Хроматография проблемы элюирования

В жидкостной хроматографии разработано несколько приемов для решения проблемы элюирования, они основаны именно на изменении коэффициентов распределения и скорости движения подвижной фазы. Можно назвать следующие программированное изменение состава подвижной фазы (ступенчатое или градиентное элюирование[12, 24—26]), скорости потока или давления [27] и температуры процесса [27—29], а также использование установок из сопряженных колонок [26, 30]. Обсуждение преимуществ и недостатков этих приемов можно найти в обзоре Снайдера [30]. Некоторые из них не очень эффективны, а ряд других сопряжены с определенными экспериментальными трудностями. [c.88]

Когда примеси, вызвавшие образование неспецифических антител, легче очистить, чем исследуемый антиген, то другой способ избавиться от неспецифических антител фракции IgG иммунной сыворотки состоит в иммобилизации на носителе этих очищенных примесей. Тогда первая элюированная фракция содержит все белки раствора IgG (включая и нужные антитела), за исключением неспецифических антител, если хроматография проводится в условиях ненасыщения. В этом случае отсутствует проблема десорбции. [c.109]

Снайдер [44] рассмотрел основные показатели адсорбции. Он показал, что обычно в хроматографии важна адсорбция в монослое и вероятность адсорбции вещества увеличивается с увеличением поверхности неподвижной фазы. Основной вклад в свободную энергию адсорбции вносят дисперсионные силы, особенно при адсорбции неполярных веществ на неполярных адсорбентах. Основная проблема, все еще не решенная в адсорбционной хроматографии, заключается в невоспроизводимости набивки и обработки адсорбента. Наличие загрязнений может блокировать центры адсорбции. Неоднородность центров адсорбции, даже по отношению к одному растворенному веществу, обычно приводит к появлению хвостов на кривых элюирования. [c.545]

При сочетании масс-спектрометра и газового хроматографа в ходе анализа приходится иметь дело с различными быстрыми изменениями парциального давления в ионном источнике в соответствии с меняющимся профилем газохроматографического элюирования. Парциальное давление во время измерения масс-спектра должно по возможности поддерживаться постоянным во избежание помех, влияющих на интенсивности пиков и могущих привести к ошибочной интерпретации результатов измерений. Решением проблемы может быть регистрация спектра за очень короткий промежуток времени (в режиме быстрого сканирования), поскольку колебания парциального давления в шкале времени пролета ионов сравнительно невелики и не сказываются существенным образом на качестве спектра. Для быстрого сканирования, однако, необходимы быстродействующие безынерционные детектирующие устройства с высокой чувствительностью. В значительной мере этим требованиям удовлетворяют вторичные электронные умножители. Вторичный электронный умножитель выполняет функцию предусилителя. Ионы, проходящие через входную щель детектирующего устройства, попадают вначале на первый конверсионный динод, при соударении с которым каждый ион выбивает несколько вторичных электронов. Эти электроны под действием ускоряющего напряжения между динодами направляются на второй динод, из которого каждый падающий электрон вновь выбивает некоторое число вторичных электронов, и этот процесс повторяется на следующем диноде. С последнего динода на коллектор падает настоящий электронный ток, по своей мощности многократно превосходящий первоначальный ионный ток, поступающий на конверсионные диноды. Коэффициенты усиления во вторичных электронных умножителях с числом динодов от 16 до 20 достигают значений 10 —10 . Другим существенным преимуществом этого метода предварительного усиления является возможность обеспечения исключительно малых значений постоянных времени при очень низком уровне шумов. В качестве одного из недостатков можно указать на некоторую зависимость коэффициента усиления от массы ионов (дискриминация по массам). [c.296]

Однако при оптимизации анализа с программированием в газовой хроматографии это требование может и не привести к непреодолимым проблемам, так как 1) процесс оптимизации может быть выполнен применительно к ограниченному числу компонентов образца (главных компонентов) [14] 2) изменения в порядке элюирования компонентов маловероятны. [c.336]

Как уже упоминалось выще, интерфейс как переходное устройство между газовым хроматографом и масс-спектрометром решающим образом влияет на качество информации об анализируемом образце, доставляемой всей измерительной системой. Функциональное назначение интерфейса состоит в быстром переносе разделенных на хроматографической колонке компонентов анализируемого образца в ионный источник масс-спектрометра в качественно и количественно неизменном виде и без нарушения оптимальных условий работающих в различных режимах спаренных приборов. Поскольку основная доля газохроматографического элюата приходится на газ-носитель, спектр которого не представляет никакого интереса, а содержание в нем компонентов анализируемого образца очень мало, необходимо (по крайней мере при использовании насадочных колонок) избирательно уменьшить долю газа-носителя для того, чтобы не нарушить вакуумный режим в масс-спектрометре. Главной проблемой согласования приборов является преодоление высокого перепада между нормальным давлением (10 Па) на выходе газохроматографической разделительной системы и глубоким вакуумом (10 Па), необходимым для нормальной работы ионного источника. Для решения этой весьма трудной задачи были разработаны различные варианты интерфейсов. В некоторых из них использовались устройства для избирательного отделения газа-носителя от хроматографических элюированных фракций, так называемые сепараторы газа-носителя в других конструкциях интерфейсов сепараторы не применяли. Различные интерфейсы, используемые при сочетании газовых хроматографов с масс-спектрометрами, рассмотрены в обзорной работе Мак-Фаддена [55]. [c.304]

Книга представляет большой интерес прежде всего для хро-матографистов-практиков, перед которыми возникают проблемы разделения сложных смесей соединений на индивидуальные компоненты или оптимизации рутинных анализов, когда требуется за предельно короткое время надежно определить лишь ограниченное число компонентов. Книга столь же полезна и для методистов, развивающих, например, методы градиентного элюирования, многомерной хроматографии, препаративных разделений и т. д. [c.5]

Среди других исследований по сравнению различных методов определения МВР одних и тех же образцов полимеров отметим работы 130, 131 точки зрения проблемы моделирования полимеризационных процессов интерес представляет работа японских авторов которые поставили своей целью сравнить стандартные методы определения МВР, не внося в них никаких дополнений. Были выбраны методы хроматографии на колонке (осадительной хроматографии), элюирования из колонки, скоростной седиментации и гель-проникающей хроматографии. Объект исследования — образцы монодисперспого поли-а-метилстирола, полученные анионной полимеризацией и специально обработанные для сужения распределения, и их смеси. [c.340]

Другая важная проблема асимметрического синтеза - установление абсолютной конфигурации. В спектроскопии ЯМР при использовании хиральных растворителей [ 9] неэквивалентность химического сдвига энантиомерных ядер обусловлена двумя независимыми вкладами различной геометрией и различной стабильностью диастереомерных аддуктов субстрат — растворитель. В отличие от этого разделение энантиомеров с помощью газовой хроматографии зависит исключительно от разности констант стабильности диастереомерных интермедиатов растворенное вещество - растворитель, образующихся при элюировании. Связь между порядком появления пиков и конфигурацией кажется поэтому более очевидной [см. табл. 1, параметр "г"]. Хотя в больщинстве случаев для соединений отде ль-ных классов наблюдалась удовлетворительная корреляция между конфигурацией и порядком элюирования с оптически активных неподвижных фаз, существует ряд исключений, что сводетельствует об ограниченном применении этого метода [8]. [c.82]

Для определения многоатомных фенолов лучше всего подходит бумажная хроматография, с помощью которой можно решать следующие аналитические проблемы определение общего содержания многоатомных фенолов, анализ фенольных продуктов и сырья, определение чистоты продуктов, проверку работы обесфеноливающих устройств и анализ фенольных вод. Наилучшие результаты дает метод, предложенный Лейбницем и др. При этом методе в качестве растворителя служит смесь четыреххлористого углерода и н. бутанола в отношении 9 1, насыщенная водой. При обработке пирокатехина азотнокислым серебром гидрохинон и пирогаллол образуют серо-черные пятна. При проявлении диазотированной сульфаниловой кислотой остальные многоатомные фенолы образуют пятна от желтого до оранжево-желтого цвета. Анализ можно производить также и методом элюирования с применением реактива Фримена (п-нитро-бензолдиазониумфтороборат) для последующего колориметрического определения. [c.345]

С целью сокращения элюирования проводится программированное дезактивирование неподвижной фазы или вытеснение сильно адсорбирующихся соединений водой. Следует, однако, отметить, что при разделении указанным способом возможно одновременное элюирование нескольких соединений. Главным образом это вызываете проскоком зоны воды. Кроме того, конец зоны вещества, элюируемого с образованием хвоста, в некоторых случаях может так сжаться, что его можно принеть за следующий пик. С проблемой расщепления зоны вещества хроматографисты столкнулись уже в классической колоночной хроматографии [44]. [c.142]

Проблемы, возникающие при количественном определении моносахаридов в присутствии большого количества аминокислот, обсуждаются в гл. 8 (том 1). В табл. приведены результаты определения содержания углеводных компонентов в препаратах а -кислого гликопротеипа, полученных из одного и того же источника разными методами. Обнаруженные расхождения, возможно, отчасти обусловлены истинными различиями между препаратами, однако, более вероятно, что они объясняются отличиями в использованных методах исследования. При изучении химической структуры -кислого гликопротеипа особый интерес представляет определение количественного соотношения маннозы и галактозы. Это соотношение варьирует от 1 1 до 1 2. Неопубликованные результаты опытов, проведенных в лаборатории автора доктором А. М. Клоссом, показали, что эти расхождения зависят только от применяемых методов. Сравнивались два метода разделение на смоле дауэкс-1 [311 и хроматография на бумаге с последующим окрашиванием фосфатом анилина и элюированием пятен. Оба метода дали правильные результаты при проверке их на стандартной смеси, но при изучении одного и того же гидролизата -кислого гликоиротеина было получено отношение маннозы к галактозе, равное 1 1 и 1 2. [c.80]