Детерминанты антигенные эпитопы

Антигенная детерминанта. См. Эпитоп. Антигенные пептиды. Связываемые молекулами МНС пептидные фрагменты белков, активирующие Т-клетки. [c.556]

Избирательность взаимодействия обусловлена комплементарностью между структурой активного центра антитела и структурой некоторого участка антигена — антигенной детерминанты. Антигенной детерминантой может быть участок поверхности белка, образованный радикалами аминокислот, гаптен или простетическая группа белка (особенно часто полисахаридные группы гликопротеинов). Многие части поверхности одного и того же антигена могут быть антигенными детерминантами (эпитопами). Иначе говоря, к одному антигену может быть несколько разных антител. Например, в молекуле белка лизоцима известны три эпитопа для трех разных антител. Эти эпитопы занимают около 40 % поверхности лизоцима возможно, что и любая часть поверхности лизоцима — потенциальный антиген. [c.477]

Белок содержит несколько разных антигенных детерминант. Некоторые белки могут иметь одну и ту же антигенную детерминанту в нескольких экземплярах (повторные антигенные детерминанты), как, например, в случае белка, состоящего из нескольких идентичных субъединиц. Число антигенных детерминант одного белка можно приблизительно установить по числу антител, которые способны связываться с молекулой антигену это число есть валентность данного антигена. Однако при стерическом несоответствии возможны и такие антитела, которые не в состоянии связываться с эпитопом антигена, и обычно валентность меньше числа антигенных детерминант [108]. В целом, как правило, для белков можно ожидать одну антигенную детерминанту на каждые 5000 Да молекулярной массы антигена [18]. На основании валентности, установленной для белковых антигенов с возрастающей молекулярной массой [108], можно подсчитать, что, по крайней мере, на одну антигенную детерминанту приходится 2500 Да молекулярной массы антител у рибонуклеазы, 3500 Да у белка вируса табачной мозаики, 8800 Да у овальбумина, [c.91]

Большая или меньшая часть антител иммунной сыворотки может реагировать с другим белком, отличающимся от белка, использованного как иммуноген. В этом случае речь идет о перекрестной реакции (схематически изображенной на рисунке 4.2 Б). Эта реакция выявляет присутствие большего или меньшего числа идентичных либо очень похожих антигенных детерминантов у этих двух белков. Антитела, участвующие в перекрестной реакции, могут не иметь одинакового сродства к этим признанным сходным эпитопам. [c.95]

Все преимущества использования моноклональных антител можно оценить, когда появляется возможность рассматривать данные об их антигенных детерминантах (эпитопах) в сочетании с оценками функционального эффекта их взаимодействия с продуктом ОРС. Этот аспект рассматривается в. разд. 6.5. [c.197]

Комплексные антигены (белки, полисахариды) имеют участки, состоящие из немногих аминокислот или углеводов, получившие название эпитопы , или антигенные детерминанты , на которые собственно и формируется специфический иммунный ответ. [c.447]

Принципиально важным является то, что поликлональные антитела даже против одной-единственной антигенной детерминанты гетерогенны как по структуре активного центра, так и по физикохимическим свойствам. В том случае, если антиген поливалентен, например белок, то в сыворотке крови образуются антитела, направленные против каждой индивидуальной детерминанты (эпитопа), что еще более усложняет состав антител. Состав антител зависит от вида животного, а также стадии иммунного процесса. [c.11]

Второй тип методов известен как сандвич -анализ. Методы этого типа применяются сравнительно недавно для определения веществ с молекулярной массой более 1000, имеющих как минимум две антигенные детерминанты (эпитопы). В этих методах избыток связывающих антител прямо или опосредованно связывают с твердой фазой. Вторые меченые антитела против другого эпитопа добавляют или одновременно при связывании с антителами первого типа (одностадийный метод), или после завершения стадий связывания и отмывки (двухстадийный метод). После завершения иммунологической реакции количество связавшегося с твердой фазой вещества непосредственно зависит от количества определяемого вещества в пробе. Уровень фона (неспецифического сигнала) наиболее сильно влияет при низких концентрациях определяемого вещества. В данном случае хорошо подобранная аналитическая система позволяет определять соединения в диапазоне концентраций, составляющем четыре-пять порядков с коэффициентом вариации менее 5%. Чувствительность методики зависит от ошибок при отборе проб, уровня фона и констант связывания антигена с антителами. [c.9]

Антигенные детерминанты эпитопы [c.19]

Она характеризует свойство антигенов реагировать на антитела и связана с определенными элементами структуры антигена. Эти структурные элементы называются антигенными детерминантами, или эпитопами они расположены на поверхности белков и представлены небольшим числом аминокислот. Понятие последовательностных и конформационных детерминантов [99, 100] ввели и уточнили Атассии и Смит [2]. Они различают детерминанты непрерывные и прерывистые . Первые образуются последовательностью аминокислот, соседствующих в первичной структуре белка, и имеют особую конформацию благодаря всей совокупности структуры белка. Антигенные детерминанты прерывистого типа образуются посредством последовательного сочетания аминокислот, не рядом расположенных в первичной структуре белка. Иммунизация нативными белками, по всей видимости, вызывает в основном образование антител, специфич- [c.90]

Окончательная дифференцировка лимфоидных клеток осуществляется под дейстаием антигенов. Антиген — это любая молекула или система молекул (например, клетка), способная индуцировать иммунный ответ. В частности, под воздействием антигена В-клетка превращается в плазматическую клетку, являющуюся фабрикой по производству антител плазматическая клетка секретирует антитела со скоростью около 2000 молекул в секунду. Плазматическая клетка не способна к дальнейшей дифференцировке и пролиферации и погибает через несколько дней. Продуцируемые ею антитела способны специфически реагировать с отдельными участками структуры антигена, так назыааемыми антигенными детерминантами или эпитопами, которых, как правило, у антигена множество. [c.210]

Большинство макромолекул, включая практически все белки и большую часть полисахаридов, могут служить антигенами. Те участки антигена, которые взаимодействуют с антиген-связывающим участком молекулы антитела или же рецептора на лимфоците, называются антигенным детерминантами (или эпитопами). Молекулы, которые хотя и нрисоеди- [c.222]

Среди множества проблем иммунологии, одну из них, если иметь в виду прежде всего чисто познавательный аспект этой области биологических знаний, следует отнести к самой фундаментальной, поскольку во многом она определяет возможность решения остальных. Эта проблема связана с изучением на атомно-молекулярном уровне механизмов узнавания и ответных реакций иммунной системы на появление в организме инфекционных антигенов - чужеродных белков, вирусов, бактерий, патогенных веществ. Важный шаг в познании принципов функционирования иммунной системы был сделан в 1959 г. Ф. Бер-нетом, разработавшим так называемую теорию клональной селекции, которая и по сей день пользуется всеобщим признанием [265]. Первоначально теория имела сугубо гипотетический характер. Однако заложенные в ней идеи оказались плодотворными и она вскоре смогла стать для экспериментальных исследований не только системой основополагающих научных принципов, но и конкретной программой поиска. В настоящее время эта программа выполнена и сегодня теория клональной селекции представляет собой скорее констатацию надежно установленных фактов, чем концептуальную основу дальнейшего развития иммунологии [266]. Специфичность антигенной реакции лимфоцитов, согласно теории Бернета, обусловлена наличием на поверхности Т- и В-клеток рецепторных белков, избирательно взаимодействующих с определенными антигенами. Связывание с ними рецепторов активирует клетку и вызывает ее эффективное размножение. Таким образом стимулируется пролиферация лимфоцитов, содержащих на своих поверхностях именно те рецепторы, которые, с одной стороны, комплементарны чужеродному антигену, а с другой - могут адекватно сигнализировать клетке о необходимости антиген-специфцч-ного ответа. По теории клональной селекции иммунную систему образуют миллионы различных клеточных семейств или клонов, каждый из которых состоит из Т- или В-лимфоцитов, имеющих общих предшественников. Так как во всех случаях клетка-предшественница детерминирована к синтезу определенного антиген-специфичного белка рецептора, то все клетки одного клона имеют одинаковую антигенную специфичность и, следовательно, могут ответить на сигнал рецептора только одним, присущим клеткам лишь данного клона, способом. Антигенами, как правило, являются белки и полисахариды. На поверхности этих молекул имеются участки, называемые антигенными детерминантами или эпитопами, которые предрасположены к взаимодействиям с антигенсвязывающим участком антитела В-лимфоцита или 3 67 [c.67]

Исходя из серологических свойств, антиген лучше всего определить как молекулу, которая специфически связывается с антителами своими антигенными детерминантами, или эпитопами (см. разд. 2). Антигены могут быть неиммуногенными субъединицами иммуногена, свободными гаптенами, гаптена-ми, связанными с различными носителями, или природными молекулами, имеющими некоторые общие детерминанты с иммуногеном. Последнее обстоятельство служит причиной перекрестных реакций между антигенами (см. разд. 5). [c.19]

Молекулы, вызывающие образование антител, называются антигенами. Каждая молекула антигена имеет набор антигенных детерминант, называемых эпитопами. Эпитопы одного антигена (Аг1) обычно отличаются от эпитопов другого (Аг2). Некоторые антигены (АгЗ) имеют повторяющиеся эпитопы. Стереохимиче-ская конфигурация эпитопов распознается антителами и Т-клеточными рецепторами, т. е. факторами приобретенного иммунитета. Каждая молекула антитела распознает не всю молекулу антигена, а один ее эпитоп. Даже самые простые по строению микроорганизмы обладают множеством различных антигенов белковой, липидной или углеводной природы. [c.10]

Для использования моноклональных антител в изучении белковых антигенов важно знать, с одной и той же или разными антигенным и детерминантами (эпитопами) антигена связываются полученные антитела. Эпитопную специфичность антител определяют методом их конкурентного связывания. Антитела одного клона конъюгируют с пероксидазой (с. 317). Берут 96-луночный микропланшет для ИФА и сорбируют в лунках антиген, как обычно (с. 320). После тщательной отмывки в каждую из 12 лунок вносят по 75 мкл культуральной жидкости того же или других клонов или раствор очищенных антител — 100 мкг/мл (рис. 42). Все остальные лунки содержат 50 мкл фосфатного буфера с 1%-ным БСА. Делают серийные разведения антител, перенося по 25 мкл раствора из каждой лунки в соседнюю (рис. 42) на 5—6 лунок. К каждой лунке добавляют 10 мкл меченных пероксидазой автител в концентрацию 20 мкг/мл. Инкубируют 2—4 ч при комнатной температуре при постоянном встряхивании. После тщательной [c.322]

Антиген — различные антигенные детерминанты (эпитопы) представлены цифрами на антигене, изображенном в виде прямоугольника (этот актигеи не несет повторных эпитопов). [c.94]

Основной принцип ELISA — специфическое связывание первого антитела с мишенью. Если молекула-мишень представляет собой белок, то его очищенный препарат обычно используют для получения антител, при помощи которых затем и выявляют данную мишень. Антитела, которые образуются в сыворотке (антисыворотке) крови иммунизированного животного (обычно кролика), связываются с разными антигенными детерминантами (эпитопами) моле-кулы-мишени. Такую смесь антител называют поликлональным препаратом. Использование поликлональных антител имеет два недостатка, существенных для некоторых методов диагностики 1) содержание отдельных антител в поликлональном препарате может варьировать от одной партии к другой 2) поликлональные антитела нельзя применять, если необходимо различить две сходные мишени, т. е. когда патогенная (мишень) и непатогенная (не-мишень) формы различаются единственной детерминантой. Однако эти проблемы вполне разрешимы, поскольку сейчас научились получать препараты антител, выработанных к одной антигенной детерминанте, т. е. препараты моноклональных антител. [c.184]

Моноклональные антитела У млекопитающих в ходе эволюции выработался сложный набор клеточных систем, защищающих организм от токсичных веществ и инфекционных агентов. Составной частью защитной реакции является индуцированная выработка клетками лимфатической системы специфических белков (антител), которые соединяются с чужеродными веществами (антигенами) и при помощи других белков иммунной системы, включая системы комплемента, нейтрализуют их эффект. В ответ на иммунологический стимул каждая антителопродуцирующая клетка синтезирует и вьгделяет единственный вид антител, которые с высоким сродством распознают отдельный участок (эпитоп, антигенную детерминанту) молекулы антигена. Поскольку в мо- [c.184]

Моноклональные антитела (Mono lonal antibodies) Однотипные антитела, строго специфичные в отношении одного эпитопа (антигенной детерминанты). Синтезируются гибридомами - клеточными гибридами, полученными при слиянии нормальных антителообразующих клеток с миеломной опухолевой клеткой, способной к неограниченному росту. Некоторые мие- [c.553]

Молекулы антител имеют два центра связывания с антигенными детерминантами (эпитопами) (рис. 30.8). Если эпитопов в молекуле антигена больше, то Ig образуют сеть антител на поверхности антигена. Комплекс антиген—ан- [c.485]

Наличие у большинстве антигенов множества эпитопов (антигенных детерминант) приводит к активации большого числа клонов В-лимфоцитов. имеющих рецепторы соответствующей специфичности. В результате образующиеся плазматические клетки секрети-руют сложный набор антител, реагирующих с разными участками поверхности антигена, т. е. наблюдается поликлональный ответ. Получить обычной иммунизацией антитела к заданной детерминанте очень сложно. [c.211]

Протективные антигены — это совокупность антигенных детерминант (эпитопов), которые вызывают наиболее сильный иммунный ответ, что предохраняет организм от повторного инфицирования данным возбудителем. [c.55]

Иммуноглобулины сами могут действовать как антигены, и можно получить антитела, которые будут узнавать антигенные детерминанты как константных, так и вариабельных участков цепей 1 . Антигенные детерминанты (эпитопы) вариабельных областей Ь- и Н-цепей, расположенные на антиген-связывающем участке антитела, называются идиотопами (рис. 18-38). Каждый специфический антиген-связывающий участок имеет свой характерный набор идиотопов, поэтому у животного, обладающего миллионами различных антиген-связывающих участков, будут также миллионы различных идиотопов. Поскольку в организме каждый отдельный идиотои присутствует в очень малом количестве, животное не толерантно к своим собственным идиотоиам, и если его надлежащим образом иммунизировать каким-либо из его собственных антител, организм животного будет давать и Т-, и В-клеточные иммунные ответы. [c.252]

Определенное сходство наблюдается между тимопентином и детерминантом гемагглютинина чумы, а также между детерминантом холеротоксина и интерфероном. Можно предполагать, что в результате длительного эволюционного процесса возбудители особо опасных инфекций включили в состав своих антигенных детерминантов (эпитопов) пептидные участки, имитирующие аминокислотные последовательности пептидов иммунной системы человека. [c.52]

В-клеточные эпитопы (детерминанты) находятся, как правило, на внепшей поверхности антигена и относятся к так называемому коиформациониому типу, т.е. обладают третичной структурой и составляют часть общей пространственной организации антигенной молекулы. Локализация на внеишей поверхности определяет их гицрофильность. На рис.1.4 представлена схев1а строения миоглобина спермы кита, полученная на основании данных рент- [c.42]

В опытах с комплексным антигеном белок-гатттен, где белок выступал в качестве носителя для гаптена, было показано, что Т-клетки распознают носитель, а В-клетки — гаптен. Несущая часть антигена — это другое название Т-клеточного эпитопа. Т-клеточ-ные эпитопы включают большее число аминокислотных остатков по сравнению с В-клеточными эпитопами и относятся к так называемому линейному типу, поскольку для его распознавания не требуется сохранения пространственной организации. Помимо детерминант, распознаваемых Т-клеточным рецептором, антигенный фрагмент включает участок, взаимодействующий с продуктами МНС. Этот участок получил название агретоп. [c.50]

На поверхности молекулы сложного антигена можно выявить )ункциональные группы или остатки, обусловливающие антиген-яую специфичность, называемые антигенными детерминантами или титопами. Число эпитопов на поверхности молекулы определяет залентность антигена. [c.10]

Антитела, распознающие минимальные структурные различия между родственными молекулами одного вида животных, часто трудно получить при ксеноиммунизации, поскольку иммунный ответ преимущественно направлен против сильных антигенных различий донора и реципиента. Иногда удается индуцировать специфическую толерантность ио отношению к им-мунодоминантным эпитопам и, таким образом, изменить специфичность гуморального ответа. Данный метод может использоваться для получения как поликлональных, так и моноклональных антител. Мы успешно получали овечью антисыворотку ко всем аллотипическим антигенам локусов а я Ь кроличьих иммуноглобулинов,. вводя -в/в новорожденным ягнятам 500 мг пула очищенного ультрацеитрифугированием кроличьего IgG, лишенного какой-либо одной аллотипической детерминанты в возрасте трех месяцев эту аллель вводили с ПАФ внутримышечно. [c.54]

Однако при равновесной седиментации невозможны кинетические измерения. Она неэф )ективна также при низкой аффинности, так как обычно нельзя создать достаточную концентрацию эпитопов, когда антигенные детерминанты составляют ничтожную часть всей массы частицы. Крупные антигенные частицы привносят также весь набор усложнений, связанных с поливалентностью и гетерогенностью поверхностей. [c.44]

Принято считать, что обработка белков ДСН вызывает у них сильные конформационные изменения, которые могут приводить к изменению структуры или к полной утрате антигенных детерминант и активных центров ферментов. В то же время без такой обработки невозможно добиться того, чтобы все белки несли отрйцательный заряд и мигрировали к аноду в условиях электрофоретического фракционирования и переноса. То, что обработанные ДСН белки после переноса проявляют антигенную активность, может объясняться их частичной ренатурацией после удаления додецилсульфата в ходе отмывки блота. Другое возможное объяснение заключается в том, что антигенная активность, обнаруживаемая на блотах, связана только с теми эпитопами белков, которые зафиксированы непосредственно на уровне первичной структуры. Не исключено, что возможность обнаружения антигенов после обработки ДСН и переноса в действительности обусловлена сочетанием обоих названных факторов. В пользу первого предположения свидетельствуют результаты обнаружения как нативных, так и обработанных ДСН белков с помощью различных моноклональных антител. Более того, нам удавалось непосредственно зарегистрировать фермен- [c.352]

Генно-инженерная технология получения гибридных белков позволила разработать эффективный метод наработки коротких пептидов для анализа их биологической активности. Как и в случае клонотек генов, клонотеки пептидов, полученные генно-ин-женерными методами, представляют собой большой (часто исчерпывающий) набор коротких пептидов. Недавно сделанные наблюдения позволяют рассматривать клонотеку пептидов одновременно и в качестве клонотеки эпитопов белков. Во-первых, короткие пептиды могут включать все основные остатки аминокислот, играющие главную роль во взаимодействии с антителами, и они в состоянии имитировать крупные антигенные детерминанты белков. Во-вторых, в большинстве случаев нековалентные связи, образующиеся между немногими наиболее важными остатками аминокислот белковых лигандов и их рецепторами, вносят основной вклад в общую энергию взаимодействия лиганд-рецептор. С учетом этого любой пептид можно рассматривать как потенциальный лиганд, гаптен или часть антигенной детерминанты более крупных полипептидов, а любую клонотеку пептидов - как клонотеку эпитопов белков или потенциальных лигандов для соответствующих белковых рецепторов. [c.338]

Клонотеки пептидов и эпитопов потенциально могут быть использованы также для скрининга иммунных сывороток для выявления пептидов, специфически взаимодействующих с защитными антителами. Такие пептиды будут имитировать антигенные детерминанты патогенных организмов и служить мишенями [c.344]

Поликлональная антисыворотка, полученная в результате иммунизации животного индивидуальным антигеном, содержит целый набор антител, принадлежащих к различным классам иммуноглобулинов, которые взаимодействуют с разными эпитопами антигена, обладают разной аффинностью и присутствуют в неодинаковых пропорциях у отдельных животных, а также в разные периоды жизни индивидуального организма. Эпитопом (антигенной детерминантой) называют часть молекулы антигена, распознаваемую молекулой антитела или рецептора, специфичного в отношении данного антигена, и взаимодействующую с ним. Как следует из названия, моноклональные антитела (mAb) представляют собой иммуноглобулины, продуцируемые одним клоном иммортализованных В-лимфоцитов, и представляют со- [c.403]

У mAb известны два механизма перекрестных иммунологических реакций с разными антигенами. В одном случае, причина кроется в антигене, и это происходит, когда разные антигены обладают одинаковыми эпитопами (например, лактатдегидрогена-за и изоцитратдегидрогеназа в области NAD-связывающего сайта). В другом случае, mAb (обычно класса IgM) сами по себе могут взаимодействовать с альтернативными антигенными детерминантами, сформированными разными остатками аминокислот. Последнее свойство иногда сильно ограничивает применение конкретных mAb для диагностики и терапии. Полиспецифичность, как правило, является свойством mAb, обладающих низкой аффинностью. [c.407]

Используя этот метод были определены линейные антигенные детерминанты изофермента С пероксидазы хрена (рис. 3) [Аммосова и др., 1997]. Показано, что линейные антигенные детерминанты фермента, некоторые из которых пространственно локализованы в регулярных элементах вторичной структуры а-спиралях, расположены как с наружи, так и внутри белковой глобулы. Часть эпитопов локализована в петлях и изгибах пептидной цепи пероксидазы, обладает нерегулярной конформацией. В составе полученных антигенных детерминант наиболее часто встречались десять аминокислот — Arg, Ser, Ala, Thr, Leu, Ile, Val, Phe, Pro, Asn. В состав эпитопов входили заряженные аминокислоты Arg и Asp, неполярные аминокислоты Ala, Leu, Ile, Val, Phe, Pro и Trp и незаряженные полярные аминокислоты — Asn, Thr, Ser, Gln, Tyr, Gly (составляющие 13,4, 51,2 и 35,4% соответственно от общего состава детерминант). Таким образом, на поверхности белковой глобулы фермента преиму- [c.28]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология