Транспортные РНК фракционирование

Характер аналитических задач, решаемых с помощью важнейшего из этих методов — инструментальной или регистрационной колоночной ЖХ,— определяется природой используемых стационарной и подвижной фаз, а также принципом детектирования элюатов. Универсальные детекторы (рефрактометрический, диэлькометрический, транспортные и др. [109, 111, 2541) использовались для количественного анализа самых различных ГАС (аминов [255, 256], порфиринов [257], жирных кислот [258, 259], фенолов [260], сернистых соединений [261 ]) в условиях адсорбционной или координационной хроматографии, а также для определения молекулярно-массового распределения высокомолекулярных веществ [69, 109, 262, 2631 при эксклюзионном фракционировании или разделении на адсорбентах с неполярной поверхностью, например, на графитирован-ных углях. Качественная идентификация элюируемых веществ в этих случаях проводится по заранее установленным параметрам удерживания стандартных соединений и при изучении смесей неизвестного состава часто затруднена из-за отсутствия таких стандартов. Групповая идентификация ГАС отдельных типов существенно облегчается при использовании специфических селективных детекторов спектрофотометрических (УФ или ИК), флю-орометрического [109, 111, 254 и др.], пламенно-эмиссионного [264], полярографического [111], электронозахватного [265] и др. [c.33]

Среди аналитических методов фракционирования, с помощью которых можно было бы значительно ускорить процесс определения ММР, наибольшее распространение получили методы турбидиметрического титрования и транспортные методы [16], к которым относятся ультрацентрифугирование, диффузия, электрофорез и хроматография. Общее во всех этих методах - направленное движение макромолекул относительно гомогенной или гетерогенной окружающей среды под действием внешней силы гравитационного или электрического поля, осмотического давления, межфазного распределения. [c.334]

В установке с замкнутым реакционным пространством концентрация растворенного в газовой фазе А возрастает, вследствие чего чистота продукта транспортной реакции А уменьщается. Этого можно избежать, если проводить транспорт в газовом потоке. При этом к будет вымываться из реакционного пространства в виде какого-либо продукта реакции С. Транспорт в газовом потоке позволяет также осуществлять фракционирование веществ, выделяющихся в процессе транспорта. [c.88]

Химические методы, применяемые для выделения полинуклеотидов или нуклеиновых кислот, могут быть основаны на специфической реакционной способности минорных компонентов или концевых групп. Эти группы могут быть непосредственно или после предварительной химической модификации связаны с нерастворимым носителем или такой молекулой, которая резко изменяет физические свойства полинуклеотида (растворимость, коэффициенты распределения или седиментация и т. д.). Подобные методы нашли применение для выделения и фракционирования транспортных РНК. [c.16]

Обычно нри исследовании транспортных РНК изучают их взаимодействие с радиоактивной аминокислотой в присутствии активирующего фермента, АТФ и ионов магния. Затем РНК осаждают, промывают кислотой и определяют количество радиоактивной аминокислоты, связанной с РНК. Техника фракционирования позволяет изолировать транспортные РНК, способные акцептировать ту или иную специфическую аминокислоту [2]. Из этого следует, что смесь РНК, получаемая из клетки, содержит различные транспортные РНК, специфичные в отношении различных аминокислот. [c.197]

Помимо ряда вирусных нуклеиновых кислот, большинство выделенных полирибонуклеотидов, бесспорно, представляют собой сложные смеси, содержащие полимеры с различной длиной цепи, нуклеотидной последовательностью и составом оснований (присутствие или отсутствие минорных оснований). Существует ряд приемов для частичного фракционирования, однако, пока не разработаны удовлетворительные методы характеристики, трудно определить степень чистоты или гомогенности рибонуклеиновых кислот. В основу оценки чистоты транспортных РНК, этих сравнительно низкомолекулярных полирибонуклеотидов, может быть положена их ферментативная реакция с аминокислотами (через аминоациладенилаты), что, конечно, позволяет оценить и их биохимическую однородность. [c.365]

Транспортные методы являются, конечно же, не единственными методами определения молекулярных масс и полидисперсности. Хорошо известны такие абсолютные методы определения М как светорассеяние растворами полимеров, осмометрия, криоскопия, эбулиоскопия и т. п., а также исследование молекулярномассового распределения (ММР) с помощью фракционирования, электронной микроскопии и т. д. Тем не менее именно транспортные методы получили в настоящее время чрезвычайно широкое распространение, и их совокупность составляет аналитическую основу современной физической химии полимеров как методов исследования молекулярно-массовой, композиционной, структурной и других типов неоднородностей макромолекул [12—16]. [c.7]

Фракционирование препаратов внутренней мембраны митохондрий из сердца быка привело к разделению митохондриальной электрон-транспортной системы на четыре белково-липидных комплекса [c.208]

В данном разделе рассматриваются физические, химические и ферментативные методы, которые используются при исследовании метаболизма бактерий. В последующих главах описаны физические методы и приборы, фракционирование и анализ химических компонентов, выделение и количественное определение ферментов, изучение катализируемых ими реакций, а также исследование проницаемости клеток и транспортных процессов. Все эти вопросы разработаны настолько хорошо, что вполне оправданно опубликование специальных книг, посвященных их методологии и применению. Однако в данном случае авторы ограничились описанием только самых надежных и простых методов, которые могут использовать для достаточно основательного изучения метаболизма бактерий даже начинающие исследователи. [c.166]

По своему существу аффинная хроматография — это особый тип адсорбционной хроматографии. В отличие от того, что было описано в гл. 6, адсорбция здесь осуществляется за счет биоспецифп-ческого взаимодействия между молекулами, закрепленными на матрице, т. е. связанными в неподвижной фазе, и комплементарными к ним молекулами, подлежащими очистке или фракционированию, поступающими, а затем элюируемыми с подвижной фазой. Биоспеци-фическое взаимодействие отличается исключительной избирательностью, а зачастую и очень высокой степенью сродства между партнерами. Оно лежит в основе множества строго детерминированных процессов, протекающих в организме. В качестве примеров можно назвать взаимодействия между ферментами и их субстратами, кофакторами или ингибиторами, между гормонами и их рецепторами, между антигенами и специфическими для них антителами, между нуклеиновыми кислотами и специфическими белками, связывающимися с ними в процессе осуществления своих функций (полимераза.мп, нуклеазами, гистонами, регуляторными белками), а также между самими нуклеиновыми кислотами-матрицами и продуктами их транскрипции. Наконец, многие малые молекулы (витамины, жирные кнслоты и др.) специфически связываются со специальными транспортными белками. [c.339]

Для экспериментального нахождения кривых ММР могут быть использованы> практически все методы препаративного фракционирования полимеров, позволяющие оценить молекулярную массу фракций, а также ряд транспортных методов — аналитическое ультрацентрифугирование, поступательная диффузия, экклюзион-ная хроматография, подробно описанные в литературе (см., например, [75]). [c.41]

Основные научные работы — в области биохимии нуклеиновых кислот. До 1964 занимался синтезом физиологически активных гетероциклических соединений пиримидинового ряда. Разработал твердофазный метод химического фракционирования транспортных рибонуклеиновых кислот на полиакрил-гидразидных сорбентах. Создал комплекс методов ультрамикро-биохимического анализа, позволяющий проводить исследование нуклеиновых кислот, белков и ферментов в масштабе отдельной клетки. Занимался изучением транспорта нуклеиновых кислот на модели гигантской одноклеточной водоросли — ацетобулярии и показал, что транспорт кислот не коррелирует с полярным ростом клетки (1973—1974), Осуществил сборку жизнеспособной клетки из отдельных компонентов — цитоплазмы, ядра и клеточной стенки, С 1974 занимается синтезом химических эквивалентов структурных генов белков и их встройкой а [c.613]

Нуклеиновые кислоты являются одним из наиболее сложных типов биополимеров. В природе встречаются двунитевые и од-нонитевые, циркулярные и сверхспиральные ДНК, рибосомаль-ные, информационные и транспортные РНК, гибриды РНК— ДНК. В процессе исследований приходится иметь дело с синтетическими монотонными или смещанными полинуклеотидами. Нуклеиновые кислоты всех типов являются полианионами даже при нейтральных значениях pH. Все эти факторы позволяют использовать при фракционировании все виды хроматографии ионообменную, адсорбционную, распределительную и гель-проникающую, а также все типы хроматографических сорбентов (см. табл. 38.2). [c.67]

Методы фракционирования включают осаждение нейтральными солями [19—21], электрофорез [22, 23], хроматографию на фосфате кальция [24—26] и осаждение дигидрострептомицином [27]. Недавно для фракционирования рибонуклеиновых кислот была использована фракционная диссоциация комплексов нуклеиновая кислота — гистон, примененная ранее к дезоксинуклеиновым кислотам [28]. Во всех фракциях отношение 6-амино- к 6-кетонуклео-зидам было близко к единице. В некоторой степени фракционирование происходит при экстракции фенолом [29—32], возможно как результат дифференциального связывания нуклеиновых кислот с белками. Анионообменные целлюлозы, такие как ЭКТЕОЛА и ДЭАЭ, широко применяются в настоящее время для фракционирования не только рибонуклеиновых кислот [33, 34], включая специфичные для аминокислот транспортные РНК [35], но и рибонуклео- [c.365]

Хроматография на метилированном сывороточном альбумине [551, 552] была весьма успешно применена для фракционирования информационной РНК (соответствующей по составу клеточной ДНК) самого различного молекулярного веса [553]. Легко достигнуто отделение низкомолекулярной транспортной РНК от микросо-мальной РНК [558] возможно также дальнейшее фракционирование транспортной РНК [568]. [c.370]

Описан родственный метод, основанный на образовании специфического комплекса с молекулами, имеющими относительно короткие цепи [563]. Этерификацией гидроксильных групп целлюлозы концевыми 5 -фосфатными остатками смеси политимидиловых кислот с небольшой длиной цепи при помощи дициклогексилкарбодиимида было достигнуто ковалентное связывание этих олигонуклеотидов с целлюлозой. При 4° гекса(дезоксиадениловая кислота) удерживалась колонкой и, таким образом, могла быть отделена от гекса(тимидиловой кислоты) олигоадениловая кислота элюировалась при 35°. Этим методом возможно фракционирование транспортных РНК [563]. [c.371]

Хотя ИЭФ широко используется при фракционировании белков, известно всего несколько попыток применить эту методику для разделения олигонуклеотидов и транспортных РНК [316, 1092, 1169]. Препарат N-формилметионил-тРНК, чистота которого, судя по данным хроматографии и его способности к ами-ноацилированию, составляла 97%, при ИЭФ в полиакриламидном геле с диапазоном pH 3,5—4,5 разделялся по меньшей мере на восемь компонентов. Принцип, лежащий в основе такого разделения, не очень ясен, но можно предположить, что каждая разделенная зона содержит молекулы, находящиеся в какой-то одной определенной конформации. [c.383]

I В последние годы наметилась тенденция к прекращению строительства газофракционирующих установок на газоперерабатывающих заводах. Строительство крупных заводов со сложной схемой переработки газа требует больших капиталовложений и много времени. Такие заводы вступают в эксплуатацию, когда значительная часть газа в первый период разработки нефтяных месторождений уже потеряна. Применение сложной схемы фракционирования газового бензина вызывает дополнительные капиталовложения и эксплуатационные расходы при транспортировании малых объемов сжиженных газов. Для каждого вида продукции нужны особые емкости для хранения и транспортные средства. Поэтому считается более рациональным строительство газоперерабатывающих заводов и отбензинивающих установок на небольших и средних месторождениях по упрощенной схеме с выпуском только нестабильного бензина и последующей его переработкой на крупных ЦГФУ нефтехимкомбинатов. В этих условиях можно быстрее построить завод и обеспечить своевременное снабжение потребителей газом. Следует отметить, что трубопроводный транспорт экономичнее железнодорожного. [c.21]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология