Эстрогены, разделение

Улучшенный метод сбора фракций эстрогенов, разделенных с номош,ью газовой хроматографии. (Метод для микрограммовых кол-в в-ва.) [c.120]

Для разделения стероидов так же широко применяют различные типы гелей сефадекса. На липофильных гелях сефадекса разделение определяется двумя основными механизмами распределением в системе жидкость—гель и ситовым эффектом. Однако в работе [41] было показано, что ароматические и гетероциклические соединения более сильно адсорбируются гелевой матрицей, нежели соединения других типов. Этот эффект играет важную роль в гель-хроматографии некоторых сопряженных ароматических стероидов (эстрогенов). [c.222]

Системы с обращенной фазой чаще всего применяются для разделения углеводородов, умеренно растворимых в воде. Как правило, если при использовании углеводородной подвижной фазы соединение не удерживается на р,р -оксидипропионитриле, следует применять систему с обращенной фазой. Если смесь можно хроматографировать на р,р -оксидипропионитриле, но в присутствии 5—10% полярного модификатора в подвижной фазе, то эта смесь будет успешно хроматографироваться на системе с обращенной фазой, но с изменением в порядке элюирования. В качестве примера можно сослаться на разделение эстрогенов. Эти соединения могут быть удовлетворительно разделены при использовании р,р -оксидипропионитрила и гептана с 5—10% тетрагидрофурана. При использовании некоторых неполярных неподвижных фаз эстрогены можно также разделить на системе с обращенной фазой (подвижная фаза — 20—30%-ный водный метанол). Возможность [c.276]

Девятнадцать менее полярных эстрогенов, полученных при первоначальном разделении, повторно хроматографируют посредством двумерного элюирования смесью этилацетат—циклогексан (1 Г), в результате чего указанные 19 соединений делятся на 8 групп. [c.299]

Струк [121] обсудил различные методы количественного определения эстрогенов. Для разделения и количественного определения эстрона, эстрадиола и эстриола он использовал слои силикагеля и смесь бензол—этанол (9 1). Чтобы очистить силикагель от мешающих примесей, его выдерживали 12 ч в метаноле, затем фильтровали, дважды промывали свежим метанолом и сушили полчаса при 100°С. Приготовленные таким образом пластинки делили на пять полосок равной ширины. На центральную полоску наносили пробу для количественного определения, по обеим сторонам от нее оставляли чистые полоски, а на наружные полоски наносили такие же пробы. После элюирования на 10 см пластинки сушили 30 мин при 100°С, а затем, чтобы защитить три центральные полоски от попадания обнаруживающего реагента, закрывали их плексигласовой [c.308]

На хроматограммах (рис. 2 и 3) графически представлены примеры разделения смеси стандартов эстрона, эстрадиола и эстриола, а также эстрогенов, содержащихся в экстрактах [c.87]

Рис. 3. Хроматограмма разделения эстрогенов

Улучшенный способ разделения эстрогенов методом газо-жидкостной хроматографии. [c.120]

Метод разделения метоксипроизводных эстрогенов методом газовой хроматографии. (Чувствительность метода 0,002—0,007 мкг стероидов.) [c.120]

Стимулирование яичников крысы гонадотропными гормонами и разделение стероидов методом газовой хроматографии. (Разделение эстрогенов, андрогенов и прогестеронов на различных полярных и неполярных НФ.) [c.198]

ДДТ может быть использован в виде различных препаративных форм. 2,4 -Изомер ДДТ, получающийся в качестве побочного продукта при производстве ДДТ, был разделен на оптические изомеры 34, 35]. Один из ннх является эстрогеном для птиц и млекопитающих, он нашел применение в медицине [35]. [c.83]

Лисбоа и Дичфалузи [88] опубликовали методику разделения и идентификации 24 стероидных эстрогенов. Разделение проводят на тонких слоях силикагеля G, высушенных в течение 30 мин при 105°С, со следующими 6 системами растворителей I) этилацетат—циклогексан—этанол (9 9 2) II) этилацетат—насыщенный водой н-гексан—этанол (16 3 1) 111) этилацетат—циклогексан (1 1) IV) хлороформ—этанол (9 1) V) этилацетат—насыщенный водой -гексан—этанол— уксусная кислота (72 13,5 4,5 10) и VI) н-бутанол, насыщенный водой. Предварительную характеристику пробы получают, хроматографируя ее со смесью этилацетат—циклогексан—этанол (9 9 2), т. е. растворителем I. По результатам этого разделения смеси эстрогенов делят на две группы более полярную (более низкие величины Rf) и менее полярную (более высокие величины Rf). После такого предварительного разделения пробу элюируют этанолом, чтобы затем сконцентрировать элюат и осуществить последующее разделение на других пластинках. Соединения более полярной группы можно разделить посредством двумерного элюирования с применением в обоих направлениях растворителя П. Разделение можно несколько улучшить, если элюировать этим растворителем только в одном направлении, а в другом нанравлении элюировать пробу растворителем V. Пример такого разделения показан на рис. 29.1. [c.299]

Вотиз и Чатторай [131] применили ГХ для количественного определения эстрогенов, разделенных методом ТСХ. При тонкослойном хроматографировании они использовали три растворяющие системы. Первая из них, смесь бензол—этилацетат (1 1), применялась для разделения смесей эстрогенов на четыре различные группы однако если в пробах содержались большие количества андрогенов, то для извлечения этих соединений использовали смесь петролейный эфир—дихлорметан— этанол (10 9 1). Третий растворитель — смесь петролейного эфира и метанола (9 1) использовали в тех случаях, когда нужно было очистить пробу до введения ее в газовый хроматограф. Пластинки для ТСХ покрывали слоем силикагеля G и сушили 3 ч при комнатной температуре. Затем, чтобы удалить примеси из силикагеля, в частности железо, их предварительно элюировали смесью метанол—концентрированная соляная кислота (9 1). После такой обработки пластинки активировали при 105°С. Пробы мочи гидролизовали кислотой, после чего по методу Брауна [132] разделяли на фенольную и нефенольную фракции. Пятна соединений эстрогеновой фракции после разделения элюировали этанолом, растворитель удаляли, а остаток ацетилировали, растворяя его в смеси пяти частей уксусного ангидрида и одной части пиридина. Эту смесь выдерживали час при 68°С, после чего добавляли к ней 5 мл дистиллированной воды, интенсивно перемешивая стеклянной палочкой . Ацетилированный продукт тщательно экстрагировали петролейным эфиром и промывали полученный экстракт сначала 8 %-ным раствором бикарбоната натрия, а затем водой. После этого петролейный эфир выпаривали досуха, прибавляли свежий петролейный эфир в таком количестве, чтобы можно было перенести полученный раствор в пробирки емкостью по [c.310]

Многочисленные попытки разделить хроматографически свободные эстроны и эквилин как на полярных, так и на неполяр ных фазах не увенчались успехом [216] Было осуществлено разделение некоторых эстрогенов в виде ТМС производных на колонке с 3 % 0V 225, однако основные компоненты — эстрон и эквилин — удалось разделить лишь частично в виде ТФА производных На рис 3 6 приведены масс хроматограммы по полному ионному току смеси производных эстрогенов с применени- [c.176]

Некоторые смеси стероидов могут быть разделены (и были разделены) несколькими принципиально различными хроматографическими методами. В качестве иллюстрации достаточно привести высказывание из работы [1], в которой автор подчеркивает, что одинаковые результаты могут быть получены применением различных хроматографических методов. Авторы использовали колонку, заполненную кремневой кислотой (ср. рис. 28.2 и 28.3), и для элюирования применяли смесь диэтилового и петролейного эфиров переменного состава. Однако в этой же работе авторы утверждают В последней работе Фернандеса и сотр. [2 описано разделение прогестинов и эстрогенов с применением колоночной хроматографии на сефадексе ЬН-20 и смеси метанол—вода (85 15) в качестве элюирующей жидкости. Мы получили результаты, сравнимые с результатами этой работы, но в нашем методе разделение различных прогестинов оказалось лучшим . [c.211]

В работах [88, 89] использован метод гель-проникающей хроматографии на сефадексе 0-25 (колонка 38X1,8 см) с применением дистиллированной воды в качестве элюента для разделения растворимых в воде производных эстрогенов. [c.235]

В работе [90] описано разделение эстрогенов мочи на колонке (60X1,2 см), заполненной сефадексом 0-10, причем в ко- [c.235]

Успешные попытки разделения эстрогенов приведены в работах Генри с сотр. [40] (использовали зипакс, покрытый сильным анионообменным полимером, и буферные смеси со значением pH от 9,2 до 9,2+ 0,8 М раствор перхлората натрия для создания необходимого градиента), а также в работах [4, 91, 92] предварительная очистка по методу [93] DEAE-сефадекс G-25, О—08 М [c.236]

Рис. 4.22. Разделение смеси эстрогенов [12]. асолонка 3 мХ1,8 мм (внутр. диам.) -температура 40 °С адсорбент — ЕТН-лермафаза элюент — тетрагидрофуран (2%) — н-гексан скорость потока 2 мл/мин давление 163,2 атм УФ-детектор (254 нм).

Шредер и др. [122] разработали метод определения эстрона, эквилина, эквиленина п эстрадиола посредством гидролиза их солей с сульфатом натрия, приготовленных в виде таблеток. После разделения свободных эстрогенов на силикагеле смесью хлороформ—циклогексан—ацетон—58 %-ный водный раствор аммиака (30 54 8 8) эквилин, эстрадиол и эстрол элюировали с пластинок 1 %-ным водным раствором гидроксида натрия и измеряли поглощение элюата при 296 нм. Эквиленин эстрагировали метанолом и его содержание определяли по поглощению при 231 нм. [c.309]

Содержание эстрогенов, выделенных методом ТСХ, определяли также колориметрически. Луизи и др. [126, 127] применили этот метод для определения содержания эстрогенов в биологических жидкостях. Эстрон, эстрадиол-17р и эстриол элюировали смесью циклогексан—этилацетат (3 17), а если в пробе содержалось слишком много хромогенов, мешающих разделению, то применяли двумерное элюирование, используя [c.309]

КИСЛОТЫ, для разделения эстрогенов элюированием смесью этанол—бензол (1 1) с добавкой 5% фосфомолибденовой кислоты или бензолом с 15 % этанола. После разделения пятна обнаруживали, прокаливая пластинки 20 мин при 110°С, и измеряли коэффициент пропускания при 560 нм. При содержании эстрогенов от 0,05 до 1 мкг наблюдалась линейная зависимость. Для денситометрического определения применяли также азобензол-4-сульфонаты [116] и дансилпроизводные [117]. Дансилпроизводные пригодны и для количественного определения посредством измерения интенсивности флуоресценции. [c.312]

Чйпешня 0. П.. Яшин Я. И. Газовая хроматохфафяя андрогенов и эстрогенов. Сообщение I. Удершваемые объемы и теплоты растворения ацетатов андрогенов и эстрогенов на 0У-101 и 0 /-225. Процессы разделения в хроматографических колонках. Вып. 26. М., 1975. [c.75]

На такой слабо полярной фазе как метилсиликон (1% по весу) разделение между метилатами эстрона и эстрадиола не происходит. Времена удерживания ацетатов и триметилсила-тов эстрогенов оказались близкими и позволяли получать вполне достаточное разделение. [c.87]

Фракционирование эстрогенов мочи. Ввиду того что все три природных эстрогена встречаются в моче беременных и небеременных женских особей и, вероятно, также в моче нормальных мужских особей проблема разделения и определения индивидуальных активных компо-нетнов привлекла внимание многочисленных исследователей. Уже первая стадия такого разделения — проведение полного гидролиза нерастворимых в эфире связанных соединений с минимальным разрушением освобожденных эстрогенов — связана с серьезными затруднениями. Под действием едкого натра (2н. раствор) при 120° в течение 6—8 час. происходит лишь неполный гидролиз, и в этих условиях как эстрон, так и эстрадиол частично разрушаются Поэтому во всех предложенных методах применяется гидролиз в кислой среде. По методу Марриана кислотность мочи доводят до pH—1, после чего добавляют 33 мл 12 н. соляной кислоты на литр раствора и нагревают в автоклаве в течение 2 час. при 120°. По методике Смита и Смита к каждому литру мочи добавляют 150 мл 12 н. соляной кислоты, кипятят смесь в течение 10 мин. и быстро охлаждают. Установлено, что добавление при гидролизе порошкообразного цинка увеличивает выход эстрогенов (определено на основании данных биологического исследования)Действие цинка заключается, повидимому, в предохранении эстрогенов от окисления кислородом воздуха или в восстановлении карбонильной группы эстрона. Кох рекомендует подкислять мочу соляной кислотой, доводя pH до 1—1,2, и подвергать затем смесь кипячению в течение 15 мин. По другой методике, мочу подкисляют, доводя pH до 0,4—0,6, и оставляют стоять при комнатной температуре в течение не менее 4 недель " . [c.323]

Стиммель описал хроматографический метод разделения эстрогенов. Смесь эстрогенов, выделенную из мочи, собранной в течение суток, растворяют в смеси метанола с бензолом, адсорбируют на активированной окиси алюминия и элюируют сначала чистым бензолом, затем [c.323]

Большинство веществ биологического происхождения термически неустойчивы, поэтому при анализе их методом газовой хроматографии встречаются трудности. Обычно эти вещества переводят с помощью химических реакций (этерификации, силанизирования) в более устойчивые и более летучие производные. Методом жидкостной хроматографии можно определять практически все соединения непосредственно в биологических жидкостях или их экстрактах. Описано много примеров применения жидкостной хроматографии в этой важной области. Здесь приводятся лишь некоторые из них. Прежде всего следует упомянуть прямой анализ стероидов в биологических жидкостях. На рис. 13.6 приведена хроматограмма разделения стероидов, находящихся непосредственно в сыворотке крови, пики идентифицированы с помощью масс-спектрометра [55]. Искусственная смесь кортнкостерона, кортизона и гидрокортизона хорошо разделяется на колонне с силохромом С-80 [56]. Больщие успехи достигнуты при разделении и анализе стероидных гормонов. Хорошо разделяются сложные смеси эстрогенов [57] и андрогенов [58]. [c.273]

Разделение эстрогенов методом газо-жидкостной хроматографии. (Анализ ацетильных, монометиловых и моноэтиловых производных эстрогенов НФ QF-1 на газхроме Р т-ра 235 и 247°,) [c.118]

Метод разделения эстрогенов с иомош,ью газовой хроматографии с использованием системы введения анализируемых веществ в твердом виде. [c.120]

Одновременное разделение 17-кетостерои-дов и эстрогенов с помощью двухфазной системы газовой хроматографии. (НФ смесь) SE-30 и ПНПГС на обработанном газхроме S. [c.120]

Разделение и количественное определение эстрогенов из плазмы крови здорового человека при помощи газовой хроматографии. (НФ QF-1 на газхроме Р т-ра 243°). [c.197]

Простой метод экстракции эстрогенов из тканей и их разделение методом газовой хроматографии. (Анализ ТМС-эфиров, НФ смесь SE-30 и ПНПГС на газохроме Р т-ра 230 .) [c.198]

Для разделепия сиптетических эстрогенов можно использовать большинство тех же систем, какие применяют для разделения эстрогенов из биологического материала (например, снстелн>1 Аксельрода [1, 2] или Боскотта 2]), поэтому мы не будем о пнх упоминать специально. [c.357]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология