Ганглиозиды выделение

Фракции, содержащие чистые Смз, Омг и Омь объединяют и упаривают досуха. Остаток растворяют в смеси хлороформ — метанол (1 1 по объему). Осадок пептидов отделяют центрифугированием, супернатант упаривают до объема 2 мл и остаток разбавляют пятикратным объемом ацетона. Образовавшийся осадок фильтруют или центрифугируют. Полученные таким образом ганглиозиды Омз и Омг имеют желтый цвет и содержат примесь, дающую положительную реакцию с нингидрином. Повторное переосаждение практически ничего не дает. В результате повторного хроматографирования ганглиозидов на том же сорбенте и в тех же системах растворителей получаются почти белые вещества. Выход Омз не достигает 1 %, а выход Омг составляет 3—5% очищенной суммарной фракции ганглиозидов, выделенных из мозга человека. [c.355]

ХТС с большим успехом была использована для выделения и определения строения ганглиозидов. Вагнер, Хорхам- [c.165]

В тканях ганглиозиды ассоциированы с белками, поэтому во всех обычных методиках их выделения используются сильно полярные растворители чаще всего применяют смесь хлороформ — метанол [3]. В качестве растворителя был также предложен тетрагидрофуран [4], однако он не нашел широкого ирименения. Ранние методы выделения были основаны на фракционировании липидов при экстракции тканей растворителями с возрастающей полярностью. С появлением распределительного метода [5] старые методы были забыты. Первая стадия распределительного метода включает исчерпывающую экстракцию липидов из ткани смесью хлороформ — метанол. При диализе полученного экстракта против воды (процедура распределения) ганглиозиды переходят в верхний водный слой, в то время как основная масса других липидов остается в нижнем хлороформном слое. В модифицированном варианте распределения вместо воды используется слабый солевой раствор. [c.349]

ВЫДЕЛЕНИЕ ИНДИВИДУАЛЬНЫХ ГАНГЛИОЗИДОВ [c.352]

Чтобы выход GDia был ВЫСОКИМ, следует использовать смесь ганглиозидов, выделенную из мозга молодого животного, так как в этом случае содержание Gma в ткани мозга наибольшее [1]. Около 2 г ганглио-зидов (соответствует 0,5 г N-ацетилнейраминовой кислоты) растворяют в 50 мл смеси хлороформ — метанол — вода (65 25 4 по объему) и наносят на колонку (300x50 мм) с 200 г силикагеля G, уравновешенную в смеси хлороформ — метанол (9 1 по объему). Колонку последовательно промывают смесями (по 2 л каждой) хлороформ—метанол—вода со следующим соотношением компонентов (по объему) а) 65 25 4 б) 60 32 7 в) 60 35 8. Рекомендуется собирать фракции по 25 мл. За ходом разделения следят при помощи ТСХ, проявляя пластинки в систе- [c.352]

К глюколипидам относятся ганглиозиды. Ганглиозид выделен из серого вещества больших полушарий головного мозга. В состав его входят по одному остатку молекул нейраминовой кислоты, сфингозина и стеариновой кислоты и три остатка молекул гексозы. [c.561]

Ганглиозиды. Эти сфинголипиды являются церамидолигосаха-ридами, содержащими помимо других сахаров по крайней мере один остаток сиаловой кислоты. Все ганглиозиды благодаря наличию карбоксильной группы в остатке N-aцeтилнeйpaминoвoй кислоты являются кислыми соединениями. В табл. 3.5 приведены некоторые ганглиозиды, выделенные из тканей человека. Номенклатура и биосинтез этих соединений обсуждаются в гл. 18. [c.75]

В обобщающей работе, опубликованной в 1960 г., Кун и сотруд-Аики описали выделение с помощью хроматографии двух кристаллических ганглиозидов 61 и Ог. Из 350 кг мозга крупного рогатого скота было получено около 60 г 61 и 45 г Ог. Позднее (1961) из того же источника были выделены ганглиозиды Оз и ( 4. Ганглиозид Ог (т. пл. 190 °С), движущийся при хроматографировании быстрее других, содержит 2 моль галактозы и по 1 моль стеариновой кислоты, сфингозина, глюкозы, Ы-ацетилглюкозамина и Ы-ацетилнейраминовой кислоты (называемой такл<е лактаминовой кислотой, поскольку она входит в состав олигосахарида, выделенного из молока и имеющего сходное строение с углеводной частью ганглиозида). Способ связи моносахаридных остатков друг с другом был частично установлен на основании результатов исчерпывающего метилирования иодистым метилом в присутствии окиси и гидроокиси бария в диметилформамиде, а также на основе результатов гидролиза и частичного ацетолиза. [c.637]

В дальнейшем химия липидов развивалась медленно, что было связано с трудностями выделения и очистки индивидуальных липидов не случайно наука о липидах получила в это время название сНт 1егсНет1е ( грязная химия ). Лишь начиная с 50-х годов нашего века, после появления методов хроматографии, липидная химия сумела перейти к идентификации и выяснению строения многочисленных липидных веществ. В частности, в 1960—1964 гг. в лабораториях Р. Куна и Э. Кленка была полностью установлена структура четырех основных ганглиозидов мозга С ,, Ср а. Сщь, Ст1ь (открыты ганглиозиды были еще в конце 30-х годов Э. Кленком при изучении мозга больных сфинголипидозами). Новейший период химии липидов связан с исследованием биологических мембран. [c.515]

Хим. и физ. св-ва Л. зависят от наличия в их молекулах как полярных групп (—СООН, —ОН, —NHj и др.), так и неполярных гидрофобных углеводородных цепей. Большинство Л.— поверхностно-активные в-ва, растворимые в неполярных р-рителях и малорастворимые или нерастворимые в водз. Получ. выделением из прир. источников, иногда хим. синтезом. Наиб, распространенные представители — триглицериды, фосфолипиды, цереброзиды, ганглиозиды. Л.— одни из осн. компонентов биол. мембран, создают в ор- [c.302]

Терминология сфинголппидов растений запутана вследствие использования таких терминов, как цереброзиды , ганглиозиды и сфинголипиды , которыми обозначают сфинголипиды, первоначально обнаруженные в нервной ткани. В растениях сфинголипиды распространены, по-видимому, параллельно с фосфатидамп. Из неочищенной смеси фосфатидов ряда семян выделен липид, содержащий в качестве основания фитосфингозин (1,3,4-триокси-производ-ное сфингозина). Сложность строения этого липида показана ниже, [c.291]

Г англиозиды. Впервые ганглиозид был выделен Кленком из мозга в 1942 г. как представитель нового класса богатых углеводами гликолипидов. Среди продуктов гидролиза Кленк идентифицировал жирные кислоты, сфйнгозин, галактозу, глюкозу и сиаловую кислоту. Этот последний компонент особенно важен и характерен, и в настоящее время ганглиозидами называют группу гликосфинголипидов, содержащих сиаловые кислоты. [c.188]

Содержание и скорость обновления общей фракции липидов определяли по методу Фолча и др. [13] и Сперри [14] с внесенными в нашей лаборатории изменениями 1151. Тарановой [16] был разработан метод выделения и очистки цереброзидов и ганглиозидов, в осадке которых производили определение их удельной активности. Количество извлеченных цереброзидов определяли по галактозе [17], содержание которой в цереброзидах равно 22,2%. Содержание извлеченных ганглиозидов определяли антроновым методом, исходя из того факта, что содержание гексоз в ганглиозидах равняется 24% [4]. [c.166]

Для выделения G ib используют фракции, полученные в результате разделения смеси ганглиозидов в нейтральных системах растворителей. Предварительно объединяют соответствующие фракции из нескольких опытов. [c.354]

Для выделения Омг используют фракции, полученные в результате предварительного разделения ганглиозидов в системах растворителей, содержащих аммиак. Фракции ганглиозидов (0,75 г, 150 мг N-ацетилнейраминовой кислоты), в состав которых входит смесь Омь Омг и Омз, растворяют в 25 мл смеси хлороформ — метанол (9 1 по объему) и наносят на колонку (300x30 мм) с 75 г силикагеля G. Колонка должна быть уравновешена смесью растворителей того же состава. Элюирование проводят следующими системами растворителей хлороформ—метанол-вода (65 25 4 по объему 1,00 л) и хлороформ — метанол — вода (60 32 7 по объему 500 мл), собирая фракции по 10 мл. Ганглиозиды Омз, Gm2 и Gmi дают три пика. Если исходным материалом служила смесь ганглиозидов из мозга новорожденных, соотношение между количествами первых двух соединений составляет примерно 1 7. Возврат N-ацетилнейраминовой кислоты составляет 90—95%. [c.355]

В настоящее время не существует простых и надежных способов выделения ганглиозидов из экстрактов тканей, а в основе большинства существующих лежит методика Фолча и сотрудников, в соответствии с которой все липиды экстрагируют смесью хлороформ — метанол, затем ганглиозиды переводят в водную фазу и полученный водный раствор диализуют. Ранделл и Пеннок [35] рассмотрели множество модификаций подобных рутинных процедур и предложили усовершенствованную простую методику экстракции ганглиозидов. Она основана на существующих способах экстракции и включает стадию диализа против карбовакса или использование фильтров фирмы М11И-роге. [c.132]

Диацилглицерины можно экстрагировать смесью хлороформ — метанол — вода — 28%-ный раствор аммиака (100 50 6 1) [48], для выделения ганглиозидов применяют смесь метанол — хлороформ— (2 1) [49]. При выделении фосфолипидов обычни используют систему хлороформ — метанол — уксусная кислота— вода в соотношениях 50 39 1 10 [50], 25 15 4 2 [51] или 49 49 2 1 [28], а также систему хлороформ — метанол — муравьиная кислота (1 1 2) [52]. При элюировании нейтральных и полярных липидов с силикагеля, пропитанного карбонатом натрия, ацетатом магния, щавелевой или борной кислотой, никаких дополнительных затруднений не возникает. А при использовании силикагеля, пропитанного нитратом серебра, к элюирующим растворителям необходимо добавить несколько капель разбавленной (1,5 М) соляной кислоты, чтобы осадить соли серебра [53]. [c.134]

Сфинголипиды и ганглиозиды, содержащие сиаловую кислоту, обычно разделяют ТСХ в системах пропанол — вода и хлороформ— вода — метанол с добавлением аммиака или без него [385—387]. Система пропанол — вода (7 3) [385] оказалась достаточно эффективной в случае ТСХ шести ганглиозидов, состоящих из тетрагексозилцерамидов, связанных с одной или несколькими молекулами сиаловой кислоты. В работах [388, 389 фракцию ганглиозидов из ткани молочной железы коровы разделяли методом тех в системе пропанол-1—28%-ный раствор аммиака — вода (14 61 1). При этом были получены разрещенные зоны ОМз, ОМг и ОМ] (указаны в порядке уменьшения их хроматографической подвижности). Для препаративной ТСХ используют смесь хлороформ — метанол — 28%-ный раствор аммиака — вода (60 35 7 3) [389]. Эта система применялась также для препаративного выделения ганглиозидов из клеточной линии карциномы молочной железы крыс [390]. Смит [391] и Свеннерхольм и др. [376] разделяли гликолипиды в системе хлороформ — метанол — вода (65 25 4). Описание других систем растворителей для ТСХ углеводсодержащих липидов читатель может найти в работах [11, 99]. [c.165]

Приведенный нами экспериментальный материал и литературные данные, как правило, основаны на знании первичной структуры молекулы ганглиозидов, точнее их мономеров. Однако ганглиозиды представляют собой сложные, многокомпонентные по.иимеры, молекулярный вес которых достигает 1.8-10 —4.0-10 . В интактном состоянии они представлены следующими основными тинами моно-, ди-, три- и тетрасиалоганглиозидами. В свою очередь эти типы делятся на индивидуальные ганглиозиды, из 14 выделенных охарактеризовано И. [c.70]

Г англиозид ы. Впервые ганглиозид был выделен Кленком из мозга в 1942 г. как представитель нового класса богатых углеводами гликолипидов. Среди продуктов гидролиза Кленк идентифицировал жирные кислоты, сфингозин, галактозу, глюкозу и сиаловую кислоту. Этот последний компонент особенно важен и характерен и в настоящее время ганглио-зидами называют группу гликосфинголипидов, содержащих сиаловые кислоты. Успехи в изучении этих очень важных соединений суммированы в недавно опубликованном обзоре Свеннерхольма [288]. [c.249]

Необходимо отметить важную роль сиаловой кислоты, которая является концевым звеном гликозидной части многих мембранных рецепторов и детерминант и имеет постоянный отрицательный заряд. Кроме того, она входит в состав гликосфинголипидов плазматической мембраны нейронов и синаптической мембраны и принимает участие в процессе выделения нейротрансмиттеров. Процесс возбуждения мозга также происходит с участием сиаловых кислот. Целый ряд возрастных патологий мозга, в том числе болезнь Альцгеймера (БА), сопровождается общим снижением уровня сиалсодержащих ганглиозидов и цереброзидов (Кеииег е а1., 1982). [c.128]

В дальнейшем многие основные белки, выделенные из нервной ткани, испытывались на способность вызывать аллергический энцефалит. Оказалось, что энцефалитогенной активностью обладают не только белки, но и п0л1ипептиды с молекулярным весом 4000—6000, которые легко образуют сложные комплексы с фосфолипидами, ганглиозидами, в нативном olt Ззк 57 161 [c.161]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология