Рибонуклеозидтрифосфаты

Синтез информационной РНК при помощи РНК-полимеразы (Вейс и др.) происходит при наличии всех четырех рибонуклеозидтрифосфатов (АТФ, ГТФ, ЦТФ и УТФ) и минимального количества затравочной ДНК (см. также стр. 345, 346), на которой и синтезируется полирибонуклеотид по механизму комплементарности азотистых оснований. В промежутках между клеточными делениями синтез РНК, возможно, происходит путем [c.379]

Инициация синтеза цепи РНК начинается реакцией АТР или GTP со второй молекулой рибонуклеозидтрифосфата [уравнение (15-5)], приводящей к образованию динуклеотида, с 5 -концом которого все еще связан трифосфат. [c.207]

Транскрипция является первой стадией реализации (считывания) генетической информации, на которой нуклеотидная последовательность ДНК копируется в виде нуклеотидной последовательности РНК. В основе. механизма копирования при транскрипции лежит тот же структурный принцип комплементарного спаривания оснований, что и прн репликации. Транскрипция осуществляется ферментами РНК-полимеразами, синтезирующими РНК на ДНК-мат-рице из рибонуклеозидтрифосфатов. [c.133]

После заражения клетки наружная белковая оболочка вируса повреждается и в цитоплазме оказывается модифицированная вирусная частица. Имеющиеся в клетке рибонуклеозидтрифосфаты получают доступ к вирусной сердцевине, которая содержит 10 сегментов двухнитевой геномной РНК и несколько белков, в том числе РНК-полимеразу, способную использовать РНК-дуплекс в качестве матрицы. Начинается асимметрический и консервативный синтез [c.328]

Известно, что в отсутствие субстратов (нуклеозидтрифосфатов) РНК-полимераза слабо связывается с ДНК. Напротив, во время синтеза РНК образуется недиссоциирующий комплекс ДНК — фермент [43]. Согласно описываемой модели этот комплекс стабилизован связями между пирофосфатными группами двух взаимодействующих рибонуклеозидтрифосфатов и катионными группами субъединиц полимеразы. Основания этих три- [c.568]

Биосинтез ц-РНК происходит в ядре клетки при участии ДНК- Исходными веществами, необходимыми для синтеза, являются рибонуклеозидтрифосфаты (АТФ, ГТФ, ЦТФ и УТФ) синтез катализируется ферментом, который получил название [c.279]

Если фермент, выделенный из клеток, зараженных фагом MS2, инкубировать с рибонуклеозидтрифосфатами, меченными С , то [c.250]

Предшественниками терминально присоединяемых нуклеотидов служат рибонуклеозидтрифосфаты, и их присоединение сопровождается обратимым отщеплением нирофосфата, который при этом процессе накапливается и ингибирует концевое присоединение нуклеотидов. [c.251]

Хорошо очищенные препараты ДНК-полимеразы из Е. соН при инкубации с дезоксирибо- и рибонуклеозидтрифосфатами в присутствии Мп++ и ДНК-затравки дают смешанные полинуклеотиды, в каждую цепь которых входят как дезоксирибо-, так и рибонуклеотиды. Такой смешанный полимер также отражает [c.354]

В присутствии всех четырех рибонуклеозидтрифосфатов — АТФ, ЦТФ, ГТФ и УТФ,— а также ионов магния эта полимераза синтезирует новую РНК по образцу фаговой (это происходит чрезвычайно быстро уже через 40 минут синтез полностью завершен). [c.397]

Биосинтез РНК (транскрипция). Биосинтез РНК на матрице ДНК называется транскрипцией. Это важный элемент экспрессии генов. Для биосинтеза РНК необходимы следующие факторы матрица — двухцепочечная или одноцепочечная ДНК четыре типа рибонуклеозидтрифосфатов — АТФ, ГТФ, ЦТФ и УТФ ДНК-зави-симая РНК-полимераза, катализирующая синтез РНК по уравнению (НМФ)п + НТФ = (НМФ)п+1 + РРп двухвалентные ионы магния, марганца регуляторные белки. [c.305]

РНК-полимеразы — это ферменты, осуществляющие транскрипцию генетической информации с цепи ДНК. Поскольку ДНК в клетке состоит из двух цепей, невольно возникает вопрос каким образом на двухцепочечной матрице может образовываться одноцепочечная РНК Частичный ответ на этот вопрос следует из того факта, что очищенные РНК-полимеразы способны также синтезировать РНК из четырех рибонуклеозидтрифосфатов, используя в качестве матрицы одноцепочечную ДНК. Этот факт позволяет предположить, что механизм транскрипции, подобно механизму репликации ДНК, включает в себя спаривание оснований. С этим выводом хорошо согласуется способность РНК-полимеразы превращать одноцепочечную ДНК из бактериофагу ФХ174 (дополнение 4-В) в двуХ1 рчечную гибридную люл улу [c.205]

Исходный специфический комплекс полимераза — промотор называют закрытым комплексом, так как считается, что основания в цеп ДНК остаются все еще спаренными. Постулируется, что закрытый комплекс находится в равновесии с открытым комплексом, готовым к началу синтеза мРНК переход закрытого комплекса сопровождается значительными конформационными изменениями [39, 40]. В открытом комплексе водородные связи между комплементарными основаниями ДНК-матрицы уже разрушены и основания матрицы доступны для спаривания с поступающими рибонуклеозидтрифосфатами. [c.207]

Исследователей репликации вирусов М13 и ФХ ожидал еще один сюрприз. Оказалось, что для образования RF-ДНК необходима РНК-полимераза. Это послужило одним из многих доводов в пользу предположения, согласно которому для того, чтобы начать синтез ДНК необходим небольшой фрагмент (затравка) РНК [уравнение (15-3)]. Аналогичные наблюдения были сделаны при изучении репликации ДНК плазмиды колицин Е-1. Этот процесс чувствителен ik рифампицину — специфичеокому ингибитору РНК-полимеразы (дополнение 15-А). Для репликации ДНК наряду с дезоксирибонуклеозидтрифосфатами необходимы также четыре рибонуклеозидтрифосфата [203]. [c.277]

РНК-ПОЛИМЕРАЗЫ (ДНК-зависимые РНК-нуклеоти-дилтрансферазы , ферменты класса трансфераз, катализирующие синтез РНК из рибонуклеозидтрифосфатов на матрице ДНК. [c.268]

Рибонуклеозидтрифосфаты и дезоксирибонуклеозидтрифосфаты не являются субстратами фермента. Фермент не нуждается в матрице, однако для синтеза необходима затравочная цепь РНК (НМФ) со свободной З -гидроксильной группой, к которой присоединяются остатки мононуклеотидов. Образовавшаяся полимерная молекула РНК не имеет заданной специфггческой последовательности мононуклеотидов, но содержит 3 —>5 фосфодиэфирные связи, легко разрываемые рибонуклеазой. Относительно биолопгческой роли этого фермента у бактерий предполагают, что он катализирует, скорее всего, обратную реакцию —расщепление мРНК с образованием нуклеозиддифосфатов. [c.495]

Методы включения метки в З -концевые группы более разнообразны. Так, а двухцепочечные ДНК метка вводится в составе (а- Р1-дез-оксирибонуклеозидтрифосфатов с помощью ДНК-полимеразы I Е. соИ или фага Т4 (см. с. 348). Двух- и одноцепочечные ДНК могут быть помечены по 3 -концевому звену с использованием концевой нуклеотидилтрансферазы. В одном из вариантов этого метода к З -ОН-группе олигодезоксирибонуклеотида присоединяются а- Р -меченые рибонуклеозидтрифосфаты. После ферментативной реакции продукт подвергается щелочному гидролизу, в результате чего на З -конце образуется только одно рибонуклеотидное звено. Во втором способе используются аналоги природных нук- [c.316]

Важнейшим классом являются также ДНК-зависимые РНК-полимеразы. Эти ферменты катализируют синтез РНК, комплементарных ДНК-матрицам (транскрипцию), используя в качестве субстратоа рибонуклеозидтрифосфаты. Общая схема синтеза такая же, как и у ДНК-полимераз, одиако РНК-полимеразы способны начинать синтез без затравки, т. е. инициировать синтез РНК. Сигнал инициации синтеза заключен в специальных регуляторных последовательностях ДНК, называемых промоторами. (Более подробно о транскрипции см. с. 411), [c.351]

Процесс биосинтеза РНК осуществляется ферментами— РНК-полимеразами, которые используют ДНК в качестве матрицы. Как и в случае репликации, механизм образования фосфодиэфирных связей включает в себя катализируемую ферментом нуклеофильную атаку 3 -гидроксильной группы растущей цепи на <а-фосфатную группу присоединяемого субстрата (рибонуклеозидтрифосфата). При образовании фосфодиэфирной связи от трифосфата отшепляется неорганический пирофосфат. Каждый вновь присоединяемый нуклеозид комп.пементарен тому звену матрицы, которое является ближайшим 5 -соседом только что скопированного звена. Цепь РНК растет в иаправ.1ении. V- - 3 по мере движения РНК-полиме-разы по копируемой цепи ДНК в направлении от З -конца к 5 -кон-цу. Схема процесса транскрипции показана на рисунке 234. [c.412]

Для реакции необходимы все четыре рибонуклеозидтрифосфата. В животных и бактериях обнаружен фермент РНК-полимераза, подобный ДНК-полимеразе. В результате исследований, в которых использовали ферментные препараты из бактерий, установлено, что все четыре рибонуклеотида включаются в РНК обычно не в концевых положениях. Для действия фермента как из животных, так и из бактерий совершенно необходимо присутствие ДНК-Сказанное, вероятно, справедливо и в отношении фермента из растений, так как частичное удаление ДНК приводит к частичному подавлению синтеза РНК. Получены данные, что ДНК, необходимая для действия РНК-полимеразы, играет роль матрицы, которая упорядочивает последовательность оснований во вновь образованной РНК. РНК-полимераза из М.1сгососси 1у5ойе1кНси8 катализирует синтез РНК с одинаковой скоростью в присутствии ДНК, полученной из самых различных организмов. Соотношения оснований (при уравнивании относительного содержания тимина и урацила) и частота повторяемости ближайших соседних оснований [c.478]

Синтез РНК в клетке. За счет рибонуклеозидтрифосфатов с участием фермента РНК-полимеразы по типу синтеза полинук-леотидных нитей ДНК в клетке идет синтез РНК. При этом матрицей является одна из нитей ДНК. В связи С этим все молекулы РНК клетки являются копиями соответствующих участков ДНК, или цистронов — они комплементарны им [7], [9], [20]. [c.12]

Первые данные о существовании в клетках животтхых и бактерий фермента, синтезирующего РНК из четырех рибонуклеозидтрифосфатов, появи.лись в 1960—1961 гг. в работах нескольких исследователей [10—15, 167]. [c.230]

Для реакции необходимо присутствие ионов двухвалентного металла, обычно магния. При замене ионов магния ионами марганца специфичность реакции существенно изменяется в присутствии субстратами могут служить только дезоксирибонуклеозидтрифосфаты, в присутствии же Мп в реакцию вступают также рибонуклеозидтрифосфаты. Таким образом, в системе, содержащей Мп , могут синтезироваться смешанные рибо-и дезоксирибонуклеиновые кислоты. [c.509]

Позднее подобные ферменты были выделены из ряда других источников. Полимерный продукт РНК-нолимеразной реакции химически идентичен природной РНК. Реакция (ХХ.З), подобно реакциям, катализируемым ДНК-полимеразой и полинуклеотидфосфорилазой, в заметной степени обратима и нуждается в присутствии попов двухвалентного металла, обычно магния. Для РНК-полимеразной реакции необходимо присутствие всех четырех рибонуклеозидтрифосфатов. Особенно интересна потребность в ДНК-затравке. Естественно, возникает вопрос о соотношении между структурами ДНК-затравки и РНК-продукта. Ниже приводятся экспериментальные факты, четко подтверждающие матричную роль ДНК-затравки в синтезе РНК, а также тот факт, что нуклеотидная последовательность в ДНК-затравке точно транскрибируется в комплементарную нуклеотидную последовательность РНК. [c.513]

После открытия полинуклеотидфосфорилазы ферменты, катализирующие реакцию получения полирибонуклеотидов из рибонуклеозидтрифосфатов, были найдены в клетках различных растений, животных, бактерий и вирусов. Помимо полирибонукле-иновой кислоты, продуктом такой реакции является также неорганический пирофосфат. Для проведения синтеза необходимы фермент РНК-полимераза, все четыре нуклеозидтрифосфата, двухвалентный ион Mg++ или Мп++, соединение, содержащее сульфгидрильные группы, и затравка. В тех случаях, когда затравкой служит ДНК, частоты 16 возможных ближайших соседей в затравке и синтезированном полирибонуклеотиде оказываются очень близкими. [c.354]

Из развивающихся семядолей гороха и из вегетативных ночек растений гороха был выделен хроматин. Напомним, что семядоли синтезируют глобулин семян гороха, тогда как вегетативные почки не синтезируют этот белок. К каждому из этих двух препаратов хроматина добавляли очищенную РНК-полимеразу и смесь четырех рибонуклеозидтрифосфатов. В такой системе, как это уже отмечалось в гл. 4, хроматин функционирует в качестве матрицы для синтеза информационной РНК. Затем к обеим системам, способным синтезировать информационные РНК, добавляли рибосомную систему синтеза белка, зависящую от информационной РНК. Таким образом, в этой смеси информационная РНК, сиптезироваппая на хроматине, использовалась для функционирования рибосомной системы синтеза белка, причем количества синтезированного растворимого белка были довольно велики. После инкубации рибосомы и хроматин удаляли из системы центрифугированием, а избыток меченой аминокислоты удаляли путем диализа. Долю глобулина в смеси вновь синтезированных растворимых белков определяли с помощью имму-нохимического метода, как это описапо выше для случая синтеза белков в различных органах [c.524]

В систему включены всг> компоненты, необходимые для синтеза РНК, в том числе 4 рибонуклеозидтрифосфата и приблизительно 10 мкг очищенной РШч-полимеразы из Es-keii hia oli. [c.526]

Обратная транскриптаза —РНК-зависимая ДНК-полимераза. этот фермент обнаружен в составе онкогенных и неонкогенных вирусов, в спонтанной карциноме млекопитающих, в нормальных клетках мыши и человека, а также в клетках опухолей человека при отсутствии каких-либо РНК-содержащих вирусов. Обратная транскриптаза, осуществляющая синтез ДНК, использует в качестве матрицы одноцепочечную РНК. Рибонуклеозидтрифосфаты в этой реакции не могут заменить дезоксирибо-нуклеозидтрифосфаты. Актиномицин D в этом случае не влияет на процесс синтеза ДНК. Непосредственным продуктом реакции является двухцепочечный гибрид РНК—ДНК, образующийся в результате синтеза комплементарной цепи ДНК на одноцепочечной РНК. . [c.64]

ДНК-зависимая РНК-полимераза. РНК-полимераза Е. соИ является мультимерным белком, состоящим из 5 субъединиц двух а, , , ст. Установлено, что -субъединица участвует в связывании с ДНК-матрицей, а-субъединица — в связывании рибонуклеозидтрифосфатов, ст-субъединица - в выборе участка инициации транскрипции. Весь комплекс субъединиц представляет собой холофермент РНК-полимераза без ст-субъединицы — кор-фермент. Каталитический участок фермента находится в кор-ферменте. В эукариотических клетках существует четыре типа РНК-полимераз в ядре — РНК-полимераза I (транскрипция рРНК), РНК-полимераза II (транскрипция мРНК), РНК-полимераза III (транскрипция тРНК), а также еще один тип в митохондриях (хлоропластах). [c.306]

Р Н К-синтетаза (рибонуклеозидтрифосфат-Р Н К-нуклеотидил-трансфераза). С. Вейс и Т. Никамото выделили фермент, синтезирующий РНК на матрице РНК. О том, что такой фермент должен существовать, свидетельствовали многочисленные косвенные данные, в первую очередь по размножению РНК-содер-жащих вирусов в клетке. Напомним, что имеется большое количество как растительных, так и бактериальных вирусов, содержащих в качестве наследственного материала не ДНК, а РНК.. [c.309]

Теперь мы можем рассмотреть вопрос о скорости роста цепи РНК в живой клетке, или, иначе говоря, о скорости перемещения вдоль цепи ДНК транскрипционного процесса, изображенного на фиг. 200. Для этого мы рассмотрим модификацию того опыта, который показал, что рост цепей РНК происходит с 5 -конца (фиг. 199). В этом модифицированном опыте РНК растущих клеток Е. oli метили добавлением в культуральную среду меченных Н пуриновых и пиримидиновых предшественников нуклеозидтрифосфатов. (В таком опыте бесполезно добавлять непосредственно меченные Н рибонуклеозидтрифосфаты, так как Е. соИ неспособна усваивать их из среды.) После добавления метки через короткие промежутки времени t, измеряемые секундами, рост клеток в пробах, взятых из культуры, останавливали и из них выделяли меченную Н РНК- В этой РНК определяли суммарную радиоактивность Т (измеряемую в милликюри) и радиоактивность Е в нуклеотидах, находящихся на 3 -концах. Теперь, если всего в экстракте содержится N молекул РНК, росших со скоростью г нуклеотидов в 1 с, а удельная радиоактивность Н-метки составляет S милликюри/нуклеотид, то можно написать [c.402]

Молекулярная биология. Структура и биосинтез нуклеиновых кислот (1990) -- [ c.133 ]

Молекулярная биология (1990) -- [ c.133 ]

Молекулярная биология клетки Том5 (1987) -- [ c.8 ]

Биохимия Издание 2 (1962) -- [ c.458 ]

Биохимия Т.3 Изд.2 (1985) -- [ c.52 , c.73 ]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология