Метод измерения интенсивности окраски пятна

Метод измерения интенсивности окраски пятна бумажных хроматограмм. Сущность метода состоит в том, что интенсивность окраски пятна в проявленной хроматограмме пропорциональна концентрации вещества в рас-створе, что может быть использовано в количественном анализе. Измерение интенсивности окраски проводят путем прямого фотометрирования интенсивности окраски всего пятна или только его максимально окрашенного участка с помощью специально приспособленного к из-мерению плотности окраски денситометра [96, 97]. [c.99]

Более точным является метод измерения интенсивности окраски пятна. Он основан на том, что концентрация вещества в пятне, а следовательно, и в исследуемом растворе, и интенсивность окраски пятна связаны между собой линейно. Поэтому, измеряя интенсивность окраски всего пятна или его максимальной плотности, можно судить о концентрации вещества в растворе. Количественный анализ проводят по предварительно полученному калибровочному графику. Измерения интенсивности окраски пятна производят при помощи специально приспособленного к измерению плотности окраски денситометра, работающего по принципу фотометрирования проходящего через хроматограмму светового потока [12, 13]. [c.265]

Метод измерения интенсивности окраски пятна [c.135]

Наиболее распространенный метод — метод измерения интенсивности окраски пятна. Для измерения интенсивности окраски пятна проводят фотометрирование непосредственно на бумаге с помощью специального прибора. Определенная оптическая плотность окраски указывает на концентрацию вещества в пятне. Для определения концентрации исследуемого раствора пользуются специальными стандартными кривыми. [c.91]

Более точным является метод измерения интенсивности окраски пятна, для чего проводят фотометрирование непосредственно на бумаге с помощью специального прибора. Найденную оптическую плотность сравнивают с оптической плотностью пятен стандартных растворов. [c.115]

Метод измерения интенсивности окраски является значительно более точным, нежели все предыдущие способы. Сущность метода состоит в том, что между концентрацией вещества в растворе и интенсивностью окраски пятна в проявленной хроматограмме имеется пропорциональная зависимость, которая может быть использована в количественном анализе. Измерение интенсивности окраски проводят путем прямого фотометрирования интенсивности окраски всего пятна или только его максимально окрашенного участка с помощью специально приспособленного к измерению плотности окраски денситометра. Этот метод впервые был использован в работах Блока и Булла [c.135]

Более точным является метод, основанный на применении градуировочного графика S —Ig , где S — площадь пятна, с — концентрация. В указанных координатах график линеен. Используется также измерение интенсивности окраски пятна, которая пропорциональна концентрации. Методами распределительной жидкостной хроматографии успешно анализируют смеси катионов в неорганическом качественном анализе, смеси аминокислот и других органических кислот, смеси красителей и т. д. [c.350]

Методы количественного хроматографического анализа на бумаге могут быть разделены на две группы методы, не требующие удаления определяемого вещества с бумаги, и методы основанные на вымывании разделенных веществ. В первом случае используют зависимость интенсивности окраски и величины площади пятна от количества вещества. Строят градуировочные графики по серии стандартных растворов с различным содержанием определяемого вещества. Однако площадь и интенсивность пятна может зависеть не только от концентрации, но и от размера капли, сорта бумаги, качества растворителя, температуры и других условий. Поэтому только при строгом соблюдении одинаковых условий разделения при градуировке и анализе можно получить правильные результаты. Более точные результаты получают при измерении интенсивного/ [c.207]

Для измерения интенсивности окраски можно применять фотоэлектрические колориметры 98]. Однако этот метод применяют в том случае, когда пятна имеют круглую или эллиптическую форму и не перекрываются. [c.100]

Количественное определение аминокислот путем измерения интенсивности окраски пятен на хроматограмме денситометром. После определения концентрации аминокислоты визуальным методом проводят ее определение путем измерения интенсивности окраски пятен, полученных при хроматографировании растворов известных концентраций и растворов, концентрации которых неизвестны, с помощью денситометра (стр. 99). Из хроматограммы вырезают полоску с пятнами определенной аминокислоты и проводят измерение интенсивности ее окраски по всей длине. С помощью планиметра определяют площадь пиков для известных и неизвестных концентраций выбранной аминокислоты и строят калибровочный график, по которому определяют неизвестную концентрацию иС следуемой аминокислоты. [c.117]

Сущность первой группы методов заключается в том, что пятна анализируемых веществ вырезают из хроматограммы и экстрагируют вещество из бумаги, а затем уже в экстракте определяют концентрацию его любым из доступных способов. Во второй группе методов концентрацию разделяемого вещества определяют по интенсивности окраски пятна. Это измерение проводят с помощью специальных фотометрических приборов — денситометров. Концентрация вещества в пятне (и в исследуемом растворе) и интенсивность окраски пятна связаны между собой линейно. [c.354]

Существуют и другие методы количественного определения веществ на бумажных хроматограммах способ визуального сравнения пятен, методы измерения площади или интенсивности окраски пятна, метод вымывания компонента из бумаги. [c.246]

Особенно подробно изложены в книге вопросы теории и техники двух основных методов количественного определения веществ в зонах метода, предусматривающего элюирование, и методов прямого (без > отделения сорбента-носителя) определения веществ в зонах хроматограмм. Последние методы более чувствительны, менее трудоемки и поэтому весьма перспективны при анализе микро- и субмикроколичеств смесей. Рассмотрены три главных способа количественного определения веществ непосредственно на хроматограммах визуальное сравнение интенсивности окраски зон, измерение площади пятна и денситометрия. [c.6]

В случае распределительной хроматографии на бумаге полученное пятно вырезают или исследуют непосредственно на бумаге, или элюируют из пятна анализируемое вещество и затем определяют его любым методом количественного анализа. Применяют также измерения диаметра пятен и их площади, ошибка составляет 2—5%. Для измерения концентрации определяемого вещества по интенсивности окраски пятен применяют фотоэлементы, денситометрию, люминесценцию, спектрофотометрию, фотографические методы и радиохроматографические методы с применением меченых атомов. В адсорбционной ионообменной хроматографии катионов и анионов на колонках окиси алюминия или [c.619]

Прямые определения на пластинке могут быть выполнены различными методами 1) полуколичественно путем визуального сравнения величины и интенсивности окраски получающихся пятен с размерами и окраской пятна, образующегося при хроматографировании известных количеств вещества 2) количественно по точно определенному размеру площади пятна 3) фотометрированием пятна (в некоторых случаях в УФ-свете) 4) измерением излучения радиоактивных веществ и т. д. [c.110]

Предложен метод [111] определения малых количеств мышьяка, основанный на выделении As на бумаге в форме окрашенного продукта реакции взаимодействия АзНз и HgBr2 с последующим спектрофотометрированием этого окрашенного пятна на спектрофотометре Бекмана со специальной приставкой для измерения диффузного отражения света. В 1962 г. появилась работа [112], в которой описано рентгенофлуоресцентное спектроскопическое определение следовых. количеств мышьяка. Этот метод является модифицированным методом Гутцейта и заключается в том, что анализируемый раствор пропускают через фильтровальную бумагу, пропитанную бромной ртутью и содержание мышьяка определяют не по интенсивности окраски пятна на бумаге, а рентгенофлуоресцентным методом. Нижний предел обнаружения равен [c.190]

Количественный анализ можно вести фотометрическим методом путем измерения интенсивности окраски пятен фотометром в отраженном свете. Полученные данные наносят на график и сравнивают с данными комбинированной кривой, построенной по стандартным препаратам [211]. Как и в бумажной хроматографии, определяют концентрацию веществ по площади пятна (полуколичественный метод, который может быть переведен в количественный при получении воспроизводимости окраски) и измерением интенсивности окраски рефлектометри-ческим методом [172]. [c.44]

Рис. 2 относится только к тиосульфату, тиомочевине и тиозинамину. Эти три вещества могут быть разделены за весьма короткое время (порядка 30 мин.) при помощи н-бутанола в качестве растворителя, хотя изображенная хроматограмма получена после 3-часового разделения. Рис. 2 позволяет сделать несколько интересных заключений. Во-первых, он показывает, что Rw данного вещества на одной и той же хроматограмме не зависит от концентрации. Во-вторых, он показывает, как и следовало ожидать, ЧТО интенсивность окраски пятна зависит от концентрации, т. е. хроматография может служить методом полуколичественного анализа. Наконец, зная концентрацию каждого вещества в исходной смеси, можно составить себе некоторое представление о минимальном количестве каждого сенсибилизатора, которое еще может быть обнаружено. Исходная смесь содержала эквимолекулярные количества трех сенсибилизаторов, а именно 0,33% тиосульфата (0,15% тиосульфат-иона), 0,1 % тиомочевины и 0,15% тиозинамина. Пятна лежат на пределе чувствительности для раствора, разбавленного в 20 раз. Следовательно, предельные концентрации, которые еще могут дать положительный результат на хроматограмме, составляют 0,008% для тиосульфата и тиозинамина и 0,005% для тиомочевины. Чтобы выразить эти концентрации в весовых единицах твердого вещества, необходимо знать объем капель, нанесенных на бумажную полосу. Измерением объема жидкости, израсходованной для нанесения большого числа капель равной площади, было найдено, что объем капли равен 1,3 v-л. Следовательно, минимальные весовые количества веществ, обнаруженные этим способом, равны 0,2 лгдля тиосульфата натрия, 0,07 для тиомочевины и 0,1 рг для тиозинамина. [c.124]

Измерение интенсивности окраски сахара или продуктов его распада непосредственно на хроматограмме производится методом денситометрии [10—16]. Ввиду того что сами сахара не окращены, их обрабатывают реактивом, вызывающим появление окращенного пятна на фоне слоя сорбента. Цвет последнего, как правило, не изменяется (белый). Если сорбент все-таки окрашивается, необходимо, чтобы окрашивание было равномерным и настолько отличалось от цвета пятен анализируемых вещств, чтобы при использовании подходящих фильтров сорбент можно было рассматривать как бесцветный фон. Пятна должны иметь четко очерченные границы и не должны выцветать. Даллас [3], а также Шеллард и Алам [4] подробно рассмотрели факторы, влияющие на точность и воспроизводимость результатов анализа. Кроме того, было проведено сравнение методов обугливания, используемых для денситометрического определения сахаров [17]. [c.47]

В бумажной распределительной хроматографии полученное пятно вырезают или исследуют непосредственно на бумаге, или элюируют из пятна анализируемое вещество и затем определяют его любым методом количественного анализа. Измеряют диаметр пятна и его площадь ошибка 2—5%. Для измерения концентрации определяемого вещества по интенсивности окраски пятен применяют денситометрию , люминесценцию, спектрофотометрию, фотографические методы и радиохроматографию (метод меченых атомов). В адсорбционной ионообменной хроматографии катионов и анионов на колонках окиси алюминия или желатины ширина гюлосы пропорциональна концентрации определяемого иона. Как показали работы О. Флуда, Ф. М. Шемякина, И. П. Харламова, В. Л. Золотавина и др., бумага, импрегнированная гидратированной окисью алюминия, позволяет разделять и количественно определять ионы. [c.516]

Прямое количественное обнаружение на хроматограмме можно проводить, измеряя площадь пятна или определяя интенсивность его окраски, но такое определение сопряжено со значительными экспериментальными погрешностями и поэтому пригодно только для ориентировочных измерений. Более точные методы определения содержания соединений непосредственно в слое требуют применения специальных приборов. Все методы этой группы основаны на принципах фотометрии, причем чаще всего применяют денситометрию, затем спектрофотомет-рию, флуориметрию и авторадиографию. Тем читателям, которых интересуют указанные методы обнаружения, следует обратиться к отличной обзорной статье Иорка и Крауса [24] или монографии Тачстона [67]. [c.121]

Методики, основанные на использовании хроматографических характерик, довольно многообразны. Количество вещества можно определить, например, методом шкалы, когда на одной и той же хроматограмме получают пятно раствора с неизвестной концентрацией и пятна нескольких стандартов. Концентрацию неизвестного раствора находят прямым сравнением площади пятна и интенсивности его окраски у исследуемого и у стандартного растворов. Более точным является метод, основанный на измерении площади пятна или интенсивности его окраски. Методами распределительной жидкостной хроматографии успешно анализируют смеси катионов в неорганическом качественном анализе, смеси аминокислот и других органических кислот, смеси красителей и т. д. [c.167]