Распределительная хроматография сахаров

Впервые разделение углеводов методом распределительной хроматографии на ионообменных смолах в смесях растворителей различной полярности было описано в 1952 г. [1]. В последние годы метод был значительно усовершенствован. В обзорной статье [2] приведены данные о влиянии ряда факторов на разделение, а также примеры использования метода. В качестве элюента при разделении сахаров и их производных наиболее пригоден водный спирт, и далее речь будет идти только об этом элюенте. [c.55]

Распределительная хроматография с неподвижной гидрофильной фазой наиболее пригодна для разделения веществ, хорошо растворимых в воде или способных образовывать растворимые в воде соли. К таким веществам относятся сахар, аминокислоты, многие органические красители, большая часть алкалоидов, моно- и поликарбоновые кислоты, спирты и т. д. Нередко для разделения веществ этого типа адсорбционная хроматография совершенно непригодна. [c.481]

Центральной задачей при получении олигосахаридов почти из любого источника является выделение индивидуальных соединений из смеси моно- и олигосахаридов. Для этой цели разработано несколько методов, основанных на хроматографии . Наиболее старым из них является распределительная хроматография на целлюлозе . Для элюирования обычно используют системы растворителей, аналогичные тем, которые применяются для бумажной хроматографии сахаров (см, гл, 14), Этот метод позволяет осуществлять вполне удовлетворительное разделение, однако характеризуется малой емкостью колонок и требует довольно много времени. Более эффективна адсорбционная хроматография на смеси угля и целита (см., например, " ). С таких колонок моносахариды обычно элюируются водой, а олигосахариды элюируются в порядке возрастания степени полимеризации водно-спиртовыми смесями с увеличивающейся концентрацией спирта. В последние годы такой метод стал основным способом разделения смесей олигосахаридов. Смеси высших олигосахаридов хорошо разделяются гель-фильтрацией на сефадексе Г-25 . Однако для низших олигосахаридов (степень полимеризации 2—4) этот способ мало эффективен . [c.425]

Полный гидролиз полисахарида проводят для установления природы и соотношения составляющих его моносахаридных остатков. Качественный анализ гидролизата в настоящее время неизменно выполняют с помощью распределительной хроматографии на бумаге, что требует лишь микроколичеств сахаров и вместе с тем дает возможность идентифицировать присутствующие нейтральные, основные и кислые моносахариды. По хроматографии углеводов существует обширная литература [91, 97, 127, 131, 162]. Было испытано множество систем растворителей и много обнаруживающих реагентов как специфических, так и неспецифических, и составлены таблицы относительных скоростей движения сахаров на бумажных хроматограммах [131]. Для окончательной идентификации определенного сахара не достаточно одного только хроматографического анализа. [c.303]

Структурный анализ олигосахаридов проводят классическими методами [171], которые включают гидролиз, метилирование и периодатное окисление. Применение бумажной хроматографии, микрометодов окисления йодной кислотой [100] и тетраацетатом свинца [174], а также использование газо-жидкостной распределительной хроматографии для анализа метилированных сахаров [31, 125, 136] значительно уменьшает количество олигосахарида, требуемое для структурного анализа. [c.304]

Способность к образованию эфиров борной кислоты используют при разделении сахаров методом распределительной хроматографии и электрофореза на бумаге, методом ионообменной хроматографии на смолах и угле. [c.53]

Время удерживания сахаров при разделении методом распределительной хроматографии на полистирольных сульфокатионитах. .................. 152 [c.82]

Порошковые целлюлозы используют в качестве носителей для жидкостной распределительной хроматографии веществ различных классов сахаров, глицеридов, карбоновых и аминокислот, витаминов, пестицидов, неорганических ионов и многих других веществ. [c.196]

Реактив для детектирования редуцирующих сахаров в хроматографах, рабо тающих по принципу распределительной хроматографии (см. разд. 72, 73). В при сутствии щелочи бесцветный реактив восстанавливается в сине-фиолетовое про изводное, растворимое в водно-спиртовых смесях (в водных растворах окрашен ный продукт выпадает в осадок). Продолжительность реакции при 80 С — 1 мин Чувствительность анализа — моль. [c.380]

Использование метода распределительной хроматографии на бумаге для разделения углеводов имеет ряд преимуществ перед, другими способами, так как дает возможность в небольшой пробе провести анализ сложной смеси сахаров. [c.155]

Такие слои используют для распределительной хроматографии гидрофильных веществ, например спиртов, аминокислот природных красителей, сахаров, фосфатов и т. д. [c.105]

Применение. Распределительная хроматография стала эффективным средством разделения близких по химическим свойствам веществ. Типичным примером служит разделение многочисленных аминокислот, образующихся при гидролизе белка, разделение и определение родственных алифатических спиртов и разделение сахаров. Рис. 29-15 иллюстрирует применение метода для разделения карбоновых кислот. В этом случае в качестве твердого носителя использовали силикагель, в качестве стационарной фазы — [c.281]

Методом распределительной хроматографии на бумаге были разделены сахара. Для их идентификации они были превращены нагреванием с кислотой в производные фурфурола, после чего была применена цветная реакция с нафторезорцином. Этим методом были разделены сотни веществ других классов, в том числе алкалоиды, порфирины и птерины, пенициллины, природные и синтетические пигменты антрахинонового ряда, антоцианидины, глюкозиды флаванолов, продукты алкилирования 3,5-динитроанилина, фенолы и фенолокислоты в связи с исследованием ферментативного окисления ароматических соединений, алифатические кислоты и неорганические соединения. В условиях распределительной хроматографии на бумаге фенолокислоты адсорбируются слабее, чем соответствующие амиды. [c.1513]

Силикагель применяется при хроматографировании углеводородов, высших жирных кислот, их сложных эфиров, нитро- и нитрозопроизводных, аминов и сахаров. Применяемый для распределительной хроматографии силикагель не должен обладать адсорбционными свойствами, для чего его предварительно пассивируют. Для уменьшения адсорбции органических кислот на силикагеле условия его получения выбирают так, чтобы поверхность его была сильнокислой. [c.78]

Разделение сахаров на колонках методом распределительной хроматографии На колонке размером 1 м X 3,45 см , наполненной смесью [c.903]

Для разделения полученных после гидролиза или метанолиза метиловых эфиров моносахаридов ли их метилгликозидов применяют различные виды хроматографии распределительную хроматографию на бумаге и колонках с целлюлозой, тонкослойную хроматографию на силикагеле. Высокой разрешающей способностью при использовании небольших количеств веществ обладает га зо-жидкости а я хроматография. Перед анализом смесь, содержащую метиловые эфиры моносахаридов, дополнительно ацетилируют или метилируют для повышения летучести производных моносахаридов. Этим методом удается разделить не только метилированные сахара, но и а- и р-аномеры. [c.82]

Газо-жидкостная распределительная хроматография метилированных сахаров. [c.141]

Газо-жидкостная распределительная хроматография производных углеводов. Часть 1. Разделение ацетатов многоатомных спиртов и сахаров. [c.137]

Распределительная хроматография сахаров на бумаге. Теоретические осиоьы метода и общие положения методики были описаны на с. 27. [c.212]

Эфиры борной кислоты и ее производных. При взаимодействии моносахаридов и их производных, содержащих г<ис-а-гликольные группировки, с борной кислотой или ее солями образуются устойчивые отрицательно заряженные комплексы. Это свойство нашло широкое применение для разделения сахаров методом распределительной хроматографии и электрофореза на бумаге а также методом ионообменной хроматографии на смолах и угле Борные эфиры сахаров были в свое время успешно использованы для установления конфигурации аномерного центра (см. стр. 34). Несмотря на то что комплексы сахаров с борат-анионом известны давно, строение их было выяснено только недавно Было показано, что существуют два типа боратных комплексов монокомплекс XXVII и дикомплекс XXVIII [c.148]

Через несколько часов, когда можно ожидать разделения аминокислот, бумагу вынимают из ванночки и растворитель удаляют высуи иванием. После этого для лучшего разделения аминокислот лист бумаги поворачивают на 90° и снова помещают в ванночку и по бумаге пропускают другой растворитель. После вторичного пропускания растворителя бумагу обрабатывают каким-либо реактивом, дающим окрашивание при взаимодействии с аминокислотами, чаще всего нингидрином или изатином. На бумаге появляются окрашенные пятна, соответствующие отдельным аминокислотам. По месту положения пятен и интенсивности их окраски судят о наличии и содержании в гидролизате белка тех или иных аминокислот. Фотография хроматограммы показана на рисунке 21. Метод распределительной хроматографии на бумаге позволяет быстро и точно определить содержание аминокислот. В последние годы хроматографические методы успешно применяются для разделения и определения сахаров, органических кислот и ряда других соединений. [c.218]

Количественное определение сахаров с применением хроматографии на бумаге включает в себя следующие основные операции а) фиксацию растительного материала б) экстракцию сахяров и очистку вытяжки от белков и других примесей в) распределительную хроматографию сахаров на бумаге г) элюцию сахаров с бумаги д) определение их содержания в элюатах. [c.227]

Из сорбентов, указанных в разд. 7.2.1, только силикагель обладает механической прочностью, обеспечивающей возможность проведения хроматографии при высоких давлениях, характерных для современной ВЭЖХ. Действительно, этот материал является в высшей степени подходящим носителем для ВЭЖХ по ряду причин [9], и в настоящее время подавляющее большинство подобного рода разделений проводится на колонках с тон-коизмельченным силикагелем или его производными подходящей полярности, полученными в результате химической модификации силикагеля. Хроматография углеводов не составляет исключения. Высокая полярность немодифицированного силикагеля препятствует его применению в хроматографии незамещенных сахаров, однако химическая обработка поверхности силикагеля позволяет получить производные, отвечающие всем требованиям ВЭЖХ свободных углеводов. Разработка сорбентов, в которых подходящая для распределительной хроматографии сахаров фаза присоединена к тонкоизмельченному силикагелю, устраняет необходимость получения производных, за исключением тех случаев, когда эта процедура имеет несомненные преимущества (см. разд. 7.2.2.1). Такого рода сорбенты в настоящее время широко используются при анализе углеводов. [c.7]

Распределительная хроматография сахаров и полиолов на шонообменных смолах в водно-спиртовом растворе в качестве элюента интенсивно исследовалась Самуэльсоном с сотр. [53— [c.18]

Хроматография на бумаге. Впервые в современной форме метод бумажной хроматографии был описан Консденом, Гордоном и Мартином [16]. Хроматографирование на бумаге может быть применено для разделения микрограммовых количеств многих веществ, таких, как алкалоиды, нуклеозиды, нуклеотиды, сахара, аминокислоты, флавоноиды, таннины, стероиды, птеридины и фосфолипиды. Метод имеет много общего с распределительной хроматографией в качестве носителя используется фильтровальная бумага. Однако в этом случае не происходит распределения в истинном смысле этого слова (между несмешивающимися растворителями), так как разделение достигается с помощью растворителей, смешивающихся с водой. Согласно Ледереру [2], вопрос о том, обусловлен ли процесс хроматографирования на бумаге адсорбцией на водно-целлюлозном комплексе или же распределением внутри этого комплекса, рассматриваемого в качестве стационарной фазы, относится скорее к области терминологии, чем к существу дела . [c.21]

Много работ опубликовано по хроматографии углеводов, особенно В. В. Рачинским, Б. Н. Степаненко. Установив зависимость между структурой и величиной Rf, можно оценить степень полимеризации олигосахаридов, влияние положения оксигрупп. На бумаге из стеклянных волокон, предварительно забуференной, можно четко разделять различные монозы, биозы, триозы, галактуровую и глюкуроновую кислоты. В микроорганизмах можно определять связанные углеводы, свободные MOHO- и дисахариды в растительном материале, также свободные олигосахариды, свободные углеводы в крови и моче, молоке, наблюдать гидролиз и синтез олиго- и полисахаридов, энзиматические превращения моносахаридов в связи с процессами окисления, восстановления, изомеризации, реакции углеводов с азотсодержащими соединениями, контролировать чистоту углеводов и идентифицировать их, определять кислоты и ла-ктоны, уроновые кислоты, кетокислоты, метилированные сахара, дезоксисахара, аминосахара, полисахариды, инозит, сорбит, эфиры фосфорной кислоты, структуру галактоманнана, эремурана, новых галактозидов, проследить превращение сахарозы, синтез олигосахаридов в растущей культуре. Бумажная хроматография применяется в сахарной промышленности, в пивоварении. Мало еще разработана теория распределительной хроматографии углеводов, мало изучены возможности разделения оптических изомеров и антиподов. [c.201]

Неионообменная порошковая целлюлоза применяется в качестве носителя при распределительной хроматографии и электрофорезе на колонках и в слоях. Целлюлоза используется для хроматографического разделения сахаров, глицеридов, спиртов, фенолов, аминов, карбоновых и аминокислот, пептидов, белков, нуклеиновых кислот, уроновых кислот, липидов, алкалоидов, антибиотиков, гормонов, ферментов, витаминов, гербицидов и инсектицидов, неорганических ионов, красителей, углеводородов и других веществ. Применяется также для электрофореза белков, пептидов, аминокислот, нуклеиновых кислот, нуклеотидов. [c.127]

Определение моносахаридного состава проводится анализом продуктов кислотного гидролиза или. чаще, мета-нолиза сахарида. Состав продуктов кислотного гидролизата анализируется с помощью хроматографии или электрофореза на бумаге. Нередко используется коммерческий углеводный анализатор, разделение осуществляется на ионообменных смолах методом распределительной хроматографии в водно-спиртовой смеси или в виде боратных комплексов сахаров. Скорость гидролиза гликозидных связей, образованных остатками нейтральных, амино- и дезокси-сахаров, различна. Легче всего отщепляются остатки сиаловых (N-ацетилнейраминовой, N-гликолилнейраминовой) кислот, труднее всего расщепляются свяэи, образованные остатками амино-сахаров и уроновых кислот. Фуранозиды гидролизуются значительно быстрее пиранозидов. В итоге при гидролизе олигосахарида может иметь место неполное расщепление связей или кислотная деструкция образующихся моносахаридов, что искажает результаты анализа. Лучшие результаты дает метанолиз в присутствии газообразного хлористого водорода (1.7 н. H l, 80 С, 18 ч) — в этом случае образуются метилгликозиды, устойчивые к кислотной деструкции. Качественный и количественный состав продуктов метанолиза определяется методом газожидкостной хроматографии в виде триметилсилильных или трифторацетильных производных. [c.463]

Сравнение нескольких методов хроматографии олигомерных сахаров с р-(1->-4)-связанными звеньями п-ксилозы [103] показывает, что для препаративных целей проникаюшая хроматография на геле полиакриламида уступает хроматографии на смеси уголь—целит и распределительной хроматографии на ионообменных смолах. Однако установлено, что разделение низших гомологов (до 5 звеньев) сахаров гель-проникающей хроматографией на ионообменных смолах в воде дает наиболее удовлетворительные результаты. Метод разделения на смеси уголь—целит был по меньшей мере удовлетворителен для аналитических целей, но в то же время этот метод можно применять в препаративных [c.95]

II. Устойчив при pH = 1- 8, ВЭТТ до 0,1 мм, 12. Среднеполярный сорбент, пригоден для разделения неполярных и полярных веществ (соответственно методами распределительной хроматографии нормальной или с обращенными фазами), ВЭТТ до 0,1 мм. 13. Для разделения сильнополярных веществ, ВЭТТ до 0,1 мм. Устойчив в области pH от 2 до 8—9, в кислых средах проявляет анионообменные свойства с обменной емкостью 0,3—0,4 мг-экв/г. Сорбент не пригоден для хроматографий перекисей и веществ с карбонильными группами (аминогруппы окисляются первыми и образуют шиффовы основания со вторыми). 14. Для разделения сахаров и полиоксисоединений (возможно, подобен сорбенту № 13), ВЭТТ до 0,5 мм. В сильнокислой и сильнощелочной средах неустойчив. 18. Рекомендуется для разделения биологически активных веществ. 19. Селективен к арои атическим и нитросоединениям. 24 —28. Поставляются только в колонках. 26. Устойчив при pH = 2- 9. 31. ВЭТТ до 0,06 мм. 33. Термостойкость 70 °С. 34—39. Поверхность пористого стекла со средним диаметром пор от 4 (№ 34) до 250 (] Го 39) нм покрыта мономолекулярным (тофциной 1,8 нм) слоем углевода. Удельный объем пор (в см г) не менее 0,1 (№ 34), 0,4 (№ 35), 1,0 (№ 36, 37), 1,2 (№ 38), 1,5 (№ 39). 40. На основе стекла со средним диаметром пор 55 нм. 41, 42. Хелатные сорбенты С высокой специфичностью к неорганическим ионам. Приготовлены на основе аминированного пористого стекла с диаметром пор 55 нм для закрепления лиганда на стекле использована реакция диазотирования. Сорбент № 41 применяют для концентрирования и разделения Со, N1, Си, Ре, А1, 2г, Т1, V и других металлов. 44—48. Содержание привитой фазы 10—40 мкмоль/см , емкость поглощения белков до 10 мг/см . Поставляют в 50%-ной водной суспензии с антисептиком (1% толуола). 49—52. Предназначены для разделение полиароматических (№ 49) и галогенированных (№ 50) соединений, эфиров нитроцеллюлозы (№ 51) и биогенных веществ (№ 52). 57—58. Устойчивы при pH = 2- 9. 59, 60. Содержание привитых фаз около 40 мкмоль/см . [c.214]

Так как в принципе описанного метода лежит использование различий коэффициентов распределения разных веществ в растворителях, его называют бумажной распределительной хроматографией. ЩтоА распределительной хроматографии широко применяют для разделения различных сахаров, аминокислот и других соединений. [c.13]

Силикагель оказался лучшим сорбентом для разделения нефтяных углеводородов, высших жирных кислот и их эфиров, нитро- и нитрозопроизводных, ароматических аминов, азоильных (п-фенилазобензойных) эфиров, сахаров и т. д. Кроме того, он широко применяется в распределительной хроматографии. Из двух основных типов силикагеля, крупнопористого и мелкопористого в распределительной хроматографии применим только первый он, [c.195]

Анализ смесей сахаров методом газо-жидкостной распределительной хроматографии. (НФ смесь апьезона М, силикона и ПБДС на хромосорбе W.) [c.137]