опыт показывает, существуют ли вещества, отложившиеся в колонке в процессе регенерации или в течение последних стадий предыдущего градиента. Хотя большинство разделений проводят в водных буферных растворах, иногда добавляют органический растворитель (метанол, этанол) в количестве 3-10% для повышения селективности и улучшения растворимости образца. При этом концентрация растворителя не должна быть велика, чтобы не выдать осаждения буферной соли, о чем будет свидетельствовать появление течи в системе и увеличение сопротивления в колонке. [c.38]

Общая схема ионообменного процесса в колонках включает стадии сорбции, промывание соответствующим растворителем или раствором (чаще всего водой), регенерацию (элюирование сорбированных ионов). Эти операции подробно описаны в т. ПВ omprehensive Analyti al hemistry (p. p. 230 — 236). Представляют интерес особые случаи применения этих операций в аналитической химии. [c.40]

ИЗОКРАТИЧЕСКИМ ЭЛЮИРОВАНИЕМ называется использование элюента постоянного состава в течение всего анализа. Почти все (кроме хроматограмм, в условиях которых есть термин "градиент") приведенные в монографии хроматограммы получены именно в этом режиме. Достоинством такого элюирования является техническая простота исполнения и высокая воспроизводимость времен удерживания, площадей и высот пиков. Для хроматографии на силикагельных колонках такой вид элюирования является единственно возможным из-за сложности регенерации колонки. [c.59]

В связи со сравнительно простой регенерацией, для проведения градиентного элюирования используются колонки, заполненные обращенно-фазовым адсорбентом. В этом случае увеличение элюирующей силы происходит за счет увеличения концентрации метанола или ацетонитрилз в элюенте в процессе одного анализа. Градиентное элюирование полезно в том случае, когда при использовании изократического элюирования невозможно добиться разделения всех компонентов, сильно различающихся по временам удерживания (рис. 5.9 и 5.10). [c.59]

Для проведения анализа используются хроматографические колонки 120x2, заполненные Диасорбом С16 Т (16% углерода) или аналогичным по свойствам адсорбентом. Анализ проводится в режиме градиентного элюирования. Ступени элюента ацетонитрил -вода состава 60 40 (ступень А), 70 30 (ступень Б), 80 20 (ступень В), 90 10 (ступень Г). Программа ступенчатого градиента А Б В Г -1200 400 700 300. Для регенерации колонки используются 400 мкл ступени А. В случае УФ-детекции определение осуществляется на длинах волн 284, 296 нм. В случае флуориметрической детекции длина волны возбуждения - 282 нм, эмиссионный фильтр - от 360 нм. [c.102]

В ионообменных процессах промывка является обязательной операцией. Ее используют для выделения из смолы механически захваченных или сорбированных примесей из основного раствора или пульпы после сорбции. Полученный нри этом промывной раствор обычно возвращают на сорбцию. Отрегене-рированный сорбент практически всегда отмывают от остатков регенерационного раствора. Полученный промывной раствор доукрепляют и используют для регенерации. Применяют также промывку сорбента между промежуточными операциями десорбции и элюирования отдельных компонентов. [c.132]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология