Фиксация растительного материала

Фиксация растительного материала. Из- [c.22]

Таким образом, оптимальными способами фиксации растительного материала являются его лиофильное высушивание или фиксация в кипящем метаноле, хотя вполне возможно, что и эти формы фиксации не лишены недостатков. [c.23]

Температурная фиксация растительного материала проводится в сушильном шкафу, лучше с принудительной вентиляцией. Растительный материал помещают в пакеты из плотной бумаги типа крафт и загружают в сушильный шкаф, предварительно нагретый до 105-110°С. После загрузки выдерживают температуру 90-95°С в течение 10-20 мин в зависимости от свойств растительного материала. При такой температурной обработке за счёт паров воды происходит инактивация растительных ферментов. [c.353]

Фиксация растительного материала. Для фиксации растительный материал помещают в предварительно охлажденную ступку, заливают жидким азотом и растирают до порошкообразного состояния. [c.9]

Метод предназначен для количественного определения общего содержания ИУК (суммы связанной и свободной ИУК). Его можно использовать также при измерении количества свободной ИУК, которая, по-видимому, и выполняет регуляторные функции. Для этого нужно анализировать не подвергаемый щелочному гидролизу метанольный экстракт растительных тканей. Следует заметить, однако, что при быстрой фиксации растительного материала кипящим метанолом удается обнаружить лишь ничтожно малое количество свободной ИУК или даже совсем не удается ее выявить. [c.22]

Во втором опыте проводилась фиксация растительного материала для определения нуклеиновых кислот через 20 ч после обработки ретардантом, через 44 ч (через день) и через 140 ч (на пятый день после обработки). [c.59]

Для определения сахаров хроматографическим методом лучше брать свежий растительный материал. В навеске материала для анализа должно содержаться около 100 мг сахаров. Таким образом, для листьев многих растений навеска будет составлять 10 г, а для плодов, овощей и ягод 1—5 г. Для фиксации материала используют спирт. [c.75]

Фиксация растительного материала [c.353]

Окончание фиксации проверяют следующим образом вынимают из шкафа образцы, разворачивают - растительный материал должен быть влажным и вялым при этом он должен сохранить свою окраску, т.е. не пожелтеть. Дальнейшее высушивание пробы проводят при доступе воздуха в открытых пакетах при температуре 50-60°С в течение 3 - 4 ч. Превышать указанные интервалы температуры и времени не следует. Длительное нагревание при высокой температуре приводит к термическому разложению многих азотсодержащих веществ и карамелизации углеводов растительной массы. [c.353]

Задачи исследователя - сократить до минимума срок от взятия пробы до проведения анализа или фиксации растительного материала. Снижения скорости реакций можно добиваться работой со свежими растениями на холоде в климатокамере (+ 4°С), а также кратким хранением в бытовом холодильнике на нижней полке. [c.352]

При определении амидов необходимо обратить внимание на фиксацию растительного материала, так как эти соединения легко разлагаются под влиянием повышенной температуры и под влиянием органических кислот растений. Растения с большим содержанием органических кислот необходимо фиксировать в спирте, это в основном [c.374]

Фиксация и экстракция растительного материала, содержащего ауксины и ингибиторы, очистка экстракта, его хроматографическое разделение и проявление хроматограмм с помощью цветных реакций и биотеста. [c.49]

Хранение. Обычно высушенный материал хранят в бюксах. Бюксы переносят в эксикаторы и хранят над прокаленным хлористым кальцием при температуре О или -f-2° в холодильнике. Влияние длительного хранения материала на содержание в нем физиологически активных веществ при этом не изучалось. С целью выяснить этот вопрос нами в черенки фасоли была введена ИУК, черенки высушивали лиофильным способом и подвергали стандартной процедуре хранения. Оказалось, что такой способ фиксации позволяет хранить растительный материал, содержащий ИУК, по крайней мере до 1 года. При этом заметного уменьшения экзогенной ИУК в тканях не наблюдалось. [c.9]

Подготовка материала. Операция включает фиксацию, высушивание и измельчение растительного материала. Фиксацию проводят жидким азотом или горячим водяным паром. Используемые для этих целей другие способы фиксации, как показали наши исследования, оказались менее надежными. Фиксированный в жидком азоте материал сушат лиофильным способом [4], а после фиксации горячим паром — в термостате при 50—60°. Высушенный материал измельчают на кофейной мельнице и непосредственно подвергают анализу или же хранят в эксикаторе в холодильнике при - - 2°. Специальные исследования показали, что измельченный материал можно хранить в таких условиях до шести месяцев при анализе свободных и связанных фенолкарбоновых кислот, кумаринов и флавоноидных агликонов и до года при изучении флавоноидных гликозидов. [c.40]

При отсутствии возможности фиксировать растительный материал жидким азотом применяют фиксацию паром. Для этого материал помещают на 5 мин. в баню, насыщенную парами этилового спирта, и затем подвергают экстракции. [c.51]

Фиксация и сушка растительного материала. Фиксация растительных тканей жидким азотом и последующая лиофильная сушка позволяют наиболее полно сохранить природные ингибиторы роста. Однако, если условия не позволяют фиксировать материал этим способом, можно проводить фиксацию в термостате при +105°, так как абсцизовая кислота — вещество термостабильное [6]. Фиксированный материал досушивают при 60° до воздушно-сухого состояния и хранят в эксикаторе над прокаленным хлористым кальцием. [c.91]

Ход определения. Для определения сахаров, как и для большинства других биохимических анализов, используют свежий растительный материал. При необходимости фиксировать материал, его следует замораживать жидким азотом или твердой углекислотой и затем высушивать лиофилизацией. Удовлетворительные результаты дает также фиксация материала кипящим 96%-ным спиртом. [c.70]

Для учета содержания нуклеиновых кислот растительный материал фиксировался 96%-ным этиловым спиртом из расчета 5 г сырой ткани на 100 мл спирта. Пробы отбирались через 24, 48 и 72 ч после обработки. Для фиксации брались 10 растений каждого варианта по одному из каждого сосуда, развитые жизнеспособные листья, начиная со второй пары настоящих листьев, и верхняя часть стебля, начиная от третьего междоузлия. Как раз в этой части стебля были обычно наиболее сильно выражены формативные изменения под действием 2,4-Д. [c.10]

Часто сохраняется и белый или окрашенный фон ткани. Напечатанную ткань высушивают, а затем фиксируют насыщенным паром при 101—105 °С (синтетические волокна 125—130°С) или горячим сухим воздухом (термофиксация). В других случаях окраску проявляют в водном растворе, содержащем необходимые реактивы. После фиксации материал тщательно промывают. Краска для печатания является раствором или, для кубовых, дисперсных красителей и пигментов, дисперсией, содержащей кроме красителя коллоидный раствор загустителя, препятствующего растеканию краски (крахмал, растительный клей и др.) и различные реагенты (в зависимости от применяемого красителя, волокна и способа печати, см. стр. 418). [c.242]

Содержание гиббереллинов в растительных тканях крайне незначительно, поэтому необходимо последовательное сочетание биологических и физико-химических методов. Эти методы обычно сводятся К фиксации материала, неоднократной экстракции различными органическими растворителями [10, 11], к анализу экстрактов методами хроматографии на бумаге [12—14], на тонком слое силикагеля [15, 16] и методами электрофореза [17], а вещества, близкие к гиббереллинам, выявляются на хроматограммах и электрофоре-граммах различными биологическими и физико-химическими методами [18—21]. Основным достоинством биологических методов является их высокая специфичность, но зато они громоздки, мало точны и длительны физико-химические методы отличаются простотой анализа, точностью, но малой специфичностью, поэтому опре- [c.50]

Количественное определение сахаров с применением хроматографии на бумаге включает в себя следующие основные операции а) фиксацию растительного материала б) экстракцию сахяров и очистку вытяжки от белков и других примесей в) распределительную хроматографию сахаров на бумаге г) элюцию сахаров с бумаги д) определение их содержания в элюатах. [c.227]

Микрофотометрическое исследование проводят как на фиксированных (белки, НК), так и нефикспрованных (липиды и ферменты) препаратах. Для НК более достоверные количественные данные могут быть получены при фиксации растительного материала смесью Карнуа или Беккера. Заливку в парафин, изготовление блоков и получение срезов проводят согласно общепринятой гистологической технике. [c.134]

Выбор образца должен производиться с некоторой осторожностью. Образец должен быть наименьших размеров, сравнимых с размерами деталей, которые нужно исследовать. С образцами малых размеров проще обращаться, и они более адекватно обрабатываются в процессе фиксации и обезвоживания. Одним из наихудших источников загрязнения в РЭМ является сам образец. Образцы малых размеров могут быть наиболее адекватно застабилизироваыы и обезвожены, что уменьшает вероятность выделения летучих компонент внутри микроскопа. Частицы ткани размером до 1—2 мм могут быть извлечены хирургическим путем из многоклеточных организмов было бы желательно получать более мелкие частицы растительного материала. Культура ткани, одиночные клетки, микроорганизмы и органеллы изолированных клеток либо могут быть собраны, переработаны в суспензии и помещены в капсулы из агара до обработки, либо их можно осадить и прикрепить на подходящую подложку, например стекло, свежий скол слюды или на диски из металла, совместимого с тканью, с пластмассовым по- [c.222]

Как видно из рис. 34, проростки в возрасте 25 дней содержат лишь (—)-эпикатехин с В) 0,56. Такое же значение Н) имеет и (+)-катехин, но, как указывалось выше (стр. 26), (+)-катехин образуется, по-видимому, как артефакт из (- -)-катехина при горячей фиксации или экстракции растительного материала. В данном случае проростки перерабатывали без нагревания, скорее даже с охлаждением за счет испарения ацетона нри растирании. Поскольку же (-f)-кaтexин на хроматограмме располагается вместе с (—)-эпигаллокатехингаллатом, возможность его присутствия в проростках, по крайней мере в данном случае, исключается (пятно (—)-эпигаллокатехингаллата отсутствует). [c.104]

Предварительная обработка материала. Для анализа берут навеску из 2—5 г свежего растительного материала, содержащего приблизительно 2—10 мг РНК и 1—2 мг ДНК. Фиксацию навески проводят 50 мл кипящей смеси 96%-ного этанола с 100%-ным ацетоном (3 1) в течение двух минут, после чего навеску гомогенизируют в этой же смеси растворителей и последовательно обрабатывают смесью 96%-ного этанола с 85% -ным ацетоном (1 1), 85%-ным ацетоном, серным эфиром, 85%-ным ацетоном [7]. Осадок отделяют высокоскоростным центрифугированием, затем охлаждают и добавляют 10—20 мл тщательно охлажденной 0,3 н. НСЮ4. [c.34]

Фиксация материала. Растительный материал (10—20 г) фиксируют жидким азотом, для чего навеску ткани помещают в предварительно охлажденную ступку, заливают двумя порциями жидкого азота и растирают до порошкообразного состояния. Охлаждение растительного материала останавливает работу окислительных ферментов и дает возможность наиболее полно сохранить гиббереллины. Величина навески определяется содержанием гиббереллинопо-добных веществ в данном объекте и подбирается эмпирически. [c.51]

Экстракция материала. Для извлечения природных гибберелли-ноподобных веществ используют 96%-ный этиловый спирт. После фиксации навеску растительного материала заливают двухкратным объемом этанола. Материал экстрагируют на холоде (+3 — +5°) в течение 20 час. при встряхивании. Затем этанольный экстракт отфильтровывают под вакуумом, и растительный остаток дважды дополнительно экстрагируют небольшим объемом спирта. [c.51]

При фиксации паром растительный материал измельчают в ста-канчатом гомогенизаторе (на 1000 об1мин), заливают этиловым спиртом в двухкратном объеме и трехкратно гомогенизируют по 5 мин. Экстракт отфильтровывают, а растительный остаток дважды промывают спиртом. [c.51]

Так как образец в конечном итоге исследуется в микроскопе в вакууме, вода либо должна быть удалена, либо давление ее паров должно быть уменьшено понижением температуры образца. Нет сомнения в том, что химическое обезвоживание приводит к потере легко диффундирующих веществ из клеток и тканей, вызванной химической фиксацией. Хотя критические сравнительные исследования не производились, оказалось, что не существует большой разницы в воздействии этанола, метанола или ацетона в качестве обезвоживающих реактивов. Однако в работе [421] было установлено, что в растительном материале, обезвоженном диметоксипропаном, обнаружена существенно лучшая сохранность ионов (Ыа+, К+, С1 ) по сравнению с обезвоживанием в ацетоне. Можно обойтись без классических процедур обезвоживания, используя инертные процедуры обезвоживания, предложенные в [422], водно-растворимые смолы, метод заливки в глутаральдегиде-мочевине [423] или пропускание материала, прошедшего фиксацию в глутаральдегиде, через глутаральдегид с возрастающимп концентрациями вплоть до 50%, после чего ткань переносится прямо в эпон-812 [404]. Другая процедура [424] заключается в инфильтрации фиксированных образцов раствором поливинилового спирта (МШ 14 000) с возрастающими концентрациями вплоть до конечной 20%-ной концентрации. Вода затем удаляется путем диализа, а образовавшийся твердый гель связан поперечными связями с глутаральдегидом. Однако оказывается, что эти процедуры незначительно снижают потерю растворимых материалов из исследуемых образцов. Простая сушка образца на воздухе также вызывает перераспределение элементов. Таким же образом процедура сушки в критической точке, которая обычно проводится в конце фиксации и обезвоживания, по всей видимости, приведет к слабому различию в концентрации растворимых веществ, которые давно уже были удалены в процессе [c.283]

Для всех полимеров, а осо бенно для жесткоцепных, к которым относится целлюлоза, процессы десорбции растворителя или выделения полимера из раствора-(в частности, при омылении водорастворимых эфиров целлюлозы) сопровождаются ири их относительно быстром проведении фиксацией неравновесного состояния (вследствие стеклования полимера), что соответственно приводит и к возникновению неотрелаксированных внутренних напряжений. Это имеет место, в частности, при производстве В1ИСКозных волокон и при сушке целлюлозных материалов. При последующем увлажнении целлюлозный материал стремится восстановить то состояние, которое он имел перед удалением влаги (в области перехода в стеклообразное состояние). Поэтому искусственные целлюлозные волокна (а также волокна растительного происхождения, подвергшиеся водным обработкам и быстрой сушке) показывают повышенную набухаемость в воде, которая достигает иногда 100— 150 мае. %. Только миогократная тепловлажностная обработка приводит 1К относительно полной релаксации внутренних напряжений и к установлению значений сор- бции, приближающихся к тем, которые дает теоретический расчет, сделанный исходя из предположения об энергетически прочном связывании одного моля воды одним молем гидроксильных групп целлюлозы в аморфном состоянии). Для вискозного волокна, степень кристалличности которого не превышает 30—40%, это отвечает приблизительно поглощению 22—25% воды от массы целлюлозы. [c.226]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология