Рибонуклеиновые кислотное

В течение многих лет результаты трудоемких и весьма грубых анализов нуклеиновой кислоты, проведенных первыми исследователями, указывали, как полагали, на эквимолекулярные отношения двух пуриновых (аденин и гуанин) и двух пиримидиновых (урацил и цитозин) оснований. Позже применение хроматографии на бумаге [222] и, в меньшей степени, ионообменной техники дало быстрые и относительно точные методы количественного определения компонентов рибонуклеиновых кислот. При гидролизе нуклеиновой кислоты щелочью образуются мононуклеотиды, которые могут быть затем разделены либо как таковые, либо в виде нуклеозидов, после дефосфорилирования. Кислотный гидролиз, напротив, дает пуриновые основания и пиримидиновые мононуклеотиды. Спектрофотометрическое определение подвергнутых разделению компонентов после элюирования их с бумаги (с применением электрофореза [223] или хроматографии) или с ионообменной смолы позволяет получать молярные соотношения оснований. [c.404]

Нуклеиновые кислоты являются многоосновными кислотами, расщепляющимися на более простые компоненты при действии специфических ферментов, кислот, щелочей и других химических реагентов. Например, при мягком гидролизе щелочами или водным раствором аммиака рибонуклеиновые кислоты распадаются на мононуклеотиды, которые, в свою очередь, отщепляют остаток фосфорной кислоты при нагревании до 145° С с водным аммиаком. Образующиеся при этом нуклеозиды в условиях кислотного гидролиза распадаются на простейшие компоненты — пуриновые и пиримидиновые основания и сахара. [c.326]

Рассмотрим третью замечательную особенность переноса генетической информации в живых организмах. Г енетическая информация закодирована в форме линейной, одномерной, последовательности нуклеотидов-строительных блоков ДНК. Но живые клетки имеют трехмерную структуру и состоят из трехмерных компонентов. Одномерная информация, заключенная в ДНК, преобразуется в трехмерную информацию, присущую живым организмам, путем трансляции (т. е. перевода с одного языка на другой) структуры ДНК в структуру белка. В этом процессе принимает участие рибонуклеиновая кислотна (РНК). В отличие от молекул ДНК, имеющих в основном одинаковую структурную форму, молекулы разных белков самопроизвольно свертываются характерным для данного белка способом, образуя самые разнообразные трехмерные структуры, каждая из которых вьшолняет специфическую функцию. Точная геометрия молекул данного белка определяется его аминокислотной последовательностью, которая в свою очередь определяется нуклеотидной последовательностью соответствующего участка ДНК. [c.22]

Более сложным оказался вопрос о строении полимерной цепи в рибонуклеиновых кислотах. РНК также являются высокомолекулярными соединениями, цепь которых состоит из рибонуклеозидов. Полимер при гидролизе распадается на соответствующие мономеры — рибонуклеоти-ды и, следовательно, РНК являются, подобно белкам и полисахаридам, продуктами поликонденсации мономеров, происходящей с отщеплением иппн Молекулярный вес РНК ниже молекулярного веса ДНК и колеблется в значительных пределах, достигая 1 000 000. РНК, будучи кислотами, при титровании показывают присутствие только первичного кислотного гидроксила. Так как известно, что пирофосфатная связь в них также отсутствует, то единственным возможным типом построения полимерной цепи является тип [c.248]

РНазы A за исключением того, что вместо двух остатков гистидина в общем кислотно-основном катализе гидролиза принимают участие остатки гистидина и глутаминовой кислоты [29]. И в этом случае гидролиз промежуточно образующегося гуанозин-2, 3 -цик-лофосфата протекает по механизму in-line [30]. Оба фермента (РНаза А и РНаза Tj) с их различной специфичностью к основаниям интенсивно использовали при определении последовательности оснований в рибонуклеиновых кислотах. [c.144]

До недавнего времени считалось, что обязательным компонентом всех ферментов являются белки. Был накоплен огромный материал, свидетельствующий, что именно белки способны опознавать определенные субстраты, обеспечивая тем самым высокую специфичность биологического катализа. Кроме того, многочисленные данные демонстрировали, что белки обеспечивают оптимальную ориентацию субстратов относительно функциональных групп фермента, осуществляющих химическое превращение. Этими группами в случае кислотного, основного и нуклеофильного катализа чаще всего являются группы, входящие в состав белка. В случае электрофильного и окислительно-восстановительного катализа в химическом превращении, как правило, участвуют специальные кофакторы — ионы металла или сложные органические молекулы. Но в этом случае белковая часть фермента организует работу кофактора так, чтобы обеспечивалась свойственная ферменту специфичность и одновременно с Высокой эффективностью реализовался каталитический потенциал кофактора. Однако в начале 80-х годов были от крыты и стали объектом интенсивных исследований ферменты, построенные из молекул рибонуклеиновых кислот (рибозимы). Интерес к этой группе ферментов резко усилился в связи с разработкой методов молекулярной селекции нуклеиновых кислот, позволившей, в частности, начать направленное конструирование рибозимов с разнообразными типами каталитической активности. [c.11]

Основной характер протаминов и гистонов обусловлен присутствием в них большого количества диаминокислот аргинина, гистидина и лизина. Кислотные свойства нуклеиновых кислот зависят от диссоциации имеющихся в них остатков фосфорной кислоты. Нуклеиновые кислоты представляют собой высокомолекулярные соединения, построенные из большого количества мононуклеотидов. Нуклеиновые кислоты в зависимости от входящего в их состав углевода — рибо-зы или дезоксирибозы — носят соответствующие названия — рибонуклеиновая кислота, или РНК, и дезоксирибонуклеиновая кислота, или ДНК. Рибонуклеиновая кислота (РНК) содержится преимущественно в протоплазме клеток (в рибосомах, митохондриях, гиалоплазме) и в небольшом количестве находится в ядре и ядрышке. Дезоксирибонукледновая кислота (ДНК) содержится преимущественно в я [c.45]

Применение. В качестве ингибитора синтеза белков и рибонуклеиновой кислоты у анаэробных дрокжей (1 . В аналитической химии в качестве кислотно-основного индикатора и реактива иа ионы калия и аммония. [c.138]

Ниже в качестве примера указаны некоторые красители и их применимость для микроскопических исследований. Краситель солохромцианин применяется для выявления основных и кислотных белков в кислых растворах, в этих условиях нуклеиновые кислоты окрашиваются в синий цвет, а основные белки — в красный метиловый зеленый специфически окрашивает дезоксирибонуклеиновую кислоту в зеленый цвет, а пиронин Ж — рибонуклеиновую кислоту в красный альциановый синий в смеси с оранжевым Ж окрашивает различные элементы гипофиза человека в пурпуровокрасный, синий, оранжевый и сине-черный цвета кармин окрашивает ядра клетки в темно-синий цвет, а гликоген — в красный, что используется для обнаружения гликогена и других углеводов. Для идентификации жиров и жироподобных веществ — липидов используется их способность хорошо растворяться в судаковых и некоторых других жирорастворимых красителях судан черный Б окрашивает липиды в черный цвет, смесь суданов III и IV — в различные оттенки от оранжево-красного до оранжевого, а нильский голубой окрашивает нейтральные липиды в красный или розовый цвета, кислые липиды — в синий цвет. [c.56]

Наиболее надежными и универсальными красителями для белков являются амидовый черный 10В [109] и кумасси синий [12]. Наибольшее распространение получил универсальный краситель Stains-al [15], который окрашивает рибонуклеиновую кислоту в голубовато-розовый цвет, дезоксирибонуклеиновые кислоты и белки — в красный, кислотные полисахариды— в синий. [c.307]

У. получают гидролизом рибонуклеиновой к-ты с последующим выделением его из смеси ионообменной хроматографией. Синтетически У. можно получить из триацетилрнбофуранозилбромида и 2,6-диэтокси-пиримидина. Кислотный гидролиз образующегося [c.181]

Часть промежуточных продуктов, образующихся при действии рибонуклеазы на рибонуклеиновые кислоты, составляют пиримидиновые нуклеозид-2, 3 -циклофосфаты, которые при дальнейшей обработке рибонуклеазой дают исключительно З -фосфаты [68, 69]. При гидролизе рибонуклеиновой кислоты под действием карбоната бария [68] или лучше трет-бугклата калия [70] были выделены пуриновые и пиримидиновые нуклеозид-2, 3 -циклофосфаты. Они образуются также при нагревании раствора нуклеиновой кислоты в формамиде с аммиаком [7П- На основании данных титрования этих веществ, их поведения при хроматографировании на бумаге и электрофорезе, кислотного и щелочного гидролиза их до 2 - и З -фосфатов, а также из сравнения их с синтетическими образцами этим соединениям было приписано строение 2, 3 -циклофосфатов [52, 53]. [c.133]

Хотя на данном этапе методы химического гидролиза не позволяют сделать выбора между 3 —5 - и 2 —5 -межнуклеотидными связями, доказательства, по-видимому, исключительного присутствия 3 —5 -структуры были получены на основании исследований ферментативного гидролиза рибонуклеиновых кислот и простых нуклеотидных производных. Из различных источников был выделен ряд нуклеаз, которые катализируют гидролиз нуклеиновых кислот на более мелкие фрагменты. Панкреатическая рибонуклеаза [93] — один из группы ферментов, обнаруживающих высокую специфичность к рибонуклеиновым кислотам,— была тщательно изучена и дано объяснение механизма ее действия. Ранние исследования показали, что фермент действует по пиримидиннуклеозидным звеньям, так как крупные педиализуемые остатки после ферментативного расщепления рибонуклеиновой кислоты значительно обогащены пуринами [94] кроме того, выделяются пиримидиновые мононуклеотиды, но не обнаружено свободных пуриновых мононуклеотидов [75, 95, 96]. Дальнейшие исследования кислотного или щелочного гидролиза продуктов, полученных в результате последовательной обработки рибонуклеиновой кислоты рибонуклеазой и фосфомоноэстеразой предстательной железы, привели к заключению, что специфичность рибонуклеазы такова, что нуклеиновые кислоты расщепляются ею с образованием смеси пиримидиновых мононуклеотидов и пуриновых олигонуклеотидов, содержащих в качестве концевой единицы пиримидиновый нуклео-зид-2 (или 3 )-фосфат [75, 97]. [c.377]

Другой важной группой природных соединений, представляющн.ч собой, так же как и рибонуклеиновые кислоты, диэфиры ортофосфорной кислоты, в молекулах которых имеются гидроксильные группы, расположенные так, что возможно образование пятичленных фосфатных циклов, явля[отся эфиры фосфорной кислоты и глицерина кефалины (коламинфосфатгщы), лецитины, инозитфосфатиды и другие, более сложные фосфатиды. Установлено - , что эти диэфиры ортофосфорной кислоты подвержены щелочному гидролизу (как и кислотному) в противоположность диэфирам типа диметилфосфата, которые особенно устойчивы к действию щелочей. Остаток К в [c.686]

Дезоксирибонуклеиновые ця слоты (ДНК), содержащиеся в клеточных ядрах, обнаруживаются по методу Фёльгена, основанному на высвобождении альдегидных групп в молекулах ДНК при кислотном гидро.чизе и последующем выявлении альдегидов реакцией с фуксин-серписто к-той. Рибонуклеиновая кислота окрашивается основными красителями о обязательным контролем специфичности окрашивания (обработка рибонунлеазой). [c.475]

Полинуклеотиды, т. е. рибонуклеиновые кислоты (РНК) и дезоксирибонуклеиновые кислоты (ДНК), представляют собой макромолекулярные цепи, в которых, в соответствии с анализом, на 1 моль гетероцикла приходится 1 моль сахара и 1 остаток фосфорной кислоты. По кривой титрования ясно, что при каждом атоме фосфора имеется 1 гидроксил, т. е. что полинуклеотиды представляют собой двузамещенные эфиры фосфорной кислоты, сохранившей одну кислотную функцию. Все это позволяет полностью установить тип первичной структуры РНК и ДНК. Однако конкретная первичная структура каждой индивидуальной РНК и ДНК определяется еще чередованием четырех гетероциклов — двух пуриновых (аденин и гуанин) и двух пиримидиновых (урацил и цитозин — для РНК тимин и цитозин — для ДНК). Методы установления этого чередования только разрабатываются. Метод, предложенный Корана, состоит в подборе специфических ферментов, один из которых (из змеиного яда) расщепляет цепь по связи фосфорной кислоты с первичным гидроксилом (С, ), а другой (из селезенки) — по связи фосфорной кислоты с вторичной гидроксильной группой (Сз>) [c.717]