Белки диазотирование

В состав белков входят различные функциональные группы, которые способны участвовать во многих органических процессах — реакциях окисления-восстановления, алкилирования, арилирования, ацилирования, этерификации, галогенирования, нитрования, диазотирования, азосочетания и др. Характерные цветные реакции, которые используют для обнаружения белков [c.547]

Если к кроличьим антителам добавить антиген ЛМ, который мы вводили кроликам, и получить положительную серологическую реакцию (специфическую преципитацию), то мы не будем знать, обусловлена ли эта преципитация реакцией между М и анти-М или между Л и анти-Л или той и другой одновременно. Если же присоединить диазотированную метаниловую кислоту к белкам сыворотки курицы [c.19]

С различными химическими группами. Основной метод, использованный Ландштейнером для этой цели, заключается в диазотировании белков различными диазосоединениями. Подобный метод имеет следующие преимущества 1) практически все вещества обладают способностью образовывать диазопроизводные, и, следовательно, таким способом можно присоединять к белковой молекуле любые желаемые группы 2) комплексирование диазо-соединепий с белками происходит при 0° в слегка щелочном растворе (рП9), т. е. в условиях, при которых большинство белков не денатурируется. При помощи этого метода удалось получить весьма интересные данные некоторые из этих данных будут изложены ниже. [c.331]

Белки способны к реакциям окисления, восстановления, алкилирования, арилирования, ацилирования, этерификации, дезаминирования, фосфорилирования, нитрования, диазотирования, диазосочетания, в которых участвуют функциональные группы. [c.435]

В настоящем разделе рассматриваются два типа реакций азосочетание солей диазония с белками и сочетание диазотированных белков с такими низкомолекулярными соединениями, как фенолы или амины. Продукты, получающиеся при том или ином методе азосочетания, весьма сходны, хотя они образуются по разным реакциям. [c.354]

Соотношение мышьяк/азот в производных белков, полученных при взаимодействии "с диазотированной м-арсаниловой кислотой при pH 9,8 [c.357]

Отметим, что анионообменники с ионогеннымн группами двух последних типов разработаны для специальных целей. Так, радикалы PEI предназначены для связывания полианионов регулярного цепочечного строения, например олигонуклеотидов, а РАБ — для ковалентного присоединения белков и НК с помощью реакции диазотирования (для аффинной хроматографии). [c.252]

Гель-хроматографию особенно целесообразно применять в тех случаях, когда необходимо очень быстро отделить высокомолекулярные компоненты от низкомолекулярных. На специально подготовленной колонке (3X6 сл) с сефадексом 0-25 (грубым) Эрлан-деру [25] удалось всего за 2 мин полностью отделить рибонуклеазу от воды, содержащей тритий. Этот быстрый аналитический метод позволяет изучить кинетику обмена трития и на этом основании сделать выводы о степени спирализации растворенного белка. Несколько позднее аналогичная методика была успешно использована при исследовании вторичной структуры растворимых рибонуклеиновых кислот [26] и дезоксирибонуклеиновых кислот [27]. Конечно, нуклеиновые кислоты также могут быть модифицированы химическим путем, например действием диазотированной сульфаниловой кислоты [28]. Избыток реагента и побочные продукты реакции удаляют на сефадексе 0-50. [c.146]

II. Устойчив при pH = 1- 8, ВЭТТ до 0,1 мм, 12. Среднеполярный сорбент, пригоден для разделения неполярных и полярных веществ (соответственно методами распределительной хроматографии нормальной или с обращенными фазами), ВЭТТ до 0,1 мм. 13. Для разделения сильнополярных веществ, ВЭТТ до 0,1 мм. Устойчив в области pH от 2 до 8—9, в кислых средах проявляет анионообменные свойства с обменной емкостью 0,3—0,4 мг-экв/г. Сорбент не пригоден для хроматографий перекисей и веществ с карбонильными группами (аминогруппы окисляются первыми и образуют шиффовы основания со вторыми). 14. Для разделения сахаров и полиоксисоединений (возможно, подобен сорбенту № 13), ВЭТТ до 0,5 мм. В сильнокислой и сильнощелочной средах неустойчив. 18. Рекомендуется для разделения биологически активных веществ. 19. Селективен к арои атическим и нитросоединениям. 24 —28. Поставляются только в колонках. 26. Устойчив при pH = 2- 9. 31. ВЭТТ до 0,06 мм. 33. Термостойкость 70 °С. 34—39. Поверхность пористого стекла со средним диаметром пор от 4 (№ 34) до 250 (] Го 39) нм покрыта мономолекулярным (тофциной 1,8 нм) слоем углевода. Удельный объем пор (в см г) не менее 0,1 (№ 34), 0,4 (№ 35), 1,0 (№ 36, 37), 1,2 (№ 38), 1,5 (№ 39). 40. На основе стекла со средним диаметром пор 55 нм. 41, 42. Хелатные сорбенты С высокой специфичностью к неорганическим ионам. Приготовлены на основе аминированного пористого стекла с диаметром пор 55 нм для закрепления лиганда на стекле использована реакция диазотирования. Сорбент № 41 применяют для концентрирования и разделения Со, N1, Си, Ре, А1, 2г, Т1, V и других металлов. 44—48. Содержание привитой фазы 10—40 мкмоль/см , емкость поглощения белков до 10 мг/см . Поставляют в 50%-ной водной суспензии с антисептиком (1% толуола). 49—52. Предназначены для разделение полиароматических (№ 49) и галогенированных (№ 50) соединений, эфиров нитроцеллюлозы (№ 51) и биогенных веществ (№ 52). 57—58. Устойчивы при pH = 2- 9. 59, 60. Содержание привитых фаз около 40 мкмоль/см . [c.214]

Аналогичный ряд опытов был проведен Прессманом с антигенами, полученными взаимодействием белка с диазотированной /i-аминобензойноп кислотой, и гомологичной антисывороткой (Pressman et al., 1944). [c.662]

Иммунологические показатели конформации детерминанта. Ландштейнер и Ван-дер Шеер (Landsteiner, Van der S heer, 1934) нашли, что образование осадка контрольного антигена, полученного соединением белка с диазотированным л-аминоанилидом [c.665]

Функциональные группы способны вступать в реакции алки-лирования, арилирования, окисления, восстановления, ацилирования, этерификации, дезаминирования (азотистой кислотой), йодирования, нитрования, фосфорилирования, диазотирования, реакцию с формалином. Белки могут осаждаться кислотами трихлоруксусной, салициловой, пикриновой, фосфовольфрамовон и фосфомолибденовой, а также солями тяжелых металлов. Благодаря наличию некоторых функциональных групп протеины дают ряд специфических реакций, как например биуретовую (реагируют пептидные связи), ксантопротеиновую (реагируют ароматические ядра циклических аминокислот), Миллона (фенольная группа тирозина), Адамкевича (индольная группа триптофана), Сакагучи (гуанидиновая группа аргинина), сульфгидрильную, нингидриновую, пикриновую и др. Больщинство из них исполь- [c.28]

После диазотирования азотистой кислотой энзакрил АА связывается с ароматическими остатками аффинных лигандов (например, в белках с тирозином и гистидином и с различными аминогруппами, но неспецифично и более медленно [39, 85]) или после активации тиофосгеном со свободными аминогруппами. [c.23]

Перечень нерастворимых ферментов, выпускаемых фирмой MiLes Laboratories Ltd., приведен в табл. 7.2. К СМ- и DEAE-целлюлозе ферменты присоединяют азидным методом [65], с помощью триазиновых производных [50], или по методу Баркера [5] путем диазотирования 2-окси-З-(л-аминофенокси) пропи-лового эфира целлюлозы. Иммобилизованные на целлюлозе ферменты содержат относительно мало белка. Ферменты с высоким содержанием белка получают путем связывания белков с сополимером этилена и малеинового ангидрида [54]. Ферменты, присоединенные к агарозе триазиновым методом, характеризуются высокой ферментативной активностью главным образом по отношению к макромолекулярным субстратам [50]. Препараты рекомендуется хранить в среде с pH не ниже 5,0. [c.33]

Пример расчета. Количество крови, взятой на определение 1 мл. Разведение пробы при гемолизе и осаждении белкой до 6 мл. Количество центрифугата, взятого на гидролиз (и параллельно без гидролиза),— 2 мл. Раз-ведение пробы в пикнометрах — до 3 мл. Количество разведенного центрифугата, взятое на диазотирование,— 2 мл. Величина ь средняя (из двух параллельных определений) для гидролизованной части пробы,— 0,258. Величина Ег, средняя для негидролизованной части пробы,— 0,205. Количество сульфаниламида, соответствующее значению Ей— 4,05 хг. Количество сульфаниламида, соответствующее значению Е ,— 3,25 [хг. [c.413]

Она соединяется также с фенольной группой тирозина — аминокислоты, входящей в состав большинства белков. Допустим, что мы присоединили ди-азотированную метаниловую кислоту (наш гаптен) к белкам лошадиной сыворотки. Если мы обозначим белки лошадиной сыворотки Л, а диазотированную метаниловую кислоту — М, то полученный азобелок можно обозначить как ЛМ. При введении этого соединения кролику в его организме, как правило, образуется несколько различных антител к белкам лошадиной сыворотки, которые можно обозначить в целом как анти-Л, а антитела к метаниловой кислоте — анти-М. [c.18]

В более поздней работе [1] было даже показано, что а- и р-аномеры глюкозы, превращенные в л-ами-нофенилглюкозиды, затем диазотированные и соединенные с белком, способны вызывать образование различных антител (схема VIII). Различия оказа- [c.36]

Белок может быть связан с хлорангидридными группами в ионообменной смоле. Диазотированный полиаминостирол используется для связывания белка. Очень активная смола получена при связывании поли-4-изоциа1натостирола с ферментом [c.140]

Следует иметь в виду, что антигенной активностью обладает не молекула вводимого белка в целом, а определенные группировки, разные в разных случаях. Такими группировками могут быть и искусственно введенные в белок антигены. Например, диазотированная л-аминофе-ниларсоновая кислота вступает в реакцию азосочетания с тирозинным звеном белка, и модифицированный таким образом белок (сыворотка крови лошади), будучи введен кролику, вызывает образование специфического антитела. Но это же антитело действенно и по отношению к обработанной подобным образом сыворотке других животных. Таким образом, нельзя переоценивать возможности иммунологической идентификации белков. Мы не приводим гипотез механизма возникновения антител, поскольку здесь ничего окончательного не имеется. [c.669]

Реакция антиген — антитело не происходит, если взаимодействующие белки подвергнуты денатурации. Поэтому можно считать, что взаимодействие между ними зависит от точной комплемептарности молекулярных поверхностей двух нативных белков. Эффективный метод исследования специфичности таких взаимодействий был разработан Ланд-штейнером, который получал антигены путем спаривания белков с многочисленными диазотированными производными анилина. Он обнаружил, что специфичность антител, создаваемая такими сопряженными антигенами, определяется в основном заместителями (гаптенами). Так как антитело будет также взаимодействовать с гаптенами, присоединенными к малым молекулам, равновесие при ассоциации может быть определено при диализе [1007]. Типичные данные такого рода были получены Карушем [1099], который изучал антитела к сопряженному белку, несущему D-изомер гаптеновой группы [c.340]

Другой подход к изучению реакции азосочетания может быть иллюстрирован работой Говарда и Вилда [140], которые исследовали азосочетание диазотированной п-арсапиловой кислоты с разными белками. Полученные азобелки чрезвычайно тщательно анализировали на содержание общего азота и мышьяка. На основании известного аминокислотного состава исходного белка и количества связанного азобелком мышьяка могут быть получены данные о природе групп белка, участвующих в этой реакции. Затем полученные данные подтверждаются путем проведения модельных реакций с соответствующими соединениями, а также проводится анализ азобелка на содержание групп, наличие которых в нем предполагается на основании полученных ранее результатов. [c.356]

Изменение соотношения мышьяк/азот в азоказеине, полученном нри азосочетании диазотированной г-арсаниловой кислоты с белком при разных условиях реакции [c.356]

В табл. У1-16 приведены данные, показывающие зависимость степени протекания азосочетания диазотированной и-арсаниловой кислоты с казеином от pH среды данные по взаимодействию диазотированной п-арсани-ловой кислоты с разными белками см. в табл. У1-17. [c.356]

Реакцию проводят в два этапа диазотируют аминогруппы гаптена с помощью НС1 и NaN02, а затем спонтанно конъюгируют их с тирозином белка-носителя. Использование бифункциональной соли диазония (бис-диазотированный бензидин) обеспечивает спонтанное образование мостиков между гаптенами с ароматическими аминокислотами (т. е. пептидами) и белками. Пример такой двухступенчатой реакции — конъюгация ара-аминобензойной кислоты с БСА. [c.48]

Рис. 3. Приготовление комплексов гапте] -белок. I. Диазотированный гаптен реагирует с ГБ (или ДГБ). 2. Комплекс гапте11-азо-ГБ (или гаптен-азо-ДГБ) затем связывается с белком, образуя комплекс гаптен-белок, Н — антигенная детерминанта гаптена.

Смотреть страницы где упоминается термин Белки диазотирование: [c.179] [c.200] [c.152] [c.272] [c.190] [c.89] [c.228] [c.449] [c.449] [c.182] [c.655] [c.655] [c.679] [c.208] [c.27] [c.208] [c.314] [c.358] [c.359] [c.340] [c.231] [c.93]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология