Вирус электрофорез

Методом электрофореза можно характеризовать фракционный состав сложных природных белков, дать характеристику энзимов, вирусов, бактерий, форменных элементов крови, латексов и др. [c.327]

До недавнего времени мало было известно о локализации генов в хромосомах человека. Исключение составляли лишь признаки, сцепленные с полом (гл. 1, разд. В, 4), которые могут быть локализованы в Х-хромосомах. Ряд исследований, проведенных в последнее время, ознаменовались успехами и привели к систематическому картированию большого количества генов человека [169—171]. Наиболее важным оказался при этом метод слияния соматических клеток (дополнение 15-Д). Для слияния человеческих лимфоцитов с клетками грызунов часто используют инактивированный вирус Сендай, обладающий способностью вызывать сначала адгезию, а затем слияние клеток. Из гибридных клеток, полученных в результате слияния человеческих клеток с клетками мыши или хомяка, можно получить линии клеток, ядра в которых также сливаются. Хотя такие клетки могут размножаться, давая много поколений, тем не менее они склонны утрачивать при этом хромосомы, особенно те из них, которые ведут свое происхождение от клеток человека. Наблюдая за утратой определенных биохимических признаков, например некоторых ферментов, специфических для человека (которые могут быть отделены от ферментов хомяка методом электрофореза), можно установить наличие или отсутствие определенного гена в данной хромосоме. Очевидно, что для этого необходимо одновременно следить за потней хромосом на каждой стадии эксперимента. Новые методы окрашивания позволяют идентифицировать каждую из 26 пар хромосом человека. В настоящее время разрабатываются методы точного генетического картирования применительно к культуре клеток [171]. [c.268]

Электрокинетические явления, особенно электроосмос и электрофорез, используются при обезвоживании и очистке различных материалов, нанесении на непроводящие материалы покрытий из каучука, отходов кожи и т. п., а также при пропитке тканей огнестойкими веществами, определении состава и разделении энзимов, белков, вирусов и других сложных систем и т. п. [c.239]

Электрофорез. Обычно при нейтральных величинах pH вирусы несут отрицательный заряд [33], и при помещении вирусной суспензии в электрическое поле они перемещаются к катоду. Этот принцип был использован для концентрирования бактериофагов в воде [34]. Разработана простая процедура, при которой концентрации фагов возрастает в 100 раз. Путем модификации этот метод может быть использован и для концентрации энтеровирусов. [c.282]

Коллоидные примеси, вирусы, мелкие бактерии и высокомолекулярные соединения входят во вторую группу. Общим свойством для них является диаметр частиц. Так как диаметр этих частиц очень мал, то для выделения их из воды необходимо введение химических реагентов, вызывающих агрегирование частиц (коагуляция) или воздействие электрическим током (электрофорез). Важная роль при удалении из воды вирусов и мелких бактерий отводится бактерицидным реагентам (хлору, озону, перманганату калия ндр.). [c.71]

Вирусологический анализ воды. Прежде всего вирусы должны быть сконцентрированы материал газ, применявшийся длительное время, сейчас не используется. Процедура концентрирования вирусов состоит в следующем фильтрование через мембраны (растворимые и нерастворимые ) или применение патронов, электрофорез или электроосмос, коагуляция — флокуляция, центрифугирование (в присутствии адсорбента, не смешивающегося с водой, или без не- [c.412]

Для зонного электрофореза вирусов в качестве поддерживающей и стабилизирующей среды используют растворы сахарозы с градиентом концентраций [521]. При электрофоретическом разделении вирусов с помощью непрерывного проточного электрофореза без поддерживающей среды можно использовать капиллярный слой буфера между двумя стеклянными пластинками, находящимися в контакте с двумя боковыми сосудами для электродов. Хорошее разделение штаммов мелких [c.43]

ДИК-содержащих вирусов было получено как с помощью электрофореза в полиакриламидном геле, так и с помощью проточного электрофореза [51, 231]. [c.44]

К основным методам обнаружения реакций антиген — антитело относятся следующие а) реакции преципитации и агглютинации, в том числе образование линий преципитации, появляющихся на пластинках с агаровым гелем между лунками, содержащими антитела и антигены, которые движутся навстречу друг другу либо в результате простой диффузии, либо под действием электрического поля (при электрофорезе) б) реакция нейтрализации инфекционности вируса специфическим антителом [c.46]

Ф и г. 15. Электрофорез в полиакриламидном голе белков вируса [c.85]

В процессе очистки и выделения ферментов, гормонов и вирусов [61—68] электрофорез является наиболее полезным методом, так как он является мягким методом, который не нарушает активности и позволяет исследовать полученные фракции. [c.377]

В эти годы созданы новые физ.-хим. методы аиализа. Были заложены основы хроматографич. методов (М. С. Цвет, 1906). В 20-х гг. Т. Сведберг предложил использовать для седиментации белков ультрацентрифугу, вскоре этим методом был выделен ряд вирусов. В 30-х гг. А. Тизе-лиусом заложены основы электрофореза, в 1944 А. Мартином и др. создана распределит, хроматография, для определения структуры прир. соед. впервые стал использоваться рентгеноструктурный анализ (Д. Кроуфут-Ходжкин, 40-е гг.). Благодаря использованию физ.-хим. методов в 50-х гг. достигнуты крупные успехи в изучении двух важнейших классов биополимеров-белков и нуклеиновых к-т Э. Чар-гафф провел детальный хим. анализ нуклеиновых к-т, открыта двойная спираль ДНК (Дж. Уотсон и Ф. Крик, 1953), определена структура инсулина (Ф. Сенгер, 1953), одновременно осуществлен синтез пептидных гормонов -окситоцина и вазопрессина (Дю Виньо, 1953), открыт один из элементов пространственной структуры белков- спираль (Л. Полинг, 1951). В эти годы Р. Замечником открыты рибосомы, что послужило стимулом для изучения механизма синтеза белка. [c.292]

Один из ПЦР-тестов основан на выявлении фрагмента ДНК длиной 188 п. н., который присутствует во множестве копий в геноме Т. ruzi, но отсутствует в геномной ДНК нескольких родственных паразитов. После амплификации этот фрагмент без труда обнаруживается с помощью электрофореза в полиакриламидном геле. Незначительно варьируя методику проведения ПЦР (например, изменяя нуклеотидную последовательность праймеров), последнюю можно использовать для обнаружения широкого спектра бактерий, вирусов и паразитов. [c.190]

Электрофорез в полиакриламидном геле также используется для оценки молекулярной массы нуклеиновых кислот. Применительно к таким огромным молекулам, каковыми являются даже простейшие ДНК, например ДНК не особенно крупных вирусов или митохондриальные ДНК, этот подход мало эффективен, но он широко применяется для оцэнки размеров фрагментов двунитевых ДНК, на которые их разрезают на первых этапах работы по установлению первичной структуры. Этот вопрос несколько подробнее рассмотрен в 7.8. [c.268]

Можно назвать множество примеров использования микрофильтрационных мембран в качестве фильтров для сбора частиц, подвергаемых затем анализу сбор бактерий для прямого подсчета с помощью микроскопа в прошедшем свете подсчет частиц в напитках подсчет фитопланктона измерение и подсчет инертных частиц подсчет асбестовых волокон, раковых клеток, адсорбция и элюирование вирусов и подсчет жизнеспособных водопереносимых бактерий [7]. Электрофорез является электрически управляемым процессом, в котором белковые фракции разделяются либо в микропористых ацетатцеллюлозных гелях [8], либо в ультрапористых агаровых или полиамидных гелях. Активному возбуждению гибридизации нуклеиновой кислоты помогает способность нитрата целлюлозы сильно сорбировать ДНК, поэтому и ДНК ДНК-, и ДНК РНК-гибриди-зации могут быть осуществлены на мембранном фильтре [7]. [c.85]

Использование электрофореза для разделения рестрикционных фрагментов дает возможность получать рестрикционные карты — последовательности ДНК с нанесенными на них сайтами разрезания для различных рестриктаз. Первая карта была получена для вируса SV 40, содержащего 5423 пары оснований (рис. 1.2). Использовали рестриктазу Hind III, расщепляющую кольцевую ДНК вируса на 11 фрагментов. Порядок их расположения в ДНК был установлен путем исследований наборов обра- [c.28]

Несмотря на то что применение электрофореза для разделения высокомолекулярных комплексов имеет ряд ограничений как в теоретическом аспекте, так и в отношении возмоишости точного предсказания получаемых в этом случае результатов, суш,ествует несколько электрофоретических методов, очень удобных для разделения вирусов. Классический метод электрофореза с подвижной границей в значительной степени вытеснен зонным электрофорезом. Часто применяют электрофорез на фильтровальной бумаге, смоченной подходяш,им буфером. Однако электрофорез в крахмальном или ацетатно-целлюлозном гелях имеет преимущества перед электрофорезом на бумаге. В настоящее время предпочтение часто отдают электрофорезу в полиакриламидном геле, однако этот метод применим, вероятно, только для мелких вирусов (см. гл. IV, разд. В). [c.43]

Не меньшей популярностью пользуется в настоящее время и метод электрофореза в полиакриламидном геле. Добавляя к раствору акриламида, налитому в стеклянные трубки, различные количества мономеров (например, метиленбисакриламид, этилендиакрилат), образующих в процессе полимеризации поперечные сшивки, можно получить гели с различной степенью связанности [137, 404]. Устойчивость к денатурирующим растворителям, например к 8 М раствору мочевины или 1 %-ному раствору додецилсульфата натрия, составляет еще одно важное преимущество этих гелей. При наложении разности потенциалов белки, пептиды, нуклеиновые кислоты и вирусы передвигаются в этих гелях на характерные расстояния, которые зависят главным образом от их молекулярного веса (или веса частицы), а также от степени связанности сшивок геля. Разделившиеся вещества образуют характерные полосы, которые можно выявить либо с помощью методов окрашивания или локального осаждения, либо (в случае разделения радиоактивных веществ) с помощью метода радиоавтографии (см. гл. XI, разд. Б). Разрешающая способность электрофореза в полиакриламидном геле такова, что с помощью этого метода можно обнаружить и идентифицировать приблизительно 37 видов рибосомных белков [508]. То, что разделение белка на многочисленные полосы происходит в силу действительного различия между белками, а не в результате каких-то артефактов, теперь уже не вызывает солшений. Однако известно, что разделяться на отдельные полосы могут не обязательно совершенно различные вещества, но и такие близкие между собой вещества, как, например, один и тот же белок, у которого часть молекул содержит одну лишнюю амидную (— СО — NH2 С00 ) группу, а другая часть — ацетильную (—NH+— NH — СОСН3) группу [136]. С помощью электрофореза в полиакриламидном геле [c.61]

Методом электрофореза обнаружены мутанты этого вируса, различающиеся аминокислотным составом. Браунит-цер [52] указывает па сходство между С-концевой последовательностью белка вируса fd и С-концевой последовательностью белка его штаммов, которые также имеют палочковидную форму. Однако вместо лизина, стоящего на третьем от конца месте в белке в белках ВТМ и его штаммов находятся дипептиды пролилглицин или про-лилаланин. [c.89]

Электрофорез окажется, повидимому, наиболее полезным в области биохимии в качестве метода очистки белков, антител, ферментов, гормонов, вирусов и т. п. При изучении антител, концентрация которых допускает их наблюдение на диаграммах, можно установить расположение и концентрацию антител путем сравнения изображений, полученных до и после осаждения антител специфическими антигенами. Этот случай изучали ва гиперим-мунной лошадиной и кроличьей сыворотках [55—57]. Однако в большинстве случаев концентрация антител лежит ниже предела чувствительности прибора. В таких случаях необходимо прибегать к исследованию выделенных проб (см. стр. 360) при помощи методов дополнительной фиксации, агглютинации, нейтрализации и т. п. [58—60]. [c.377]

Смотреть страницы где упоминается термин Вирус электрофорез: [c.408] [c.174] [c.140] [c.276] [c.276] [c.81] [c.38] [c.81] [c.82] [c.83] [c.20] [c.350] [c.174] [c.182] [c.43] [c.46] [c.83] [c.84] [c.245] [c.139] [c.155] [c.195] [c.247] [c.317] [c.176] [c.293]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология