Хроматография тонкослойная на пластинках с двумя

Прямое соединение методов ГХ и ТСХ осуществляется очень просто и не требует особых затрат. Практически каждый газовый хроматограф можно модифицировать для сочетания с хроматографией в тонком слое. В принципе возможны два варианта такой комбинации. В первом из них тонкослойная пластинка служит только в качестве детектора (статический вариант). Во втором варианте эффективно используется разделительная способность обоих хроматографических методов (динамический вариант). [c.143]

Тонкослойная хроматография. Тонкослойная хроматография применяется при разделении очень малых количеств веществ на небольшом слое адсорбента за короткое время. Существуют два способа приготовления тонкого слоя сорбента — в закрепленном и незакрепленном слое. В качестве сорбента для приготовления закрепленных слоев применяют оксид магния, оксид алюминия, оксид кальция, карбонат магния, силикагель в смеси со связывающими компонентами. Связывающими веществами могут служить сульфат кальция, рисовый крахмал и вода. При приготовлении хроматографической пластинки с закрепленным слоем адсорбента на стеклянную пластинку (9 X 12 см, 13 X 7 см) наносят в виде кашицы смесь адсорбента со связующим веществом (5% от массы адсорбента) и водой. С помощью специального валика равномерно раскатывают эту смесь и делают слой толщиной 2 мм, затем пластинку высушивают при ПО—120°С. После этого на пластинке не должно быть трещин. При работе на тонком, незакрепленном слое можно использовать различные адсорбенты (наибольшее значение имеет оксид алюминия и силикагель). Для приготовления тонкого, незакрепленного слоя можно воспользоваться такими же стеклянными пластинками, как это описано выше. На пластинку насыпают слой сорбента, равномерно раскатывают его валиком, слегка прижимая к стеклу, снимая при этом избыток. Валик можно сделать из стеклянной палочки диаметром 8—10 мм и длиной несколько большей, чем ширина пластинки. На концы палочки надевают резиновые трубочки (длиной 1 см). Толщину их стенок подбирают так, чтобы при накатывании адсорбента образовывался слой до 1 мм. Трубочки должны находиться на таком расстоянии, чтобы после проведения валиком по пластинке оставались свободные от адсорбента полосы. Можно валик сделать металлический, причем он должен накладываться на пластинку для закрепления ее во время нанесения адсорбента удобно пользоваться специальным приспособлением (рис. 20). [c.27]

В тонкослойной хроматографии используется два типа слоев, получивших название незакрепленный и закрепленный, которые наносятся на стеклянную пластинку или какую-либо другую подложку. [c.46]

Посторонние примеси. Проводят испытание, как описано в разделе Тонкослойная хроматография (т. 1, с. 92), используя в качестве адсорбента силикагель Р2, а в качестве подвижной фазы смесь 4 объемов 1-бутанола Р, 3 объемов хлороформа Р и 1 объема аммиака ( 260 г/л) ИР. Готовят два раствора в смеси 6 объемов хлороформа Р и 4 объемов метанола Р, содержащие (А) 20 мг испытуемого вещества в 1 мл и (Б) 0,20 мг испытуемого вещества в 1 мл. Наносят отдельно на пластинку 10 мкл раствора А и 5 мкл раствора Б. Вынимают пластинку из хроматографической камеры, дают ей высохнуть на воздухе и оценивают хроматограмму в ультрафиолетовом свете (254 нм). Любое пятно, полученное с раствором А, кроме основного пят- [c.90]

Заметим, что соединения отличаются числом эфирных связей (от О до 3 сверху вниз в каждой вертикальной колонке) и числом двойных связей (от 3 до О слева направо в каждом горизонтальном ряду). Тонкослойное хроматографическое разделение, основанное на числе эфирных связей, т. е. на полярности растворенного вещества, достигается хроматографией на силикагеле с элюентом, выбранным таким образом, чтобы наименее полярное вещество имело / 0,8. Для случая, изображенного на рис. 17-8, подвижной фазой служил 10%-ный (по объему) раствор диэтилового эфира в петролейном эфире (последний не является на самом деле эфиром его называют так только в связи с его большой летучестью, он представляет собой смесь легких углеводородов). Разделение по числу двойных связей проведено на силикагеле, пропитанном приблизительно 5% (по массе) нитрата серебра, а растворитель используют тот же, что и раньше. В этом случае два способа разделения были оригинально скомбинированы. При нанесении тонких слоев конструкцию наносящего устройства изменили таким образом, чтобы можно было одновременно наносить два рядом расположенных тонких слоя, один из которых содержал нитрат серебра, а второй нет. Как показано на рис. 17-8, первое хроматографическое разделение проводили элюированием пробы вверх на части пластинки, покрытой силикагелем. Второе же разделение в направлении, перпендикулярном первому, приводило к быстрому движению зон растворенных веществ на часть пластинки, содержащую нитрат серебра. Таким образом было легко достигнуто, как это показано, разделение соединений с разным числом двойных связей. Относительное положение зон растворенных веществ на пластинке соответствует расположению структур, показанному выше. Наименее полярные соединения (не имеющие эфирных связей) мигрируют быстрее всех на первой ступени проявления, а соединения, не имеющие двойных связей, мигрируют быстрее всего на второй ступени проявления. Для обнаружения зон пластинку опрыскивали 70%-ной серной кислотой, насыщенной бихроматом калия, и нагревали при 200 °С. [c.565]

В ЖЖХ и гжх распределение индивидуального компонента между двумя фазами характеризуется изотермой распределения так же, как и в экстракции. В случае ГЖХ подвижной фазой является газ, а неподвижная фаза представляет собой жидкость, нанесенную на твердый носитель. В ЖЖХ обеими фазами -служат жидкости. Носитель для неподвижной фазы подбирается в соответствии с полярностью этой фазы, однако он должен быть инертным по отнощению к разделяемым компонентам. В обычном варианте ЖЖХ неподвижная фаза является более полярной, чем подвижная фаза, поэтому носитель также должен иметь полярный (гидрофильный) характер было найдено, что для больщинства целей пригодны фильтровальная бумага, целлюлоза или силикагель. Последние два из этих носителей могут быть использованы в виде тонких слоев на пластинках (тонкослойная хроматография. [c.234]

Достоинства указанного метода этим не исчерпываются. Имеются еще по крайней мере два существенных преимущества тонкослойной хроматографии — удивительная простота техники эксперимента, доступная даже для малоподготовленного исследователя, и высокая чувствительность при детектировании вещества на пластинке вследствие сохранения значительной концентрации вещества в центре пятна. Это позволяет в ряде случаев разделять вещества в количествах, не превышающих сотых долей микрограмма. [c.197]

Различают два варианта тонкослойной хроматографии на незакрепленном и на закрепленном слое сорбента. В первом варианте сорбент (окись алюминия, силикагель и др.) насыпают на небольшую стеклянную пластинку и [c.38]

К 1987 году еще не было издано такого широко доступного руководства по тонкослойной хроматографии, которое информировало бы читателя (владеющего лишь английским языком) о реальной роли насыщения" тонкослойных пластинок о том, что множество камер может быгь подразделено иа два основных типа, и чем эти типы различаются о причинах образования нескольких фронтов растворителя (и о влиянии таких фронтов на результаты разделения) о воздействии влаги, попадающей из атмосферы о целесообразности пользования (в конкретных случаях) предварительным насыщением слоя об удобных способах регулирования воздействующих факторов и улучшения воспроизводимости о том, в каком диапазоне значений разделение оказывается невозможным по чисто физическим причинам о воздействии "селективности", качества слоя и величин Rr на получаемые результаты о влиянии других важнейших факторов (о которых специалисты, занимающиеся тонкослойной хроматографией, должны быть уведомлены [c.20]

Ацилпроизводные линкомицина разделены на тонкослойных пластинках и с помощью газовой хроматографии на колонке, содержащей 3% 0V-1 на газохроме Q [228]. С целью различить митрамицины А, В и С использован ряд ТСХ-систем [299—231], а также метод ВЭЖХ, который пригоден и для препаративного выделения этих антибиотиков [232]. Из смеси недавно обнаруженных веществ с антибактериальной активностью, продуцируемых микроорганизмом My oplasma типа RP III, с помощью бумажной хроматографии, ТСХ и электрофореза выделены два антибиотика [233, 234]. [c.154]

Посторонние примеси. Проводят определение, как описано в разделе Тонкослойная хроматография (т. 1, с. 92), используя в качестве адсорбента силикагель Р4, а в качестве подвижной фазы смесь 5 объемов 1-бутанола Р, 4 объемов воды и 1 объема уксусной кислоты ( 300 г/л) ИР. Наносят отдельно на пластинку по 5 мкл каждого из трех растворов в метаноле Р, содержащих (А) 40 мг испытуемого вещества в 1 мл, (Б) 0,40 мг испытуемого вещества в 1 мл и (В) 0,40 мг бефения оксинафтоата СО в 1 мл. Вынимают пластинку из хроматографической камеры, дают ей высохнуть на воздухе и оценивают хроматограмму в ультрафиолетовом свете (254 и 365 нм). При 254 нм видны два основных пятна на хроматограммах растворов А, Б и В, в то время как при 365 нм флуоресцируют только пятна, близкие к фронту растворителя. Любое дополнительное пятно, видимое на хроматограмме, полученной с раствором А, кроме двух основных пятен, не должно быть более интенсивным при рассмотрении при двух длинах волн, чем пятно, расположенное ближе к стартовой линии при хроматографировании раствора Б. [c.56]

A. Проводят испытание, как описано в разделе Тонкослойная хроматография (т. 1, с. 92), используя в качестве сорбента силикагель Р1, а в качестве подвижной фазы — свежеприготовленную смесь 3 объемов 1-бутанола Р, 1 объема уксусного ангидрида Р и 1 объема воды. Наносят на пластинку отдельно по 2 мкл каждого из 4 растворов в метаноле Р, содержащих (А) 2,5 мг испытуемого вещества в 1 мл, (Б) 2,5 мг х1,ексаметазона натрия фосфата СО в 1 мл, (В) с.месь равных объемов растворов А л Б и (Г) смесь равных объемов раствора. А и раствора 2,5 мг преднизолона натрия фосфата СО в 1 мл. метанола Р. После извлечения пластинки из хроматографической камеры дают ей высохнуть на воздухе до испарения раствор нтеле.ч, сбрызгивают ее смесью 10 мл серной кислоты ( 1760 г/л) ИР и 90 мл этанола ( 750 г/л) ИР, нагревают 10 мин при 120°С, дают остыть и оценивают хроматограмму в ультрафиолетовом свете (365 нм). Основное пятно, которое дает раствор А, соответствует по положению, внешнему виду и интенсивности пятну, которое дает раствор Б. Основное пятно, которое дает раствор В, выглядит единым компактны.м пятно.м, в то время как хроматограмма раствора Г представляет собой два близко расположенных пятна. [c.103]

Почти все 2-тио-З-фенилгидантоины можно разделить, используя двумерную тонкослойную хроматографию на силикагеле. Используют две системы растворителей хлороформ — этанол (98 2, по объему) и хлороформ — этанол — метанол (88,2 1,8 10, по объему). Если силикагель содержит флуорофор, можно наблюдать зоны в УФ-свете (254 нм). Альтернативно, пластинки можно опрыскать раствором нингидрина или раствором иод-азида. Тонкослойная хроматография — дешевый метод, однако ему присущи два недостатка малая чувствительность и невозможность количественной оценки. Эти недостатки устраняются использованием для ступенчатой деградации фенил [ 5] изотиоцианата. В этом случае обнаружение проводят либо авторадиографически, либо одним из выше- [c.270]

Элюирование при изменении уровня погружения пластинки в растворитель Как показывает уравнение (54), наибольщей разрещающей способности для почти одинаково удерживаемых веществ в обычном варианте тонкослойной хроматографии можно достигнуть, когда величина Кг низка, но высока используемая доля К числа тарелок N. Эти два условия, по существу, оказываются несовместимыми, поскольку (при конкретном качестве слоя) величина N велика, когда значение Кг близко к единице. Используемая доля числа тарелок, насчитываемого на всю длину пластинки, составляет лишь [c.251]

Гель-фильтрация на пластинках не требует какого-либо дорогостоящего оборудования. Правда, в этом случае не пригодна и обычная аппаратура для тонкослойной хроматографии. Простая легко изготовляемая модель, напоминающая прибор, описанный Детерманом [10], приведена на рис. 1. По краям вдоль пластинки закреплены два пластиковых стержня (толщина 0,5 см), на которых фиксируется стеклянная покровная пластинка. [c.258]

Проявление тонкослойных или бумажных хроматограмм может осуществляться путем восходящего, нисходящего, горизонтального или радиального движения растворителя. При восходящей хроматографии ослол непия, связанные с образованием каналов при движении растворителя, сводятся к минимуму. При непрерывном проявлении растворитель продвигается до конца бумаги или тонкого слоя в одном опыте. При многократном проявлении после того, как фронт растворителя достигает края листа, растворителю дают испариться и повторяют проявление при том же направлении движения растворителя. Ступенчатое проявление включает проявление на пластинке в неполярном растворителе, испарение растворителя и второе проявление в более полярном растворителе. При двухмерном проявлении также последовательно применяют два растворителя сначала проводят хроматографирование в одном направлении, затем высушивают пластинку для испарения первого растворителя, поворачивают пластинку на 90° и проводят проявление вторым растворителем. При градиентном элюировании состав растворителя меняется в ходе проявления [94]. Эта методика, однако, сложна, в ней теряется простота тонкослойной или бумажной хроматографии. [c.553]

Для тонкослойной хроматографии используются два типа пластин с закрепленными и незакрепленными слоями. Пластины с закрепленными слоями приготовляются на стеклянных четырехугольных пластинках различного размера (можно использовать старые фотопластинки), на которые наносится слой пористого материала. Обращается внимание на необходимость тщательной очистки, а главное на обезжиривание поверхности стекла перед нанесением слоя, например промывая стекло раствором детергента, водой и водным 50%-м метанолом, подкисленным ПС1. Перед нанесением на пластинку закрепленных слоев силикагеля приготовляют так называемую адсорбционную массу. Ее консистенция зависит от соотношения воды силикагеля и парижского пластыря, а если в состав ее входит прокаленный гипс, то и от времени между приготовлением массы и ее нанесением на пластинку. Для получения одинаковых хроматографических пластинок, в особенности при использовании апликаторов, важно выдерживать постоянными оба фактора. Для нанесения закрепленных слоев на пластины используют несколько способов. [c.290]

После того как фронт растворителя прошел заданное расстояние, пластинку вынимают из хроматографической камеры, подсушивают и обрабатывают проявляющими растворами для обнаружения разделенных веществ. В настоящее время при определении остатков хлорорганических пестицидов методом тонкослойной хроматографии используют два способа проявления хроматограмм окрашивапие пятен хромогенным реактивом внесение хромогенного реактива в сорбент. [c.258]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология