Гистидин, определение воды

Для определения коэффициента распределения можно использовать 0,01 эквимолярный раствор смеси трех аминокислот гистидина, валина, лейцина. Неподвижный растворитель—вода подвижный растворитель—смесь н-бутанола, уксусной кислоты и воды (4 1 5). [c.141]

Другие низкоспиновые координированные комплексы. Данные рентгеноструктурного анализа [15, 93] показывают, что координированный цианид-анион наклонен относительно каркаса порфирина. Согласно принципу электронейтральности Полинга [173, 174], как цианид-анион, так и окись углерода должны быть связаны с атомом углерода линейно. В случае цианидметмиоглобина предполагается, что угол Ре—С—N составляет 130°. Поскольку в карте разностной электронной плотности цианидный лиганд плохо разрешен, в работе 93] предполагается, что атом углерода занимает шестое координационное место в комплексе, т. е. то же самое, которое занимает молекула воды. Однако с точки зрения электронной структуры [173, 174] связь Ре—С должна быть несколько короче. Хендриксон и Лав [15] указывают, что в цианидметгемогло-бине морской миноги координирующий атом углерода смещен на 100 пм от нормали к плоскости порфирина, проведенной через атом железа (рис. 9). В то время как результаты обоих исследований указывают, что стереохимия, предсказываемая принципом электронейтральности, соблюдается не совсем точно, вероятно, вследствие стерических препятствий со стороны ближайщих аминокислотных остатков, не имеется количественных данных для более точного определения геометрии лиганда. В обоих случаях был сделан вывод о том, что атом азота цианидного лиганда образует водородную связь с имидазольным кольцом дистального остатка гистидина. Невозможно четко оценить, насколько значительно разли- [c.71]

При интерпретации карт разностной электронной плотности было предположено [142], что положение атома молекулы кислорода, координирующего с атомом железа, соответствует положению, занимаемому кислородом молекулы воды в метмиоглобине. Поскольку, согласно модели Полинга, с точки зрения электронной структуры атом железа должен образовывать резонансную двойную связь с координирующим атомом кислорода, следует ожидать некоторого уменьшения длины связи железо — кислород. Кроме того, в модели Полинга (рис. 17) требуется удлинение связи 0—0 вследствие образования простой связи между атомами координированного кислорода. Разностный синтез Фурье оксимиоглобина относительно метмиоглобина [142] не обладает достаточной точностью для определения столь детальных стереохимических соотношений. Кроме того, хотя образование водородной связи с остатком дистального гистидина может приводить к стабилизации молекулы в данном миоглобине, вообще говоря, она вовсе не обязательна. Как эритрокруорин hironomus [177], так и миоглобин Aplysia [178] не имеют остатка дистального гистидина, соответствующего остатку в миоглобине кашалота или гемоглобинах млекопитающих. [c.73]

Дистальный гистидин не создает существенных пространственных затруднений для таких малых лигандов, как вода, или лигандов типа азид-иона и кислорода, которые дают комплексы нелинейной структуры. Азид-ион располагается над метиновым мостиком порфиринового кольца и очень точно соответствует пространству между гистидиновой, фенилаланиновой и валиновой группами [211]. Однако дистальный гистидин создает весьма существенные пространственные затруднения для таких лигандов, как СО и N , которые при координации предпочитают линейную конфигурацию. Пространственное затруднение может быть преодолено путем отклонения угла Ее—С—О или Fe—С—N от 180° и (или) путем перестройки белка. По данным рентгеноструктурного анализа карбонильного комплекса мономерного гемоглобина hironomus, валентный угол Ее—С—О составляет 145 15° изолейцин Е11, который занимает в этом белке примерно то же положение, что и дистальный гистидин в гемоглобинах млекопитающих, также испытывает некоторое смещение [109]. Аномально низкие волновые числа валентного колебания связанного СО во многих гемоглобинах и миоглобинах, имеющих дистальный гистидин, но не в белках, в которых этот гистидин замещен на аргинин или тирозин, также были объяснены некоторым взаимодействием (за счет водородных связей или в силу стерических факторов) между гистидином и координированной окисью углерода [48]. Разностная фурье-карта между Ее ЮНз- и Ре" СМ -комплексами миоглобина свидетельствует о том, что система связей Ее—С—N остается линейной и что смещается спираль Е[8]. Таким образом, рентгеноструктурный анализ дает непосредственные доказательства существенных пространственных затруднений и определенной гибкости белкового окружения вокруг дистального координационного положения комплекса. Способность связывать гораздо более объемистые лиганды, [c.161]

Атом железа, принадлежащий плоской гемогруппе, связан с азотом имидазола гистядинового остатка. Шестое координационное положение у атома железа в исследованных кристаллах занято водой. Найденная из рентгенографических данных ориентация гемогруппы в молекуле согласуется с результатами определения ее ориентации с помощью электронного парамагнитного резонанса. Полярные группы пропионовой кислоты порфирина находятся вблизи поверхности молекулы, тогда как неполярные винильные группы расположены внутри. Сторона гемогруппы, обращенная к белковой части молекулы, находится в контакте с неполярными боковыми цепями в непосредственной близости от нее расположено несколько ароматических боковых цепей. За исключением связи железо — гистидин, все свя- [c.265]

Ход определения. Стандартные растворы аминокислот готовят в концентрации 10 мг аминокислоты в 1 мл. Некоторые аминокислоты (тирозин, аспарагиновая кислота) в воде растворяются плохо, поэтому при их растворении добавляют по нескольку капель НС1. На листы или полосы (шириной 15—20 см) хроматографической бумаги на расстоянии 2,5—3 см микропипеткой наносят такое количество раствора каждой аминокислоты, чтобы содержание любой из них в местах нанесения бы-ло не менее 15—2Q мкг, а для триптофана, гистидина, тирозина, лизина и пролина не менее 20—30 мкг. После подсыхания пятен хроматограммы закрепляют в камере и приливают растворитель. [c.34]

III) н-бутанол — уксусная кислота — вода (300 60 140) при трехкратном пропускании для определения цистина, цистеина, орнитина, лизина, гистидина, аргинина, аланина, пролина,тирозина, уаминомасляной кислоты, фенилаланина, лейцина и изолейцина [c.40]

Через колонку, содержащую 6 г анионообменной окиси алюминия, было профильтровано 10 мл полученного раствора аминокислот. Фильтрат собирался в мерную колбу объемом 25 мл. Затем колонку промывали водой и фильтрат промывания собирали в ту же мерную колбу. Промывание колонки было закончено, когда общий объем собранного фильтрата (Fj) был доведен до 25 мл. Для определения аминного азота по Ван-Слайку было взято 4 мл фильтрата F . Аминокислоты, задержанные анионообменной окисью алюминия, вытеснялись 0,5 н. раствором NaOH. Фильтрат, получавшийся при этом вытеснении (El), собирали в отдельную колбу. Другая порция фильтрата Fl объемом 20 мл была пропущена через колонку, содержащую 100 мл катионообменной окиси алюминия. Колонка была затем промыта 100 мл воды. При этом первичный фильтрат и фильтрат промывания также собирали в один приемник. Так был получен фильтрат F2, содержащий нейтральные аминокислоты и гистидин. [c.119]

Почти в одно время с этой работой по хелатам шиффовых оснований кобальта в литературе появились данные по изучению свойств бис-гистидин-кобальта(П) и большого числа комплексов других а- и 3-аминокислот, способных переносить кислород [170]. Соединения получают растворением гистидина, его производных, глицилглицина или аминокислот в воде при определенном pH с последующим добавлением раствора СоС12- Все физические измерения были проведены для водных растворов этих соединений при насыщении кислородом, хотя была возможность выделить некоторые хелаты, насыщенные кислородом, в виде твердых веществ. Насыщенные кислородом соединения имеют соотношение 1 моль О2 на 2 моля кобальта. [c.558]

О п р е д е л е н и е положения остатков м о н о а ц е т о н х и н о в о з ы в би с - (м оноа ц е т о н X и но в 03 и л - 6,6 ) - N- ги с т и д и н е. Точную навеску производного гистидина (для сравнения самого гистидина) растворяют в минимальном количестве воды, затем добавляют 0.1 н. щелочи до нейтральной реакции на лакмус. К полученному таким образом раствору добавляют по 0.05 мл титрованного )аствора азотнокислого серебра. Раствор азотнокислого серебра лучше брать 0.03—0.1 н. Лосле каждого добавления азотнокислого серебра стеклянной палочкой наносят маленькую каплю титруемого раствора на чистую, сухую, ровную стеклянную пластинку. К этой капле добавляют пипеткой маленькую каплю свежеприготовленного раствора диазобензолсульфокислоты. Если все еще гистидиновое производное не оттитровалось, в приготовленной капельной пробе появляется интенсивное красное окрашивание. По мере добавления азотнокислого серебра все время выпадает в осадок серебряная соль гистидинового производного. Во время титрования следят за тем, чтобы титруемый раствор был нейтральным, что достигается добавлением через определенные промежутки времени 0.1 н. щелочи, так как серебряная соль образуется только в нейтральном растворе. Раствор азотнокислого серебра добавляют до тех пор, пока в капельной пробе не будет больше появляться окрашивание Данные опытов собраны в таблице. [c.467]

Дженкинсон и Тинслей [19] идентифицировали с помощью хроматографии на бумаге состав аминокислот, гидролизат которых был получен в ходе изучения аминокислот растительного происхождения, выделенных из компоста. Десять мл гидролизата, содержавшего приблизительно 1 мг связанного азота, запаривали досуха при пониженном давлении, растворяли в 5 мл воды и снова упаривали досуха. Остаток растворяли в 1,5 мл воды и центрифугировали. Осветвленную жидкость в количестве 0,04 мл наносили на бумагу Ватман № 1. Разделение проводили элюентом, предложенным Вольфом [20]. Хроматограмму проявляли, окуная лист в 0,2%-ный раствор нингидрина в ацетоне. Были идентифицированы следующие аминокислоты цистеиновая, аспарагиновая, глутаминовая, лизин, аргинин, глицин, гистидин, серии, аланин, тирозин, пролин, валин, треонин, изолейцин, лейцин и фенилаланин. Метионин не поддавался определению, поскольку его трудно было отделить от глицина в описанных системах растворителей. Метио-нин-5-оксид тоже не отделялся от валина. Хроматограммы опускали в 0,1%-ный раствор изатина в ацетоне для обнаружения про-лина и подтверждения отсутствия оксипролина. Детектирование и определение содержания пептида с остатком лизина в середине цепи проводили с помощью 2,4-динитрофторбензола [21]. Эта реакция протекает, поскольку е-аминогруппа, в отличие от а-амино-группы лизина, свободна и может вступать в реакцию. [c.306]

В миоглобине атом железа выдвинут из плоскости порфиринового кольца в сторону проксимального гистидина примерно на 0,5 А. Менее определенным является вопрос о смещении железа из плоскости порфиринового кольца и о координации воды по шестому месту в молекуле оксимиоглобина. Здесь сдвиг атома железа невелик, а вместе с кислородом к области гема вероятно проникает и молекула воды. [c.101]

Из-за множества биокаталитических процессов, протекающих в клетках, избирательности действия сенсоров на основе цельных клеток ткани следует уделять особое внимание. Изучение избирательности биосенсора на основе ткани почки свиньи показало его пригодность для определения глутамина в сложных биологических объектах. Специально изучалось влияние большого числа соединений (мочевина, Ь-аланин, Ь-аргинин, Ь-гистидин, Ь-валин, Ь-серин, Ь-глутаминат, Ь-аспарагин, Ь-аспартат, О-аланин, О-аспартат, глицин и креатинин), которые могли бы создавать помехи работе сенсора, но оказалось, что они не дают заметного сигнала. Как известно, в клетках почки свиньи велика концентрация О-аминокислотной оксидазы [16], поэтому проверяли также отклик сенсора на различные О-аминокислоты. В присутствии кислорода и воды этот фермент катализирует окислительное деаминиро-вание нескольких О-аминокислот. Однако в специфических условиях работы глутаминовый биосенсор не обнаруживал чувствительности к проверяемым О-аминокислотам. То, что побочные биокаталитические процессы не влияют на сигнал биосенсора, по всей вероятности, обусловлено отсутствием флавинадениндинуклеотида в буферной системе [23]. [c.37]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология